耐高温α-淀粉酶产生菌的选育研究

从土壤中分离到1株能在55℃生长并分泌耐高温α-淀粉酶的菌株,其最适生长pH值为7．0-8．0,最适生长温度50℃。该菌株经初步鉴定为芽孢杆菌,疑似微地衣芽孢杆菌,命名为DG-1。对该菌株分泌的耐高温α-淀粉酶的性质研究表明,最适作用pH值为7．0,在pH6．0-7．5的范围内有较高酶活。最适反应温度为95℃,95℃保温60min处理后酶活仅损失4．73％。经紫外线诱变处理,得到菌株DG-4,酶活较出发菌株提高了104．6％。     

低温α-淀粉酶产生菌GS230发酵条件与酶学性质研究

对分离自连云港海域的低温α-淀粉酶产生菌Pseudoalteromonas sp．GS230进行了产酶条件的优化和酶学性质的研究。结果表明,该酶在0．4％可溶性淀粉、0．25％牛肉膏、1．5％蛋白胨以及5％接种量、培养32h产酶量达到最高。对低温仪．淀粉酶性质进行研究发现,该酶的最适作用温度和pH值分别是30℃和pH8．0、0℃时相对酶活达28％。对酶稳定性的研究发现,该酶对热敏感,30℃半衰期为1．5h,Ca^2＋可以提高酶的稳定性;在反应体系中添加5mmol／L Ca^2＋,30℃保温1．5h,残余酶活达93％。Na^＋K^＋、Ca^2＋等对酶有激活作用,而Pb^2＋、Cu^2＋、Fe^3＋等强烈抑制酶活性。     

耐高温α-淀粉酶产生菌产酶条件的研究

以一株高温淀粉酶产生菌为出发菌,经过单因素法和正交实验法确定优化培养条件为:玉米粉0.50g, 黄豆粉1.00g,NaCl 0.5g,蒸馏水100mL, pH10.0,接种量0.4%(v/v),装液量14%,50℃,180r/min摇床培养48h后,测定酶活达到32225.4BV,较初始酶活15812.0BV提高了103.8%.     

耐高温α-淀粉酶产生菌产酶条件的研究

以一株高温淀粉酶产生菌为出发菌,经过单因素法和正交实验法确定优化培养条件为:玉米粉0.50g,黄豆粉1.00g,NaCl0.5g,蒸馏水100mL,pH10.0,接种量0.4%(v/v),装液量14%,50℃,180r/min摇床培养48h后,测定酶活达到32225.4BV,较初始酶活15812.0BV提高了103.8%。      

高温α-淀粉酶产生菌的筛选及酶学性质研究

从酒厂高温曲中筛选到一株产高温α-淀粉酶的野生茼株，经初步鉴定为链霉菌，命名为Streptomycessp．1109。在45℃条件下，该茵株固体发酵产酶活力达到169．13u／g。通过酶学性质研究，该酶反应最适温度为85℃，最适pH为6．5，具有较高的热稳定性。     

一株蜡状芽孢杆菌α-淀粉酶产生菌株的分离鉴定及酶学性质研究

从土壤中筛选出一株淀粉酶分泌能力较强的菌株,通过形态学观察、生理生化试验、16S rDNA测序分析等方法对该菌株进行了鉴定,并对其分泌的淀粉酶的酶学性质进行了研究。经鉴定该菌株为蜡状芽孢杆菌。酶学性质研究表明,该酶的最适温度为40℃,最适pH值为5.0~6.0,在40℃保温20min,酶活力下降70%左右。Ca2+对酶的活性和热稳定性没有激活作用。非变性蛋白电泳和淀粉酶活性染色结果显示,该菌仅产生一种淀粉酶。通过高效液相色谱分析,该酶对可溶性淀粉的主要水解产物为糊精、寡聚糖和少量葡萄糖,表明该酶为α-淀粉酶。     

一株α-高温淀粉酶的地衣芽孢杆菌产酶培养基的优化

从西藏当雄温泉附近的土壤中筛选到的一株分泌高温淀粉酶的地衣芽孢杆菌B.licheninformis LT.该菌的原始的淀粉酶活为60 U.经优化培养基(黄豆粉1.5,玉米粉1.5, NaCl 1,K2HPO4 0.01, KH2PO4 0.01, CaCl2 0.4,司盘40 0.1,pH 10.0)在50 ℃、装液量10%、180 r/min的摇床培养72h后, 测得酶活105 U.     

