柿子皮提取物的抗氧化活性

为评价柿子皮提取物(persimmon peel extracts,PPE)的抗氧化活性,采用不同的抗氧化评价方法以及Fe2+-H2O2或Fe2+-VC诱导的离体鼠肝线粒体损伤模型。结果显示：PPE具有良好的总抗氧化活性、还原力、脂质过氧化抑制力以及自由基清除能力;清除DPPH自由基、超氧阴离子自由基(O2·)、羟自由基(·OH)的IC50值分别为57、137、425μg/mL;另外,PPE能显著地抑制线粒体脂质过氧化、肿胀、蛋白氧化和ATPase活性降低。说明PPE有明显的体外抗氧化活性,有可能作为一种天然抗氧化剂的新原料。     

苦荞壳提取物抗氧化活性研究

目的:研究苦荞壳提取物的抗氧化活性。方法:通过研究苦荞壳提取物对小鼠红细胞溶血性、小鼠红细胞MDA生成、肝脏自发性脂质过氧化、Fe2+-H2O2诱导的肝脏脂质过氧化、以及小鼠肝脏线粒体肿胀的影响探讨了苦荞壳提取物的抗氧化活性。结果:苦荞壳提取物显著抑制小鼠肝脏自发性脂质过氧化和Fe2+-H2O2诱导的肝脏脂质过氧化,抑制率分别达到38.1%和24.0%,并对Fe2+-VC诱导的小鼠肝线粒体肿胀具有显著的抑制作用;苦荞壳提取物不能抑制小鼠红细胞溶血,但可以抑制红细胞MDA的生成。结论:苦荞壳提取物具有抗氧化活性;     

杜仲内生球毛壳菌发酵产物抗脂质过氧化和保护红细胞的研究

对所筛选的一株具有较高抗氧化活性的杜仲内生球毛壳菌的发酵液提取物进行体外抗脂质过氧化和抑制小鼠红细胞溶血氧化的研究。结果表明：杜仲内生球毛壳菌的发酵液提取物对小鼠肝、肾、心和脾组织的脂质过氧化的抑制效果随着发酵提取物浓度的增加而不断增强,1mg/ml 发酵提取物对小鼠心和脾两种组织脂质自发过氧化的抑制率分别为71.55% 和71.68%,对H2O2 诱导的肝组织脂质过氧化的抑制率达到92.50%;0.3mg/ml 的发酵提取物对小鼠红细胞自氧化溶血的抑制率为68.48%,对H2O2 诱导的小鼠红细胞氧化溶血的抑制效果则随着浓度的提高而增强,0.75mg/ml 浓度的抑制率达到96.12%。结论：杜仲内生球毛壳菌发酵液提取物在体外有较显著的抗脂质过氧化作用和通过降低氧化溶血而保护红细胞的作用。     

阿魏酸体外抗氧化作用研究

为研究阿魏酸的抗氧化作用,以分光光度法测定其对红细胞溶血和肝线粒体肿胀的保护作用;用TBARA法测定其对血清自氧化、肝匀浆自发性及Fe2+ 诱导性脂质过氧化的抑制作用;并测定其对·OH、O2·以及DPPH自由基清除能力和对铁离子的还原能力。结果表明：阿魏酸对Fe3+ 具有很强的还原能力,相对还原力是VC 的2倍;能有效清除Fenton 反应生成的·OH 和次黄嘌呤- 黄嘌岭氧化酶系统产生的O2·以及DPPH 自由基,其IC50分别为1.09mmol/L、0.62mmol/L 和23.56μmol/L;对红细胞溶血和血清自氧化均具有很好的保护作用,并能有效的抑制肝匀浆自发性和Fe2+ 诱导性脂质过氧化。这些结果说明阿魏酸具有明显的抗氧化活性。     

