创伤弧菌食物中毒(综述)

创伤弧菌食物中毒（综述）韩怀忠张丽菊郑艳菊山东省枣庄市卫生防疫站（２７７１０１）１９７６年Ｈｏｌｉｓ等首次完成了创伤弧菌的分离与鉴定，［１］１９７９年正式被定名为创伤弧菌（Ｖｉｂｒｉｏｖｕｌｎｉｆｉｃｕｓ）。［２］进食被创伤弧菌污染食品而引起的食物...     

临沂市淡水鱼养殖、销售及餐饮环节致病性弧菌污染状况及病原学特征

目的：了解临沂市淡水鱼养殖、销售及餐饮环节中常见致病性弧菌的污染现状,进一步描述病原学特征,为加强本市食源性疾病监测和防控提供依据。方法：在本市3个县区设置采样点,采集养殖场、销售场所、餐馆的鱼样及存养鱼的相关样本,参照《国家食品安全风险监测淡水动物性水产品养殖环节中常见弧菌专项监测工作手册》,进行致病性弧菌的分离与鉴定。结果：在281份淡水鱼及相关样品中,4种常见致病性弧菌均有检出,其中霍乱弧菌的检出率最高,为18.15%（51/281）,之后依次为副溶血性弧菌12.81%（36/281）,溶藻弧菌4.27%（12/281）,创伤弧菌0.71%（2/281）。在养殖(144份样品)、销售（74份样品）和餐饮（63份样品）三个环节霍乱弧菌检出率为16.67%（24/144）、21.62（16/74）、17.46%（11/63）,副溶血性弧菌的检出率为2.78%（4/144）、24.32%（18/74）、22.22%（14/63）,溶藻弧菌的检出率为0.69%（1/144）、8.11%（6/74）、7.94%（5/63）,创伤弧菌的检出率为0.00（0/144）、2.70%（2/74）、0.00%（0/63）。检出的霍乱弧菌均为非O1/O139群,不携带ctxAB毒力基因;在淡水鱼及相关样本中检出的36株副溶血性弧菌中有1株携带trh基因,其余均不携带tdh/trh毒力基因。结论：临沂市淡水鱼养殖、销售和餐饮环节均存在不同程度的致病性弧菌污染,非O1/O139群霍乱弧菌和副溶血性弧菌为主要污染菌,霍乱弧菌污染在三个环节中均存在,副溶血性弧菌污染主要存在于销售和餐饮环节,整个淡水鱼产业链需加强综合监管。     

北京口岸进口鲜活海产品中副溶血性弧菌致病性分析

目的调查从北京口岸进口的鲜活海产品中是否存在致病性副溶血性弧菌。方法对2005年从北京口岸进口的鲜活海产品中分离的267株副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus）的尿素酶活性、神奈川现象和毒性基因（tdh和trh）进行了检测。结果267株副溶血性弧菌中27株尿素酶呈阳性，其中14株菌tdh基因和砌基因呈阳性。tdh基因和trh基因呈阳性的14株菌中有10株菌神奈川现象为阳性，并且全部分离自从加拿大进口的象拔蚌。结论北京口岸进口的鲜活海产品中存在致病性副溶血性弧菌，主要集中在象拔蚌中。应对从加拿大进口的象拔蚌加强监管，防止致病性副溶血性弧菌引起食物中毒发生。     

冷冻海产品中病原性弧菌的调查研究

冷冻海产品中病原性弧菌的调查研究徐合连李树桐于萍王清秀山东省日照市卫生防疫站（２７６８００）近年来，对病原性弧菌的研究已引起了人们的高度重视，其致病性也从不同的角度被证实，特别是从来自病人的，淡水鱼类及海产品标本中分离出病原性弧菌的报道屡见不鲜，但对...     

