新型肺癌小分子多肽的~(131)I标记及其在小鼠体内的生物分布

建立肺癌特异性靶向小分子多肽cNGQGEQc的~(131)I标记方法,研究~(131)I-cNGQGEQc在正常小鼠体内的生物学分布特性。采用氯胺-T法对N端连接有酪氨酸的cNGQGEQc进行~(131)I标记,测定~(131)IcNGQGEQc的标记率、放化纯度、脂水分配系数及在生理盐水(NS)和正常人血清中的体外稳定性,并对标记物在正常小鼠体内的分布进行了初步研究。结果表明,~(131)I-cNGQGEQc的标记率大于90%,比活度为0.4TBq/g;~(131)I-cNGQGEQc在正常人血清和NS中较稳定;~(131)I-cNGQGEQc的脂水分配系数lgP为—1.68,体内生物分布结果表明,肾脏的放射性摄取率在1 h和12 h分别为(10.59±4.66)%ID/g和(1.79±0.89)%ID/g,肾脏的放射性摄取明显高于其他脏器,表明~(131)I-cNGQGEQc主要经肾脏代谢。以上结果表明,~(131)IcNGQGEQc的标记率较高,在体外具有良好的稳定性。~(131)I-cNGQGEQc为水溶性,可用于进一步的靶向诊断与治疗的研究。     

Radioiodine-labeling of EGCG and Its Biodistribution in Mice

To establish the ¹²⁵I-EGCGlabeling method and investigate the biodistribution of ¹²⁵I-EGCG inmice, ¹²⁵I-EGCG was prepared by Iodogen solid labeling method, andwere isolated and purified by Sephadex-G25 agarose, The labeling yield andradiochemical purity of ¹²⁵I-EGCG was analyzed by polymide TLC. Thelabeling yield of ¹²⁵I-EGCG was 89.4% and its radiochemicalpurity(RCP) were 96.4%. The Biodistribution of ¹²⁵I-EGCG in mice wasmeasured at different times after caudal vein injection with 185 kBq for eachmice. The biodistribution in mice demonstrated that ¹²⁵I-EGCG wasdistributed into broad organs and tissuuues, especially in the Stomach, Smallintestine and Submaxillay gland, and the biggest uptake of ¹²⁵I-EGCGin there organs was 15.92、5.83and 11.56 %ID·g^-1respectively at 15 min post injection. In addition, ¹²⁵I-EGCG wascleared out from blood guickly, and theuptake of ¹³¹I-EGCG in blood was 11.95 at 5 min, anddecreased to 1.25 at 4 h post injection. Therefore, ¹²⁵I-EGCG wasstable and it was metabolized mainly in Stomach, Small intestine, Submaxillaygland, worthy of further investigation to trace the compound in vivo and invitro.     

碘标锰卟啉及其小鼠体内分布

通过131I标记锰卟啉(MnTBAP)探讨锰卟啉在小鼠体内的分布代谢。采用Iodogen法对锰卟啉进行131I标记;以聚酰胺薄膜为支持介质、生理盐水为展开剂,测定标记物的标记率和放化纯度;KM小鼠尾静脉注射131I-MnTBAP(每只185kBq,n=6),分别于注射后5、10、30、60、120、240、1 440min取各脏器,称重、测定计数率,计算每克组织摄取注射剂量的百分率(%ID/g)。结果表明,131I-MnTBAP标记率达96.3%,其放化纯在标记后2、24、48h分别为96%、95%、94.5%;动物实验显示131I-MnTBAP在小鼠体内广泛分布,主要经肝和肾脏进行代谢,肝、肾的放射性摄取在注入后5min时分别为8.34%ID/g、12.23%ID/g,4h时则分别下降为0.34%ID/g、0.73%ID/g,血液中放射性清除较快,注入后5min时血液中放射性摄取为5.55%ID/g,4h为0.86%ID/g。因此,碘标记锰卟啉的标记物体外稳定,体内主要经肝、肾代谢,可用于进一步的微量示踪研究。     

