因子工程在植物抗冷性研究中的应用

随着分子生物技术的快速发展,人们从分子水平上对植物抗冷性进行了大量研究。由于植物抗冷性并不是由单基因决定的,而是由一系列相关的直接或间接作用的基因形成一个复杂的调控网络,所以分子标记成为广大学者研究植物抗冷性的重要手段。笔者针对不同抗冷性基因及转基因植物中分子标记法的应用,并证明了分子标记为抗冷性育种和抗冷性基因定位打下了基础。     

植物细胞凋亡研究进展

介绍了细胞凋亡不仅在存在于动物细胞中,也发生于植物个体发育中,并起着重要作用。植物细胞凋亡与动物细胞凋亡有相似的形态学和生化特征;植物细胞凋亡中存在着核酸科的激活;也可能有Ｃａｓｐａｓｅ蛋白酶的参与。对一些与植物细胞凋亡有关的基因等问题进行了综述。     

抗微囊藻毒素单链抗体基因的构建、表达及初步鉴定

利用RT-PCR方法从抗微囊藻毒素-LR(MC-LR)单克隆抗体的杂交瘤细胞中扩增出抗体的V_H和V_L基因,构建了抗MC-LR分子的单链抗体(scFv)基因。SDS-PAGE和Western blot分析结果显示,该单链抗体基因在大肠杆菌Origami 2中特异性表达出分子量约为30kD的融合蛋白。通过Ni-NTA金属亲和层析法对可溶性表达产物进行纯化,获得的目的蛋白浓度为0.115mg/mL。ELISA反应结果表明该单链抗体能与MC-LR特异性结合。此研究为制备多价高亲和力抗MC-LR抗体奠定了基础。     

中国科学院上海植物生理研究所植物分子遗传国家重点实验室

中国科学院上海植物生理研究所植物分子遗传国家重点实验室（ＰＭＧ）于１９８４年底由国家计委批准开始建设，１９８８年１０月建成并通过国家验收并正式对外开放，是我国第一批国家重点实验室之一。该实验室依托于在植物生理生化、分子遗传和微生物学研究方面具有坚实基...     

转拟南芥AtNHX1基因促进烟草对钾吸收的研究

提取拟南芥总RNA,反转录合成Na /H 逆向转运蛋白基因AtNHX1,构建了植物高效表达载体,用叶盘法将其导入烟草,经筛选获得了抗卡那霉素和GUS染色阳性的转化子38株.应用荧光定量PCR方法对转化材料部分含AtNHX1基因的烟草内源钾通道基因、烟草K 转运蛋白基因和烟草焦磷酸酶基因的转录水平进行了分析.结果表明:在转化烟草中可以检测到AtNHX1基因mRNA,与未转化材料相比,烟草钾离子转运蛋白基因NtHAK1的转录降低,H -ATPase基因NHA1转录增加,钾通道基因NKT转录无显著变化,T1代转化烟叶中K 含量显著增加,Na 、Ca2 无显著变化,烟叶中总糖含量降低,证明了编码拟南芥AtNHX1基因与植物的K 吸收有关.     

激发子诱导植物基因表达研究进展

介绍了基因诱导表达调控的研究方法，并概述了与ABA，乙烯，真菌激发子诱导表达相关的顺式作用元件（G-box,GT-1结合位点，GCC－blox,W-box)，以及与这些顺式作用元件相互作用的转录因子（GBFS，GT－1，EREBPS，WRKY）。同时对植物基因诱导表达调控的分子机制作了综述。     

利用Cre/loxP位点特异性重组酶系统从转基因植物生产非转基因食品

转基因植物中的外源基因是引起转基因植物食品安全性问题的主要原因。通过对Cre／loxP系统介导转基因植物中外源基因选择性切除的最新研究成果进行综述分析,指出利用果实、花粉等组织特异性启动子对重组酶基因的表达进行调控,将转基因植物食用部位的外源基因选择性的切除,是将转基因植物转化为非转基因食品的一条有效途径。     

