基于发光细菌法的农产品中主要重金属的联合毒性评价

通过细菌发光抑制试验,研究Pb~(2+)、Cd~(2+)和Hg~(2+)的单一毒性,以及Pb~(2+)+Cd~(2+)、Cd~(2+)+Hg~(2+)、Pb~(2+)+Hg~(2+)、Pb~(2+)+Cd~(2+)+Hg~(2+)的混合毒性,分别采用等毒性单位法与加和指数法,对其混合物的联合毒性进行评价。结果表明,3种重金属的毒性大小为Hg~(2+)Pb~(2+)Cd~(2+)。对于混合体系,两种评价方法结果一致,即Pb~(2+)+Cd~(2+)为协同作用;Cd~(2+)+Hg~(2+)、Pb~(2+)+Hg~(2+)和Pb~(2+)+Cd~(2+)+Hg~(2+)均为拮抗作用。     

温度、pH及金属离子对大连虾蛄消化酶活性影响

以大连虾蛄为原料,从肌肉及消化腺中提取消化酶(蛋白酶,淀粉酶),研究其酶学性质。实验结果表明,(1)大连虾蛄肌肉中蛋白酶最适温度为50℃,最适p H为8,反应激活剂为Mg~(2+)、Ca~(2+)和Mn~(2+),抑制剂为Pb~(2+)、Cu~(2+)、Zn~(2+)、Fe~(2+)。(2)消化腺中蛋白酶最适温度为40℃,最适pH为6,EDTA对其有抑制作用,反应激活剂为Ca~(2+)、Mn~(2+),抑制剂为Pb~(2+)、Mg~(2+)、Cu~(2+)、Zn~(2+)、Fe~(2+)。(3)大连虾蛄肌肉中淀粉酶最适温度为30℃,最适pH为7,反应激活剂为Mn~(2+),在浓度为20mmol/L时,激活作用最大,抑制剂为Pb~(2+)、Mg~(2+)、Ca~(2+)、Cu~(2+)、Zn~(2+)和Fe~(2+)。(4)消化腺中淀粉酶最适温度为30℃,最适pH为7,EDTA对消化腺淀粉酶有抑制作用,反应激活剂为Mn~(2+)和Ca~(2+),抑制剂为Pb~(2+)、Mg~(2+)、Cu~(2+)、Zn~(2+)、Fe~(2+)。     

主要谷物水分测定方法比较研究

对大米、小麦和玉米水分测定方法进行了比较研究.水分测定方法包括:(Ⅰ)GB/T 5497 105℃恒重法(烘箱干燥105℃,3 h)、(Ⅱ)GB/T 5497定温定时烘干法(烘箱干燥130℃,40 min)、(Ⅲ)ISO712粉状物测定(烘箱干燥130℃,90 min)、(Ⅳ)ISO712常规法(烘箱干燥130℃,2 h)、(Ⅴ)GB/T 10362粉碎玉米水分测定(烘箱干燥130℃,4 h)、(Ⅵ)GB/T 10362整粒玉米水分测定(烘箱干燥130℃,38 h)和(Ⅶ)M105/72(烘箱干燥105℃,72 h).在小麦和大米水分测定及同一类型的粮食水分测定中,方法(Ⅳ)测定值要大于方法(Ⅰ)、(Ⅱ)、(Ⅲ);其标准偏差要小于这三种方法,精确度较高,方法(Ⅰ)、(Ⅱ)、(Ⅲ)测定值与方法(Ⅳ)测定值的相关系数较高.玉米水分测定中,方法(Ⅴ)测定值和精确度大于方法(Ⅰ)、(Ⅱ),这两种方法的测定结果与方法(Ⅴ)的相关系数较高.     

Ei Compendex数据与Ei Page One数据的区别

EiCompendex数据数据内容全面,主要包括:论文标题(Ti);作者(AU);作者单位(AF);英文文摘(Ab-stract);论文所在期刊名称(ST);卷,期(VO,IS);论文页码(XP);分类码(LL);主题词(MH,CV);等等。其中分类码(LL)和主题词(MH,CV)需要专业人员单独给出。EiPageOne数据数据内容主要包括:论文标题(Ti);作者(AU);作者单位(AF);论文所在期刊名称(ST);卷,期(VO,IS);论文页码(XP);少数数据带有英文文摘。不需要任何专业人员再做工作。Compendex数据和PageOne数据的主要区别在于数据中是否有分类码(LL)和主题词(MH,CV);有这两项内容的数…     