耐高温α-淀粉酶的酶学性质研究

耐高温α-淀粉酶是淀粉生产麦芽糖的关键酶。本文对两种耐高温α-淀粉酶的酶学性质进行了对比研究。结果表明：两种酶的耐高温能力差别较大，酶活差别明显；最适pH值均为7．0，耐酸性较差：当Ca^2＋浓度在7～9mmol／L时，酶活提高明显。     

α-淀粉酶产生菌的筛选鉴定及其发酵条件的优化

从土壤样本中分离出一株产α-淀粉酶的菌株,经形态学初步鉴定为热红短芽孢杆菌。对该菌株产酶条件进行了优化,确定其最佳碳源为麸皮,最佳氮源为明胶,最佳p H值为10,最佳初始装液量为60 m L。     

耐酸性α-淀粉酶产生菌株的筛选及其液态发酵条件研究

从富含淀粉质的土壤中筛选到1株耐酸性α-淀粉酶的产生菌株ZY8,经初步鉴定为黑曲霉。并对其液态发酵条件进行了研究,产酶适宜培养基为可溶性淀粉50g/L,柠檬酸氢二铵20g/L,KH2PO43g/L,CaCl20.1g/LF,eSO4.7H2O0.01g/L,MgSO4.7H2O1g/L。以2%的接种量在30℃、120r/min、初始pH4.0的条件下培养72h,酶活力达到19.86U/mL。酶学特性研究表明,该耐酸性-α淀粉酶最适反应温度为70℃,最适反应pH值为2.0～5.0,在90℃高温处理20min酶活力仍然保持在80%以上。     

耐高温α—淀粉酶的研究概况

本文对地衣芽孢杆菌产生的耐高温α－淀粉酶的生产和特性作一阐述。该酶作用的最适ｐＨ５．５￣７．０，最适温度９２℃；酶合成是在对数生长期进行，工业化生产时酶活在稳定期达到最高，细胞生长与产酶量成反比；淀粉质原料具有诱导作用，可避免分解代谢阻遏；蛋白胨、玉米浆是较适宜的氮源；最佳产酶条件ｐＨ６￣９，温度３５℃；酶变性符合Ｎ←→Ｘ→Ｄ模型；非酶底物的糖类、多聚物、辛烷等都能增加酶的热稳定性。     

酸性α-淀粉酶生产菌株的筛选及酶学性质研究

从土壤中筛选到一株产酸性α-淀粉酶的野生菌株N7,此菌株具有较高的产酶活性。通过菌落形态、菌体特征观察和16SrDNA序列比对,鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌。其酶学性质研究表明,菌株代谢产酶的反应最适温度为53℃,最适作用pH值为4．6,在pH3．0～10．0之间,具有较好的酸稳定性。     

溶氧等参数对耐高温α-淀粉酶发酵的影响

利用耐高温α－淀粉酶的生产菌种－地衣芽孢杆菌IIY－1菌株，对其发酵过程中的各种参数的变化规律与控制方式进行了研究。实验结果表明，采用连续式的pH值的控制方式有利于提高耐高温α－淀粉酶的发酵水平，最后的发酵液的酶活力明显地高于脉动式的pH值控制方式。菌体在产酶阶段对发酵液的溶氧水平要求不高，但是溶氧浓度（DO值）不应低于10％。     

中温α-淀粉酶高产菌株的选育及其粗酶性质

以从自然界中筛选的野生芽孢杆菌XLG-1为出发菌株,通过紫外线诱变及紫外线-氯化锂复合诱变筛选出高产中温α-淀粉酶的优异菌株XLG-51,经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。初步研究了其所产的α-淀粉酶的酶学性质:通过SDS-starch-PAGE电泳与酶谱分析得该酶分子质量为60 ku左右,最适作用温度为60℃,最适作用pH范围为5.0～6.5,且在最适条件下具有较强的稳定性。以该菌株为生产菌进行5 L罐发酵实验,产酶达5298 U/mL。     