碘标记毒死蜱及其在小鼠体内的生物分布

为探讨¹³¹I标记毒死蜱（Chlorpyrifos, CPF）在小鼠体内的分布特点,采用Iodogen法对CPF进行¹³¹I标记,KM小鼠尾静脉注射¹³¹I-CPF（185 kBq/只,n=5）,分别于注射后5、10、30、60、120、240、1440 min取各脏器,计算每克组织摄取注射剂量的百分率（%ID/g）。结果显示,¹³¹I-CPF标记率达93.5%,放化纯度为96.9%,¹³¹I-CPF在小鼠体内广泛分布,主要经肺、胃、小肠、大肠、肌肉和颌下腺吸收,其放射性摄取率在注药后 10 min 时达高峰,分别为37.12%ID/g、6.18%ID/g、8.12%ID/g、8.15%ID/g、7.04%ID/g和7.02%ID/g;经肝和肾进行代谢,其放射性摄取率在5 min时分别为4.34%ID/g和8.50%ID/g, 4 h为0.22%ID/g和 0.69%ID/g。血液中放射性清除较快,放射性摄取率在注入后5 min时为37.27%ID/g,4 h为1.35%ID/g。碘标记CPF体外稳定,体内主要经肺和消化道吸收,肝、肾代谢,可用于进一步的微量示踪研究。     

碘标白藜芦醇及其小鼠体内分布

通过碘¹³¹标记白藜芦醇探讨白藜芦醇在小鼠体内的分布代谢。采用过氧化物酶法对白藜芦醇进行¹³¹I标记;经乙酸乙酯萃取纯化,以聚酰胺薄膜为支持介质,V(三氯甲烷)∶V(丙酮)∶V(乙醇)∶V(水)=4∶4∶0.5∶0.4为展开剂,测定标记物的标记率和放化纯;KM小鼠尾静脉注射¹³¹I白藜芦醇（每只0.185MBq,n=5）。¹³¹I白藜芦醇标记率达69.3%,萃取分离后其放化纯为959%,3、7和15d后分别为92.0%、90.4%、90.1%;动物实验显示,¹³¹I白藜芦醇在小鼠体内广泛分布,主要经肝和肾进行代谢,5min时每克组织百分注射剂量率(%ID•g^-1)分别为16.35、13.05,在肠中也有较高分布,10min时%ID•g^-1为11.70;甲状腺的摄取率随时间的延长而增加。碘标白藜芦醇标记物较稳定,可用于进一步的微量示踪研究。     

Annexin V的~(125)I标记及其在正常小鼠体内的分布

采用Iodogen法对Annexin V进行了125I标记,并观察了其在正常小鼠体内的分布情况。标记结果显示,125I-Annexin V标记率达94.9%,纯化后放化纯度达99%;室温放置72 h后,放化纯度仍保持在92%以上,表明其体外稳定性较好。生物分布结果显示,125I-Annexin V在肾脏中放射活性最高,其次为血液、肝脏、心、肺、脾;脑不吸收125I-Annexin V;肌肉、骨骼组织摄取亦较少;各组织、器官放射性摄取在1 h内除血液下降稍慢外,其余均有明显下降。表明125I-Annexin V适合用作核医学诊断试剂。     

Rituximab的碘标记方法及其正常小鼠体内的生物分布

系统考察了反应时间、NBS 用量、反应温度、反应体积、pH值等条件对125I-Rituximab标记率的影响。用ITLC-SG测定标记物的标记率或放化纯度。在最佳条件下，标记率大于92％。用体外结合试验测定储存不同时间的131I-Rituximab的免疫活性，证明随着131I-Rituximab的储存时间增加免疫活性下降。正常小鼠静脉注射131I-Rituximab后体内分布显示血液中放射性分布较高，并可持续6天，表明131I-Rituximab体内稳定。异常毒性试验结果表明131I-Rituximab毒性低。     

^99Tc^m标记硫酸软骨素及其在小鼠体内的生物分布

采用亚锡还原法对硫酸软骨素（CS）进行了^99Tc^m标记,优化了标记条件,并观察标记物在小鼠体内的生物分布,为骨关节软骨显像提供依据。采用薄层层析分析标记产物的标记率为81．6％±1．7％;用直径为0．2p．m的无菌滤膜对标记液纯化,纯化后放化纯度为90．1％±1．2％^99Tc^m—CS在小鼠体内的生物分布结果显示,其在血液中清除较快,肾脏是主要排泄器官;有较高的亲软骨组织特性,4h时软骨与血液的放射性摄取比（T／NT）为8．31,软骨与骨的T／NT为2．03。以上结果提示,^99Tc^m-CS的标记方法简便,有一定的亲软骨组织性,有待进一步研究。     

