昆仑雪菊结合型黄酮类化合物的分离与鉴定

昆仑雪菊结合型黄酮类化合物因与细胞壁以共价键结合,难以直接用溶剂萃取出来。本研究采用碱降解法使结合型化合物释放出来并优化降解条件,在此基础上,利用不同溶剂对降解产物进行提取筛选出最佳的溶剂得到粗提物,利用常压硅胶柱层析和SepdexLH-20凝胶柱层析对粗提物中的黄酮类化合物进行分离纯化得到单体化合物,采用Fe3+还原/抗氧化能力（ferric reducing antioxidant power,FRAP）法、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-diphenyl-1-（2,4,6-trinitrophenyl）hydrazyl,DPPH）法及2,2’-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（2,2’-Azinobis-（3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate）,ABTS）法对单体化合物进行抗氧化活性评价。结果表明：最佳的碱降解时间2 h、温度50 ℃、NaOH浓度2 mol/L,最佳提取溶剂为正丁醇;从粗提物中分离得到2 个单体化合物,采用核磁共振（nuclear magnetic resonance,NMR）和电喷雾质谱（electrosprayionization mass spectra,ESIMS）鉴定其化学结构分别为金鸡菊查尔酮-4’-O-β-D-吡喃葡萄糖（化合物1）、3’,4’,7,8-四羟基二氢黄酮（化合物2）;活性测定结果表明两个化合物的总抗氧化能力均强于阳性对照VE,化合物1与化合物2对DPPH自由基的半数抑制率IC50分别为（17.29±0.17）μmol/L和（70.09±0.09）μmol/L、对ABTS＋·半数抑制率IC50分别为（22.86±0.21）μmol/L和（33.4±0.18）μmol/L,远低于阳性对照VE的IC50值（分别为（78.08±1.63）μmol/L和（38.54±0.42）μmol/L）,说明两个化合物均有很强的抗氧化活性。     

不同光照对荞麦芽黄酮类化合物及相关代谢酶基因表达的影响

通过分析不同品种荞麦的发芽形态及发芽后总酚、总黄酮的含量,从10 个荞麦品种（7 个苦荞和3 个甜荞）中筛选出2 个最适合生产荞麦芽的品种：‘蒙古2号’苦荞和‘西农9976’甜荞。将筛选出的品种进行不同发光二极管（light-emitting diode,LED）光照发芽处理,比较荞麦芽中总酚及黄酮的含量,同时分析不同光照下苦荞芽中苯丙氨酸解氨酶、黄酮醇合酶、查耳酮合酶及查耳酮异构酶的基因表达,探讨其作用机理。结果表明,‘蒙古2号’提高黄酮类化合物含量的最佳处理方式是白光光照,其中荭草苷、异荭草苷含量分别提高了63%、69%（发芽6 d）,总黄酮含量提高了40%～53%（发芽2～6 d）;‘西农9976’提高黄酮类化合物含量的最佳处理方式是红光光照,其中芦丁含量提升70%（发芽6 d）,总黄酮含量最多提高111%（发芽2～6 d）。荞麦芽中总酚含量均是在红光作用下提高最多,其中‘西农9976’总酚含量最多提高83%（发芽2～6 d）,且光照处理可明显上调4 种代谢酶基因的表达水平。     

黄芪中黄酮类成分的研究进展

黄芪以蒙古黄芪和膜荚黄芪的干燥根入药,是中医临床上常用的大宗中药材.近年来,国内外以黄芪为原料的中成药、保健品、食品、化妆品、动物饲料和有机绿肥等产品的研究与开发迅速升温,具有广泛的应用前景.黄芪具有多种生物活性,如增强机体免疫力、保肝、利尿、抗衰老、降压和抗菌等作用.药材的药效与其所含的有效成分息息相关,不同的化学成...     

