柱前衍生化-高效液相色谱法测定叔丁基肼盐酸盐的含量

建立了柱前衍生化-高效液相色谱法测定叔丁基肼盐酸盐含量的方法.以苯甲醛为衍生化试剂,色谱柱为HypersilTM BDS C18,柱温为25℃,流动相为甲醇,流速为1.0 mL/min,检测波长为298 nm.叔丁基肼盐酸盐在3.0 ～7.0mg范围内与其衍生物峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=179 361X-112 865,R2=0.999,RSD=0.68％,平均回收率为100.40％.本方法简便易行、样品前处理简单,具有较高的精密度与准确度.     

卡尔·费休容量法测定环己酮氨肟化反应体系的水分含量

采用卡尔·费休容量法测定环己酮氨肟化反应体系的水分含量(W),探讨了卡尔·费休试剂的种类、浓度、试样中的杂质组分、仪器操作条件对测定试样中的W的影响.结果表明:选择KFR-04型卡尔·费休醛酮专用试剂A液、B液能消除环己酮的干扰,且反应体系中的其他主要组分叔丁醇、环己酮肟、环己醇、氨无明显干扰;在卡尔·费休醛酮专用试剂...     

柱前衍生化气相色谱法测定草酰氯

用乙醇对草酰氯进行柱前衍生化,通过气相色谱法测定草酰氯的含量。以苯甲酸乙酯为内标物,OV-225毛细管柱分离,氢火焰离子化检测器检测。在选定的色谱条件下,衍生物、内标物及杂质能得到有效分离,并能获得较好的检测效果。分析结果表明,草酰氯的线性相关系数为0.999 8,回收率为99.1%~100.9%,变异系数为0.52%。     

柱前衍生高效液相色谱法测定一乙醇胺含量

建立柱前衍生高效液相色谱（HPLC）内标法测定一乙醇胺含量的方法。以C18（5μm,250mm×4.6mm）为色谱柱,V（甲醇）/V（磷酸氢二钾缓冲液）=40/60,为流动相,在流速为1.0mL/min,柱温30℃,紫外检测波长为310nm,进样量为20μL的情况下,选用衍生试剂2,4-二硝基氟苯（DNFB）将一乙醇胺样品在75℃水浴中衍生90min后进样分析。一乙醇胺在5～25μg/mL范围内质量浓度与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9999）,平均回收率102.27%,相对标准偏差为1.18%（n=5）。     

水苏碱的柱前衍生化HPLC测定

选择含水苏碱的中药复方制剂前列泰片为对象 ,研究水苏碱的柱前衍生化HPLC测定方法。以对溴基溴化苯乙酮为衍生化试剂 ,18 冠醚 6为相转移催化剂 ,流动相为V(甲醇 )∶V(水 )=75∶2 5 ,检测波长 2 5 4nm ,用外标法定量。线性范围 0 5～ 5 μg(n =5 ) ,相关系数r =0 9992 ,平均回收率 10 0 1% (n =3) ,相对标准偏差 (RSD)为 0 6 4 %。重现性好 ,灵敏度高 ,为中成药中水苏碱的含量测定提供了参考方法。     

建立HPLC法测定妥布霉素滴眼液含量

目的：建立HPLC法对其含量进行测定。方法：选用Kromasil C18,4．6×250mm色谱柱,2.4-二硝基氟苯柱前衍生,流动相为乙腈：0．25％三羟甲基氨基甲烷（67：33）,检测波长为365nm,流速为1．0ml／min,进样量为20μl,柱温为30℃。结果：妥布霉素保留时间处,辅料峰无干扰;标准曲线浓度范围0．002399mg／ml-0．01439mg／ml,R=0.9990;平均回收率=99．6％,RSD=0．88％;精密度RSD=0．29％;在24小时内,任取6个时间点。RSD=0．35％;50分钟为最佳处理时间。结论：该方法准确、可靠,便捷、快速,完全适合妥布霉素滴眼液（中间体）进行质量评价。     

柱前和柱后衍生法测定化妆品中游离甲醛的比较与评价

研究采用柱前衍生液相色谱法与柱后衍生液相色谱法对化妆品中游离甲醛进行测定.结果表明两种方法在0.1～5 mg/L的线性范围内线性关系良好,柱前衍生法的检出限为0.82 μg/g,回收率为94.1％～104％,相对标准偏差(RSD)为1.53％;柱后衍生法的检出限为1.13 μg/g,回收率为98.5％～99.2％,相对...     

