电针对局灶性脑梗死大鼠RhoA/ROCK表达的影响

目的:观察大鼠局灶性脑梗死后大脑皮质RhoA和ROCK(Rho-associated kinases)的表达以及电针刺激对其表达的影响。方法:将成年健康雄性SD大鼠40只,随机分为正常组,假手术组,模型组和电针组,每组十只。模型组和电针组利用改进后的Longa方法制作大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,电针组在大鼠麻醉苏醒后90min进行电针刺激,每天一次,连续针刺14天。每组分别在1d,3d,7d,14d四个时间点进行神经行为学评分。14天时运用免疫组织化学法观测缺血区大脑皮质中RhoA和ROCK的分布和表达,利用免疫印迹法检测缺血区侧大脑皮质RhoA和ROCK的蛋白表达。结果:模型组大鼠神经行为学评分明显高于正常组和假手术组(p0.01),14天后电针组的神经行为学评分明显低于同时段模型组(p0.05);免疫组化结果显示,电针组的RhoA和ROCK表达较模型组明显减少(p﹤0.05);Western blot检测结果显示,电针组RhoA蛋白和ROCK蛋白的表达量较模型组RhoA蛋白和ROCK蛋白明显减少(p0.05)结论:大鼠局灶性脑梗死后脑损区皮质RhoA与ROCK表明显上调,给予电针干预后可降低其表达,这可能是电针促进MCAO大鼠脑损区轴突再生的机制之一。     

孕鼠肝内胆汁淤积症：胎鼠心肌细胞缝隙连接蛋白Cx43、Cx45表达及意义

目的:探讨肝内胆汁淤积症(ICP)孕鼠的胎鼠心肌细胞缝隙连接蛋白 43(Cx43)和缝隙连接蛋白45(Cx45)的表达.方法:应用雌、孕激素建立妊娠肝内胆汁淤积大鼠模型,透射电镜观察胎鼠心肌细胞闰盘超微结构,免疫组化、RT-PCR和Western Blot检测胎鼠心肌细胞Cx43和Cx45的表达.结果:(1)ICP组胎鼠心肌细胞闰盘结构部分模糊,缝隙连接消失;(2)免疫组化、RT-PCR和Western blot实验均发现,ICP组胎鼠心肌细胞Cx43蛋白表达显著下调,与正常组胎鼠比较,差异有极显著性,均P<0.01.(3)免疫组化、RT-PCR和Western blot实验均发现,ICP组胎鼠心肌细胞Cx45蛋白表达与正常组胎鼠比较差异无显著性,P>0.05.结论:ICP孕鼠的胎鼠心肌细胞缝隙连接超微结构发生改变,Cx43蛋白表达下调,缝隙连接通讯受到明显抑制,可能导致胎鼠发生心律失常和猝死.     

水通道蛋白8在人胎盘和胎膜中的表达

目的:探讨水通道蛋白8(aquaporin 8,AQP8)在正常人胎膜及胎盘中的表达情况。方法:采集6例正常足月剖宫产的胎膜和胎盘组织,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测AQP8mRNA在胎膜、胎盘中的表达,用免疫组织化学的方法检测AQP8蛋白在胎膜、胎盘中的定位表达。结果:AQP8mRNA在羊膜、绒毛膜和胎盘均有表达,AQP8蛋白主要表达于羊膜上皮细胞、绒毛膜滋养细胞和胎盘合体滋养细胞的胞浆和胞膜中。结论:AQP8在羊水平衡的调节和母儿液体交换过程中可能起重要作用。     

