基于无花果蛋白酶快速检测维生素C含量的方法研究

无花果蛋白酶具有过氧化物模拟酶活性,能催化H2 O2产生·OH,从而氧化底物ABTS发生显色反应,而具有强抗氧化性的维生素C可清除自由基,从而诱导绿色ABTS+·还原为无色的ABTS,基于此建立高选择、高灵敏、快速检测食品中维生素C含量的比色检测方法,优化方法并对维生素C的检测性能进行评估.研究结果表明,检测方法较优方案组合为:H2 O2浓度0.5 mol/L,无花果蛋白酶质量浓度0.5μg/mL,温度50℃,孵育时间30 s.在优化条件下,维生素C浓度在0.001～0.080 mmol/L范围内呈良好的线性关系,线性回归方程为y=7.381 x+0.1091,相关系数R2值为0.9923,检出限为0.43μmol/L,说明该检测方法灵敏度高;同时此比色检测方法加标回收率在95％ ～105％,且其选择性高和稳定性好,在食品分析、生物化学和医药应用等方面具有很好的应用前景.     

氯化血红素比色法检测乳制品中土霉素

建立了一种新的土霉素（OTC）的比色检测方法。 以具有辣根过氧化物酶活性的氯化血红素（hemin）溶液作为催化剂,以 3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）和双氧水（H2O2）为底物,检测其产物在波长450 nm处的吸光度值,通过吸光度变化值ΔA450 nm与土霉素 含量回归方程计算样品中土霉素含量,并对实验的各个相关因素进行了优化。 结果表明,最优实验条件下,在浓度0～30 nmol/L的范 围内,ΔA450 nm与OTC浓度呈良好的线性关系,最低检测限度为21.89 nmol/L,通过牛奶样品的加标回收实验得知,加标回收率范围为 90%～108%,相对标准偏差（RSD）为1.39%～4.02%。 本方法对其他抗生素的抗干扰能力较强,具有较好的准确性和重复性。     

基于纳米金的过氧化物模拟酶比色检测乐果

以金纳米粒子（gold nanoparticles,AuNPs）作为过氧化物模拟酶建立一种简单、快速、可视化的有机磷农药检测方法。以金晶种生长法制得平均直径为25?nm表面带正电性球形AuNPs,这种AuNPs具有明显的过氧化物模拟酶的活性;优化反应条件实验得出在pH?4.0、温度35?℃、四甲基联苯胺浓度1?mmol/L和H2O2浓度10?mmol/L时模拟酶具有最强的催化活性;通过比色分析法实现对有机磷农药检测,实验发现乐果在1～80?mmol/L浓度范围与显色抑制率呈良好的线性关系,相关系数R2为0.985,检出限为1.39?mmol/L,在茶叶样本中的加标回收率在91.36%～102.56%之间;AuNPs在室温条件下贮存1?个月能保持良好的催化活性;通过傅里叶变换红外光谱的变化推断乐果是通过酰胺键连接AuNPs;该方法对环境污染物检测具有潜在的应用价值。     

构建氯化血红素/G-四链体DNA酶比色生物传感器检测食品中苏丹红

以苏丹红III核酸适配体为识别元件,以氯化血红素/G-四链体DNA酶为信号探针,结合杂交链反应信号放大策略,构建一种简单、新颖、高灵敏的生物传感器,用于苏丹红比色检测。在优化条件下,对该方法的灵敏度、准确性、特异性进行评估,最后将其应用食品中苏丹红III快速检测,并与GB/T 19681—2005法对比验证。结果显示,在优化条件下,苏丹红III质量浓度在0.5～250 ng/mL范围与450 nm波长处的吸光度呈良好线性关系（相关系数为0.995）,方法检测限为0.09 ng/mL。特异性分析显示,本方法可用于苏丹红I～IV的检测。实际样品分析中表明,食品中苏丹红III加标回收率为84.3%～101.6%,相对标准偏差为4.13%～8.36%,本方法的加标回收率与GB 19681—2005法相比差异不显著（P＞0.05）。该方法操作简便、准确可靠、灵敏度高,适用于批量食品中苏丹红的快速检测。     

