荞麦蛋白的碱性蛋白酶酶解动力学研究

为掌握碱性蛋白酶对荞麦蛋白的酶解特性,实现对荞麦蛋白的深加工利用及生物活性肽的开发.采用pH-stat法,系统分析了底物浓度、酶浓度、pH及温度对荞麦蛋白水解度的影响,并运用对数函数对水解动力学过程进行描述和拟合.结果表明:在碱性蛋白酶水解荞麦蛋白的过程中,水解度随水解时间的变化呈现对数函数关系,可用公式h=(1/b)ln(1+abt)对其水解动力学过程进行描述;底物具有促进水解反应速度和抑制酶活性的双重作用,在低底物浓度条件下,荞麦蛋白的水解度较高;当底物浓度增加到6%时,蛋白水解度与底物浓度的关系曲线出现转折,水解度较低且趋于平缓;在酶浓度为0.002 g/mL时,水解反应的临界底物浓度为12.27%;在pH9.8、水解温度为50℃、水解时间30 min的条件下,碱性蛋白酶催化水解荞麦蛋白的动力学方程为h=1.218 2 ln(1+12.6([E]/[S]+0.58)t)     

碱性蛋白酶Alcalase酶解大米蛋白制备小分子肽的动力学研究

以大米蛋白为原料,用碱性蛋白酶Alcalase2.4 L酶解大米蛋白制备小分子多肽。采用单因素试验方法优化酶解条件,考察酶解过程中pH、加酶量、底物浓度和温度酶解初速度的影响,并建立了酶解动力学方程。研究了最优酶解条件下酶解过程中酶解产物的分子量分布状态。结果表明,Alcalase2.4 L酶解大米蛋白的最优pH 8.5、温度65℃、酶底比0.096 AU/g(底物),在酶解过程中存在产物抑制,在研究的底物浓度范围内(90 g/kg)不存在底物抑制。主要动力学参数为:Km为5.76(g·min)/mmol,Vmax为0.67mmol/(kg·min),k2为0.28 mmol/(AU·min)。酶解动力学方程为:1/V0=56.29/[S0][E0]+1/0.28[E0]。酶解至3 h时水解度达到16%,酶解产物的分子量在264~584 u之间的组分达到94%,酶解3 h后酶解产物的分子量分布基本保持不变。本研究结果为制备大米蛋白小分子活性肽奠定基础。     

碱性蛋白酶酶解罗非鱼下脚料蛋白动力学研究

以加工罗非鱼片废弃的下脚料蛋白和碱性蛋白酶为原料,以水解度为指标,考察温度、底物质量浓度、酶用量及pH等因素对碱性蛋白酶酶解罗非鱼下脚料蛋白水解度的影响。得到碱性蛋白酶水解罗非鱼下脚料蛋白的适宜工艺条件为：酶解温度50℃、底物质量浓度20g/L、酶用量为0.067g/L、pH9.50、反应时间180min,此时水解度为22.00%。同时得到50℃条件下酶失活常数Kd为37.9min-1,反应速率常数K2为244.2min-1、米氏常数KM为29.27g/L、最大反应速度Vmax为28.41g/(min·L);并建立了相应的水解动力学模型。验证实验表明：建立的水解动力学模型与实际水解过程基本吻合。     

胶原蛋白酶酶解牛骨胶原蛋白的动力学研究

针对从细菌中提取的胶原蛋白酶酶解牛骨胶原蛋白的动力学性质进行研究。通过全波长扫描和SDS-PAGE电泳,对酶解的动态变化及其多肽分子量的变化进行了研究,考察了温度、酶用量、底物浓度等因素对酶解动态的影响,并对酶解的过程动力学进行了分析。结果说明:胶原蛋白酶酶解牛骨胶原蛋白得到的多肽分子量分布不均匀,分子量大小随反应时间的增大而减小;在一定范围内,增大酶浓度、提高温度可使酶解反应更彻底。     

风味酶酶解小麦面筋蛋白动力学研究

研究Flavourzyme风味蛋白酶水解小麦面筋蛋白的酶解效率和反应动力学特性,调控和优化面筋蛋白的酶解工艺。研究结果表明,在该酶的最适作用条件(pH 6.0,55℃)下,10%底物,1%加酶量(酶与底物比),酶解12 h,可获得较高水解度(DH30%)和蛋白回收率(30%)。通过数学推导结合试验研究,建立了该水解反应的动力学模型。水解度(DH)和水解时间(t)的关系:DH=12.35ln[1+(2.923E0/S0-0.015)t],酶失活常数Kd约3 min-1。与试验结果相比,模型计算值与试验值吻合较好,说明该模型具有很好的实际应用价值。     