水稻光(温)敏核不育基因的定位分离、研究进展及对策

本文从经典遗传学的角度分析了水稻光（温）敏核不育性，认为在定位、分离光（温）核不育基因时，应尽可能选择受１对基因控制的不育系及其分离群体。对标记基因法、同工酶标记法和ＤＮＡ标记法进行光（温）核不育基因染色体定位的优缺点及其定位结果不一致的原因进行了探讨。比较了各种植物基因克隆技术在分离光（温）核不育基因上的优缺点，认为图谱分离法虽已有一定的基础，但要在距不育基因１ｃＭ范围内找到分子标记并克隆出此基     

丛枝菌根真菌在提高植物抗逆性与土壤改良中的作用与机制研究进展

【目的】为深入了解植物抗逆性及土壤生态修复的机制,开展丛枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungi,AMF）在分子水平上的研究,以实现对植物生长发育及抗逆性和土壤生态改良的精准调控。【研究现状】综述AMF对宿主植物抗逆性和土壤生态改良的影响,概括AMF抵御生物胁迫和非生物胁迫的作用机制,总结AMF在非侵染性病害、土壤生态结构改良等方面的作用机制和实际应用潜力。【展望】提出AMF在植物抗逆性提升与土壤生态结构改良方面的作用是生态学与农学研究的热点,继续研究AMF如何在分子层面影响植物的应激反应、免疫机制、与土壤微生物相互作用等方面的具体机制;AMF在不同植物种类、土壤类型和环境条件下的适用性也需要深入研究。未来的研究应更加侧重AMF与植物互作的分子机制,特别是AMF在基因调控和信号传导方面的作用;探索AMF在干旱、高盐、重金属污染等极端环境下的功能多样性和适应性;AMF作为一种新兴的有机菌肥,将有助于推动农业的可持续发展,为应对全球农业面临的挑战提供新的解决方案。     

植物细胞抗重金属伤害的分子机制研究进展

植物细胞抗重金属伤害的分子机制主要涉及金属离子高的吸收、运输、区域化及螯合作用等方面,其中跨膜运载蛋白的表达、调控对重金属超富集起了关键作用。金属阳离子运载蛋白家族主要包括CDF家族、NRAMP家族和ZIP家族。综述了近年来研究重金属超富集植物吸收、转运和贮存zn、M、cd等重金属的分子机制所取得的主要进展。     

固氮螺菌与植物相互作用的遗传学研究进展

对固氮螺菌与植物相互作用的遗传学研究进行了综述。本文对进一步研究非豆科固氮体系中植物－微生物互相作用的分子机理有一定参考价值。     

抗菌核病转基因油菜植株的获得

将携带菜豆几丁质酶基因的植物表达载体ｐＢｃｈ通过农秆菌介导法导入甘兰型油菜Ｈ１６５中。经卡那霉素对Ｔ０、Ｔ１和Ｔ２代植株进行连续的筛选和菌核病（ｓｃｌｅｒｏ－ｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｏｒｉｕｍ）接种试验,共获得２２株抗菌核病的Ｔ２代植株。对其中的２２株进行ＰＣＲＳ检测,从６株扩增得到与菜豆几丁质酶基因大小对应的ＤＮＡ带型,Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实其中２株呈现阳性结果,表明外源基因已整合到油菜     

海洋抗菌肽研究进展

抗菌肽是基因编码的肽类抗菌分子,广泛分布于整个生物界,是脊椎动物、无脊椎动物和植物先天免疫的关键因子。本文综述了目前已发现的海洋动物抗菌肽的种类、结构、功能及分子生物学等研究状况,探讨了其在免疫防御中的作用及其应用前景。     