99Tcm标记糖肽及其在荷瘤小鼠体内的分布与代谢动力学

Glucose and galactose are conjugated to the N- mercaptoacetyl-Val-Gly-Gly (MAVGG). The glycopeptides and MAVGG are labeled with 99Tcm. The partition coefficients between octanol and water (Pow) are measured. Glycopeptides or MAVGG labeled with 99Tcm areinjected into the mice bearing S180 tumor. 10μL blood samples are withdrawn at different time points and the radioactivities are counted to calculate the effective halflife (T1/2) using a bi-exponential fit. Biodistribution is measured at 3 h postinjection and the percentage of injected dose per gram ( ID%/g ) and tumor to normal tissue ratio (T/NT) were calculated. The assigned structures were confirmed on the basis of IR, NMR and MS. The 99Tcm labeling yield 巨radiochemical purity is greater than 90%. The lgPow of 99Tcm-Glu-MAVGG, 99Tcm-Gal-MAVGG and 99Tcm-MAVGG are –1.974, –2.128 and –1.378, respectively. The T1/2αof the three labeled peptides are 24.3, 37.1, 46.3 min and T1/2β are 221.5, 158.4 and 198.4 min, respectively. The tumor uptakes at 3 h postinjection are 1.46, 1.55 and 0.67 for 99Tcm-Glu-MAVGG, 99Tcm-Gal-MAVGG and 99Tcm-MAVGG, respectively. Their T/NT for tumor over muscle are 3.74、7.38 and 3.53, respectively. The results demonstrated that after carbohydrate conjugate of peptides, the lipophilicity is decreased , the blood clearance is increased and the tumor uptake is enhanced. Of the two glucopeptides, 99Tcm-Gal-MAVGG shows faster blood clearance, higher tumor uptake and T/NT, which suggests the potential utility of 99Tcm-Gal-MAVGG as a suitable tumor imaging agent.     

~(125)I-OxLDL-Ab在正常小鼠及动脉粥样硬化动物模型体内的生物分布

分别采用高效液相色谱法、紫外分光光度法对OxLDL-Ab进行定性、定量分析,评价~(125)I-OxLDL-Ab在正常动物和动脉粥样硬化模型动物的体内分布。正常动物采用昆明小鼠,模型采用载脂蛋白E基因敲除的小鼠(apolipoprotein E-deficient mice,ApoE~(-/-))。高效液相色谱条件为:磷酸缓冲液(PB,0.2 mol/L,pH=7.4)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长220nm;紫外分光光度法测得蛋白浓度的标准曲线为:y=0.664 5x-0.008 3,r2=0.999 7。~(125)I-OxLDL-Ab在正常小鼠体内分布实验结果表明:除甲状腺外,各器官的放射性摄取随时间延长而减少,无明显浓集;在注射~(125)I-OxLDL-Ab后1d各器官代谢消除超过2/3,7d后血液中完全清除。~(125)I-OxLDL-Ab在ApoE~(-/-)鼠体内的分布实验中采用w=2%的KI溶液封闭了甲状腺,消除了甲状腺高摄取的影响;靶器官肺有较高放射性摄取,且在注射后4~8h显示出放射性浓集;除血外,其它各器官的靶器官/非靶器官的放射性摄取比值(T/NT)均大于1,其中T/Mu(肌肉)8,显示出~(125)I-OxLDL-Ab对靶器官有一定的选择性。标记抗体的体内靶向性是显像研究中至关重要的一环,要进一步用于动脉粥样硬化早期显像诊断,还需进一步提高靶器官/非靶器官的放射性摄取比值,提高其在体内与其抗原的亲和性。     

两个99Tcm标记胸苷衍生物在小鼠体内分布的比较

为了找到适合肿瘤显像的99Tcm标记胸苷衍生物,制备了2个标记物99Tcm-ANMdU和99Tcm-NHT,标记率均大于95％,且稳定性好.生物分布结果显示:99 Tcm-ANMdU主要经肾脏代谢,在体内清除比较迅速;99Tcm-ANMdU注射60 min后,荷瘤鼠体内肿瘤的放射性摄取与肌肉、骨和血的放射性摄取的比值达...     