种用油菜籽真空干燥动力学特性及对Weibull模型的解析

为了获得发芽力较好的种用油菜籽,以及提高其真空干燥效率,将Weibull分布函数应用于油菜籽真空干燥动力学特性的研究。在装载量(50±0.5) g条件下,将初始含水率(M)为16.12%、18.19%、20.26%的油菜籽样品分别置于不同温度(T)(40、50、60、70、80℃)以及不同真空度(V)(0.03、0.04、0.05、0.06、0.07 MPa)进行实验。考察初始含水率(M)、温度(T)及真空度(V)对油菜籽干燥特性的影响。利用决定系数(R~2)、均方根误差(RMSE)、卡方(χ)~23个指标对拟合结果进行评价。对尺度参数(α)、形状参数(β)、水分扩散系数(D~(eff))、有效扩散系数估算值(D_(cal))和几何参数(R_g)进行解析。结果表明,尺度参数(α)与温度(T)和真空度(V)呈负相关,与初始含水率(M)呈正相关;形状参数(β)值均低于1,水分扩散系数(D_(eff))值为6.051×10~(-9)～2.908×10~(-8)m~2/s,几何参数(R_g)值均低于1,油菜籽真空干燥活化能(E_a)为22.369 k J/mol;温度(T)与平均干燥速率(r)呈正相关,与发芽率(g)和芽长(l)呈负相关;真空度(V)仅与平均干燥速率(r)呈正相关;初始含水率(M)与单位能耗(e)呈正相关,与发芽率(g)、芽长(l)以及平均干燥速率(r)均呈负相关。     

腈基淀粉接枝含氟单体共聚物乳液表面施胶剂的制备及应用

以丙烯腈改性淀粉为分散剂,苯乙烯(St)、丙烯酸丁酯(BA)为单体,丙烯酰胺(AM)为交联单体,甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯(DM)为阳离子单体,甲基丙烯酸十二氟庚酯(FM)为功能单体,过硫酸钾(K2S2O8)为引发剂,采用无皂乳液聚合技术合成了一种阳离子含氟表面施胶剂。最佳合成工艺是:w(腈基淀粉)=8%,w(FM)=0.3%,w(DM)=0.9%,w(AM)=3%,w(K2S2O8)=0.5%,m(St):m(BA)=2.5。并对施胶纸张各种性能做了测试,与同等条件下未含氟表面施胶剂相比,纸张的施胶度和抗张强度提高明显。     

食肉质量的酶学研究

本文阐述了猪骨骼肌中肌酸激酶(CPK)及磷酸己糖异构酶(PHI)的活力与猪肉的食用质量之间的关系.实验中,采用了五种肌肉〔背最长肌(Ⅰ)、腰大肌(Ⅱ)、岗上肌(Ⅲ)、腰部眼肌(Ⅳ)、股二头肌(Ⅴ)及其它混合肉样〕,比较了三种测定CPK活力的方法〔无机磷酸法(IP)、二乙酰法(DA)及PH法〕.结果表明,CPK活力与肌肉中的肌酸成总肌酥含量呈正相关关系(IP法,r=0.88,用肌肉(Ⅰ),r=0.80,用肌肉(Ⅱ)〕.不论用哪种测定方法,肌肉(Ⅰ)的CPK活力总是比肌肉(Ⅱ)的为高(DA法P<0.01,PH法P<0.05);而肌 肉(Ⅱ)的活力又比肌肉(Ⅲ)的为高(DA法,P<0.001).肌肉的水溶性蛋白质量的多少也与CPK的活力高低相一致.这些结果表明,CPK作为食肉质量的指标是可靠的.以CPK为参比,令人满意地得到了PHI与GPK的正相关关系:r=0.85(肌肉Ⅳ),r=0.72(肌肉Ⅴ).相关程度在肌肉(Ⅳ)较高,而肌肉(Ⅳ)中的CPK活力、PHI活力皆较肌肉(Ⅴ)中的为高(CPK,P<0.001;PHI,P<0.05).由以上结果得出如下结论:除G...More     

阳离子含氟苯丙共聚物表面施胶剂的制备及应用

在氧化还原体系中,以淀粉为主链,苯乙烯(St)、丙烯酸丁酯(BA)、甲基丙烯酸十二氟庚酯(FM)、N-羟甲基丙烯酰胺(HMAM)和二甲基二烯丙基氯化铵(DMDAAC)为单体,通过无皂乳液聚合制备了阳离子含氟苯丙共聚物瓦楞纸表面施胶剂,并通过红外光谱(FT-IR)、静态接触角和扫描电镜(SEM)进行了表征。结果表明,最佳合成工艺是:m(单体):m(淀粉)=2,m(St):m(BA)=2.5,m(过硫酸钾):m(淀粉)=0.5,w(FM)=0.3%。当施胶浓度为0.6%时,施胶度可达5min。     

