漆酶高产菌株的筛选及产酶条件优化

以愈创木酚和α-萘酚为底物,采用平板筛选法从河南省各地采集到的土壤样品中分离获得8株产漆酶能力较强的真菌.根据变色圈的大小和颜色深浅挑选出产漆酶能力最强的WJ6菌株,鉴定表明为绿色木霉(Trichoderma viride).确定该菌株发酵产酶的最优条件为:以葡萄糖为碳源,以NH4Cl为氮源,反应温度30 ℃,pH=4.0,Cu2+添加浓度60 μmol/L,在此条件下培养7 d,漆酶活力最大,可达256.6 U/L.     

绿色木霉产纤维素酶条件优化研究

以绿色木霉菌株No.33为实验材料，采用液体发酵方法，对其产纤维素酶进行了研究，结果表明液体发酵最佳培养条件为：在初始pH5．0的条件下，4环接种量，四层纱布封口，32℃培养120h。     

绿色木霉发酵条件的优化

由于绿色木霉的广泛适应性、拮抗的多样性和寄生的广谱性,它是一种很有潜力的生防菌.木霉菌主要通过拮抗作用、竞争作用、重寄生作用、促生作用、溶菌作用等作用机制抑制病原菌的生长.本实验通过研究绿色木霉的最适发酵条件,从中找出合理的发酵条件用于工业化生产.不同的发酵条件会影响绿色木霉的抑菌效果.本实验研究了不同碳源、氮源、初始pH值、接种量、装样量、发酵天数等因素对木霉菌抑菌效果的影响.通过测定不同培养条件下绿色木霉的抑菌率,结果表明,碳源、氮源和pH等对绿色木霉的抑菌效果有明显影响.绿色木霉菌的最适碳源、氮源分别为3.0%葡萄糖和0.2%硫酸铵,在初始pH为6.0,接种量为6%,培养基装样为在250mL三角瓶中60mL装瓶量,和发酵周期为5天时,抑菌效果最佳.本研究结果为高效率、低成本、工业化生产具有生防作用的绿色木霉制剂提供了科学依据.     

绿色木霉HY-07产纤维素酶发酵工艺的优化

以玉米芯、麸皮为主要原料,通过单因子及正交试验对绿色木霉HY-07固态发酵生产纤维素酶的产酶条件进行优化。结果表明,最佳产酶条件为:250 mL三角瓶装料量6 g,玉米芯∶麸皮111∶4,固液比10∶.8,吐温80添加量0.2%,K2HPO4含量0.05%,MgSO4.7H2O含量0.025%,(NH4)2SO4含量1%,pH自然,30℃恒温培养7 d,酶活力可达674.44 u/g,比对照增加了50.8%。     

一株绿色木霉产纤维素酶摇瓶发酵条件优化研究

本文研究了利用纤维素刚果红分离培养基从废纸液里筛选出一株纤维素酶高产菌株,经鉴定为绿色木霉。同时对绿色木霉摇瓶发酵产酶进行了条件优化,实验结果表明其最佳发酵条件为:碳源纤维素粉:麸皮为12g∶8g;氮源(NH4)2SO4:玉米浆:豆饼粉为2g∶2g∶1g;起始pH2.5;接种量8%;转速200r/min;乳糖诱导添加量0.2%;发酵时间4d。在最佳产酶条件下CMCA酶活达到735.06U/mL,比未优化条件下酶活234.21U/mL提高了213.8%。     

产漆酶细菌的筛选、鉴定及产酶条件的初步优化

从甘蔗渣滤泥中筛得一株具有漆酶活性的细菌SYBC star X,通过16S r RNA基因序列分析,并结合生理生化实验及形态学观察,鉴定为考克氏菌属(Kocuria);利用液态发酵法研究了碳源、氮源、金属离子对其发酵产漆酶的影响,确定菌株SYBC star X的最优碳源为15 g/Lα-乳糖,最佳氮源为40 g/L大豆蛋白胨,最适铜离子和锰离子的浓度分别为3 mmol/L和0.4 mmol/L。     