一株α-淀粉酶产生菌的分离、鉴定及产酶条件研究

为获得具有高产α-淀粉酶能力的菌株,从不同土壤环境中分离产酶菌株,对其进行分类鉴定和产酶条件研究。通过透明圈法初筛、3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)法复筛分离得到产α-淀粉酶能力较强的菌株,利用形态学和生理生化反应特征,结合16S rDNA序列分析,对其进行分类鉴定;通过单因素试验和正交试验确定该菌株的最佳产酶条件。结果表明:从土壤环境中分离得到一株产α-淀粉酶菌株MF04,初步鉴定为蜡状芽胞杆菌(Bacillus cereus),其初始产酶活力为32.5 U/mL;产酶条件试验结果显示其最适培养温度为37℃,初始pH值为6.0,培养时间为72 h,经优化后液体发酵得到的粗酶液酶活力为60.2 U/mL,是优化前的85.2%。因此分离得到菌株MF04在工业生产中具备潜在开发价值。     

固态发酵生产细菌α-淀粉酶

采用国内α 淀粉酶生产常用菌株BF7658变异菌种 ,直接以麸皮为原料固态发酵法生产α 淀粉酶 ,得到较适宜的条件为 :培养基初始含水量 (质量分数 )为 60 % ,起始 pH自然 ,液体接种量为 5mL/kg ,3 7～ 3 9℃培养 4 8～ 60h ,三角瓶培养产酶水平可达 1 2 4 8U/ g ,浅盘培养平均产酶可达 1754U/ g .固态发酵生产细菌α 淀粉酶产酶水平为液体深层发酵法的 4～ 5倍 ,并且成本低廉 ,具有较好的经济和环境效益 .     

枯草芽孢杆菌工程菌产中温α-淀粉酶发酵条件优化

利用基因工程的手段获得高产中温α-淀粉酶基因工程菌株pWB—amy／WB600,对其在7L发酵罐中的发酵条件进行了研究和优化。结果表明,发酵过程中通过调节通气量和搅拌转速来控制发酵液中的溶氧含量,使溶氧浓度控制为15％-25％;采用流加氨水的方式控制发酵液的pH值为6．0～7．5;并且利用间歇补料的方式,有利于酶量的积累,优化过后的发酵液酶活比未优化时提高了41％。     

耐高温α-淀粉酶高密度高表达发酵条件的优化

通过摇瓶实验对产耐高温α-淀粉酶的重组菌E.coli BL21的高密度高表达发酵条件进行研究。考察不同培养基和不同发酵条件对该菌株产耐高温α-淀粉酶的影响,并利用正交试验进行优化。结果表明:在葡萄糖0.5g/L,酵母粉15g/L,pH6.5,诱导时机为接种后发酵4h,诱导时间为6h,IPTG添加量为0.8mmol/L,接种量为体积分数3%的优化条件下,该重组菌发酵液菌体生物量为原来的1.29倍,酶活力达到8.754U/mL,是原来的1.55倍,目的蛋白的表达量也为原来的1.24倍。     

产淀粉酶芽孢杆菌的分离鉴定、高温驯化及酶学性质研究

该研究从酱香型高温大曲中筛选出产淀粉酶芽孢杆菌,对筛选菌株进行形态学观察、分子生物学鉴定以及高温驯化,并针对驯化前后所产淀粉酶进行酶学性质研究。结果表明,分离筛选到的产淀粉酶菌株Amy Z5为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),在45℃培养条件下生物量及淀粉酶活性有较大幅度降低。菌株Amy Z5经高温驯化,生长温度提高至45℃,并缩短对高温环境的适应期,培养3 h时OD_{600 nm}值即提高4.2倍。高温驯化后的菌株HTAmyZ5所产淀粉酶的最适反应温度从40℃提高至70℃,最适反应pH仍为3,在20～90℃及pH 1～7条件下酶活均能保持在60%以上,pH 9时仍有40%的酶活;最高酶活性提高了3.1倍,达到322.1 U/m L;但稳定性受到高温环境影响略有下降。该研究对酱香型大曲微生物高温发酵、原料高效持久利用及关键香气成分的形成均具有一定的参考意义。     

α-乙酰乳酸脱羧酶高产菌株的选育及产酶条件的研究

以从土壤中分离出的9株地衣芽孢杆菌株，通过产酶实验发现BL－4的产酶活性最好，通过UV和NTC对BL－4进行复合诱变，获得了一株产酶活性比出发菌株BL－4高1．22倍的α－乙酰乳酸脱羧酶高产菌株，并研究了该菌株的最佳发酵产酶条件：培养温度30℃，发酵时间36h，发酵液起始pH6.5.