党红饮体外保护线粒体功能评价

目的：探索党红饮(CVD)的健康益处,研究其清除活性氧自由基特性并对线粒体损伤有保护作用。方法：分别用AlCl3比色法和酸苯酚法测定CVD的功能因子总黄酮及党参多糖含量。以Fe2+-VC诱发肝线粒体脂质过氧化,采用TBA显色法测定硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)含量;以还原型辅酶I-吩嗪硫酸甲酯(NADH-PMS)为超氧阴离子自由基(O2－ ·)生成系统,过氧化氢(H2O2)-Fe2+体系为羟自由基( ·OH)生成系统,分别用氮蓝四唑(NBT)还原法和Fenton反应显色法测定CVD清除O2－ ·及 ·OH的能力;用Na2S2O3滴定法测定CVD清除过氧化氢的能力;用Ca2+诱导肝线粒体通透性转换(PT),用分光光度法测线粒体的PT程度。结果：CVD总黄酮含量为(95.2±6.3)μg/mL,党参多糖含量为(7.5±0.4)mg/mL。线粒体与Fe2+- VC 体系共同温育,可使TBARS生成量显著增加,而加入CVD可明显抑制TBARS生成;CVD能在一定质量浓度范围内明显清除超氧O2－ ·、 ·OH和过氧化氢,并均呈剂量-效应关系;另外,Ca2+引起的线粒体PT可通过加入CVD而一定程度抑制其PT的发生。结论：CVD能通过抗氧化及清除活性氧来保护线粒体免受损伤,具有保护机体的功效。     

草苁蓉多糖抗氧化活性研究

研究草苁蓉多糖(BRPS)的抗脂质过氧化活性。以铁还原法检测BRPS的总抗氧化能力,以硫代巴比妥酸(TBA)法测定H2O2、Fe2+以及.OH所致肝匀浆丙二醛(MDA)生成量。结果表明,BRPS具有较强的总抗氧化能力,其总抗氧化能力随浓度增高而升高,回归方程为y=21.988x+1.1247,R2=0.9996;呈量效关系。同时,BRPS可浓度依赖性地抑制H2O2、Fe2+以及.OH诱导的肝匀浆和肝线粒体体系的脂质过氧化作用。提示,BRPS具有体外抗脂质过氧化活性。     

祁州漏芦水提物体外抗氧化活性研究

以高铁还原法检测祁州漏芦水提物(RUWE)的总抗氧化能力,以水杨酸法检测RUWE的羟自由基(.OH)清除率,以硫代巴比妥酸(TBA)法测定RUWE对肝线粒体的抗脂质过氧化作用。结果表明,RUWE的总抗氧化能力随其浓度增高而升高,呈量效关系。同时,RUWE浓度依赖性地清除羟自由基,抑制H2O2和Fe2+诱导的肝线粒体脂质过氧化作用。表明RUWE具有体外抗氧化活性。     

新疆黄芪抗氧化活性研究及保健作用评价

采用Fe2 -半胱氨酸系统诱发小鼠不同器官微粒体脂质过氧化反应,以分光光度法测定脂质过氧化物含量;以Fenton反应检测阿克苏黄芪多糖清除羟自由基能力;以氨基酸分析仪测定其氨基酸含量。研究新疆阿克苏黄芪的氧化活性及保键作用。结果:阿克苏黄芪不同提取物中均有对抗肝、脑、心微粒体脂质过氧化作用,而且醇提部分比水提部分作用强。结论:阿克苏黄芪具有抗脂质过氧化作用和清除羟自由基(·OH)作用,抗脂质过氧化作用与蒙古黄芪相当,具有较好的保健功能。     