碱性蛋白酶水解米糠蛋白动力学特性研究

研究蛋白酶水解制备生物活性多肽反应机制与动力学行为,基于经典的米氏方程理论,应用数学推导结合试验研究的方法,以米糠蛋白为原料,对米糠蛋白-碱性蛋白酶体系进行酶解动力学研究.考虑蛋白质单底物水解、蛋白酶失活的机理模型,构建动力学模型R=aexp[-b(DH)],其中对参数a值和b值进行确定.利用Origin 8.0软件,对推导出的公式进行拟合得到水解速率动力学模型为R=(94.754e0-0.0597s0)exp[-0.157(DH)],水解度-水解时间的动力学模型:DH =6.37ln[1+(14.88e0/s0-0.009)t].对于米糠蛋白-碱性蛋白酶模型体系,经试验拟合,并求得该体系动力学常数:酶失活常数K4为16.144 min-1,酶解反应速率常数k2为94.754 min-1.     

蛋白酶水解啤酒糟蛋白动力学研究

为了研究蛋白酶水解啤酒糟蛋白的动力学性质,采用pH-stat法,以蛋白酶对啤酒糟中提取的蛋白进行水解处理。探讨了底物浓度[S]、酶与底物浓度比[E]/[S]和反应时间t对产物水解度DH的影响。建立了[S]及t同DH间的数学模型。通过不同底物浓度加碱量随水解时间的变化速度,测定出蛋白酶水解啤酒糟蛋白的K值。      

Alcalase碱性蛋白酶酶解蚕豆蛋白的研究

蚕豆经去皮、粉碎、除淀粉后,得到蚕豆粗蛋白.采用Alcalase碱性蛋白酶酶解蚕豆蛋白制备蚕豆蛋白水解物.通过单因素试验,调查了pH、底物质量分数、酶用量(E∶S)和酶解温度等因素对Alcalase碱性蛋白酶酶解蚕豆蛋白效果的影响.通过正交试验设计,确定Alcalase碱性蛋白酶酶解蚕豆蛋白适宜的工艺参数:酶解温度60℃,底物质量分数3％,酶用量(E∶nS)8％,pH 9.0,此条件下,蚕豆蛋白水解度(DH)达最大,为21.67％.该结果与Alcalase碱性蛋白酶水解大豆蛋白、绿豆蛋白和小麦蛋白等适宜条件参数接近.     

中性和碱性蛋白酶协同酶解大豆分离蛋白研究

采用中性和碱性蛋白酶协同酶解大豆分离蛋白制备大豆多肽,采用茚三酮分析法测定酶解液中氨基氮含量以判断其酶解效率。影响大豆分离蛋白酶解主要因素有中性与碱性蛋白酶用量比、酶解pH值、酶解温度、酶解时间,通过单因素和优化酶解条件正交试验分析,筛选出酶解最适实验条件:中性蛋白酶与碱性蛋白酶用量比为1∶3、温度55℃、pH 8.5、酶解时间6 h;在此条件下酶解,氨基氮含量为15.86 mg/g。     

菠萝蛋白酶酶解鱼鳞蛋白的工艺优化研究

鱼鳞中含有丰富的蛋白质资源,对其进行温和、环保的酶法水解受到更多的关注。本文采用菠萝蛋白酶水解鱼鳞蛋白,制备胶原多肽制品。通过考察温度、时间、酶量、料液比等单一因素对酶解的影响,设计了L9(34)正交实验,最终获得了菠萝蛋白酶水解鱼鳞蛋白的优化工艺条件,即温度60℃,时间3h,酶量4%(质量分数),底物浓度5%(质量分数),水解度为18.1%,该条件具有生产应用前景。      

两种来源酶多种方式水解牛骨蛋白

选用两种不同来源的枯草杆菌中性蛋白酶与木瓜蛋白酶,以水解度为特征性指标,采用5种不同水解方式水解牛骨蛋白。结果表明：枯草杆菌中性蛋白酶与木瓜蛋白酶同步水解,效果优于木瓜蛋白酶与枯草杆菌中性蛋白酶分步水解两种方式,最佳酶体系反应条件为pH7.05、温度51℃、加酶总量7000U/g(枯草杆菌中性蛋白酶与木瓜蛋白酶用量比1:1)、150r/min 振荡水解6h,水解度可达27.54%。     

