胶体金免疫层析法快速检测食品中庆大霉素残留

应用胶体金免疫层析技术,建立一种快速检测食品中庆大霉素残留的方法。采用免疫竞争法,柠檬酸三钠还原制备胶体金颗粒,标记抗庆大霉素单克隆抗体并喷于玻璃纤维上,庆大霉素偶联抗原和羊抗兔二抗分别包被在硝酸纤维素薄膜表面作为检测线(T线)和控制线(C线),制备检测庆大霉素的胶体金免疫层析试纸条,并对试纸条的灵敏度、特异性、准确性和稳定性进行测定。测试结果表明:庆大霉素快速检测试纸条的灵敏度为0.7μg/mL,检测时间为10min,稳定性和特异性良好,与其他同类物质无交叉反应,其检测结果与酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测结果呈现了很好的一致性。该方法快速简便、灵敏度高、特异性强、准确性和稳定性好,非常适合现场快速检测庆大霉素。      

胶体金免疫层析法快速检测牛奶中环丙沙星残留

针对牛奶中恩诺沙星的代谢物环丙沙星残留的问题,该研究开发一种胶体金试纸条快速检测牛奶中的环丙沙星残留。研究制备环丙沙星包被抗原,对环丙沙星抗体进行表征,优化胶体金标记条件,选用最佳标记pH和最佳蛋白添加量,以硝酸纤维素膜为固相载体,环丙沙星包被抗原为检测带(T带),羊抗兔二抗为质控带(T带)。依据免疫竞争法原理,建立胶体金免疫层析试纸条快速检测牛奶中环丙沙星的方法,方法检出限为6.25 ng/mL,对牛奶样品的检出限为12.50 ng/mL。样品前处理方法简单,在10 min内即可目测判断结果。     

胶体金试纸条快速检测动物源性食品中头孢氨苄残留

头孢菌素类抗生素属于第二种类型的β-内酰胺类抗生素,其在动物源性食品中的残留问题引起普遍关注。为保障食品安全,实现对食品中头孢菌素类抗生素残留的快速检测,该研究利用金纳米颗粒标记头孢氨苄(cefalexin,CEX)兔多克隆抗体作为可视化信号探针,基于硝酸纤维素膜研制一种能够检测头孢菌素类抗生素的免疫层析检测试纸。试纸条以CEX包被原为检测线,以羊抗兔二抗为质控线,对试验条件进行优化后,所构建的试纸条在缓冲液体系中对CEX、头孢拉定(cefradine,RAD)和头孢羟氨苄(cefadroxil,CFR)的检测限分别可达到20、25、25μg/L。为验证方法的实用性,将一定浓度的CEX添加至虾肉、牛奶、牛肉、猪肉、生猪肝和熟猪肝6种常见的动物源性食品中进行添加回收测定。结果显示:经过简单的样品处理,所构建的试纸条在10 min内即可实现对目标物的快速可视化检测。该方法操作简便、快速,适用于大批量动物性食品中多种头孢菌素类残留的高通量筛查。     

胶体金免疫层析法快速检测动物组织中残留的喹乙醇

研制胶体金免疫层析法试纸条,用于动物源食品中喹乙醇药物残留的快速检测。将已制备纯化过的喹乙醇多克隆抗体与胶体金结合产生的金标抗体喷涂在玻璃纤维垫上,并将包被抗原OLA-OVA和羊抗鼠二抗分别结合在硝酸纤维素膜上,组装成免疫层析快速检测试纸条,并检测试纸条的灵敏度、特异性、准确性和稳定性。将制备的试纸条用于检测猪肉和猪肝样品,结果表明本研究制备的试纸条可以在10min内完成检测,肉眼观察的最低检测限为0.05μg/m L,与其结构类似物卡巴氧、乙酰甲喹、3-甲基-喹噁啉-2-羟酸的反应交叉性小,该试纸条假阳性率小于5%,假阴性率为0,在干燥常温条件下保存6个月仍然有效。本实验研究的检测方法可应用于动物组织中喹乙醇的快速检测和现场筛查。     

