分子量对酪蛋白多肽抗氧化活性的影响

在对酪蛋白酶解产物制备工艺进行优化的基础上,对不同分子量抗氧化肽（>3ku,1～3ku,<1ku）的抗氧化活性进行了评价。首先对酶的种类、酶底物比及水解时间进行了单因素实验,最终确定采用碱性蛋白酶,在pH8.0,55℃,底物浓度5%,酶底物比0.192AU/g的条件下,酶解4h所得水解物抗氧化活性最高。经过超滤和凝胶过滤层析分离获得不同分子量的抗氧化肽,并采用2,2′-连氮基-双-（3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（ABTS+.）、羟自由基和超氧自由基清除活性评价其抗氧化性。结果表明,ABTS+.清除活性与分子量呈负相关（r=-0.898,p<0.01）,分子量低于1ku组分活性最强（2mg/mL,Trolox当量为2.08±0.05mmol/L）;分子量低于3ku的抗氧化肽羟自由基清除活性较高（IC50:1～3ku,4.43±0.03mg/mL;<1ku,4.35±0.06mg/mL）;分子量高于3ku组分主要分布在3～5ku,超氧自由基清除活最强（10mg/mL,66.1%±1.0%）。      

不同分子量酪蛋白肽对自由基清除作用研究

采用超滤法结合凝胶过滤色谱法,分析了不同分子量范围酪蛋白肽对生物体内自由基清除效果的影响。结果表明:酪蛋白肽分子量越小,对生物体内自由基清除率越高,抗氧化效果越好。分子量1ku时,对羟自由基最高清除率为73.33%,DPPH最高清除率为90.94%。     

不同分子量鹿茸多肽抗氧化活性的研究

本文利用膜分离技术获得不同分子量段的鹿茸多肽,采用五种抗氧化检测方法对其进行全面的抗氧化活性分析,获得抗氧化活性较好的多肽Ⅲ片段,分子量在6214u以下。实验结果表明,当浓度在0.1~10.0mg/m L范围之间,多肽Ⅲ对超氧阴离子自由基清除能力和对还原能力低于VC;当浓度为10.0mg/m L时,多肽Ⅲ对DPPH自由基的清除能力与VC基本相当;当浓度在8.0~10.0mg/m L时,对羟自由基的清除率和对脂质体氧化抑制能力高于VC。      

不同分子量水牛乳酪蛋白酶解肽抗氧化活性的研究

通过超滤分离得到不同分子量范围的水牛乳酪蛋白酶解肽组分,对比不同组分的抗氧化活性,结果表明:分子量范围小于1 ku的组分,其DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子清除能力以及还原能力均高于分子量范围在大于1 ku(1~3 ku)的组分,且二者均显著高于(P0.05)酶解前的底物酪蛋白。     

酪蛋白抗氧化肽的制备及初步分离

采用凝乳酶对牛乳酪蛋白酶解,以水解液对DPPH的清除率为指标,进行了酶解工艺优化。酶解液经超滤,Sephadex G-15凝胶层析柱和DEAE-52离子交换层析分离,得到了初步纯化。     

大豆活性肽抗氧化力与其分子量关系的研究

大豆活性肽具有抗氧化性,其抗氧化力大小与大豆活性肽的分子量有关。采用凝胶柱层析分离法对碱性蛋白酶所制备的大豆活性肽(水解度为19.5%)进行分离纯化,得到六个组分,然后比较六个大豆活性肽组分(浓度均为1mg/mL)的抗氧化力大小,结果表明,组分4的抗氧化效果最好。用电喷雾质谱(ESI-MS)测定抗氧化大豆肽组分4的分子量,根据质谱图采用电喷雾质谱软件分析得出,抗氧化大豆肽组分4的平均分子量500,氨基酸数目为4个。     

低分子量透明质酸的制备及其抗氧化活性的研究

首先研究了Fe2+-S2O2-8氧化体系硫酸根自由基（SO-4·）对透明质酸（HA）的氧化降解作用,初步确定了SO-4·氧化降解HA制备低分子量透明质酸（LMWHA）的实验条件。接着HA降解产物经过乙醇沉淀以及凝胶柱层析纯化,采用高效凝胶过滤色谱法（HPGFC）测得纯化后LMWHA分子量为1.45×105Da。最后采用不同的体外抗氧化实验,并以HA为对照,研究了LMWHA的抗氧化活性,发现SO-4·降解后生成的LMWHA的抗氧化活性高于降解前的。本实验说明用SO-4·降解HA制备具有抗氧化活性LMWHA是可行的,为LMWHA抗氧化药物的开发提供了理论依据。      