HPLC-荧光衍生化法在药物分析中的应用

综述了HPLC-荧光衍生化法中衍生化试剂的研究现状,简述了HPLC-荧光衍生化技术及其在药物分析中的应用情况,展望了HPLC-荧光衍生化技术的发展前景。     

柱前衍生化高效液相色谱法测定氯乙酰氯及其多氯杂质含量

采用乙醇对氯乙酰氯及其多氯杂质(二氯乙酰氯、三氯乙酰氯)进行柱前衍生化,通过高效液相色谱法测定氯乙酰氯及其多氯杂质的含量.在选定的色谱条件下,即采用Hedera ODS-2液相色谱柱,以乙腈/水(60/40)为流动相(每500 mL流动相中含0.68 g磷酸二氢钾),检测波长为210 nm,氯乙酰氯及其多氯杂质衍生物能...     

PITC柱前衍生-HPLC法测定蒙药鹅绒藤中17种氨基酸成分

通过PITC柱前衍生,用HPLC法分析蒙药鹅绒藤的氨基酸成分.从鹅绒藤中鉴定出了17种氨基酸,其总含量为8.38％.本结果为鹅绒藤的保健价值、营养成分以及药用资源的开发应用提供了理论基础资料.     

用柱前衍生CE-ECL法测定茶叶样品中茶氨酸的含量

利用自制的交联壳聚糖修饰毛细管为分离毛细管,采用毛细管电泳-电致化学发光法(CE-ECL)对六种常见商品茶叶中茶氨酸含量进行测定。在最优实验条件下,茶氨酸衍生物在5 min之内达到基线分离。在5.0~200μM浓度范围内,茶氨酸衍生物的浓度与其电泳峰强度呈良好的线性关系(R~2=0.9952),检测限为2.8μM。在75μM浓度水平上,用茶氨酸纯品进行衍生反应并平行测定6次,其电泳峰高和迁移时间的相对标准偏差分别为2.49%和1.14%。此外,采用标准加入法对几种茶叶中的茶氨酸含量进行了实样测定,结果表明白茶、红茶、龙井茶、绿茶、铁观音茶和普洱茶中茶氨酸的测得值分别为1.53%、0.91%、0.61%、0.37%、0.28%和0.14%(以干茶样的质量比计算)。同时,采用白茶样品进行了加标回收实验,加标回收率为105.3%。该方法快速、简便,可适用于不同种类商品茶叶中茶氨酸含量的测定。     

2,4-二硝基氟苯柱前衍生化法测定普瑞巴林

利用2,4-二硝基氟苯为柱前衍生剂,建立了用高效液相色谱法测定普瑞巴林的方法。考察了光、反应温度、摩尔比和反应时间对衍生化反应的影响,确定了最佳衍生反应条件:在65℃水浴中避光反应75min。色谱柱为C18,流动相为50mmol·L-1KH2PO4(pH=3.0)/乙腈(30/70,v/v),检测波长为360nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为35℃。实验结果:在8～48μg·mL-1范围内呈较好的线性关系(r=0.9998),回收率(100.03±1.10)%(n=9),不同浓度下日内精密度0.82%、0.77%和1.87%,8h内稳定性良好(RSD=1.92%),检测限低至0.8ng·mL-1。实验表明该方法简便、快速、准确、灵敏。通过对该方法的实际应用,三批样品测定值的RSD分别为0.59%、0.68%和1.04%,表明该方法能够用于测定普瑞巴林的含量。     

柱前衍生高效液相色谱法测定纤维蛋白原中精氨酸含量

目的测定人纤维蛋白原中的精氨酸含量。方法应用柱前衍生高效液相色谱法检测,用外标法计算含量。结果系统适应性测试:n=6,T=1·04,RSD%(定性)=0·2,RSD%(定量)=2·0,表明系统适应性良好。应用该法检测3批人纤维蛋白原,精氨酸含量分别为0·87%、0·85%和0·90%,结果符合《中国药典》要求。结论柱前衍生高效液相色谱法简单、迅速,可作为纤维蛋白原质量控制中检测精氨酸含量的方法。     