水飞蓟寡肽对小鼠肝线粒体损伤的保护作用

研究水飞蓟寡肽对羟自由基(·OH)致小鼠肝细胞线粒体氧化损伤的保护作用。采用·OH诱导小鼠肝细胞线粒体氧化损伤,通过测定线粒体肿胀度、丙二醛含量、琥珀酸脱氢酶及ATP酶活性、线粒体膜电位和膜流动性等指标,研究水飞蓟寡肽对·OH引起的体外氧化损伤的保护作用。结果表明水飞蓟寡肽可显著抑制小鼠肝细胞线粒体的肿胀,降低丙二醛的含量,可显著增强琥珀酸脱氢酶和ATP酶活性,维持线粒体膜电位和膜流动性,在试验剂量范围内,以高浓度组效果最好。研究证明水飞蓟寡肽可以抑制·OH所致的小鼠肝细胞线粒体氧化损伤,其机制可能与清除自由基、抑制脂质过氧化有关。     

祁州漏芦不同溶剂提取物抗氧化活性的比较研究

研究祁州漏芦的体外抗氧化活性。以高铁还原力法检测总抗氧化能力,以水杨酸法检测羟自由基(.OH)清除率,以硫代巴比妥酸(TBA)法测定H2O2和Fe2+诱导的肝匀浆丙二醛(MDA)生成量。结果表明,漏芦不同溶剂提取物均具有较强的总抗氧化能力和清除羟自由基能力,可抑制H2O2和Fe2+诱导的肝匀浆脂质过氧化的发生,且呈剂量依赖性。其中,漏芦正丁醇萃取物(RUBF)的抗氧化活性高于水萃取物(RUAF)。因此,祁州漏芦具有体外抗氧化活性。     

槐树内生真菌抗氧化活性的初步研究

为了确定槐树内生真菌的抗氧化活性,利用抗氧化能力(T-AOC)测试盒初步测定了分离自槐树的12个内生真菌菌株的总抗氧化活性,进而采用碘量法比较了总抗氧化活性较高的菌株的抗氧化能力及其动态变化。结果表明,供试的12株槐树内生真菌均有不同程度的抗氧化活性,4个菌株的抗氧化活性较高,7号菌株最高,达12.54U/ml;30号菌株经碘量法测定反应10d后的过氧化值仅为39.13meq/kg,说明其抗氧化活性较高且较稳定。本研究的结果预示着槐树内生真菌在探寻天然抗氧化活性产物中具有重要价值。     

三种海藻内生真菌的分离及其抑菌活性研究

从烟台浅海处采集到的鼠尾藻、裙带菜、海带三种海藻表面消毒后用PDA培养基将内生真菌进行分离纯化,将纯化的内生真菌进行液体培养7d后离心,菌丝体烘干研磨后用无水乙醇提取,分别测定发酵液和菌丝体乙醇提取物对七种植物病原真菌的抑菌活性。结果表明:三种发酵液都至少对三种病原菌有大于50%的抑菌活性,裙带菜发酵液对六种病原菌都有大于50%的抑菌率,最高为78.8%,说明它们能产生广谱高效的胞外代谢产物;而菌丝体提取物的抑菌活性并不明显,说明三种海藻内生真菌产生的胞内代谢产物无明显的抑菌活性。     

酸橙内生菌Bacillus thuringiensis Bt028几丁质酶的分离纯化及其酶学性质

为揭示酸橙内生菌Bacillus thuringiensis Bt028几丁质酶的基本酶学性质,采用离心、硫酸铵盐析、葡聚糖凝胶G-100层析及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法对菌株Bt028发酵液中的几丁质酶进行分离纯化鉴定,并考察该几丁质酶的最适温度、最适pH、催化动力学参数等性质。结果表明,Bt028菌株发酵液经离心、硫酸铵盐析、葡聚糖凝胶G-100层析分离纯化后获得电泳纯几丁质酶比活力为681.78 U/mg,纯化倍数为3.21,回收率15.52%。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,几丁质酶的分子质量为65 kDa。酶学性质研究结果表明,该酶的最适反应温度为60 ℃,最适反应pH为6.5,在温度低于60 ℃、pH5.5~7.5时有较好的稳定性;Mg2+、Ca2+、Hg2+、Co2+对该酶活力有抑制作用,而Cu2+和Fe3+有一定的促进作用;低浓度的甲醇、乙醇、正丙醇和二甲亚砜使酶的活性增加,但当浓度继续增大,反而会抑制酶的活性;丙酮对几丁质酶有激活作用,而甲醛对几丁质酶有抑制作用。在最适催化条件下,几丁质酶催化反应的米氏常数Km、最大反应速率Vmax、酶的转换数Kcat分别为29.533 mg/mL、108.696 μmoL/(L·min)和0.527/min。研究结果可为该酶的实际应用提供必要的工艺参数。     