低分子量透明质酸的制备及其抗氧化活性的研究

首先研究了Fe2+-S2O2-8氧化体系硫酸根自由基(SO-4·)对透明质酸(HA)的氧化降解作用,初步确定了SO-4·氧化降解HA制备低分子量透明质酸(LMWHA)的实验条件。接着HA降解产物经过乙醇沉淀以及凝胶柱层析纯化,采用高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)测得纯化后LMWHA分子量为1.45×105Da。最后采用不同的体外抗氧化实验,并以HA为对照,研究了LMWHA的抗氧化活性,发现SO-4·降解后生成的LMWHA的抗氧化活性高于降解前的。本实验说明用SO-4·降解HA制备具有抗氧化活性LMWHA是可行的,为LMWHA抗氧化药物的开发提供了理论依据。     

核桃多肽的抗氧化活性及其分子量、氨基酸组成特性研究

目的:为了提高核桃粕利用价值,阐明核桃多肽抗氧化活性及其构效关系。方法:采用DA 201-C大孔树脂和Sephadex G-15葡聚糖凝胶分离纯化核桃粕蛋白酶解液,分析比较不同疏水性和不同分子量核桃多肽抗氧化活性及氨基酸组成特性。结果:经DA 201-C大孔树脂分离的多肽组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的抗氧化活性随洗脱溶剂疏水性增大而增大。组分Ⅲ经Sephadex G-15分离纯化得到a、b、c、d四个不同分子量多肽组分。分子量分布在400~700 Da的组分c具有最高的羟自由基清除能力,并含有较高的谷氨酸、天冬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸,与组分Ⅲ在氨基酸组成上具有相似性。结论:具有较好抗氧化活性的核桃多肽分子量小于800 Da,并具有疏水性较强,谷氨酸、天冬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸组成含量相对较高的结构特性。     

酪蛋白抗氧化肽的胃肠消化稳定性研究

目的:研究酪蛋白抗氧化肽的活性在模拟胃肠消化过程中的稳定性。方法:采用脱脂乳粉为原料提取酪蛋白,经酶解,初步分离得到酪蛋白抗氧化肽。以氧自由基清除能力(ORAC)和2,2′-联氮-双-(3-乙基苯并噻错啉-6-磺酸)(ABTS)自由基清除率为抗氧化指标,采取单因素试验,体外模拟胃肠消化模型研究酪蛋白抗氧化肽的胃肠消化稳定性。结果:酪蛋白抗氧化肽经胃蛋白酶消化后其抗氧化活性显著降低,而在随后的模拟肠消化中抗氧化活性逐渐回升至消化前的水平。在模拟胃消化阶段,胃液pH对于酪蛋白抗氧化肽的抗氧化活性没有显著影响,酶与底物比(E/S)越小,酪蛋白抗氧化肽活性保留得越多;在模拟肠消化阶段,底物浓度越大,其活性恢复得越缓慢。结论:酪蛋白抗氧化肽在模拟胃肠消化过程中的稳定性研究,为日常膳食中生物活性肽的合理搭配提供了理论依据。     

酪蛋白酶解物中抗菌肽的分离及其分子量的测定

使用离子交换层析分离纯化酪蛋白酶解物中的抗菌肽并测定其分子量。选用Q-Sepharose Fast Flow为分离介质,对分离条件进行了研究,并对各洗脱组分进行抑菌活性测定,确定了适宜分离条件下酪蛋白抗菌肽的洗脱体积,同时测定了酪蛋白抗菌肽的分子量。结果表明,离子交换层析对酪蛋白酶解物中的抗菌肽的最佳梯度洗脱条件为:流动相A:pH10.5的0.05mol/L乙醇胺盐酸缓冲液;流动相Β:含1mol/L氯化钠的A相溶液,pH10.5;洗脱程序:7%B,1.55CV;13%B,1.40CV;25%B,1.25CV;100%B,1.55CV,洗脱流速:0.5mL/min,检测波长:280nm,酪蛋白抗菌肽的洗脱体积为76.57mL和89.48mL。酪蛋白抗菌肽的平均分子量为3137u。     