环氧树脂阳离子无皂苯丙乳液用于纸张的表面施胶

以丙烯腈改性淀粉为分散剂,苯乙烯(St)、丙烯酸丁酯(BA)、甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯(DM)为单体,丙烯酰胺(AM)为交联单体,环氧树脂(E-44)为功能单体,过硫酸钾(K2S2O8)为引发剂,采用无皂乳液聚合技术合成了一种阳离子苯丙乳液表面施胶剂,并对文化纸进行表面施胶。最佳合成工艺是:w(DM)=3%,m(St):m(BA)=3,w(AM)=4%,w(E-44)=0.3%,w(K2S2O8)=0.5%。     

Loeb条件概率空间

给出了内有限可加概率空间(X,ζ,P)上条件概率PA的定义,并通过完备化得到条件Loeb概率空间(X,L(ζ,PA),L(PA)).其次对内有限可加概率空间(X,ζ,P)完备化,得Loeb空间(X,L(ζ,P),LP).在所得Loeb空间上定义Loeb条件概率LP(A),并讨论这2个空间之间的关系,得出L(ζ,PA)=L(ζ,P),且对B∈L(ζ,P),L(PA)(B)=LP(A)(B).     

利用代谢工程改造谷氨酸棒杆菌产丙酮酸研究

丙酮酸是一种重要的有机酸,可以作为前体物质,参与合成多种有机化合物,在生物体的能量代谢中发挥着重要作用。为提高丙酮酸产量,选择利用代谢工程改造谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)生产丙酮酸。利用同源重组的方法,依次敲除谷氨酸棒杆菌中与丙酮酸代谢支流相关的5个关键基因(丙酮酸醌氧化还原酶基因pqo、丙酮酸羧化酶基因pyc、转氨酶基因alaT、缬氨酸-丙酮酸氨基转移酶基因avtA、丙酮酸脱氢酶基因aceE),摇瓶发酵72h后丙酮酸的产量达到14.64g/L。通过过表达编码转酮醇酶基因tkt、转醛酶基因tal、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶基因pck,增加合成丙酮酸前体物质的供应。最终,复合培养基摇瓶发酵72h后,发酵液中丙酮酸的产量达到15.39g/L,与野生型菌株相比提高了28倍。研究旨在为利用微生物发酵生产丙酮酸提供一定的理论参考。     

Innovative metabolic pathway design for efficient l-glutamate production by suppressing CO2 emission

In the pathway of L-glutamic acid (L-Glu) biosynthesis in Corynebacterium glutamicum, 1 mol of L-Glu is synthesized from 1 mol of glucose at a cost of 1 mol of carbon dioxide (CO(2)), with a maximum theoretical yield of 81.7% by weight. We have designed an innovative pathway for efficient L-Glu production employing phosphoketolase (PKT) to bypass the CO(2)-releasing pyruvate dehydrogenase reaction, thereby increasing the maximum theoretical yield of L-Glu from glucose to up to 98.0% by weight (120% mol/mol L-Glu produced/glucose consumed). The xfp gene encoding PKT was cloned from Bifidobacterium animalis and overexpressed under the strong cspB promoter in C. glutamicum. A functional enzyme was detected in an L-Glu-producing strain of C. glutamicum (odhA). When cells of this producer strain with the xfp gene and those without the xfp gene were cultivated in a controlled fermentation system, the L-Glu production yield of the strain expressing the xfp gene was much higher than that of the original strain, coupled with the suppression of CO(2) emission. Consequently, we could successfully enhance L-glutamate production by installing the PKT pathway of B. animalis into C. glutamicuml-Glu metabolism, and this novel metabolic design will be able to increase L-Glu production yield beyond the maximum theoretical yield obtained from the conventional metabolic pathway of biosynthesis from glucose.     