黑木耳多糖清除活性氧及保护线粒体

目的:观察黑木耳多糖(AAP)是否具有清除超氧阴离子(O-2•)、抗氧化、保护线粒体作用。方法:以Fe2+-L-半胱氨酸(L-Cys)体系体外诱发鼠肝、脑线粒体及匀浆脂质过氧化并导致线粒体肿胀。以还原型辅酶I-吩嗪硫酸甲酯-氮蓝四唑(NADH-PMS-NBT)系统产生O-2•,用分光光度法测定脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量、线粒体肿胀度和O-2•的清除情况。结果:黑木耳多糖可明显抑制MDA生成及线粒体肿胀,并能明显清除O-2•,且呈剂量效应关系。结论:黑木耳多糖具有清除超氧阴离子、抗氧化及保护线粒体功能。     

天竺桂挥发油对小鼠的体外抗氧化作用研究

目的:通过提取天竺桂挥发油,对小鼠进行体外的抗氧化的实验,研究天竺桂挥发油的抗氧化作用。方法:使用ROS测定试剂盒测定挥发油的抗活性氧能力;使用丙二醛(MDA)测定试剂盒和GSH-Px活力测定试剂盒测定天竺桂挥发油对小鼠体外MDA含量的影响;用分光光度法来测定天竺桂挥发油对H2O2所诱导的小鼠红细胞溶血和Fe2+-Vc诱导的肝线粒体肿胀度的抑制效果;通过化学方法考查了天竺桂挥发油清除DPPH自由基以及羟自由基的能力。结果:挥发油在浓度为0.25%～1.00%的范围内,有较强的体外抗氧化性,且能减少小鼠肝匀浆和心脏匀浆MDA的含量,对H2O2诱导的小鼠红细胞溶血和由Fe2+-Vc诱导的肝线粒体肿胀度均具有显著的抑制作用,具有较强的清除DPPH自由基以及羟自由基的能力。     

降香内生真菌代谢产物对H2O2诱导的HepG2细胞氧化损伤保护作用

由降香树皮中分离筛选获得一株抗氧化活性较好的内生真菌JXP21,通过ITS-rDNA序列比对及系统发育分 析对其进行分类鉴定,初步鉴定为链格孢菌（Alternaria alternata）,ITS-rDNA序列与GenBank登录号KP979753.1 具有100%的相似性。通过高效液相色谱串联二级质谱对其代谢产物进行检测,检测到了化合物染料木素。进一步 探讨了内生真菌JXP21代谢产物对H2O2诱导的HepG2细胞氧化损伤的保护作用,以200 μmol/L H2O2制备HepG2细胞 氧化应激损伤模型,检测在不同质量浓度（0、10、20、40、80 μg/mL）内生真菌代谢产物的保护作用下,对细胞 丙二醛（malonic dialdehyde,MDA）含量、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和谷胱甘肽过氧化物 酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力的影响。结果表明：内生真菌代谢产物作用于HepG2细胞后,能够降低 H2O2诱导损伤引起的MDA含量的升高,MDA含量由4.65 nmol/mg pro下降为3.68 nmol/mg pro;提高SOD和GSH-Px 活力,SOD活力由6.88 U/mg pro升高至8.64 U/mg pro,GSH-Px活力由8.45 U/mg pro升高至9.68 U/mg pro。表明内生 真菌代谢产物对H2O2诱导所致肝细胞氧化损伤具有一定的保护作用。     