HPLC分析芦苇叶中天然抗氧化成分黄酮类化合物

用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）成功地分离和制备了芦苇叶中天然抗氧化成分黄酮类化合物，并进行了定性和定量分析。     

昆仑雪菊黄酮类化合物的抗氧化相互作用研究

目的：选取昆仑雪菊中5 种具有强抗氧化活性的黄酮类化合物马里苷、金鸡菊噢、黄杉素、紫铆因和奥卡宁,研究其抗氧化相互作用。方法：以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-dinhenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力为指标,采用Chou-Talalay中效原理设计实验,分析抗氧化相互作用。结果：金鸡菊噢与紫铆因、黄杉素与紫铆因之间具有抗氧化中等协同作用,它们对清除DPPH自由基的加权平均联合作用指数（weighted averagecombination index,CIwt）值分别为0.824和0.749。另外,金鸡菊噢与紫铆因复配时,当半抑制浓度（IC50）大于1且CIwt值小于0.90时,出现协同效应。3 种化合物联合使用时,清除DPPH自由基的CIwt值均大于1,不存在协同抗氧化作用。结论：昆仑雪菊中黄酮类化合物之间的抗氧化相互作用关系与化合物的结构和浓度有关。     

葡萄酒中主要的黄酮类化合物及其分析方法

随着黄酮类化合物生物化学及药理作用研究的深入,人们对于黄酮类化合物的重视程度越来越高。葡萄酒是人们日常饮食中摄取黄酮类物质的一个重要来源。本文综述了葡萄酒中主要的黄酮类化合物的结构、含量以及葡萄酒或葡萄汁中黄酮类化合物的分析、测定方法。     

响应面分析昆仑雪菊水溶性黄酮类化合物的提取工艺

以新疆昆仑山产雪菊为原料,采用水作为萃取剂提取黄酮类化合物,研究提取温度料液比、提取时间和粒度大小4因素对生物黄酮含量的影响,进行响应面试验设计分析。以黄酮类化合物含量为指标,通过响应面法对提取工艺条件进行优化,最终确定水溶液萃取法提取黄酮的最优条件为提取温度90℃、料液比1:90(g/mL)、提取时间60min、粒度40目,在此条件下昆仑雪菊的水溶性黄酮含量为24.85%。     

黑米中黄酮类化合物的稳定性分析

以黑龙江五常黑米为原料,研究利用超声波辅助水浴浸提黑米中黄酮类化合物的稳定性。对黑米黄酮浸提液在不同温度、pH值、光照、氧化剂、还原剂、金属离子等条件下的稳定性进行测定。结果表明:温度在20℃~60℃时黄酮类化合物含量基本不变;长时间的光照对黄酮的稳定性影响较大;在弱酸性条件下比较稳定;对氧化剂H_2O_2具有较好的抗氧化性,但对还原剂Na_2SO_3显示出很大的不稳定性;K~+和Na~+两种金属离子对黑米黄酮稳定性无明显影响,Al~(3+)、Ca~(2+)、Mg~(2+)、Fe~(3+)对其影响较大。     

芹菜中黄酮类化合物及其生物活性研究进展

芹菜是一种常见的蔬菜,在我国分布广泛。通常含有多种黄酮类物质,包括芹菜素及其糖苷、槲皮素、山奈酚、木犀草素等。本文综述了芹菜中的总黄酮含量与品种,取样部位,生长期等因素的关系。在生物活性方面,芹菜黄酮具有抗氧化、抗癌、抵抗心血管疾病功效,在生殖系统方面有抑制雌激素和孕激素分泌等作用。      

昆仑雪菊茶总黄酮提取及抗氧化活性研究

以昆仑雪菊为原料,在单因素试验基础上,结合BoxBehnken响应面法,研究昆仑雪菊茶总黄酮的浸提工艺优化及抗氧化活性。结果表明:昆仑雪菊茶总黄酮的最佳浸提工艺条件为浸提时间13 min、浸提温度98℃、料液比178(g/mL),总黄酮得率为(20.39±0.07)%。最优条件下浸提物的DPPH·清除能力、铁还原力的IC_(50)分别为(82.40±1.98),(137.98±1.56)μg/mL,氧自由基吸收能力(ORAC值)为1 427.89μmol TE/g·DW,证明昆仑雪菊茶总黄酮具有很好的抗氧化活性。     