基于氯化血红素/G-四链体比色分析检测食品中赭曲霉毒素A

为了满足食品质量安全并快速检测食品中赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)的含量,探究基于氯化血红素/G-四链体比色分析检测OTA的方法。通过引入两条无标记DNA单链,其中链1由OTA适配体和富含鸟嘌呤的序列组成,链2与链1部分互补。无OTA时,两条DNA链杂交成双链,氯化血红素因聚集使其酶活性降低。而有OTA时,OTA与链1中适配体特异性结合,双链解离,链1中富含鸟嘌呤的序列与氯化血红素结合形成具有酶催化活性的G-四链体结构,可催化过氧化氢氧化2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)使溶液呈深绿色,最大吸收波长420 nm。OTA检测的线性范围为0.001~2.5 μmol/L(R²>0.99),检出限为70.3 pmol/L(3α/κ,n=10)。将此方法用于食品中OTA的检测,加标回收率为91.9%~109.0%,表明该探针能够准确、灵敏地检测食品中的OTA。     

提取氯化血红素新工艺的研究

研究一种从猪血中提取氯化血红素的新工艺,将超声波细胞破碎应用于鞣酸法提取氯化血红素。应用红外光谱法对氯化血红素产品进行定性的鉴定,紫外光谱法进行产品中氯化血红素纯度的测定。该法所得产品的纯度为93.03%,得率为79.58%。     

氯化血红素诱导烟草抵御碱胁迫的初步研究

为研究外源氯化血红素（hemin）处理对碱胁迫下烟株生长和生理特性的影响,以云烟87为材料,从抗氧化系统、渗透调节系统、离子含量以及相关基因表达来探讨hemin对烟草抗碱的作用机理。结果表明:外源施加1 μmol/L hemin和2 μmol/L hemin能促进碱胁迫下烟株的生长;降低丙二醛（MDA）含量和相对电导率,提高超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、抗坏血酸还原酶（APX）活力,同时增加叶绿素、脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白等含量,提高根系活力;还可以减少烟株体内Na+积累,增加K+、Ca2+、Mg2+吸收。相对定量PCR结果表明,hemin处理后NtPDR1、NtPDR3、NtNAC和NtGSH1基因表达上调。综上所述,hemin缓解烟株碱胁迫伤害是激发抗氧化系统和渗透调节系统、加强离子转运及调节相关基因表达综合作用的结果。      

牦牛血粉制备氯化血红素工艺优化研究

牦牛血粉易于贮藏和运输,是工业化制取氯化血红素的天然优质原料。本文采用单因素实验和正交实验对牦牛血粉制备氯化血红素的工艺参数进行了优化。优化后的工艺参数为:超声处理时间30min,酸性丙酮150mL,抽提时间30min,乙酸钠11mL。在此工艺条件下,氯化血红素的含量可以达到2.30mg/g。      

基于氯化血红素模拟酶活性的荧光分析法检测牛奶中胆固醇含量

本文建立了一种基于氯化血红素模拟酶催化过氧化氢氧化酪胺产生荧光的胆固醇检测方法,通过测量波长426 nm处的荧光强度(F)计算胆固醇的浓度,检测浓度范围0.1～2μmol/L(F=34.85C+165.3,R2=0.992),检测限0.08 μmol/L(3σ/k,n=9).将此方法用于牛奶中胆固醇的检测,加标回收率在...     

基于金核铂壳纳米酶比色检测白菜中有机磷农药新方法研究

目的 基于纳米模拟酶活性抑制策略开发具有特异性的有机磷农药分析方法。方法 基于金核铂壳纳米粒子(gold core-platinum shell nanoparticle, Au@Pt NPs)可以与甲拌磷、氧乐果和乐果3种有机磷农药发生作用从而使其类过氧化物酶活性被特异性抑制, 建立3种有机磷农药比色检测方法。结果 透射电镜(transmission electron microscope, TEM)、X射线能谱仪(energy dispersive spectrometer, EDS)结果表明, 3种有机磷农药可通过Pt-S键吸附到Au@Pt NPs表面, 不仅遮蔽了Au@Pt NPs表面的活性位点, 还促使了Au@Pt NPs的团聚, 最终导致Au@Pt NPs的催化活性降低。通过3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine, TMB)和过氧化氢(H2O2)的显色体系将农药的抑制作用信号放大, 甲拌磷、氧乐果和乐果的比色检测半抑制浓度(50% inhibiting concentration, IC50)值分别为0.38、0.41和5.21 μg/mL, 检出限为19.7、24.2和13.4 ng/mL, 且表现出一定的特异性。结论 该方法操作简单、具有一定的特异性, 可用于白菜中甲拌磷、氧乐果和乐果的检测。     

