黄精及其复配植物多糖提取工艺优化及人体保湿评价

目的:研究黄精及其植物复配多糖最佳提取工艺并对其进行人体保湿评价。方法:通过单因素实验及正交实验确定了黄精多糖的最佳提取工艺参数;以多糖含量为指标通过均匀设计实验确定黄精复配其他植物多糖最优原材料组合,通过单因素实验及正交实验确定了黄精复配其他植物多糖的最佳提取工艺参数;并对黄精多糖及黄精复配其他植物多糖进行了人体保湿评价实验。结果:在温度为50 ℃,时间为2.5 h,料液比为1∶90 g/mL条件下,黄精多糖的含量为(3.90±0.01) mg/g。在温度为50 ℃,时间为2 h,料液比为1∶50 g/mL条件下,植物复配多糖的含量为(4.17±0.13) mg/g。黄精多糖具有即时保湿的功效,0.5 h时,皮肤水分含量达到62.261 C.U.;随着时间增加,植物复配多糖的保温效果逐渐增强,4 h时水分含量达到61.13 C.U.。结论:本实验为黄精及其植物复配多糖的进一步深入研究提供了坚实的理论基础。     

3种黄精多糖含量及抗氧化活性的差异分析

为探究不同品种间黄精多糖的含量与抗氧化活性差异,以多花黄精、鸡头黄精和滇黄精为原料,采用苯酚硫酸法测定多糖含量,利用DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、羟基自由基清除率、超氧自由基清除率和总还原能力等指标评价多糖抗氧化活性。结果显示, 3种黄精多糖含量均超过7%,其中以鸡头黄精的质量最佳,多糖含量达15.02%,其次为滇黄精,含量为11.18%,多花黄精的多糖含量为9.88%。结果表明, 3种黄精多糖对4种自由基均具备一定清除效果,其中鸡头黄精多糖对DPPH自由基的清除能力强于滇黄精多糖和多花黄精多糖(P<0.01),对ABTS自由基的清除能力好于滇黄精多糖和多花黄精多糖(P<0.05),对羟基自由基和超氧自由基的清除能力也高于滇黄精多糖和多花黄精多糖。此外,鸡头黄精多糖的总还原能力强于滇黄精多糖(P<0.05)和多花黄精多糖(P<0.05)。3种黄精多糖均具备一定的抗氧化活性,但鸡头黄精多糖的抗氧化活性最佳。试验结果为黄精品种的评价与选育、加工与应用提供理论依据。     

多花黄精多糖含片制备工艺的优化

采用超声辅助提取法开展多花黄精多糖提取工艺研究,在单因素试验的基础上,以多糖得率为指标,响应面法优化料液比、超声功率、超声时间、超声温度提取工艺参数;采用响应面设计优化多花黄精多糖含片配方,以综合评分为指标,在考察单因素基础上,获得最佳的填充剂、矫味剂、润滑剂添加量以及制粒润湿剂的体积分数。结果表明,多花黄精多糖超声辅助提取法最佳提取工艺参数为料液比为1∶40(g/mL)、超声功率为270 W、超声温度为71℃、超声时间为49 min,该条件下多花黄精多糖提取的得率为（25.07±0.15）%。多花黄精多糖含片最佳配方为填充剂添加量19.91%（甘露醇:微晶纤维素=3∶1,质量比）、矫味剂木糖醇添加量14.55%、矫味剂柠檬酸添加量5.04%、润滑剂硬脂酸镁添加量0.5%、制粒润湿剂乙醇的体积分数为85%。多花黄精多糖提取及其含片制备工艺稳定可控,多花黄精多糖含片中黄精多糖含量不低于0.28 g/片,崩解时限、脆碎度符合质量要求,呈淡黄色,色泽均匀,酸甜适宜。     