胶体金免疫层析法快速定量检测猪肝中喹乙醇残留

本文研究了胶体金免疫层析试纸条快速定量检测猪肝中喹乙醇残留的方法。利用胶体金免疫层析技术,制备了喹乙醇胶体金试纸条,检测了其特异性,并建立了T/C比值法进行定量检测猪肝中喹乙醇的残留。制备的试纸条可以在15min内完成定性和定量检测,与卡巴氧、乙酰甲喹和3-甲基-喹噁啉-2-羟酸几乎无交叉反应。当肝中喹乙醇质量浓度在1~200ng/mL范围内,试纸条有较好的线性关系,最低检测限为6.83ng/mL。阴性加标实验结果表明,喹乙醇浓度在25、50、100ng/mL时,试纸条的回收率在90.9%~105.0%之间。     

胶体金免疫层析法快速定量检测猪肝中喹乙醇残留

本文研究了胶体金免疫层析试纸条快速定量检测猪肝中喹乙醇残留的方法。利用胶体金免疫层析技术,制备了喹乙醇胶体金试纸条,检测了其特异性,并建立了T/C比值法进行定量检测猪肝中喹乙醇的残留。制备的试纸条可以在15min内完成定性和定量检测,与卡巴氧、乙酰甲喹和3-甲基-喹噁啉-2-羟酸几乎无交叉反应。当肝中喹乙醇质量浓度在1²00ng/mL范围内,试纸条有较好的线性关系,最低检测限为6.83ng/mL。阴性加标实验结果表明,喹乙醇浓度在25、50、100ng/mL时,试纸条的回收率在90.9%¹05.0%之间。      

胶体金免疫层析法快速检测食品中金霉素残留

研究食品中金霉素残留的胶体金免疫层析法的快速检测方法。采用戊二醛交联法制备金霉素-BSA 免疫抗原,按照常规的免疫程序免疫新西兰大白兔制备抗金霉素多克隆抗体。纯化后的抗体用ELISA 法检测其特异性和效价。采用柠檬酸三钠还原法制备颗粒大小为15nm 的胶体金,并制备抗体- 胶体金复合物,以组装检测试纸。通过可见的颜色深浅,检测样品中金霉素的残留量。结果表明：试纸条法的金霉素检测限为0.7μg/mL,在四环素质量浓度大于1.0μg/mL 时,与金霉素存在交叉反应性,其结果与高效液相色谱法测定的结果一致。本方法检测时间仅需5min,适用于食品中金霉素残留的快速检测。     

胶体金免疫层析法快速检测食品中苏丹红I残留

通过设计合成苏丹红I衍生物,将其与明胶用混合酸酐法合成苏丹红I-明胶免疫抗原,免疫新西兰白兔制备抗苏丹红I多克隆抗体.采用柠檬酸三钠还原法制备颗粒大小为24.5 nm的胶体金,并制备苏丹红I-BSA抗原-胶体金复合物,组装检测试纸.实验结果表明,试纸条法的苏丹红I检测线为15 μg/kg,抗苏丹红I抗体与苏丹红Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ均无交叉反应性,与高效液相测定差异不显著.检测时间5min,适用于食品中苏丹红I残留的快速检测.     

胶体金免疫层析法快速检测猪肉及牛奶中磺胺二甲嘧啶残留

目的:以胶体金为标记物,根据竞争抑制免疫层析原理,建立一种快速检测猪肉及牛奶中磺胺二甲嘧啶残留的方法.方法:采用柠檬酸三钠法制备40nm胶体金.电镜鉴定后标记磺胺二甲嘧啶多克隆抗体:磺胺二甲嘧啶半抗原-OVA和羊抗兔二抗分别包被在硝酸纤维素膜上,金标抗体喷涂在玻璃纤维垫上,制成免疫层析快速检测试纸条.结果:所建立的检测体系方法检出限为1 μg/L,将该法与高效液相色谱法(HPLC)对比检测猪肉和牛奶样品,在试纸务的检测范围内,与HPLC法检测结果一致性好,从而验证了该方法的有效性.结论:通过消除基质影响,成功检测到猪肉及牛奶中的磺胺二甲嘧啶残留.该方法灵敏度高,样品前处理简便、快速,整个检测过程可在10min内完成.该方法适用于动物源性食品中磺胺二甲嘧啶残留的大批量现场检测.     