~(99)Tc~m(CO)_3-BPHRGD的制备及其在荷M21人黑色素瘤裸鼠体内的生物分布

制备了99 Tcm(CO)3-BPHRGD,并进行了荷M21人黑色素瘤裸鼠体内生物学评价。在pH=7、75℃条件下反应30min,99 Tcm(CO)3-BPHRGD的标记率大于80%,纯化后标记物的放化纯度大于98%。体外稳定性实验结果显示,37℃下,标记物在生理盐水、人血清中具有很好的稳定性。荷M21人黑色素瘤裸鼠体内分布显示,注射99 Tcm(CO)3-BPHRGD后0.5、1、2、4h,标记物的瘤/血比分别为0.70±0.45、0.87±0.05、1.10±0.19、1.68±0.04。随着时间的延长,靶与非靶的放射性摄取比(T/NT)增大,表明该标记物在肿瘤细胞中的清除速度慢于其他组织。通过进一步结构修饰,改变其体内代谢途径及药代动力学性质,99 Tcm(CO)3-BPHRGD非常有希望成为一种新型肿瘤显像剂。     

藤黄酸的标记及其小鼠体内分布实验

通过¹³¹I 标记藤黄酸以分析其在肿瘤细胞中的摄取及动物体内的分布。采用双氧水标记、氯仿萃取,以聚酰胺薄膜为支持介质、氯仿 甲醇(体积比为40∶1）为展开剂,测定标记率及放化纯;分析肿瘤细胞MCF-7对¹³¹I-藤黄酸的摄取;KM小鼠尾静脉注射¹³¹I-藤黄酸（每只185 kBq）,于不同时间处死,取各脏器,称重、测量计数率,计算每克组织百分注射剂量率。¹³¹I-藤黄酸标记率达86%,放化纯在1, 4, 20 d分别为97.2%,95.4%,93.3%; MCF-7在30 min时对¹³¹I-藤黄酸摄取率达3.50%,显著高于对Na¹³¹I的摄取（P<0.01）;¹³¹I-藤黄酸在体内分布广泛,以肝、肾和肠为最多,肝中5 min时放射性摄取达25.93%ID/g, 4 h则为5.54%ID/g,而肾中5 min时为6.37%ID/g, 4 h时为2.46%ID/g;甲状腺中的放射性摄取随时间的延长而增加。¹³¹I-藤黄酸标记物稳定;肿瘤细胞MCF-7对¹³¹I-藤黄酸有显著摄取;体内主要通过肝肾代谢。     

Rituximab的碘标记方法及其在正常小鼠体内的生物分布

采用N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)方法对Rituximab(美罗华)进行标记,并优化标记条件。系统考察了反应时间、NBS用量、反应温度、反应体积、pH值及KI的加入等条件对125I-Rituximab标记率的影响,用ITLC-SG测定标记率和放化纯度。确定最佳条件为:反应时间2～3 min、pH 7.0、室温、反应体积80μL为反应最优条件。在最佳条件下,5次标记实验标记物的放化纯度为93.9%±1.6%。采用体外结合实验测定储存不同时间131I-Rituximab的免疫活性,结果表明随着131I-Rituximab储存时间的增加免疫活性下降。正常小鼠静脉注射131I-Rituximab后体内分布显示血液中放射性分布较高,并可持续6 d,表明131I-Rituximab体内稳定。异常毒性实验结果表明131I-Rituximab毒性低。     

89SrCl2溶液中载体含量对其在动物体内分布的影响

利用89Y(n,p)89Sr反应在快中子反应堆中制得高比活度89Sr并将其溶于0.01mol/LHCl中,之后加入不同量的SrCl2配制成不同载体含量的溶液;将所得溶液注入正常小鼠体内进行体内分布及急性毒性研究。结果表明:制备的89SrCl2溶液是无菌无热原的澄明溶液,89SrCl2的核纯度>99%,90Sr的含量<1×10-4%,其它伽玛杂质<1×10-2%,89Sr的比活度>185TBq/g,满足医用要求;89SrCl2溶液特异性浓聚于骨,在24h内达到最高,在其它组织中浓聚较少;89SrCl2溶液的载体含量对其在小鼠体内的分布有明显影响,高比活度组(0.5mg/L)在骨中最高浓聚为80.2%(ID%),且7天内骨中的浓聚都显著高于其他组;载体含量对正常小白鼠有较大的毒性,其半致死剂量约为3mg,安全剂量<1mg。     