两种方法提取佛手渣多糖及其对巨噬细胞RAW264.7免疫调节活性的研究

本文以提取精油和黄酮后的佛手渣为原料,分别采用连续相变萃取(CPE)法和热水浸提法(HWE)法提取佛手多糖,在单因素实验的基础上,以佛手多糖提取率为指标,通过响应面优化得出两种方法的最佳提取工艺,并利用RAW264.7巨噬细胞模型评价佛手多糖的免疫活性,采用MTT法、中性红比色法和Griess法分别检测佛手多糖对RAW264.7细胞的生长、吞噬活性和释放NO能力的影响。结果表明,CPE法提取佛手多糖的最佳工艺条件为:温度99 ℃,时间4.5 h,流速66 L/h,提取率为16.09%±0.12%,得率为21.31%±0.13%;HWE法提取佛手多糖的最佳工艺条件为:95 ℃,时间6.0 h,液料比63 mL/g,提取率为15.43%±0.21%,得率为20.22%±0.16%;与HWE法相比,CPE法将佛手多糖提取率提高了4.28%(P<0.05),得率提高了5.39%(P<0.05),且提取时间缩短了1/4。佛手多糖在浓度低于500 μg/mL时对RAW264.7巨噬细胞无明显毒性作用,且可以促进NO的分泌以及提高吞噬活性。上述结果说明,CPE法适合佛手多糖的提取,优于传统的HWE法,且佛手多糖具有免疫类保健食品和药品开发的潜力。     

锁阳多糖对巨噬细胞RAW264.7的免疫调节作用的影响

目的 研究锁阳多糖对巨噬细胞RAW264.7免疫调节作用的影响。方法 以巨噬细胞RAW264.7为研究对象, 设置空白对照组、阳性(LPS)对照组、锁阳多糖给药组(25、50、100、200、400 μg/mL), 用CCK-8法测定细胞增殖活性, 中性红法测定其吞噬活性; Griess法测定其对NO分泌量的影响; ELISA法测定其IL-6和TNF-α的释放能力。结果 与空白组比较, 不同浓度(25~400 μg/mL)锁阳多糖均能够促进巨噬细胞RAW264.7的增殖(P<0.05或P<0.01), 干预24 h和48 h的增殖活性明显高于干预6 h和12 h的增殖活性(P<0.05); 锁阳多糖(25~ 400 μg/mL)能显著促进细胞的吞噬活性(P<0.05); 干预48 h后, 锁阳多糖(25~400 μg/mL)的NO分泌量显著高于空白组和LPS组(P<0.05); 与空白组和LPS组相比, 锁阳多糖(25~400 μg/mL)能显著促进细胞IL-6和TNF-α的释放(P<0.01)。结论 锁阳多糖在一定浓度范围内对巨噬细胞RAW264.7具有良好的免疫调节作用。     

榆黄菇多糖提取工艺优化及其免疫调节活性评价

以榆黄菇为研究对象,对榆黄菇多糖（PCP）提取工艺进行优化、纯化、测定单糖组成和分子量,再对其体外免疫活性进行评价。在单因素基础上通过响应面法确定榆黄菇多糖最优提取工艺为：提取温度59.81 ℃,提取时间2.40 h,液料比29.91 mL/g,在此条件下,预测得率为18.82%,实际得率为18.60%。经DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析从榆黄菇多糖中分离纯化出3个多糖组分（PCP-1、PCP-2、PCP-3）,采用离子色谱法和高效凝胶渗透色谱法分析多糖成分和分子量,得出PCP-1由半乳糖组成,分子量为 1.90×104 u;PCP-2由半乳糖和葡萄糖组成,摩尔比为4.36:5.64,分子量2.76×104 u;PCP-3由岩藻糖、盐酸氨基葡萄糖、半乳糖、葡萄糖和葡萄糖醛酸组成,其摩尔比为0.07:0.11:0.51:7.46:1.85,分子量为4.81×104 u。通过体外试验评估PCP对巨噬细胞RAW264.7免疫调节活性。结果表明,PCP-1、PCP-2和PCP-3多糖质量浓度在25~200 g/mL范围内对巨噬细胞RAW264.7无毒性并具有一定增殖作用、显著提高了NO释放量并增强了巨噬细胞RAW264.7的吞噬能力。当PCP-1、PCP-2和PCP-3多糖质量浓度为200 g/mL时,巨噬细胞RAW264.7 NO释放量达到最大值,分别为11.40、11.56、11.76 moL/L。该研究结果可为榆黄菇的精深加工综合利用提供理论依据。     