胶体金免疫层析法定量检测猪肉中克伦特罗

建立了基于T/C比值的胶体金免疫层析法快速定量检测猪肉中克伦特罗残留的新方法。胶体金免疫层析试纸条的定量检测线性范围为0.1～1.5 ng/g,检测猪肉中克伦特罗残留的最低检测灵敏度为0.19 ng/g。比较了5种猪肉组织样本中克伦特罗的简便提取方法,其中采用0.02 mol/L,含2.8%NaCl的HCl溶液抽提猪肉样品2次的提取方案,克伦特罗的平均回收率达到76.7%,变异系数为7.4%。实际样本加标回收实验显示,加标量为0.5、1.0、2.0及3.0 ng/g时,胶体金试纸条检测回收率分别为(60.4±12.8)%,(70.24±4.2)%,(75.9±4.9)%,(71.1±5.0)%。与传统ELISA方法比对,结果显示2种方法具有较好的相关性(R2=0.9136)。以上实验结果证实,基于T/C比值法的胶体金免疫层析试纸条可用于猪肉组织样品中克伦特罗的快速及定量检测。     

胶体金免疫层析法检测禽蛋中氯羟吡啶残留

目的 建立胶体金免疫层析法检测禽蛋中氯羟吡啶残留的分析方法。方法 在用间接竞争酶联免疫吸附法分析氯羟吡啶单克隆抗体灵敏度和交叉反应性的基础上,以胶体金标记单克隆抗体作为示踪标志物,以包被氯羟吡啶半抗原-卵清蛋白偶联物和羊抗鼠IgG的硝酸纤维素膜作为载体,制备了氯羟吡啶胶体金免疫层析试纸条。结果 氯羟吡啶单克隆抗体的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC₅₀)为1.6μg/L,与地克珠利、二硝托胺、尼卡巴嗪、磺胺喹噁啉、磺胺二甲嘧啶、癸氧喹酯、盐酸氨丙啉和盐酸氯苯胍8种药物均无交叉反应。制备的胶体金免疫层析试纸条肉眼判定禽蛋中氯羟吡啶的检出限为15μg/kg,灵敏度为98%、特异性为93%、假阴性率为2%、假阳性率为7%。结论 制备的试纸条具有操作简单、检测快速、成本低等优点,可用于大批量禽蛋样本中氯羟吡啶残留的初步筛选。     

一种快速检测氟喹诺酮类药物的胶体金试纸卡的研制

利用胶体金免疫层析技术研制了一种快速检测牛奶中的氟喹诺酮类药物试纸卡,并配合胶体金试纸卡读数仪使用.结果表明,该试纸卡对恩诺沙星、沙拉沙星、双氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、培氟沙星、氟甲喹、达氟沙星的检测限为20 μg/L,对依诺沙星、恶喹酸的检测限为40 μg/L,检测时间为10 min,假阳性率和假阴性率均为0.该试纸卡能够准确、可靠、简便地检测牛奶中残留的氟喹诺酮类药物,适合大量样品的现场检测.     

基于单克隆抗体的胶体金免疫层析法快速检测丁香酚

目的 采用免疫层析技术对丁香酚残留的胶体金免疫层析快速检测试纸条的制备开展研究。方法 用柠檬酸三钠还原法制备胶体金纳米颗粒, 标记丁香酚单克隆抗体得到胶体金-丁香酚单克隆抗体复合物。以硝化纤维素膜为固相载体, 包被丁香酚-BSA偶联物为检测带(T带), 羊抗鼠IgG为质控带(C带), 建立了丁香酚的胶体金免疫层析快速检测试纸条。结果 胶体金免疫层析试纸条具有较高的灵敏度和特异性, 检出限为2.0 mg/L。结论 本研究所开发的胶体金免疫层析试纸条可作为快速测定丁香酚的可靠、低成本的方法。     