Drosha蛋白在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨胰腺癌组织中Drosha蛋白表达状况及其临床意义。方法:收集胰腺癌样本85例及对应癌旁组织53例,采用HE和免疫组化法检测胰腺癌组织标本中Drosha蛋白的表达并分析其与临床病理因素之间的关系。采用定量PCR方法检测Drosha基因表达。结果:胰腺癌组织中Drosha的表达阳性率为72.9%(62/85),而相应癌旁Drosha表达阳性率为100%(53/53),两者表达差异有统计学意义(P=0.000),Drosha蛋白在胰腺癌中的阳性强度平均积分值由10.3分降至2.3分。Drosha蛋白的表达与肿瘤的分期(c2=19.2,P=0.0003)、分级(c2=10.8,P=0.013)、淋巴结转移(c2=23.6,P=0.00003)等密切相关。与对应癌旁组织相比,Drosha基因在胰腺癌组织中表达下调(P=0.000)。结论:Drosha蛋白在胰腺癌组织中表达下降,Drosha可能在胰腺癌的发生、发展中具有重要作用。     

GAD65基因修饰的神经干细胞移植治疗癫痫的实验研究

目的:将谷氨酸脱羧酶65(GAD65)基因修饰的神经干细胞移植到海仁酸颞叶癫痫模型大鼠海马中,检测目的基因在脑内的表达以及基因工程化细胞移植对癫痫的影响.方法:建立海仁酸致癫痫大鼠模型,完全随机分为GAD-NSCs移植组、单纯NSCs移植组、生理盐水对照组,每组20只.在移植后1、2、3天,1、2、4、8周各时间点,通...     

ALA-PDT通过NF-kB通路调节巨噬细胞极化状态

目的:探讨ALA-PDT对巨噬细胞极化的影响,并探讨相关机制.方法:采用免疫荧光、PCR、WB等试验检测巨噬细胞极化特征蛋白CD86、CD206、iNOS、ARG-1的表达水平变化,NF-kB激活-核转运检测试剂、WB试验检测NF-kB通路激活情况,WB试验检测抑制NF-kB通路后CD86、iNOS蛋白表达水平.结果:...     

发射机的检修

电视发射机的故障检修故障1:北广CSD-1-Ⅲ-1型1KW电视发射机,故障现象是开风机和负压(36V)均正常工作,但加不上高压。将高压控制盒用转接盒接上,用万用表测,逻辑控制盒中的YF1-1 和YCF1-2第8脚和第6脚、8脚步为0态,6脚为1态正常,测YF3-1、8脚和YF3-2、6脚、8脚1态,6脚0 态正常,证明开机信号和灯丝预热, 偏压,门开关等信号已送来。当测YF4-1、8脚时电压为0态不正常(应为1态),6脚为1态,正好相反,并且6脚电压低于正常值,怀疑、YF4 (H005),损坏,用一新的逻辑集成电路H005换上后故障依旧。怀疑YCF6损坏,用一新的H005对YF6 进行更换,还是加不上高压。当用表测电容C7(10μF)时,发现工作电压低,拆下C7,用万用表测该电容已严重漏电,用一新的10μF/35V电容换上后便能加上高压,恢复正常。     

全反式维甲酸对恶性黑素瘤A375细胞VEGF表达的影响

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对体外培养恶性黑素瘤A375细胞VEGF表达影响。方法应用Real-time PCR检测A375细胞VEGF-B在基因水平的表达。应用ELISA法检测A375细胞上清中VEGF蛋白水平的表达。结果ATRA可降低A375细胞培养上清的VEGF的mRNA表达和血清浓度,与对照组相比有统计学意义(P<0.05)。结论ATRA可在mRNA和蛋白水平下调A375细胞VEGF的表达,且这种抑制作用呈时间剂量依赖关系。     