2019年广州市售食品中食源性致病菌监测结果分析

目的 了解广州市售食品中食源性致病菌污染和分布情况,以及污染危险因素。方法 2019年共采集9类共1066份食品样品,对霍乱弧菌、副溶血性弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌、河弧菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、克罗诺杆菌、蜡样芽胞杆菌、单增李斯特氏菌、小肠结肠炎耶尔森菌等进行监测分析。结果127份样品食源性致病菌检出阳性,检出率为11.91％。食源性致病菌中克罗诺杆菌的检出率最高(24.69％),溶藻弧菌检出率为14.81%、创伤弧菌检出率为6.76%、副溶血性弧菌检出率为5.52%。不同食品类别中甲鱼和蛙的检出率最高,达到了43.21%,其次为冲调谷物制品（25.93%）、进口生畜肉（15.97%）、生食动物性水产品（15.83%）和水产肉糜（12.50%）。不同采样场所中采自网店的食品食源性致病菌检出率最高(29.17％),其次依次是餐饮单位（21.59%）、农贸肉菜市场（15.38%）、超市（14.36%）和学校(8.72％),最低的是零售店（3.88%）。预包装食品食源性致病菌检出率（21.33%）高于散装食品的检出率（10.37%）。结论 2019年广州市部分市售食品存在较高的食源性致病菌检出率,应对重点食品加强监管,降低食品中致病菌污染,预防食源性疾病的发生。     

黄精与土霉素协同抑制副溶血弧菌研究

为了抑制对虾养殖急性肝胰脏坏死病（AHPND）的主要病原菌副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus），本论文用药食同源的天然草本黄精和8种水产用抗生素联合抑制副溶血弧菌，通过棋盘法测定黄精和抗生素的最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration，MIC）和联合抑菌效果，研究了黄精等对细菌细胞膜电导率、膜电位和存活率的作用，采用RT-PCR研究了黄精等对细菌外排泵相关基因表达的影响。结果表明，黄精和土霉素具有较好的协同抑菌效果，最佳配比为1/8 MIC黄精+1/4 MIC土霉素，此时分级抑菌浓度（fractional inhibitory concentration ，FIC）为0.38，但在羰基氰化物间氯苯腙（CCCP）的存在下，这种协同作用转为相加甚至无关作用。电导率、膜电位和碘化丙啶染色证明黄精能破坏副溶血弧菌细胞外膜，提高其渗透性，导致细胞内膜去极化，膜两侧质子梯度消失。黄精显著抑制副溶血弧菌5个外膜蛋白、5个反向协同运输子和11个RND外排转运子的表达，其中vpa0096（OmpW）下调497.51倍，vp0425（TolC）、vp2072（Na+/H+反向协同运输泵）、vp2665（Na+/Ca2+交换蛋白）、vp1092、vp0941、vp1178、vpa0344和vpa0809分别下调27.03倍、73.53、55.56、100.00、35.71、37.74、49.02和56.18倍。黄精降低TCA循环关键酶苹果酸脱氢酶（MDH）和琥珀酸脱氢酶（SDH）酶活，从而抑制副溶血弧菌体内TCA循环。土霉素是vp0425（TolC）的底物之一，黄精属于天然外排泵抑制剂，能将土霉素阻留在细胞内，提高土霉素的抑菌效果。黄精和土霉素协同作用于水产养殖的弧菌病，大幅度缩减土霉素使用浓度、残留风险和耐药性弧菌的出现，从而促进水产养殖的健康发展。     

副溶血性弧菌外膜蛋白VP1008和弧菌铁蛋白受体的重组表达及抗体交叉反应

目的:副溶血性弧菌特异性表面抗原对副溶血性弧菌免疫检测具有重要意义,目前外膜孔蛋白VP1008（39.3 kDa）和弧菌铁蛋白受体（78.7 kDa）的免疫原性仍不清楚。方法:从基因组DNA扩增了目的基因,分别构建了含目的基因的pET-28a（+）重组质粒,转入大肠杆菌BL21并经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达两种重组蛋白。采用镍柱纯化的重组蛋白分别免疫了BALB/c小鼠,并通过酶联免疫吸附反应（ELISA）和免疫印迹研究了小鼠多抗与不同株副溶血性弧菌、其它弧菌等菌株的交叉反应。结果:重组蛋白VP1008和弧菌铁蛋白受体均以包涵体形式表达,小鼠多抗与免疫的重组蛋白的效价>1000 K,与7株副溶血性弧菌的效价在4.5~13.5 K,与10株弧菌基本无交叉反应,与肠杆菌的交叉反应和纯化过程中大肠杆菌蛋白的微量残留有关;多抗均与副溶血性弧菌全菌蛋白在目标位置出现反应条带,其中VP1008多抗效价和免疫原性相对较好。结论:外膜蛋白VP1008小鼠多抗对副溶血性弧菌识别性、免疫原性较好,为建立新的副溶血性弧菌免疫检测方法奠定了基础。     