基于Fe3+催化荧光增强的抗坏血酸检测

目的建立了一种基于Fe~(3+)催化的荧光增强的传感平台用于抗坏血酸的灵敏检测。方法抗坏血酸可以和邻苯二胺反应生成一种具有π键共轭结构的氮杂环的荧光化合物,从而实现检测抗坏血酸;Fe~(2+)能够加速上述反应的进程。结果在0.2~1.7 mmol/L浓度范围内,体系荧光信号和抗坏血酸浓度成线性关系,相关系数r=0.997,检测限为0.35μmol/L。此外,常见的干扰物不影响抗坏血酸的选择性测定。结论该方法具有较高的灵敏度,低廉的成本和简便的操作步骤,并且易于实现定量分析。     

抗坏血酸及抗坏血酸棕榈酸酯的稳定性研究

研究了光照、温度、pH、氧化剂、抗氧化剂、金属离子、糖类对抗坏血酸（AA）及抗坏血酸棕榈酸酯（AP）稳定性的影响。结果表明：目光、高温、氧化剂、中性及碱性环境都会不同程度地对两者造成损失,其中抗坏血酸棕榈酸酯的稳定性要强于抗坏血酸。维生素E可以有效保护AP。铜离子、铁离子、锰离子会引起AA较大的损失,锰离子对AP稳定性有显著影响。糖类对两者稳定性基本没有影响。     

酸价的特异性检测方法——铜皂络合比色技术的研究进展

酸价（acid value, AV）指示油脂中游离脂肪酸(free fatty acid, FFA)含量,是油脂和含油食品最重要的质量指标和安全指标之一。针对现行AV测定标准的酸碱中和滴定技术的共性与非特异性的局限,旨在给复杂基质样品的特异性定量FFA或AV提供新思路,综述了最具代表性的FFA特异性检测技术——铜皂络合比色法的近70年的研究进展。阐述了有机相溶解液的毒性与显色强度之间的矛盾化解历程、铜盐-吡啶水相染色液的演化史、FFA的铜皂络合物结构解析过程,以及从pH调控的经典络合显色理论到以吡啶与铜离子摩尔比为核心的络合显色理论的新发展。吡啶与铜离子摩尔比为[1,3）的络合显色理论、具有增强显色强度和抑制乳化作用的乙酸盐-乙酸缓冲体系的中性染色液、低毒性溶剂替代传统高毒性苯的有机相溶解液,这三大创新使经典铜皂络合比色法突破了长期存在的试剂毒性与显色稳定性等瓶颈,成为复杂基质样品的特异性定量FFA或AV的理想方法。     

高压液相色谱法同时测定食品中抗坏血酸与异抗坏血酸的含量

目的 建立食品中同时测定抗坏血酸和异抗坏血酸含量的高压液相色谱检测方法。方法 用乙腈?0.1%磷酸水溶液(90∶10, v/v)作流动相和提取液, 以Venusil HILIC色谱柱(250 mm?4.6 mm, 5 ?m, 100 ?)分离抗坏血酸和异抗坏血酸。结果 抗坏血酸的平均回收率为96.61%, 异抗坏血酸的平均回收率为96.53%,异抗坏血酸和抗坏血酸最低检出浓度分别为0.35 ?g/mL和0.42 ?g/mL。结论 该方法准确、灵敏、精密度高, 适用于食品中抗坏血酸与异抗坏血酸的测定。     

紫外分光光度法和高效液相色谱法测定Maillard体系中抗坏血酸含量的比较

在抗坏血酸/半胱氨酸Maillard体系中,探讨了简单、快速、准确测定抗坏血酸含量的方法。用偏磷酸溶液作为提取剂,比较了紫外分光光度法和高效液相色谱法(HPLC)测定Maillard体系中抗坏血酸的含量。结果表明:紫外分光光度法和HPLC标准曲线线性关系良好,线性范围分别为0~14μg/mL和0~100μg/mL,两种方法相关系数R均达到0.999,平均回收率分别为111%和99.7%。使用两种方法测定三组平行样时,结果相近,误差较小。说明Maillard体系中紫外分光光度法测定抗坏血酸含量时干扰较小,且相比之下其更为简单快捷,适合Maillard体系中的抗坏血酸含量的测定。      