HPPH光动力治疗对鼠G422脑胶质瘤各部位突变型p53蛋白和p16蛋白表达及与HpD-PDT对比

目的:探讨HPPH光动力治疗对鼠G422脑胶质瘤脑及腋部皮下移植瘤各部位mtp53蛋白和p16蛋白表达的影响并和HpD-PDT做比较。方法:建立鼠G422脑胶质瘤脑及腋部皮下移植瘤模型,设立空白对照组、单注射HPPH 0.45mg/kg组、单注射HPD 5 mg/kg组、单665 nm激光照射组、单630n m激光照射组、HPPH-PDT各组(0.15 mg/kg组、0.3 mg/kg组、0.45 mg/kg组)、HpD-PDT 5 mg/kg组。单注射HPPH组、HPPH-PDT组和单注射HPD组、HpD-PDT组自尾静脉注入光敏剂,24 h后以波长665 nm的半导体激光照射HPPH-PDT组和单665 nm激光组肿瘤,功率密度200 mW/cm~2,每光斑照射17 min,能量密度为204 J/cm~2;以波长630 nm的半导体激光照射HpD-PDT组及单630 nm激光组肿瘤,功率密度200 mW/cm~2,每光斑照射20 min,能量密度为240 J/cm~2。于PDT后9 d处死鼠行酶联免疫吸附法(ELISA)的双抗体夹心法检测HPPH-PDT和HpD-PDT后肿瘤及对照组各部位(肿瘤、肿瘤边缘、正常脑组织)、血液突变型p53蛋白(mutant type p53 protein,mtp53)和p16蛋白表达变化。结果:空白、单注药和单照光三组对照组之间mtp53蛋白和p16蛋白表达值两两比较,P>0.05,差别无统计学意义。HPPH-PDT各剂量组及HPD-PDT组与空白对照组比较,mtp53蛋白表达值明显降低,p16蛋白表达值明显升高,P<0.01,差别有统计学意义。且接近正常脑组织值,或p16蛋白表达稍低于正常脑值,mtp53蛋白值表达稍高于正常脑组织值。0.3mg/kg和0.45mg/kg HPPH-PDT组与0.15 mg/kg HPPH-PDT组及HPD-PDT相比,mtp53蛋白表达值降低,p16蛋白表达值升高,P<005,差别有统计学意义,0.45 mg/kgHPPH-PDT组mtp53蛋白表达值稍低于0.3 mg/kgHPPH-PDT组,p16蛋白表达值稍高于0.3 mg/kgHPPH-PDT组,P>0.05,差别无统计学意义。HPPH-PDT0.3 mg/kg组的mtp53蛋白表达值低于HpD-PDT5 mg/kg组,p16蛋白表达值高于HpD-PDT 5 mg/kg组,P<0.05,差别有统计学意义。肿瘤边缘mtp53蛋白值稍高于肿瘤值,血液低于肿瘤值;p16蛋白值肿瘤边缘稍低于肿瘤值,血液高于肿瘤值。结论:HPPH-PDT能诱导mtp53蛋白表达降低,p16蛋白表达升高。与HpD-PDT相比,HPPH-PDTmtp53蛋白表达更低,p16蛋白表达更高。本次实验条件下HPPH 0.3 mg/kg是适宜的HPPH-PDT剂量。     

低能量ALA-PDT对脑组织新生血管形成及胶质瘤生长的影响

观察了低能量5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学疗法(ALA-PDT)对脑组织新生血管形成和胶质瘤生长的影响。用10J/cm2的ALA-PDT照射27只裸小鼠大脑皮层后第1、5、10天,利用二维、三维图像观察新生血管形成,western blot检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达。另将12只裸小鼠分为对照组(无特殊处理)和ALA-PDT预处置组(10J/cm2),ALA-PDT预处置后第10天,颅内接种U87胶质瘤细胞,21天检测肿瘤体积。结果发现,以照射区对侧大脑相应区域为对照,低能量ALA-PDT照射后第1和5天,血管形态无明显变化,第10天有新生血管形成;VEGF在照射后第5和10天显著增高;HIF-1α在照射后第1天即开始增高,随后越发明显。低能量ALA-PDT可通过HIF-1α诱导VEGF高表达和新生血管形成,这种微环境的改变有助于U87脑胶质瘤细胞的生长。     

水通道蛋白4在脂多糖致大鼠感染性脑水肿模型中的表达变化

目的:观察脂多糖(LPS)致大鼠感染性脑水肿后水通道蛋白4的表达情况.探讨其在脑水肿形成发展中的作用.方法:84只雄性SD大鼠,随机分为3组:空白对照组(C组,n=12):生理盐水对照组(S组,n=12):水肿组(L组,n=60).水肿组又按注射脂多精后6h、12h、24h、48h、72h分为5个亚组(n=12).向颈...     