双酶分步水解牛骨蛋白工艺的优化

以新鲜牛骨为原料,探讨牛骨粉的制备工艺。选用枯草杆菌中性蛋白酶与胰蛋白酶分步水解牛骨蛋白,以水解度为特征性指标,采用L9(34)正交试验设计优化双酶水解牛骨粉的工艺条件。结果表明：牛骨粉蛋白质含量高达30.72%,约为鲜骨蛋白质含量的3倍;采用胰蛋白酶先水解,中性蛋白酶后水解的方式分步水解牛骨蛋白,其效果优于两种酶同时水解及中性蛋白酶先水解,胰蛋白酶后水解;中性蛋白酶与胰蛋白酶分步水解牛骨蛋白的最佳工艺条件：固液比1:2,起始pH8.0,胰蛋白酶2000U/g蛋白质于45℃、150r/min振荡水解3h,然后用中性蛋白酶2000U/g蛋白质于45℃以150r/min振荡水解3h,水解度达18.34%;粒径小的活性炭对酶解液脱苦、脱色及除腥效果优于粒径大的活性炭。     

骨蛋白酶解物的抗氧化作用

研究了骨胶原蛋白酶解物的总抗氧化能力、羟自由基(·OH)清除作用和抑制超氧阴离子自由基的能力.通过与谷胱甘肽(GSH)的比较发现,溶液质量浓度在100～150 mg/mL时,该骨胶原多肽的总抗氧化能力为GSH的71.92%.溶液质量浓度在2.5～20 mg/mL时,该多肽羟自由基清除作用为谷胱甘肽的1.36倍.溶液质量浓度为10～150 mg/mL时,多肽抑制超氧阴离子自由基的能力低于谷胱甘肽.     

响应面试验优化牛骨汤酶解工艺及其钙含量分析

试验研究牛骨汤的最佳酶解工艺并对其游离钙含量进行分析。以牛骨汤为原料,以水解度为指标,从木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶中筛选最佳酶制剂,通过单因素试验和响应面试验得到酶解最佳工艺。结果表明复合蛋白酶酶解效果最好,其最优酶解工艺为:pH 7.60、加酶量1.16%、温度53℃、时间3.5 h,在此条件下水解度可达到4.83%;通过游离钙含量测定可知酶解后牛骨汤中可溶性钙含量增加了75%。     

木瓜蛋白酶水解螺旋藻蛋白的研究

利用木瓜蛋白酶进行水解制取螺旋藻蛋白水解液,确定了木瓜蛋白酶水解的最适工艺条件为:温度55℃、pH值6.0、酶底比1.0%、水解时间2h。     

婴幼儿配方奶粉中乳蛋白酶解工艺条件的研究

通过测定婴幼儿配方奶粉乳蛋白酶解液的氮溶指数表征蛋白的酶解程度,确定蛋白酶水解乳蛋白的最佳酶解工艺条件。使用蛋白酶Protease M“Amano”G 酶解婴幼儿配方奶粉中乳蛋白的最佳酶解工艺条件为酶解时间3h、酶浓度1.5%、pH7.0、酶解温度45℃。在此条件下,氮溶指数为45.93%。     

牛骨蛋白酶解制备呈味肽工艺优化

我国畜骨资源丰富,但综合利用水平不高。以畜骨为原材料,利用蛋白酶解技术制备呈味肽,开发复合型骨调味品,具有原料价格低、营养价值大和附加值高的特点,发展前景良好,市场潜力巨大。本文以牛棒骨为原材料,选用三种酶制剂,通过JMP软件的定制设计功能,研究了骨水比、酶骨比和酶解时间对水解制备呈味肽的影响,在实验条件下建立了牛骨的水解预测模型,优化了酶解制备呈味肽的工艺参数;同时酶解液的感官品质的研究结果显示,实验条件下提高水解度、酶骨比和骨水比均有利于呈味肽的释放,促进酶解液风味的提高。     

大米蛋白质的酶法水解及其性质研究

本文通过三种蛋白酶催化反应动力学特性的比较，确定用碱性蛋白酶Alcalase作为水解大米分离蛋白的酶制荆，并通过正交试验分别获得高溶解性、高发泡性、高乳化性大米蛋白水解物的酶反应条件。本实验所得到的大米蛋白水解物最大溶解度为50．2％，最大发泡力为50mL，最大乳化力为73．6mL／g。     

蛋白酶处理对鸡骨泥营养组成的影响

研究了蛋白酶处理对鸡骨泥营养组成的影响。研究结果表明,木瓜蛋白酶适合用来水解鸡骨泥以提高游离氨基酸及钙的含量,其最优水解条件为:60℃,pH 6.5条件下,取浓度为50%的粗鸡骨泥,按照加酶量3000 U/g加入木瓜蛋白酶,水解5 h后,鸡骨泥水解液中游离氨基酸及游离钙含量分别可以达到2.0365 mg/g和0.9856 mg/g。适当微波加热预处理可以改善木瓜蛋白酶对粗鸡骨泥的水解作用。