稀土元素对谷氨酸发酵产酸及其谷氨酸脱氢酶的影响

以目前我国谷氨酸发酵广泛使用的谷氨酸棒杆菌S9114 为实验菌株 ,研究了稀土元素对谷氨酸发酵产酸及其谷氨酸脱氢酶的影响。结果表明LaCl3、CeCl3和NdCl3浓度分别为 0 72 0、0 0 71和 0 0 0 7mmol/L时 ,促使谷氨酸发酵产酸水平提高 6%～ 8% ,对菌体的GDH NADPH的酶活性有显著的激活作用。实验还表明 ,稀土元素对纯化GDH NADPH的活性也有一定的调节作用     

谷氨酸棒状杆菌高效发酵谷氨酸的关键分子机理研究进展

谷氨酸是世界上产量最大的氨基酸,在食品、医药、工农业等领域具有广泛的用途。谷氨酸棒状杆菌是工业生产谷氨酸的主要菌株,从发现谷氨酸棒状杆菌以来,国内外在谷氨酸过量产生机理方面的研究已取得了一定的科研成果。本文就发酵过程中基因转录水平、关键酶酶活、细胞膜与运输蛋白的结构3个层面机理的研究进展做一综述。最后对谷氨酸过量产生的机理进行分析,将来需从生理作用及调控因子等方面研究,进一步完善谷氨酸过量产生机理,以期对提高谷氨酸产量以及开发微生物合成其他生物产品提供参考和方向。     

Decreasing acetic acid accumulation by a glycerol overproducing strain of Saccharomyces cerevisiae by deleting the ALD6 aldehyde dehydrogenase gene

Glycerol is a major fermentation product of Saccharomyces cerevisiae that contributes to the sensory character of wine. Diverting sugar to glycerol overproduction and away from ethanol production by overexpressing the glycerol 3-phosphate dehydrogenase gene,GPD2, caused S. cerevisiae to produce more than twice as much acetic acid as the wild-type strain (S288C background) in anaerobic cell culture. Deletion of the aldehyde dehydrogenase gene, ALD6, in wild-type and GPD2 overexpressing strains (GPD2-OP) decreased acetic acid production by three- and four-fold, respectively. In conjunction with reduced acetic acid production, the GPD2-OP ald6Delta strain produced more glycerol and less ethanol than the wild-type. The growth rate and fermentation rate were similar for the modified and wild-type strains, although the fermentation rate for the GPD2 ald6Delta strain was slightly less than that of the other strains from 24h onwards. Analysis of the metabolome of the mutants revealed that genetic modification affected the production of some secondary metabolites of fermentation, including acids, esters, aldehydes and higher alcohols, many of which are flavour-active in wine. Modification of GPD2 and ALD6 expression represents an effective strategy to increase the glycerol and decrease the ethanol concentration during fermentation, and alters the chemical composition of the medium such that, potentially, novel flavour diversity is possible. The implications for the use of these modifications in commercial wine production require further investigation in wine yeast strains.     

Effect of NAD+-dependent isocitrate dehydrogenase gene (IDH1, IDH2) disruption of sake yeast on organic acid composition in sake mash

The ratio of organic acids in sake mash is a very important factor affecting the taste of alcoholic beverages. To alter the organic acid composition in sake and investigate the mechanism of producing organic acids in sake mash, we examined the effect of NAD+-dependent isocitrate dehydrogenase (IDH) activity deficiency in sake yeast by disrupting the IDH1 or IDH2 gene. Two haploid strains (MATa or MATa genotype) isolated from sake yeast Kyokai no. 701 (K701) were disrupted using the aureobasidin A resistant gene (AUR1-C) as a selection marker. These disruptants were defective in the activity of IDH and failed to grow on medium containing glycerol as a sole carbon source. Sake meter, alcohol concentration, and glucose consumption in sake brewed with the disruptants were reduced in comparison with those of the parental strains. The production of citrate (including isocitrate), malate, and acetate by the disruptants was increased, but succinate production was reduced to approximately half in comparison with the parental strains. These results indicate that approximately half the amount of succinate in sake mash is produced via the oxidative pathway of the TCA cycle in sake yeast. While the diploid strain constructed by mating haploid disruptants for the IDH gene exhibited stronger fermentation ability than the haploid disruptants, almost similar profiles of components in sake were obtained for both strains.     