VEGF165基因修饰的神经干细胞对脑外伤大鼠的神经保护作用及机制

目的：探讨移植转染pDsVEGF165Redl-N1质粒的神经干细胞对脑外伤大鼠的神经保护作用及机制。方法：由新生大鼠脑组织分离培养神经干细胞,应用Lipofectamine2000介导pDsVEGF16sRed1-N1质粒转染神经干细胞;分别将PBS（A组）、神经干细胞（B组）、转基因神经干细胞（C组）移植到脑外伤大鼠局部损伤灶边缘;利用ELISA法检测转基因细胞在体内的表达情况,以免疫组化检测移植后局部损伤组织中微血管密度变化,通过NSS评分评价移植后大鼠神经功能的变化。结果：转基因细胞移植后在一定时间内持续表达VEGFl65,C组大鼠NSS评分从移植后第3天开始明显低于A组（P〈0．05）,而B组大鼠NSS评分则从移植后第7天开始明显低于A组（P〈0．05）,C组大鼠微血管密度从移植后第7天开始明显高于其他两组（P〈0．01）。结论：转基因神经干细胞表达的VEGF165既可以通过促进微血管再生和改善微循环发挥保护作用又可以直接作用于神经细胞发挥保护作用。     

不同强度脉冲电磁场对去卵巢大鼠股骨骨密度的影响

目的：建立去卵巢大鼠骨质疏松模型,通过采用不同治疗强度脉冲电磁场（PEMFs）干预去卵巢大鼠,观察各组大鼠的股骨骨密度的变化,初步确定治疗骨质疏松的最适的治疗强度。方法：按随机的分组原则用密闭信封法将雌性3月龄sD大鼠50只分为5组：SHAM对照组10只、OVX对照组10只、OVXⅠ组10只、OVXⅡ组10只、OVXⅢ...     

纳洛酮对大鼠中重度创伤性脑损伤后细胞免疫功能影响的实验研究

目的：通过观察大鼠创伤性脑损伤（traumatic brain injury,TBI）后纳洛酮治疗前后血浆β-EP、CD4＋、CD8＋和IL-2的动态变化,探讨纳洛酮对大鼠TBI后细胞免疫功能变化的影响及作用机制。方法：采用气体冲击致大鼠中重度脑损伤模型;流式细胞术、RIA、ELISA检测血液中CD4＋、CD8＋、β-EP、IL-2的变化。结果：TBI大鼠经纳洛酮治疗后,血浆中CD4＋和IL-2含量升高,β-EP和CD8＋则降低。大、小剂量纳洛酮治疗在相应时间点比较有显著性差异（P〈0.05）。结论：纳洛酮可通过降低TBI大鼠血浆中β-EP,调节TBI后应激紊乱,竞争性抑制β-EP对免疫细胞受体的作用,从而使CD4＋、CD8＋和IL-2水平趋于正常,恢复免疫平衡,起到治疗与保护作用。     