食品中副溶血性弧菌toxR和tdh基因双色荧光PCR检测方法的建立

目的 建立对副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus）特异性检测toxR（跨膜转录激活蛋白）基因和tdh（热稳定性直接溶血素）毒力基因的Taqman探针双色荧光PCR检测方法。方法 根据副溶血性弧菌toxR基因和tdh基因,分别设计引物和探针,建立Taqman探针双色荧光PCR扩增体系,进行特异性、灵敏度试验;对副溶血性弧菌分离菌株实施检测,了解其tdh基因和tdh基因分布情况。结果 结果表明,副溶血性弧菌标准菌株和3株从食物中毒患者中分离获得的分离株均出现toxR基因和tdh扩增曲线,而溶藻弧菌、单增李斯特菌等31株弧菌属其他菌株和肠杆菌科的菌株未见扩增曲线。从食品中分离的37株副溶血性弧菌分离株均未携带tdh毒力基因。副溶血性弧菌检测灵敏度可达到3.6×102 cfu/mL。结论 该方法可用于同时检测食品中副溶血性弧菌的特异性和毒力基因。     

盐浓度对自制香肠理化因子及原核微生物群落多样性的影响

为研究盐浓度对香肠发酵的影响，采用16S rRNA测序和理化分析技术，对不同盐度下发酵的自制香肠中微生物多样性和物理化学特性进行研究。结果表明，盐浓度可以显著影响pH、水分含量及过氧化值，并且也会显著影响微生物的多样性和组成。乳杆菌属（Lactobacillus）在香肠发酵中占优势，其相对丰度在30.29%～58.15%范围之间，明串珠菌属（Leuconostoc）、弧菌属（Vibrio）、不动杆菌属（Acinetobacter）、魏斯氏菌属（Weissella）、盐单胞菌属（Halomonas）、片球菌属（Pediococcus）、盐弧菌属（Salinivibrio）和四联球菌属（Tetragenococcus）受盐度的影响显著。冗余分析（RDA）结果表明，盐度对菌群的影响最大。综上所述，添加4%食盐的香肠具有更高的乳酸菌相对丰度（58.15%）。该结果有助于了解加盐对香肠发酵微生态的影响，为香肠的质量控制提供依据。     

壳聚糖盐酸盐对几种水产致病菌的抑菌性研究

目前,对虾疾病仍然是困扰对虾养殖业的一大难题,由弧菌属（Vibrio）细菌引起的弧菌病（Vibriosis）是其中危害最大的细菌性疾病,给水产养殖业造成了严重的经济损失。本实验以副溶血弧菌、哈维氏弧菌和鳗弧菌为供试菌种,采用滤纸片扩散法对壳聚糖盐酸盐进行抑菌实验研究。在此基础上进一步采用96孔板法测定了壳聚糖盐酸盐对副溶血弧菌、哈维氏弧菌和鳗弧菌的最小抑菌浓度（MIC）,结果表明：壳聚糖盐酸盐对3种供试菌株均具有抑菌作用,最小抑菌质量浓度因供试菌的不同而不同,副溶血弧菌为2.5 mg/mL,哈维氏弧菌和鳗弧菌为3.25 mg/mL。     

一起溶藻弧菌引起的食物中毒

一起溶藻弧菌引起的食物中毒张谷若，聂忠学，钟加荣，平波贵州省龙里县防疫站（５５１２００）溶藻弧菌引起的食物中毒少有报导，在内陆省份更是罕见。１９９２年９月１日贵州省龙里县冠山饭店承办宴席６桌，随即发生多人中毒并死亡１人。后经调查，证实是一起溶藻弧菌引...     