复合酶解法优化黄精多糖提取工艺

采用复合酶解法优化黄精多糖提取工艺,苯酚-浓硫酸显色法测定黄精多糖质量浓度,以黄精多糖提取率为指标,对复合酶种类和配比进行筛选后,在单因素试验基础上,考察酶解温度、pH、料液比、加酶量对提取率的影响,并通过正交试验进行优化。结果表明,复合酶提取优于单酶提取和普通水提。酶用量配比为纤维素酶:木瓜蛋白酶=3∶7。酶解最佳条件为:pH值5.0,酶解温度50℃,料液比(g/mL)1∶20,加酶量1.5 g/dL,即纤维素酶0.45 g/dL,木瓜蛋白酶1.05 g/dL,酶解2 h后,沸水浸提2 h。在此工艺条件下,黄精多糖提取率可达21.55%,是普通水提法得率的2.75倍,比单酶水解高出12.06%。     

超声波辅助酶法优化黄精多糖提取工艺的研究

该文主要以始兴黄精为原料,纯净水为提取溶剂,采用超声波辅助酶法提取黄精多糖,通过单因素试验研究复合酶添加量、酶解时间、酶解温度和料液比等因素对黄精多糖提取率的影响,并对其最佳工艺进行正交试验优化。结果表明,超声波辅助酶法提取黄精多糖的最佳工艺条件为:复合酶添加量6%、酶解温度65℃、酶解时间55 min、料液比1∶30(g/mL),在此工艺条件下得到黄精多糖的提取率为25.63%。     

5种食用菌多糖及复配多糖对RAW264.7细胞的免疫调节作用

探究银耳多糖、茯苓多糖、香菇多糖、猴头菇多糖和竹荪多糖5种食用菌多糖及其两两复配得到的10种复配多糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7的免疫调节作用。将RAW264.7细胞分为正常对照组、阳性组和样品（不同浓度的银耳多糖、茯苓多糖、香菇多糖、猴头菇多糖和竹荪多糖及其10种复配多糖）处理组,通过检测巨噬细胞的细胞活力、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）分泌水平以及吞噬能力评价免疫调节作用。结果表明：与正常对照组相比,在质量浓度5 μg/mL～320 μg/mL范围内,5种食用菌多糖在一定浓度时皆能表现出显著增强巨噬细胞RAW264.7的细胞活力,提高巨噬细胞的吞噬能力,促进细胞因子TNF-α的分泌效果（P<0.05）。此外,10种复配多糖在RAW264.7细胞的细胞活力、TNF-α分泌和吞噬能力皆呈现出显著的促进效果。10种复配多糖中,基于香菇多糖和猴头菇多糖的复配多糖在浓度为160 μg/mL时促进细胞因子TNF-α的分泌效果最好;基于茯苓多糖和香菇多糖复配得到的复配多糖对细胞吞噬功能的增强效果最佳,且优于其组成多糖单独作用效果。基于银耳多糖和竹荪多糖复配得到的复配多糖在浓度为80 μg/mL时促进RAW264.7分泌TNF-α的效果优于其组成多糖单独作用,在浓度为160 μg/mL时对细胞吞噬功能的增强效果优于其组成多糖。银耳、茯苓、香菇、猴头菇、竹荪来源的多糖单独作用及其两两复配得到的复配多糖对RAW264.7细胞均具有免疫调节活性。不同多糖间可能存在相互作用,复配后免疫调节活性优于单独作用时免疫调节活性,例如茯苓多糖和香菇多糖,银耳多糖和竹荪多糖。     