天山雪菊不同溶剂提取物的抗氧化活性研究

以天山雪菊为原料,经过超临界二氧化碳萃取后,萃余物又分别采用丙酮、体积分数分别为50%、95%乙醇进行提取,获得不同溶剂提取的4种天山雪菊提取物,比较不同溶剂提取物的抗氧化活性。通过对二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基和羟基自由基清除能力的评价,比较各种提取物的抗氧化活性,并对各种提取物中的总多酚和总黄酮的含量进行了分析。结果表明,4种提取物对DPPH自由基均具有较强清除活性,但活性弱于对照品二丁基羟基甲苯(BHT)、水溶性维生素E(Trolox)、α-生育酚和Vc;对羟基自由基的清除能力低于对照品芦丁和BHT。清除DPPH自由基的能力以体积分数为50%乙醇提取物最强,超临界浸膏最弱;清除羟基自由基的活性以体积分数为50%乙醇提取物最强,丙酮提取物最弱。     

雪菊醇提物对糖尿病气阴两虚证候细胞代谢物的影响

目的研究雪菊醇提物对体外诱导气阴两虚证候细胞代谢物的影响。方法噻唑蓝实验检测细胞毒性;采用核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)代谢组学方法检测证候细胞裂解液和细胞培养上清液中内源性代谢物变化;用多元统计分析差异性代谢物与通路的变化。结果建立糖尿病气阴两虚证候细胞模型,雪菊醇提物干预后改善了细胞生长活力。代谢组学结果显示:本实验的所有样本点都分布在95%的置信区间内(即散点图的4个区域中),聚类分布显著,且可信度较高。代谢物分析发现与正常组相比,证候细胞模型组的异亮氨酸、亮氨酸、α-葡萄糖和琥珀酸的含量显著上升(P0.05或P0.01),果糖含量显著下调(P0.05);与证候细胞模型组相比,雪菊醇提物组的脂肪酸、脯氨酸、甘油磷酯酰胆碱、抗坏血酸、α-葡萄糖含量显著下调(P0.05或P0.01)。差异性代谢物主要涉及氨基酸代谢途径、丙酮酸代谢途径及乙醛酸盐和二羧酸盐代谢途径。结论采用代谢组学技术进行全面、整体性的分析雪菊醇提物对糖尿病气阴两虚证细胞内代谢物的影响,为雪菊降低不同证候糖尿病的药用性功效提供基础理论依据。     

雪菊精油对希氏肠球菌产酪胺及相关基因表达的影响

探讨不同质量浓度雪菊精油对希氏肠球菌(Enterococcus hirae)N47产酪胺的影响机制.利用反转录实时定量聚合酶链式反应分析E.hirae在雪菊精油作用下酪氨酸脱羧途径相关基因的表达情况;利用高效液相色谱法检测不同质量浓度雪菊精油对E.hirae产酪胺的影响.并将E.hirae接入到含不同质量浓度雪菊精油的...     

正交优化超声辅助双水相法粗提雪菊色素

研究超声辅助正丙醇(NPA)/(NH4)2SO4双水相技术对雪菊色素的粗提工艺。以(NH4)2SO4质量分数、NPA质量分数、雪菊粉末用量、超声温度、时间及p H为考察因子,以总黄酮为指标,选择差示分光光度法测定粗提物中色素含量,并以单因素试验为基础设计正交试验优化提取工艺,发现雪菊色素主要集中于上相。在最佳水平,建立20.0 g ATPS,(NH4)2SO4质量分数29%、NPA质量分数23%,雪菊粉末用量0.08 g,调pH3,温度60℃下超声提取60 min;雪菊色素得率240.1469 mg/g,RSD为4.414%。与传统提取法相比,超声辅助NPA/(NH4)2SO4双水相粗提雪菊色素时间短、温度低、效率较高,可以实现雪菊色素粗提物的提取分离,且差示分光光度法用于雪菊色素的检测可信度较高,为雪菊色素粗提工艺提供一种新途径。     

雪菊化学成分分析、提取、鉴定及其生物活性研究进展

对目前国内外在雪菊（Coreopsis tinctoria）的有效化学成分分析、提取、鉴定及其生物活性等方面的研究进展进行综述,并提出一些建议,旨在为雪菊的深入研究和开发利用提供参考。     