基于高通量测序分析虾夷扇贝柱菌群结构及腐败优势菌

为揭示虾夷扇贝柱的菌群结构及腐败优势菌,通过对宏基因组DNA进行高通量测序,分析虾夷扇贝柱新鲜和腐败样品的菌群结构,同时对可培养细菌菌群基因组DNA进行高通量测序,分析新鲜和腐败样品可培养细菌菌群的结构特征。结果表明,对宏基因组测序后获得的新鲜虾夷扇贝柱中细菌菌群多样性丰富,其中相对丰度较高的有Candidatus kuenenia（10.73%）、弧菌属（Vibrio,8.15%）、别弧菌属（Aliivibrio,7.38%）、芽孢杆菌属（Bacillus,7.20%）和未分类菌（unclassified,16.08%）;4?℃的腐败优势菌为发光杆菌属（Photobacterium,46.91%）、别弧菌属（36.82%）和假交替单胞菌属（Pseudoalteromonas,11.01%）,15?℃的腐败优势菌为发光杆菌属（46.97%）和别弧菌属（43.33%）,25?℃的腐败优势菌为发光杆菌属（41.94%）、别弧菌属（23.10%）、梭杆菌属（Fusobacterium,18.61%）和乳酸菌属（Lactobacillus,10.60%）。对可培养细菌菌群基因组测序后发现,新鲜样品可培养细菌菌群多样性大大降低,大部分为假交替单胞菌属（89.46%）,在25?℃腐败后,可培养的腐败优势菌为弧菌属（50.98%）、希瓦氏菌属（Shewanella,17.43%）和乳酸菌属（10.68%）。本研究揭示了虾夷扇贝柱新鲜及腐败样品的菌群结构特征及腐败优势菌,为进一步研究微生物对虾夷扇贝柱品质劣化的作用机制提供一定参考。     

一株副溶血弧菌噬菌体生物学特性、全基因组特征及其在食品中的应用

目的：分析1株副溶血性弧菌噬菌体474x1的生物学特性、全基因组及在食品中的抑菌效果。方法：以副溶血性弧菌474菌株为宿主菌，从海鲜市场基围虾分离噬菌体474x1，利用透射电镜观察其形态，并绘制一步生长曲线，分析474x1对温度及pH的敏感性。分析474x1全基因组序列，根据474x1末端酶大亚基构建系统进化树。通过测定菌落总数评价噬菌体对虾肉中副溶血弧菌的抑制效果。结果：分离到1株新型的副溶血弧菌噬菌体，命名为474x1，该噬菌体能够裂解23株副溶血弧菌中的19株（19/23=82.61%）。电镜观察474x1具有典型的短尾病毒科病毒形态特征。最佳感染复数（MOI）为0.01，一步生长曲线显示474x1的潜伏期为10 min，裂解量为115 PFU/cell。该噬菌体能够在较大的温度范围（30～60℃）和pH(4～11)范围内维持活性。474x1全基因组长47830 bp，包含69个开放阅读框（open reading frames,ORFs），其中14个具有特定功能的基因。比较基因组学分析474x1与短尾噬菌体科弧菌属噬菌体Vp41s3基因组具有较高同源性，进化分析表明474x1与...     

浅谈无碳复写纸蓝点质量纸病

浅谈无碳复写纸蓝点质量纸病刘映尧（广州珠江特种纸有限公司）１前言无碳复写纸（简称ＮＣＲ纸）分为上纸（ＣＢ），中纸（ＣＦＢ），下纸（ＣＦ）。上纸背面涂发色剂，中纸正面涂显色剂、背面涂发色剂，下纸正面涂显色剂。按显色可分为黑印纸、蓝印纸或其它色印纸，我国...     

超高压杀灭青蛤污染弧菌条件优化

以青蛤为研究对象,以水产品常见污染的致病菌副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）CGMCC1.1997及溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）CGMC1.1833为目标菌,优化超高压杀菌条件。研究选用CGMCC1.1997和CGMC1.1833两种弧菌菌株,在离体和在体状态下,采用不同压力、保压温度及时间进行处理,确定杀灭条件。结果表明,在离体状态下,300 MPa、20 ℃处理5 min或不小于300 MPa、30 ℃ 处理3 min以上,可以彻底杀灭108 CFU/mL的弧菌;但在体状态下,即使青蛤污染的弧菌量级为104 CFU/g,该条件仍不能彻底杀灭所污染的弧菌,说明青蛤的肌肉组织对弧菌的杀灭有保护作用。经过优化得到超高压杀灭青蛤中弧菌（污染菌的量级为104 CFU/g）的条件为500 MPa、30 min、30 ℃或400 MPa、30 min、40 ℃或600 MPa、20 min、40 ℃,这些条件下,同样可杀灭青蛤体内污染更高数量级（107 CFU/g）弧菌,说明青蛤肌肉组织对高压杀灭弧菌的保护作用是有限度的。因此,超高压处理可以杀灭青蛤污染的弧菌;在一定压力条件下,青蛤的肌肉组织对弧菌的杀灭有保护作用,但其保护作用是有限度的。     