盐制巴戟天多糖结构表征及其免疫活性

该研究采用水提醇沉法从盐制巴戟天中提取粗多糖（SMP）,经DEAE-52纤维素柱和葡聚糖凝胶Sephadex G 100柱分离纯化得到多糖（SMP-4）,采用红外光谱、高效凝胶渗透凝胶色谱、气相色谱和核磁共振波对SMP-4进行结构表征,并以RAW264.7巨噬细胞为模型,通过测定其细胞增殖活性和细胞因子分泌水平来评价其免疫活性。多糖结构分析表明,SMP-4是由阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖、核糖、木糖、葡萄糖和甘露糖组成的,摩尔比例为：0.55:0.23:0.16:0.03:0.02:0.01:0.01,分子量为1.32×105 u的多糖。SMP-4具有六种糖苷键,其中→3)-D-Araf-(1→占比最高,为58.35%。在免疫活性评价分析中表明,与对照组相比,在15.625~500.000 μg/mL质量浓度范围内不影响RAW264.7细胞的增殖,同时能显著地促进肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的分泌。SMP-4质量浓度为500 μg/mL时,RAW264.7细胞分泌的TNF-α质量浓度最高,为2 100.00 pg/mL（P<0.001）;在31.25 μg/mL质量浓度下,RAW264.7细胞分泌的IL-1β质量浓度最高,为14.50 pg/mL（P<0.05）。综上,SMP-4表现出良好免疫活性,具有成为一种天然的免疫调节剂的潜力。     

不同来源多花黄精多糖的结构特性及抗氧化活性比较

以5种不同来源多花黄精为原料,通过水提醇沉法制备黄精多糖,利用离子色谱、高效凝胶渗透色谱、傅里叶红外变换光谱、X-射线衍射仪和扫描电镜等技术研究其结构性质,并评价其抗氧化活性。结果表明,5种多花黄精的多糖含量在7.63%～16.78%质量分数范围内,相互间有显著性差异（P<0.05）,且产自江西铜鼓的黄精多糖含量最高（16.78%）;5种多花黄精多糖均为杂多糖,单糖组成以果糖为主。红外光谱表明5种多花黄精多糖均具有典型糖类吸收峰,含有α-糖苷键和β-糖苷键;其微观形貌主要呈不规则片状或多孔片状结构。抗氧化活性实验显示,5种多花黄精多糖具有一定抗氧化能力,在2～10mg/m L的质量浓度范围内对1,1-二苯基-2-苦基肼自由基和羟自由基清除能力呈一定的剂量依赖性,其中江西铜鼓多花黄精多糖的抗氧化活性最好。该研究反映了不同来源多花黄精多糖的结构特性和自由基清除能力差异,可为多花黄精的良种选育和资源利用提供科学依据。     

九华黄精9蒸9晒加工过程中重金属含量的变化及安全性

目的探究9蒸9晒炮制不同加工阶段九华黄精中重金属和有害元素的含量变化。方法根据国家标准GB 5009.3-2016《食品安全国家标准食品中水分的测定》、GB 5009.268-2016《食品安全国家标准食品中多元素的测定》和GB5009.17-2014《食品安全国家标准食品中总汞及有机汞的测定》,检测不同蒸晒阶段的九华黄精的水分和铅、砷、汞、镉、铜、铬、锰、钼8种元素的含量并进行比较分析。结果九华黄精中汞和钼未检出,9蒸9晒炮制过程中,随着蒸晒次数的增加,重金属和有害元素的浓度被相应增加,但铅、砷、镉3种重金属的浓度却是在5蒸5晒时达到最高,随后又下降。九华黄精中重金属含量低于《中国药典》(2020)和《代用茶》标准中规定限量,但铅含量高于新鲜蔬菜和蔬菜制品限量。结论九华黄精用作中药材及生产代用茶时,其重金属和有害元素的含量是在安全范围内,但不宜作为菜肴烹调原料。     

水态、氨基酸组成及抗氧化活性对黄精切片干燥过程的影响

目的 探究冷冻干燥和热风干燥对黄精切片颜色、抗氧化活性、氨基酸组成等品质的影响。方法 本研究使用氨基酸分析仪分析氨基酸的组成变化,并采用低场核磁技术表征黄精切片干燥过程中的水态变化,通过研究其色度、抗氧化活性变化,探析不同方法干燥黄精切片的效果差异。结果 与热风干燥样品相比,冷冻干燥样品可以更多的保留其抗氧化活性,冷冻干燥样品的色度更接近于新鲜样品;相较于冷冻干燥,热风干燥处理对黄精的游离氨基酸组成及含量的影响更显著。除此之外,冷冻干燥可以更大程度的降低切片中束缚水的含量,而且热风干燥处理结合低场核磁共振成像实现了干燥过程的水分变化的可视化。结论 冷冻干燥可以更好的保留黄精切片的生物活性,相关研究为相关的食品干燥过程中的水态变化研究提供了理论指导。     