谷氨酸棒状杆菌合成L-高丝氨酸的代谢改造与发酵条件探究

目的:本研究以谷氨酸棒状杆菌ATCC 13032为底盘细胞,构建1株L-高丝氨酸合成菌株并分析溶氧环境对其产物合成的影响。方法:首先通过外源添加0～40 g/L的L-高丝氨酸分析谷氨酸棒状杆菌的产物耐受性;随后,通过基因thrB敲除阻断L-高丝氨酸的降解途径,获得谷氨酸棒状杆菌重组菌H1;在此基础上利用挡板摇瓶进行细胞培养以增强发酵过程中氧气供给能力。结果:与大肠杆菌相比,谷氨酸棒状杆菌对L-高丝氨酸具有更强耐受性。研究中通过敲除基因thrB构建了L-苏氨酸缺陷型谷氨酸棒状杆菌重组菌H1,发现基础培养基中加入0.5 g/L的L-苏氨酸后,该重组菌生长恢复正常水平。挡板摇瓶条件下重组菌H1的L-高丝氨酸产量增加至836.7 mg/L,较普通摇瓶产量44.6 mg/L提高了17.76倍。结论:通过阻断L-苏氨酸的合成,成功构建L-高丝氨酸合成菌株谷氨酸棒状杆菌H1,并且发现利用挡板摇瓶增强发酵过程中供氧能力是促进谷氨酸棒状杆菌高效合成L-高丝氨酸的有效手段,为后续提高L-高丝氨酸发酵产量提供了参考。     

一株黄色短杆菌基因工程菌株的构建及其L- 缬氨酸积累

从谷氨酸棒杆菌模式菌株C. glutamicum ATCC13032 中克隆出L- 缬氨酸合成途径上的限速酶--乙酰羟酸合酶编码基因ilvBN。对ilvBN 进行定点突变,获得其抗反馈抑制突变型ilvBNr。以大肠杆菌- 黄色短杆菌穿梭表达载体pDXW-10 为基础,构建重组质粒pDXW-10-ilvBNr,并转化野生型黄色短杆菌B. flavum ATCC14067,获得工程菌株ATCC14067/pDXW-10-ilvBNr。3L 罐发酵实验结果显示：在野生型菌株发酵液中检测不到L- 缬氨酸积累,而工程菌株发酵液中L- 缬氨酸积累达5.0g/L。     

耐Mn~(2+)高产柠檬酸菌株的选育及其特性分析

诱变选育耐锰离子(Mn2+)的高产柠檬酸菌株,并研究了突变株的特性。采用紫外和亚硝基胍复合诱变,以含不同浓度Mn2+的培养基进行筛选,同时考察了不同浓度Mn2+对突变株柠檬酸发酵、关键酶酶活力及呼吸途径的影响。在以葡萄糖为唯一碳源进行摇瓶发酵时,突变株柠檬酸产量比野生菌株提高了92.4%,突变株UV-141对高浓度Mn2+有一定的耐受性,且Mn2+对其发酵生产柠檬酸有促进作用,与不添加Mn2+时相比,添加300 mg/L Mn2+时,柠檬酸产量及葡萄糖最大比消耗速率分别提高了107%和16.7%;乌头酸酶最高酶活下降了15.8%,NAD+-(NADP+-)异柠檬酸脱氢酶对Mn2+不敏感且在整个发酵过程中始终处于较低水平,有利于柠檬酸的积累;当侧系呼吸链(AOX)受到水杨基氧肟酸(SHAM)抑制时柠檬酸产量显著下降,而添加Mn2+则能够削弱其对柠檬酸产量的影响。突变株柠檬酸产量明显高于野生菌株,Mn2+能促进突变株葡萄糖代谢加快、乌头酸酶酶活下降,同时能削弱SHAM对AOX途径的影响,从而促进柠檬酸的大量积累。     

生物合成对香豆酸大肠杆菌工程菌的构建

对香豆酸是一种具有预防心血管疾病、抗氧化和抗菌消炎等生物活性的酚类物质,同时,它也是高价值苯丙烷类保健营养品(如白藜芦醇)的前体。本研究希望创制出一种生物合成对香豆酸的方法,以缓解对香豆酸的供求问题。把带有粘红酵母(Rhodotorula glutinis)酪氨酸解氨酶(Rg TAL)基因的组成型表达载体转化大肠杆菌ATCC31884,并通过PCR鉴定后,获得重组菌株。对重组菌株进行发酵培养,对发酵液进行高效液相色谱检测,确定工程菌具有生物合成对香豆酸的能力。随后通过优化L-酪氨酸的添加量和工程菌的发酵时间,最终确定,底物L-酪氨酸的添加量为0.5 m M,发酵时间为36 h,检测发酵液中的对香豆酸含量最高,为161.23 mg/L。这表明,Rgtal基因在重组大肠杆菌中成功得到了表达,并且能利用自身代谢和外源添加的L-酪氨酸生物合成对香豆酸。