2019年冻鱼糜制品中食源性致病菌污染状况分析

目的 了解冻鱼糜制品中食源性致病菌污染状况。方法 从全国范围内采集冻鱼糜制品4 516份，按照食品安全国家标准《食品微生物学检验》相应标准的规定，对样品中单核细胞增生李斯特菌、副溶血性弧菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、致泻大肠埃希菌进行检验。结果 单核细胞增生李斯特菌检出率6.02%（272/4 516），副溶血性弧菌检出率0.84%（38/4 516），小肠结肠炎耶尔森氏菌检出率0.84%（38/4 516），致泻大肠埃希菌检出率0.91%（41/4 516）。单核细胞增生李斯特菌的污染在4种食源性致病菌中较为突出，且不同产地的样品中单核细胞增生李斯特菌的污染差异较大。除副溶血性弧菌以外，其余3种食源性致病菌在散装样品中的检出率均高于预包装样品。结论 市售冻鱼糜制品存在致病菌污染，需要关注其健康风险。     

2017—2021年泉州市食品污染风险监测中副溶血性弧菌耐药性及分子分型研究

目的 了解2017—2021年泉州地区食品污染风险监测中副溶血性弧菌的耐药情况以及菌株之间的同源性关系。方法 对各县区送检的食品样本进行副溶血性弧菌的增菌培养和分离鉴定，荧光定量PCR法进行毒力基因（tdh、trh和tlh）检测，微量肉汤稀释法进行药敏试验，脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术进行分子分型，利用BioNumerics 6.6软件进行聚类分析。结果 210份食品样本共检出副溶血性弧菌65份，总检出率为30.95%；毒力基因检测中tlh基因100%检出，tdh和trh均未检出；药敏试验显示65株副溶血性弧菌对8种抗生素表现出不同程度的耐药，其中耐药最强的是多黏菌素E(27.70%,18/65)，而对美罗培南、环丙沙星、头孢他啶/阿维巴坦、替加环素、阿奇霉素、萘啶酸、链霉素、复方新诺明和阿米卡星9种抗生素不具有耐药性。65菌株通过PFGE图谱聚类分析显示63种型别，菌株之间相似度为34.67%～100.0%。结论 泉州地区食品中存在一定程度的副溶血性弧菌污染，所分离出的副溶血性弧菌对多种抗生素具有较高敏感性，菌株分布呈多态性，相互之间关系比较分散，亲缘关系较远。     

无碳复写纸CB涂层间隔基国产化应用的实践

无碳复写纸ＣＢ涂层间隔基国产化应用的实践江桥特种纸有限公司梁超雄无碳复写纸的上页纸（Ｃｏａｔｅｄｂａｃｋ简称ＣＢ），和中页纸（Ｃｏａｔｅｄｆｒｏｎｔａｎｄｂａｃｋ简称ＣＦＢ）的背面都涂布上有包复无色染料的微胶囊的涂层（以下简称ＣＢ涂层），ＣＢ涂层的主...     

∧BMV中函数的F（a,q）平均逼近

设σｐ（ｆ，ｘ）＝＾∞∑ｋ＝０Ｃｋ（ｐ）Ｓｋ （Ｃｋ（ｐ）〉０）为∧ＢＭＶ中函数的Ｆｏｕｒｉｅｒ级数的Ｆ（ａ，ｑ）平均，这里Ｃｋ（ｐ）ｐ是满足一定条件的含参数系数，本文作者给出了σｐ（ｆ，ｘ）－［ｆ（ｘ＋０）＋ｆ（ｘ－０）］／２的收敛速度。     

紫苏子油中游离脂肪酸的动态分析

采用毛细管气相色谱的方法，以十五碳烷酸为内标，对紫苏子油中的五种游离脂肪酸：棕榈酸（Ｃ１６：０）、硬脂酸（Ｃ１８：０）、油酸（Ｃ１８：１）、亚油酸（Ｃ１８：２）、亚麻酸（Ｃ１８：３）进行分析，研究紫苏子油中五种游离脂肪酸在储藏期间的变化。此分析方法无需进行甲基化，直接分析游离脂肪酸的变化。研究中对每种脂肪酸都作了方法学研究，脂肪酸的线性范围在１４７～９２２ｐｐｍ之内，ｒ＾２值≤０．９９７。精密度≤