产白藜芦醇葡萄内生菌的分离与鉴定

从酿酒葡萄梅洛特的葡萄皮、葡萄穗轴及梗中分离出30株葡萄内生菌,经过摇瓶液体发酵后检测发酵液提取物,发现有7株内生真菌具有产白藜芦醇的能力。其中菌株MG1发酵产白藜芦醇的能力稳定、产量高,达97μg/L,其他几株菌株白藜芦醇产量较低且不稳定。对菌株MG1的分类鉴定进行重点研究,结合形态学特征及分子生物检测结果,鉴定其为链格孢属菌。     

罗汉果内生真菌的分离及其发酵产物的抗氧化活性研究

为探究罗汉果内生真菌发酵产物的化学成分及其抗氧化活性,从罗汉果内生真菌中筛选8株菌株的代谢产物进行化学成分试验,用DPPH·清除法和·OH清除法测定发酵产物的体外抗氧化活性。结果表明,8株罗汉果内生真菌发酵产物通过化学成分定性试验,推测可能含有蛋白质、多糖、有机酸、黄酮和醌类等物质。在供试液质量浓度为1 mg/mL时,其中菌株F5发酵液对DPPH·的清除率大小顺序为乙酸乙酯萃取相（96.83%）＞VC（95.77%）＞氯仿相（95.24%）;菌株F5发酵液对·OH的清除率大小顺序为VC（99.36%）＞原液（73.56%）＞水相（61.98%）,表明罗汉果内生真菌发酵产物具有较强的抗氧化作用,并且抗氧化的成分极性较大。     

南瓜中内生菌筛选及其次级代谢产物的分析

目的：为充分开发利用南瓜资源,寻找生产多酚类化合物等活性物质的内生菌。方法：采用组织块分离法、划线分离法及梯度稀释法获得南瓜果肉中的内生菌,并利用平板对峙法对其抑菌活性进行测定,再以南瓜提取液为对照,对各拮抗菌株的发酵液进行薄层层析分析,然后利用高效液相色谱法作进一步检测,从而确定活性物质的种类。结果：从南瓜果肉中共分离到54 株内生菌。通过抑菌实验发现其中12 株对一种或多种指示菌具有抑菌活性,占分离菌株数的22%,其中3 株（25、26、29号）具有较广谱抑菌活性,抑菌率较高,可达（36.73±0.52）%。薄层层析检测表明：25号菌株的发酵产物在比移值（Rf）为0.57时与标准南瓜提取液斑点Rf相同。结论：25号菌株能发酵产生多酚类或类似化合物,这为利用内生菌发酵生产多酚类成分提供了新的思路和途径。     

高产β-甘露聚糖酶菌株的分离鉴定及酶学性质研究

通过初筛和复筛从魔芋种植基地土壤样品中分离筛选高产β-甘露聚糖酶菌株。通过形态学观察、生理生化试验及16S rDNA序列分析对菌株进行鉴定,并对其产β-甘露聚糖酶酶学性质进行研究。结果表明,筛选出一株高产β-甘露聚糖酶的菌株,编号为HTGC-10,被鉴定为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）。菌株HTGC-10在30 ℃、180 r/min条件下液体发酵24 h后,发酵液β-甘露聚糖酶活力为61.75 U/mL。酶学性质的研究结果表明,该菌株所产酶的最适反应pH值为6.0,在中性偏酸环境下稳定性较好,属于偏酸性酶;最适反应温度为55 ℃,热稳定性相对较差;乙二胺四乙酸（EDTA）和金属离子Na+、K+、Mn2+、NH4+、Mg2+、Fe2+、Cu2+、Ca2+对酶活力均有不同程度的抑制作用,其中Cu2+对酶活力的抑制作用最显著。