昆仑雪菊水溶性黄酮提取物对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆障碍的改善作用

为探讨昆仑雪菊水溶性黄酮提取物（water soluble flavonoids from Coreopsis tinctoria flowers,CTWF）对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆障碍的影响,以SPF级昆明种小鼠为实验对象,随机分为正常组、衰老模型组、VE组（50 mg/（kg·d））和CTWF低、高剂量组（150、600 mg/（kg·d））。除正常组皮下注射生理盐水外,其余各组均注射D-半乳糖（300 mg/（kg·d））,连续42 d造模,注射1 h后,药物组分别灌胃VE和不同剂量CTWF,正常组和模型组灌胃等量生理盐水。采用Morris水迷宫测试各组小鼠学习记忆能力,并测定小鼠脑组织乙酰胆碱（acetylcholine,Ach）含量,乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase,AchE）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量。结果表明：CTWF能够显著提升衰老模型小鼠的学习记忆能力（P＜0.05）,并显著提高脑组织SOD、GSH-Px活力和Ach含量（P＜0.05）,降低AchE活力和MDA含量（P＜0.05）。因此,CTWF具有明显改善衰老模型小鼠学习记忆障碍的作用,其机制可能与提高脑组织胆碱能系统功能和减少自由基损伤有关。     

昆仑胎菊水溶性黄酮提取工艺优化及其对衰老小鼠肝组织SIRT1、p53表达的影响

采用水溶剂法提取昆仑胎菊水溶性黄酮（water-soluble flavonoids from Coreopsis tinctoria buds,CBF）。在单因素试验的基础上,以提取液中总黄酮提取量为指标,响应面法优化得到CBF提取最优工艺：水提时间15 min、水提温度96 ℃、液料比71∶1（mL/g）,在此条件下水溶性总黄酮提取量可达到145.45 mg/g。探讨CBF对D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用及其对衰老小鼠肝组织中沉默信息调节因子1（silent information regulator 1,SIRT1）、p53蛋白表达的影响。以长期皮下注射D-半乳糖（300 mg/（kg?d））建立衰老小鼠模型,连续造模45 d,建模的同时分别灌胃VE（50 mg/（kg?d））、CBF（180、700 mg/（kg?d））,观察各组小鼠体质量变化及行为学状态,HE染色法观测肝组织病理形态学变化,并采用免疫印迹法评价衰老小鼠肝组织中SIRT1、p53蛋白的表达。结果表明,CBF对小鼠生长发育无不良影响且可改善衰老小鼠的行为状况;显著减轻D-半乳糖引起的肝组织病理学损伤;显著提升衰老小鼠肝组织中SIRT1蛋白表达（P＜0.05）,有效抑制D-半乳糖引起的p53蛋白过量表达（P＜0.05）。结论：响应面法建立的回归数据模型优化得到的CBF水提取工艺条件实际有效,同时发现CBF具有良好的抗衰老作用,其作用机理可能与激活SIRT1/p53信号通路有关。     

Rapid Identification and Comparison of Compounds with Antioxidant Activity in Coreopsis tinctoria Herbal Tea by High‐Performance Thin‐Layer Chromatography Coupled with DPPH Bioautography and Densitometry

A simple and efficient method based on high‐performance thin‐layer chromatography coupled with 2,2‐diphenyl‐1‐picrylhydrazyl (DPPH) bioautography (HPTLC‐DPPH) was established for the screening and comparison of antioxidants in different parts of Coreopsis tinctoria herbal tea from different origins and other related herbal tea materials, which used Chrysanthemum morifolium cv. “Gongju” and “Hangju” in this study. Scanning densitometry after DPPH derivatization was applied for the determination of antioxidant capacities of isolated compounds in each sample. It is considered that ethanol extracts of C. tinctoria had stronger antioxidant activity and more characteristic bands than those of 2 compared samples, C. morifolium cv. “Gongju” and “Hangju.” Chemometric analysis results showed that the combination of hierarchical clustering analysis and principal component analysis based on determined antioxidant capacities could be used for the discrimination of different parts of C. tinctoria and C. morifolium. Results showed that 7 compounds made up the major contributions of antioxidant activity in C. tinctoria, including okanin, isookanin, marein, flavanomarein, 5,7,3′,5′‐tetrahydroxyflavanone‐7‐O‐glucoside, 3,5‐dicaffeoylquinic acid, and chlorogenic acid. Therefore, 7 compounds were identified as major antioxidant biomarkers for quality control of C. tinctoria. Results demonstrated that the established method could be applied for the identification of C. tinctoria, and were beneficial for the bioactivity‐based quality control of C. tinctoria.