多花黄精非药用部位活性成分及抗氧化性比较

目的:提高多花黄精的综合利用。方法:测定多花黄精根、茎、叶、花和嫩芽5个非药用部位的总黄酮、总皂苷和总酚含量,并比较非药用部位提取液的DPPH·、·OH及对亚硝酸盐的清除率。结果:多花黄精5个部位中总黄酮和总酚含量顺序大小一致,依次为叶>嫩芽>花>茎>根,总皂苷以花中含量最高;抗氧化活性方面,叶提取液的DPPH·、·OH和对亚硝酸盐的清除率最高,其次是嫩芽、花。相关性分析发现,多花黄精非药用部位提取液对DPPH·、·OH和亚硝酸盐的清除率与总黄酮、总皂苷和总酚含量均表现出一定的正相关。结论:多花黄精非药用部位提取液具有较好的生物活性。     

九华山黄精多糖的分离纯化及化学表征

采用传统方法、酶法、超声波提取以及酶法辅助超声等多种手段对九华山多花黄精多糖进行提取,并用DEAE-纤维素柱层析与交联葡聚糖分子筛法等对多糖进行纯化、分级以及相对分子质量测定,采用红外光谱以及气相色谱法等对多糖的构型和组成进行分析。结果表明：纤维素酶辅以超声提取方法最佳,多糖得率最高;多糖为杂多糖,其相对分子质量为8912,其组成为果糖:葡萄糖=8.7:1。     

3种不同酵母发酵黄精酒的抗氧化活性及风味物质分析

目的 探究3种酵母发酵黄精(Polygonatum cyrtonema)酒的抗氧化活性及其风味特征。方法 借助紫外分光光度法、电子舌、顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法(headspace solid phase microextraction-gas chromatography-mass spectrometry, HS-SPME-GC-MS)及感官评价法多源信息综合分析BRG、D254、DV10 3种商业酵母发酵黄精酒的理化指标、总酚、总黄酮、抗氧化活性及滋味和挥发性香气成分。结果 酵母发酵能够提升黄精酒皂苷、总酚、总黄酮的含量及抗氧化活性。不同酵母发酵黄精酒的理化指标存在显著差异, DV10发酵的黄精酒酒精度、总黄酮含量, 总糖、总酸含量相对较低。电子舌系统测定结果表明3种黄精酒在涩味、苦味回味、鲜味、丰富度、咸味、酸味和苦味上存在差异, DV10黄精酒滋味更为协调。3种酵母发酵的黄精酒共计检测出51种挥发性物质, BRG、DV10和D254分别为36、31和22种。DV10菌株发酵的黄精酒酯类物质含量最高, 气味活度值(odor activity value, OAV)>500的香气成分有6种, 分别为丁酸乙酯、乙酸异戊酯、正己酸乙酯、辛酸乙酯、癸酸乙酯、异戊醇, 是DV10发酵黄精酒的关键香气组分, 赋予了DV10发酵黄精酒花香、果香和奶油香甜的香气。BRG发酵黄精酒挥发性物质中有硫化氢(H2S), D254发酵黄精酒关键香气组分较少。感官评价结果显示BRG发酵黄精酒存在臭鸡蛋气味, 与HS-SPME-GC-MS分析结果一致, 对酒体感官造成了负面影响。DV10发酵黄精酒综合感官评价结果最优。结论 通过3种酵母发酵均可提高黄精浸提液的皂苷、总酚和总黄酮含量及抗氧化活性, DV10酵母发酵的黄精酒酒精度高, 滋味和香气协调, 酯类物质含量较高, 以黄精香和花果香为主, 品质较优, 可作为酿制黄精酒的参考商业菌株。     

基于智能感官和顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法分析原料冷冻处理对黄精米酒风味成分的影响