HPLC法检测晚期糖化产物 前体物质的柱前衍生化条件优化

目的 HPLC-柱前衍生化法测定晚期糖化产物的前体物质α-二羰基类化合物的最优衍生化条件。方法采用紫外分光光度法检测α-二羰基类化合物标准品衍生化后的最大吸收波长。运用单因素试验,以HPLC-柱前衍生化法所检测出的峰面积作为评价指标,对衍生化反应的影响因素——p H值、温度、加热时间、物质的量的比例进行优化。结果 2,3-戊二酮、甲基乙二醛、2,3-丁二酮、乙二醛用衍生化试剂4-硝基-1,2-苯二胺(NPDA)衍生化产物的紫外吸收最大波长约是260nm。2,3-戊二酮最佳衍生条件是p H值为3、40℃、加热20min、衍生化试剂与其物质的量比例为1:1;甲基乙二醛最佳衍生条件是p H值为3、60℃、加热20min、物质的量比例为8∶1;2,3-丁二酮最佳衍生条件是p H值为5、40℃、加热30min、物质的量的比例为1∶1;乙二醛最佳衍生条件是p H值为9、40℃、加热30 min、物质的量的比例为10∶1。并考察方法的线性范围和衍生物的稳定性。结论本次研究说明NPDA可在温和的反应条件下,短时间内与α-二羰基类化合物发生衍生化反应。加热温度不宜过高,加热时间不宜过长,否则衍生化产物可能会发生分解。     

氨基酸的柱前衍生高效液相色谱分析述评

综合报道了氨基酸的各种柱前衍生高效液相色谱分析技术,比较了各自的优缺点,并指出了新的发展方向。     

柱前衍生—RP-HPLC法测定吸附精制百白破疫苗中的醛类

吸附精制百白破疫苗 (APPDT)暂行规程所载的戊二醛测定法为希夫氏试剂 (Schiff's reagent)法 ,该试剂不能将戊二醛与甲醛区分开来。采用柱前衍生 - RPHPL C法测定 APPDT中的醛类 ,能将 APPDT中的甲醛、戊二醛完全分离并加以测定 ,其结果准确可靠 ,该法亦可用于其它制品中醛类的测定。     

N—羟基琥珀酰亚胺—α—萘乙酸酯的合成及其作为柱前衍生试剂在反相高 …

合成了Ｎ－羟基琥珀酰亚胺－α－萘乙酸酯。研究了这一试剂在反相高效液相色谱中作为新的柱前衍生试剂,紫外可见检测,分离测定氨基酸的基本条件,衍生条件简单,方便ＲＰ－ＨＰＬＣ分离了多种氨基酸,检测下限达ｐｍｏｌ级,是一优良的柱前衍生度剂。     

柱前衍生HPLC法测定人凝血因子Ⅷ中氨基酸的含量

目的建立人凝血因子Ⅷ中氨基酸含量的柱前衍生HPLC检测方法。方法采用6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯(6-aminoquinoline-N-hydroxysuccinimide carbamate,AQC)在一定条件下与氨基酸形成稳定的衍生产物(柱前衍生),再通过高效液相色谱仪,采用氨基酸分析柱(150 mm×3. 9 mm,4μm)检测,以不同流动相进行梯度洗脱[在《中国药典》三部(2015版)的基础上进行调整],柱温为37℃,流速为1. 0 mL/min,检测波长为248 nm。同时验证方法的系统适应性、专属性、线性范围、精密性及准确度。结果甘氨酸及盐酸赖氨酸均可在25 min内获得较好分离,与相应相邻色谱峰之间的分离度均 1. 5,拖尾因子在0. 95～1. 40之间;各样品的氨基酸种类均能正确检出,混合样品与单纯样品出峰时间保持一致,且供试品溶液与对照品溶液主峰保留时间相对偏差均2%;当甘氨酸浓度在12. 5～62. 5μg/mL,盐酸赖氨酸浓度在4. 0～20. 0μg/mL时,与相应氨基酸与内标峰面积比呈良好的线性关系,相关系数(r)分别为0. 999 9和0. 999 8;甘氨酸及盐酸赖氨酸重复性的相对标准偏差(RSD)分别为0. 4%和0. 5%,中间精密度RSD分别为1. 3%和1. 0%;两种氨基酸的回收率均在95%～105%范围内,RSD均≤2%。结论建立的方法具有良好的专属性、精密性及准确度,可用于测定人凝血因子Ⅷ中的氨基酸含量。     

氨基酸的柱前衍生高效液相色谱分析述评

综合报道了氨基酸的各种柱前衍生高效液相色谱分析技术,比较了它们各自的优缺点,并指出了新的发展方向。