L-抗坏血酸传感器在果汁中Vc含量的测定

本文利用花椰菜组织通过交联制备L-抗坏血酸传感器,该传感器在pH6.0、0.1mol/L的KH_2PO_4-Na_2HPO_4真缓冲溶液中对Vc标准溶液的线性范围为5.0×10~(-5)×1.8×10~(-3)mol/L,响应时间1min。电极使用寿命在1个月以上。利用该传感器测定了部分水果和果汁中Vc的含量,所得结果与分光光度法(2,4-二硝基苯肼法)测得结果一致。     

A comparative study on the determination of lactic acid in silage juice by colorimetric,high-performance liquid chromatography and enzymatic methods

The determination of lactic acid in the silage juice of artichokes with different additives (formid acid, molasses and NaCl) by the colorimetric method and its comparision with the high-performance liquid chromatography and enzymatic methods was investigated. The lactic acid content of the artichoke with molasses (62.1 g kg⁻¹) was higher than that of those with formic acid, or NaCl and without any additive (39.3, 33.0 and 43.2 g kg⁻¹, respectively). However, this effect was not significant (P > 0.05). There were significant differences on the method of measuring lactic acid of the artichoke silages (P < 0.001). The use of the enzymatic method resulted in a higher (75.6 g kg⁻¹) lactic acid content than when the colorimetric or HPLC methods were employed (with results of 42.0 and 28.9 g kg⁻¹, respectively). However, the levels of lactic acid in silage juices found using the colorimetric and HPLC methods were not different, and recovery percentages, by using the colorimetric method, were satisfactory (103.78%), when the detection limit at maximum level (30 µg ml⁻¹) was not exceeded. © 1999 Society of Chemical Industry     

UPC~2快速测定葡萄酒中抗坏血酸和异抗坏血酸含量研究

建立了超高效合相色谱法(Ultra Performance Convergence Chromatography,UPC2)分离和测定葡萄酒中抗坏血酸和异抗坏血酸的方法。超高效合相色谱(UPC2)技术集合超临界流体色谱(Supercritical Fluid Chromatography,SFC)和超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLCTM)的技术优点,流动相CO2为主体,0.1%磷酸甲醇为助溶剂。选用Waters BEH色谱柱,流速1.5 m L/min,检测波长为245 nm,方法检出限为2.0 mg/kg,定量限为6.0 mg/kg,线性范围为2.5~80.0 mg/L;加标回收率范围为93.2%~105.9%;相对标准偏差RSD为4.5%~9.8%,该方法操作便捷、检测速度快、准确性高、重复性好、节约成本,能够满足葡萄酒中抗坏血酸和异抗坏血酸的检测。      

采用褪色光度法测定维生素C

在硫酸介质中,利用维生素C（L-VC）对高锰酸钾的褪色效应建立了褪色光度法测定维生素C的方法。在最大吸收波长为526nm,表观摩尔吸收系数为6.71×103L·mol-1·cm-1时,维生素C浓度在0～20μg/ml范围内与溶液的褪色程度（△A）服从比尔定律,最小检出限为0.91mg/L,相对标准偏差为0.54%～0.96%,回收率为92.5%～101.8%。     

Absorption of folic acid and ascorbic acid from nutrient comparable beverages

One hundred percent fruit juices can help consumers increase the nutrient content of the diet since these beverages can be naturally rich in micronutrients. Micronutrient-fortified low-calorie beverages are an important alternative to those wishing to minimize their calorie intakes. However, little is known about the bioavailability of nutrients from fortified beverages relative to 100% fruit juices. The present study examined the bioavailability of ascorbic acid (AA) and folic acid (FA) in 100% orange juice (OJ) and a low-calorie beverage fortified with these nutrients. In a within-subjects, cross-over design, 12 adult men consumed a 591 mL serving of OJ, a low-calorie beverage fortified with AA and FA, and 1% low fat milk. Participants were aged 20 to 35 y, with body mass indexes between 20 and 30 kg/m(2). Blood plasma concentrations of AA and serum concentrations of FA were assayed by serial blood draws, made at 30 min intervals for 4.5 h. Blood plasma concentration of AA was significantly greater after ingestion of the fortified beverage compared to after OJ ingestion. However, the bioavailability of AA did not significantly differ from that of OJ. Analyses of FA indicated no significant difference between fortified beverage and OJ. Consumption of both vitamin containing beverages led to higher concentrations of AA and FA than the milk control. This study showed that similar levels of AA and FA bioavailability can be attained through ingestion of 100% OJ and a fortified beverage.