目的 探究原料冷冻处理对黄精米酒风味物质成分的影响。方法 借助电子舌、电子鼻、顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法(headspace solid-phase micro-extraction-gas chromatography-mass spectrometry,HS-SPME-GC-MS)和感官小组评价分析-20℃冷冻处理7 d与未冷冻处理原料黄精酿造黄精米酒的滋味和挥发性香气成分。结果 与未冷冻处理黄精米酒相比,冷冻黄精米酒的苦味、苦味回味、涩味、涩味回味、鲜味回味无显著变化,但鲜味和咸味降低,酸味有所提升;电子鼻分析结果显示冷冻黄精米酒的挥发性香气以芳香类物质为主,而未冷冻黄精米酒挥发性香气以氢化物、甲基类、长链烷烃为主。HS-SPME-GC-MS数据分析显示冷冻黄精米酒中酯类物质的种类和含量均增加,醇类物质的种类和含量减少,未检测到醛酮类物质,该结果与电子鼻数据结果吻合;冷冻黄精米酒气味活度值(odor activity value, OAV)>1的物质有16种,其中丁酸乙酯的OAV最高(264.92),而未冷冻黄精米酒OAV>1的物质有20种,其中癸酸乙酯的OAV...     

多花黄精提取物体外干预3T3-L1前脂肪细胞并缓解其脂质积累

研究多花黄精提取物对3T3-L1前脂肪细胞以及分化后成熟脂肪细胞的作用。用φ=70%乙醇和复合酶（纤维素酶:木瓜蛋白酶=3:7）为提取剂，分别提取出多花黄精生品乙醇提取物（Raw Products Extract，RPE）、多花黄精九蒸九制品乙醇提取物（Processed Products Extract，PPE）和多花黄精生品多糖（Polysaccharide from Polygonatum cyrtonema Hua，CPP），得到的九蒸九制品提取物中多糖质量百分比减少（RPE 29.83%，PPE 1.92%），但表现出更高的皂苷、总黄酮和总酚含量（13.63%、5.37 mg/g、14.52 mg/g）。各多花黄精提取物处理3T3-L1细胞后，均观察到3T3-L1前脂肪细胞被阻滞在G0/G1和S期，细胞被诱导凋亡从而抑制细胞的增殖，成熟脂肪细胞内脂滴沉积累量和甘油三酯（Triglyceride，TG）所占比例显著降低，且高剂量组的PPE（380 µg/mL）对降低TG占比的效果最显著，与市售多花黄精九蒸九制品多糖（Polysaccharides from Purchased Products，PP）无显著差异。此外，脂肪生成和脂肪酸氧化有关基因也可受到调控，包括抑制PPARγ、C/EBPα、FABP4和LPL的mRNA表达，促进CPT-1的mRNA表达。结果提示，多花黄精提取物可防止脂肪细胞在体外积聚脂肪，表明多花黄精可能具有抗肥胖作用。     

黄精炮制前后及配伍对雌性大鼠内分泌神经递质和免疫功能的影响

目的 探讨黄精炮制前后及配伍对雌性大鼠内分泌和免疫功能的影响。方法 将SD健康雌性大鼠32只,随机分为空白对照组、生药黄精组、炮制黄精组、黄精配伍组,应用酶联免疫法检测血清中激素、神经递质和免疫球蛋白含量。结果 各个处理组与空白对照组相比,作用效果显著（P<0.05）,黄精显著升高雌性大鼠血清的促性腺激素释放激素、促卵泡生长激素、雌二醇、5羟色胺、去甲肾上腺素以及免疫球蛋白A的水平（P<0.05）。结论 综合各考察因素效果,最佳为炮制黄精组。黄精对雌性大鼠内分泌、神经和免疫系统功能作用效果存在差异,且从内分泌系统方面论证了黄精补阴作用的中医理论,也进一步为黄精作为功能食品原料提供了依据。     

玉米红茶复合发酵饮料的研制

以红茶、玉米为主要原料,结合传统红茶茵的培养方法,开发出既含有玉米中丰富的氨基酸又兼具红茶茵特殊保健作用的发酵茶饮料。研究得出最佳发酵条件为玉米糖化物10％,茶叶0．4％,接种量15％,发酵温度30℃,发酵成品的终点pH2．5左右。