植物抗虫基因的研究与应用

综述了抗虫目的基因的分离克隆和转基因抗虫植物的培育这两方面的研究成果和进展,并对植物抗虫基因工程研究和应用中存在的问题及其对策进行了分析和讨论。     

对一个CDR区发生突变的改形抗CD28重链单域抗体的研究

在构建改形抗CD28重链单域抗体时,得到一个具有较高免疫学活性的改形抗CD28重链单域抗体基因序列。其推导氨基酸序列与改形构建时所选的人源抗体的FRs同源性最高;其推导氨基酸序列与鼠源抗CD28半日克隆抗体重链可变区氨基酸序列比较发现,该改形抗体在CDR2区53位缺失Ala氨基酸残基,而在65a位上插入一个Arg氨基酸残基。在CDR3区缺少Asp95,Lys96,GLy97,Tyr98氨基酸残基,在FR3区缺少Lys82a,Ser82b,Leu82c氨基酸残基,由于该序列发生的突变较大,作者进一步对其进行了研究,该改形抗CD28VH单域抗体基因与人c-myc及人IgG3‘CL绞链区基因在大肠杆菌中融合表达,融俣表达包函体经复性,纯化处理后,仍具有较高与人CD28的分子结合活性。     

哈尔滨医科大学发现两种与肺癌转移有关的基因

哈尔滨医科大学发现两种与肺癌转移有关的基因哈尔滨医科大学遗传学研究室孟祥文博士应用目前国际上最先进的差异基因分离技术，发现了２个与肺癌转移有关的基因。对获得的这２个基因片段及其它基因片段进行深入研究，有助于从分子水平上阐明癌转移机理，为肿瘤治疗和预防...     

部分缺失的棉花曲叶病毒互补链基因启动子具有超强活性

棉花曲叶病毒（CLCuV)互补链基因启动子是一种新近鉴定的启动子,它能驱动外源基因在植物体内高效表达,为了研究其最佳启动子区域,对启动子5端进行了一系列缺失,得到5种不同长度的启动子片段与GUS基因融合的植物表达载体,继而导入根癌农杆菌,采用叶盘法转化烟草,并检测转基因植株的GUS活性,实验结果表明,自启动子5端缺失至翻译起始位点上游－287,－271时启动子活性分别是全长启动子的5倍,3倍。首次对棉花曲叶病毒互补链基因启动子的功能区进行了分析比较,发现缺失负调控元件的启动子比全长启动子具有更强的活性,平均活性是CaMV35S启动子的12倍,暗示该启动子具有应用潜力。     

血友病A的分子诊断：因子Ⅷ基因重排分析

采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交技术对１８个无亲缘关系的中国血友病Ａ家系共５２名成员的因子Ⅷ基因重排进行了分析。结果表明８个家系显示Ⅷ基因倒位，其中７个为远端倒位，１个为近端倒位。证实因子Ⅷ基因倒位是中国人血友病Ａ患者的普遍分子基础，从而为血友病Ａ的分子诊断提供了科学依据。     

转基因番木瓜pUC57-Papaya质粒标准分子的构建与适用性研究

构建了含番木瓜2个内标准基因、4个筛选靶标及3个转化体特异性片段的质粒分子pUC57-Papaya,进行了适用性验证实验。应用普通PCR和实时荧光定量PCR对其进行互换性评估;使用质粒分子对2个样品进行转基因含量测定。结果显示：质粒分子全部9个目的片段按照设计排列,序列完全一致;全部9个基因片段普通PCR和实时荧光PCR方法均能正确扩增得到预期结果,特异性、灵敏度与基因组DNA一致;全部9个基因构建标准曲线做定量测试时,与基因组DNA标准曲线斜率无显著差异,线性相关系数均大于0.99,其中内标准基因Papain、NOS终止子、YK1601与55-1事件特异性片段的截距无差异;利用质粒分子测量2个样品的Papain、NOS终止子、YK1601与55-1事件特异性片段拷贝数,计算转基因含量,结果与基因组DNA一致;测序结果显示各片段拷贝数比值为1,质粒DNA拷贝数浓度为(2.54±0.10)×10⁶ copies/μL。构建的标准质粒分子可代替基因组DNA用于定量检测,也可作为转基因番木瓜定性和定量检测用标准物质。     

转基因油菜T45质粒分子标准物质协同实验研究

对转基因油菜T45荧光定量PCR方法的关键参数进行了方法验证,结果表明该方法适合于标准物质协同实验.选择6家实验室采用经过验证的方法对转基因油菜T45质粒分子标准物质进行了协同实验研究.通过比较分析转基因油菜T45基因DNA与质粒分子DNA两者产生的标准曲线的斜率(扩增效率)、线性拟合度和截距,发现转基因油菜T45基因...