青养蛋白抗氧化肽的制备及其胃肠道消化性的研究

采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰酶、风味酶四种酶水解青养蛋白,探讨了各种酶对青养蛋白的酶解特性、清除DPPH·能力和ORAC值的差异。结果表明,木瓜蛋白酶和风味酶复配酶解青养蛋白可以得到较好的抗氧化活性肽,且水解度、蛋白回收率均较好;酶解产物的氨基酸组成中EAA/TAA为45.06%,EAA/NEAA为82.01%均高于FAO/WHO的推荐值,表明青养蛋白酶解物是较优的营养补充剂,且富含抗氧化性氨基酸;分子量分布表明,大于10ku的组分含量为3%,5~10ku肽段的含量为9%,低于3ku的组分含量达到73%。构建模拟了胃肠道消化,青养多肽的抗氧化活性在0~0.5h之间都有一个显著增加的过程(p<0.05),在2.5~4.0h消化的过程中得到的肽的抗氧化活性均较低,且不同时间段之间的活性差异不显著。      

酪蛋白钙肽研究进展

酪蛋白钙肽是含磷酸丝氨酸残基具生理功能多肽,该文介绍酪蛋白钙肽物理特性,生理功能,制备工艺,检测方法及在乳制品中应用。     

萌芽黑豆中蛋白质组分分子量分布及其抗氧化活性研究

本文目的是研究萌芽黑豆中不同蛋白质组分的分子量分布,以及各组分的抗氧化活性。采用碱提酸沉法获得萌芽黑豆中的蛋白质,通过硫酸铵盐析法逐级分离各蛋白质组分,SDS-PAGE法测定各蛋白质组分分子量分布,并从清除自由基和抗人皮肤成纤维细胞氧化损伤两个方面研究了各蛋白质组分的抗氧化活性。萌芽黑豆中蛋白质组分可以集中分离为三个部分,其分子量分布为140.0¹66.0、45.0⁷2.0、17.0²3.0ku;清除自由基和抗人皮肤成纤维细胞氧化损伤的实验结果均表明分子量在17.0²3.0ku的蛋白质组分具有最优的抗氧化活性,说明低分子量的萌芽黑豆蛋白质具有更强的抗氧化活性。      

河蚬抗氧化肽抗氧化稳定性研究

以河蚬抗氧化肽清除羟自由基的活性变化为指标,研究温度、p H、食品原料、防腐剂和不同金属离子对河蚬抗氧化肽抗氧化稳定性的影响。结果表明:河蚬抗氧化肽具有较强的耐热性,加热到100℃仍能保持95%以上的活性;在酸性环境中活性保持较好,在碱性条件下丧失较快;蔗糖、Na Cl对河蚬抗氧化肽的稳定性影响不明显,而葡萄糖和山梨酸钾会明显降低河蚬抗氧化肽活性（p<0.05）;K+、Mg2+、Ca2+、Zn2+、Cu2+等金属离子对河蚬抗氧化肽稳定性均有不同程度的影响,其影响大小顺序为:Cu2+>Zn2+>Ca2+>K+>Mg2+。      

酪蛋白的胰蛋白酶水解物分离及其抗氧化性研究

采用胰蛋白酶水解酪蛋白,使用D201阴离子交换树脂对酪蛋白酶解液进行分离,并收集5个多肽片段（P1、P2、P3、P4、P5）,评价酪蛋白酶解液及分离所获得的酪蛋白多肽的抗氧化性。结果表明,酪蛋白多肽的还原力和DPPH自由基清除力均显著高于酪蛋白酶解液（P＜0.05）;多肽P2的还原力最高,为0.234,然后是多肽P3,为0.057;多肽P4的DPPH自由基清除活力最高,达到（23.8±0.18）%,然后是多肽P3,为（4.5±0.16）%;多肽P5的Fe2+螯合率最高,为（99.80±0.12）%,多肽P3的Fe2+螯合率最低,为（2.50±0.14）%,而酶解液的Fe2+螯合率为（31.27±5.80）%;多肽P2和P3不具备脂质过氧化抑制力。多肽P1、P4、P5具有较好的抗氧化性。     

超声对木瓜蛋白酶酶解产物分子量分布的影响

本文探讨了超声对木瓜蛋白酶酶解产物分子量大小及分布的影响。以牛血清白蛋白为底物,采用高效液相色谱法测定游离酶和固定化酶在超声和非超声作用下的酶解产物肽分子量大小及分布情况。结果表明,游离酶和固定化酶在超声和非超声条件下,酶解产物肽分子量大小及分布有一定的差异。非超声条件下,游离木瓜蛋白酶酶解效果明显比固定化酶酶解效果要好。比较超声条件下游离木瓜蛋白酶和固定化木瓜蛋白酶酶解产物分子量大小及分布情况发现:游离木瓜蛋白酶超声条件下酶解肽主要分布在180~1000 Da、1000~5000 Da这两个范围内,而固定化木瓜蛋白酶超声条件下酶解肽在<180 Da所占比例比较大。