一种多氯联苯胶体金免疫快速检测试纸条的研制

该研究制备了多氯联苯（PCB118）半抗原,基于该半抗原研制出一种能够检测饲料中多氯联苯的胶体金免疫层析试纸条。结果表明,该试剂条检测限为10 μg/kg,检测时间约为15 min,假阳性率和假阴性率均为0。与多氯联苯PCB52、PCB101、PCB28、PCB138、PCB153、PCB180等药物无交叉反应,特异性较好,12个月内稳定性指标均符合要求,技术指标均符合《农残办技术材料要求及审查程序》对快速检测产品的要求,该试纸条适用于基层实验室的大批量样本检测,具有实际意义。     

胶体金免疫层析法快速检测烟草中吡虫啉残留

目的建立胶体金免疫层析法快速检测烟草中残留的吡虫啉。方法用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,并用它标记吡虫啉单克隆抗体,建立并优化胶体金免疫层析法。结果本方法对烟草中吡虫啉的检测限为5μg/mL,重复性较高,有假阳性情况出现,但假阳性率较低,与烟草中其他常用药物没有交叉反应,特异性良好,且与气相色谱检测法所得的结果差异较小。结论该方法快速、高效、可靠,可满足现场快速检测烟草中吡虫啉残留的需要,实现生物技术在烟草流通、消费领域的方便、快速检测。     

胶体金免疫层析法快速测定玉米和小麦中玉米赤霉烯酮

采用高效液相色谱法对玉米赤霉烯酮阳性样品进行定值,将阳性样品制备为不同毒素含量的验证样品,对胶体金免疫层析法的准确性、重复性、稳定性、最低检出限、误差范围进行了验证试验,并且完成了对实际样品的检测,同时采用酶联免疫法（ELISA）进行对比,试验结果为：最低检出限为60μg/kg,其检测结果与酶联免疫法基本一致,方法具有...     

胶体金读数仪法快速检测动物肌肉中克伦特罗含量

目的建立用于运动队肉食品克伦特罗(clenbuterol,CL)快速检测的方法。方法采用克伦特罗胶体金检测卡确定阳性结果,胶体金读数仪法确定克伦特罗含量。结果已知克伦特罗含量为0.94 ng/g的羊肉,测试结果平均值为1.21 ng/g。结论从运动员饮食安全角度出发,胶体金读数仪法快速检测动物肌肉中克伦特罗暂时无法完全达到含量检测的要求,经过检测卡和胶体金读数仪的进一步优化改进,可以给运动队尤其是外训队伍提供了一种快速、便捷的检测方法。     

一种异丙威胶体金免疫快速检测试纸条的研制

农产品的农药残留检测方法较多,异丙威作为速效性农药,应用较为广泛,但是检测异丙威的快速检测方法极少。该研究通过制备异丙威半抗原,研制出一种能够检测蔬菜、水果中异丙威的胶体金免疫层析试纸条。结果表明,该试纸条对蔬菜、水果等农产品中异丙威的最低检出限为10 μg/kg,检测时间仅为15 min,假阳性率和假阴性率均为0。与甲草胺、亚胺菌、乙霉威和异丁草胺等药物无交叉反应,技术指标均符合《农残办技术材料要求及审查程序》要求。该试纸条检测快速、便捷,能够应用到基层实验室的大批量样本检测,具有实际意义。     

胶体金试纸条在豆芽喹诺酮快速检测的应用

目的 研究胶体金免疫层析法检测豆芽中诺氟沙星、氧氟沙星、双氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、氟罗沙星、达氟沙星、培氟沙星、洛美沙星和沙拉沙星10种喹诺酮类药物的适用性。方法 取豆芽样品2 g,经5 mL提取液提取、过滤、2倍稀释后,加入至金标微孔孵育,后与试纸条反应。通过比较检测线（T线）与控制线（C线）的颜色深浅判读结果;考察与6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、甲硝唑、尿素、氯吡脲交叉反应;通过真实阳性样品和加标样品考察方法的可靠性。结果 方法检出限可达到5 μg/kg;常规检出水平条件下,6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、甲硝唑、尿素以及氯吡脲等与喹诺酮类药物不发生交叉反应;真实阳性样品和多水平加标样品证实方法可靠。结论 该方法简单快速,对试剂、耗材、人员等要求不高,易于判读,结果准确可靠,适合现场快速检测。