探讨辛伐他汀对新生大鼠缺氧缺血性脑病的保护作用及其对大脑皮质MMP-9和ICAM-1表达的影响

目的:探讨辛伐他汀对新生大鼠缺氧缺血脑损伤(HIBD)的保护作用及其对大脑皮质MMP-9和ICAM-1表达的影响。方法:将新生7d SD大鼠随机分为假手术组、HIBD-生理盐水组及HIBD-辛伐他汀治疗(1mg/ml和10mg/ml)组,每组各12只。采用Rice法制备新生大鼠HIBD模型,缺血缺氧后连续7d(每天1次)大鼠腹腔内分别注射等量的生理盐水和辛伐他汀,观察各实验组大鼠缺血缺氧后28 d内存活率和学习记忆能力测试(Y-迷宫法);另取新生大鼠27只(HIBD-生理盐水组和HIBD-辛伐他汀治疗组分别各9只)制备HIBD模型,采用Western blotting检测新生大鼠HIBD后24h、48h及72h时大脑皮质细胞MMP-9和ICAM-1蛋白表达水平及辛伐他汀对它们表达的影响。结果:(1)HIBD-生理盐水组新生大鼠存活率明显低于其余各组(p0.05);(2)学习记忆能力测试表明:HIBD-生理盐水组达标率明显低于其他各组(p0.05);(3)辛伐他汀对MMP-9和ICAM-1蛋白表达水平呈时间依赖性降低,且1mg/ml和10mg/ml辛伐他汀治疗组之间有差异性(p0.05)。结论:辛伐他汀对新生大鼠HIBD具有保护作用,通过抑制MMP-9和ICAM-1表达,减轻脑水肿和缺氧损伤可能是其发挥保护性作用机制之一。     

血管性痴呆大鼠行为学及海马CA1区CREB改变的研究

目的：观察缺血性痴呆（VD）大鼠神经行为学及海马CREB的改变,并探讨两者间的关系。方法：采用双侧颈总动脉永久性结扎（2 vessels obstruction,2-VO）法建立血管性痴呆模型,8周后采用Morriss水迷宫实验测试大鼠记忆行为,海马HE染色检测神经元损伤,PCR及免疫组化检测海马CAl区CREB表达的变化。结果：模型组与正常组相比,大鼠认知功和神经元损伤程度明显,海马区CREB表达也明显降低（P〈0.01）。结论：2-VO法成功制作了缺血性痴呆大鼠模型。模型大鼠脑内海马区CREB水平明显下降,其空间学习记忆障碍可能与海马区CREB表达下降有关。     

酪氨酸蛋白激酶抑制兔角膜新生血管的实验研究

目的：探讨酪氨酸蛋白激酶抑制剂sunitinib对碱烧伤诱导的兔角膜新生血管的抑制作用。方法：采用碱烧伤法诱导兔角膜新生血管模型。将30只新西南大白兔随机分为3组,A组：给予0.5mg/ml sunitinib滴眼,B组：给予1mg/ml sunitinib滴眼,C组：给予生理盐水滴眼作为实验对照组。于碱烧伤后4d、7d、14d显微镜观测新生血管长度及面积。在4d、14d时各组处死4只兔,角膜作病理分析和免疫组织化学法测定血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达。结果A、B组的角膜新生血管长度及面积均显著少于C组（p〈0.01）;A、B组VEGF蛋白表达较C组弱,具有统计学差异（p〈0.01）;结论：酪氨酸蛋白酶抑制剂sunitinib能降低兔角膜碱烧伤后角膜VEGF的表达,有效抑制角膜新生血管的形成。     

粉防己碱对血管性痴呆大鼠齿状回S1000B蛋白表达的研究

目的：探讨粉防己碱（Tet）对血管性痴呆（VaD）大鼠齿状回S1000B蛋白表达的影响以及在血管性痴呆发病中的作用。方法：运用双侧颈总动脉永久性结扎（2-VO法）建立VaD大鼠模型,Nissl染色观察海马齿状回（DG）神经元内的尼氏小体的变化,免疫荧光观察海马DG区S100B的表达情况,F1uo-3/AM探针负载后检测各组大鼠海马内〔Ca2＋〕i浓度变化,探讨Tet改善VaD大鼠神经功能的分子机制。结果：Nissl染色后,Tet干预组大鼠海马DG区尼氏小体较模型组显著增多;免疫标记发现Tet干预组大鼠DG区神经元内S100B蛋白的表达量明显增多;Tet干预组大鼠海马〔Ca2＋〕i浓度显著下降（p〈0.05）。结论：Tet可改善大鼠脑缺血损伤引起的学习记忆能力障碍,可能与Tet下调S100B蛋白,抑制钙离子有关。