177Lu-DOTMP在荷瘤小鼠体内的生物分布和兔SPECT显像研究

以1,4,7,10-四氮杂环十二烷和亚磷酸为原料合成了1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四甲撑膦酸（DOTMP）,并对其进行了¹⁷⁷Lu标记;观察了¹⁷⁷Lu-DOTMP在骨转移癌模型鼠体内的生物分布,并对日本大耳白兔进行显像。荷瘤鼠体内的生物分布结果显示：¹⁷⁷Lu-DOTMP可以选择性地在骨组织吸收,具有良好的靶向性,而且在血中清除较快,在其它脏器只有少量的摄取。日本大耳兔显像结果显示：¹⁷⁷Lu-DOTMP主要聚集于膀胱组织,即¹⁷⁷Lu-DOTMP主要通过肾排泄;注射后22 h 骨骼放射性摄取明显,46 h骨骼中放射性积聚更多。以上结果表明,¹⁷⁷Lu-DOTMP具有良好的骨靶向性,值得进一步研究。     

188Re-NEMMPTDD的制备及生物分布研究

在合成新配体NEMMPTDD(2,2,9,9-四甲基-4,7-二氮-4-乙撑-(3,5-二甲基)哌啶-1,10-二硫癸烷)的基础上,以SnCl2作还原剂制备了8Re-NEMMPTDD。生物分布研究表明,该配合物的碘化油溶液具有较理想的肝摄取和滞留,非靶组织的摄取和滞留相对较低,配合物主要通过肾和胃肠代谢。     

99TcmN-HL91的制备及其生物分布

以丁二酰二酰肼(SDH)为N3-离子供给体,SnCl2·2H2O为还原剂,室温下制备[99TcmN]2+中间体,并于100 ℃水浴中与HL91配体进行交换反应,制得99TcmN-HL91配合物,标记率大于90%;室温下放置6 h,99TcmN-HL91标记率仍大于90%;其脂水分配系数lg P为-1.026±0.019,水溶性较99Tcm-HL91(lg P为-0.859±0.009)强;正常小鼠体内生物分布显示,99TcmN-HL91在血液、肝脏中的清除较99Tcm-HL91快;由于99TcmN核的引入,使得99TcmN-HL91配合物在乏氧选择性和生物体内代谢方面不同于99Tcm-HL91,前者在荷瘤小鼠体内没有明显的肿瘤摄取.     

99Tcm-MAG3-Lys-mPEG的制备及其在小鼠体内的分布

以mPEG-5000、Fmoe-Lysine和MAG3为原料，经过五步反应合成了载体MAG3-Lys-mPEG；对其进行^99Tc^m标记后，进一步研究了标记物的体外稳定性及其在小鼠体内的生物分布。结果表明，^99Tc^m-MAG3-Lys-mPEG的标记率〉98％；标记物在体外有很好的稳定性，在生理盐水中放置24h时，放化纯度〉91％；在血清中温浴16．5h时放化纯度仍〉92％；标记物在小鼠体内的血液清除较快，在肾脏中的摄取最高，标记物主要经肾脏通过尿液排出体外。mPEG有可能用作反义核酸的有效载体。     

~(125)I-MIL50在大鼠体内的药代动力学及生物分布

为探究~(125)I标记重组抗蓖麻毒素(Ricin)人源化单克隆抗体(~(125)I-MIL50)在大鼠体内的药代动力学、生物分布及排泄特点,采用Iodogen法对MIL50进行~(125)I标记,结合TCA法测定不同时间~(125)IMIL50在大鼠血清、组织、体液和排泄物中的含量。结果表明:Ricin染毒组和直接给药组血药浓度在14d内没有差异,14d后染毒组~(125)I-MIL50消除快于未染毒组;血清中~(125)I-MIL50浓度高于其他组织和体液,肾、膀胱组织中浓度较高,脑、脊髓、脂肪等脂性组织中浓度一直较低;~(125)I-MIL50给药后27d内经尿累积排泄率约为62.6%,经粪便的排泄率为15.5%。研究结果为临床实验和给药方案提供参考依据。