绿色木霉产内切壳聚糖酶的鉴定及酶学性质的研究

以实验室前期从Trichoderma viride XW01微晶纤维素诱导的发酵液中分离纯化的一种新壳聚糖酶组分Csn为对象,采用SDS-PAGE分析、不同反应时间水解产物的粘度测定和薄层层析（TLC）分析、还原糖含量的测定等手段对壳聚糖酶Csn进行了初步鉴定及酶学性质研究,结果显示：Csn的分子量为45ku,最适作用温度和最适pH分别为60℃和pH5.0,在低于50℃、pH4.8～7.5范围内非常稳定;脱乙酰度DD对Csn的催化速率影响显著,其对83%DD的壳聚糖的催化活力最高;金属离子Mn2＋、Mg2＋、Ca2＋、Zn2＋对该酶有明显的促进作用,而Fe3＋、Cu2＋和Hg2＋则对该酶有强烈的抑制作用;该酶的米氏常数为1.10mg/mL,最大反应速度为7.15μmol/mL·min;该酶以内切方式作用于壳聚糖,主要水解GlcNAc-GlcN和GlcN-GlcN之间的糖苷键,水解产物以四糖以上的壳寡糖为主。     

绿色木霉产特定纤维素酶条件优化研究

采用液体发酵方法对绿色木霉菌株No．33产纤维素酶条件进行了研究,确定了菌株产C1、Cx酶的最佳条件,在初始pH值为5．0的条件下,接种量为5％,6层纱布封口,32℃培养120h,该菌株产C,酶活为0．391U／mL,Cx酶活为1．387U／mL,为膳食纤维的生物改性提供了理论参考依据。     

绿色木霉发酵产木聚糖酶的培养条件研究

以玉米芯为主要原料,探索绿色木霉发酵玉米芯产木聚糖酶的培养条件,进一步提高木聚糖酶的酶活。结果表明其产酶最佳培养条件为：接种量为5mL（孢子1．3×10^7个,mL）,初始pH值为6,玉米芯与水质量比为1：2,温度为33℃,在培养到第4d时,其酶活力最高达1537．52U／mL。     

绿色木霉液体发酵产纤维素酶的培养基优化

研究液体摇瓶发酵产纤维素酶的最佳培养基组成。通过单因素实验确定了培养基中氮源、碳源和诱导碳源的种类,采用正交试验确定了培养基中4种主要营养成分的组成。结果表明,摇瓶液体发酵产纤维素酶的最佳产酶培养基的种类和组成为：有机氮源蛋白胨和无机氮源硫酸铵的含量分别为11g／L和13g／L,葡萄糖6g/L,磷酸二氢钾10．5g/L,爆破的稻草为13．4g/L;纤维素酶的滤纸酶活为19．22U／mL。     

绿色木霉发酵强化糖蜜酒精废液活性炭脱色效果的研究

采用绿色木霉菌株对糖蜜酒精废液进行生物处理,并对处理后的废液进行活性炭脱色试验.考察不同活性炭吸附处理条件和不同绿色木霉培养条件对糖蜜酒精废液生物法脱色的影响,并进行了正交实验.结果表明,在绿色木霉接种量为1%(v/v),培养时间为36h,培养温度为26℃,活性炭投加量为5%的条件下糖蜜酒精废液脱色效果最好,透光率达91.57%.     

绿色木霉与黑曲霉混合发酵产纤维素酶的研究

为提高绿色木霉与黑曲霉混合发酵产纤维素酶的能力,进行了黑曲霉接种时间和混合发酵时间的优化。研究了绿色木霉与黑曲霉4株菌单独发酵及混合发酵产纤维素酶酶活的特点,调整黑曲霉NH11-1的接种时间与绿色木霉NM01进行混合发酵来寻找产酶能力最高的时间点。结果表明,黑曲霉NH11-1推迟48 h接种的混合发酵组产酶效果最佳。最佳混合发酵条件为30 ℃、200 r/min恒温振荡培养5 d,滤纸酶活力（FPA）达到242.80 U/mL,是出发菌黑曲霉NH11-1的2.66倍;β-葡萄糖苷酶活力（β-GA）达到297.35 U/mL,是出发菌绿色木霉NM01的1.94倍;β-GA与FPA的比值为1.22,符合纤维素酶水解天然纤维素的最佳比值范围（0.12～1.50）。     

绿色木霉95106固态发酵生产纤维素酶条件优化研究

以稻草粉与麦麸为主料,对影响绿色木霉固态发酵生产纤维素酶的因素,如秸秆粉和麦麸的用量比、固液比、初始pH值、氮源及其浓度、发酵温度和时间等进行了研究.结果显示,稻草粉:友麸比为15∶5、料水比为1∶5、初始pH值为6.0、以0.25％尿素液为氮源、28℃培养72h的产酶活力最高,滤纸酶活和内切酶活分别比基础发酵条件下增加了1.21倍和0.726倍.该研究结果为高效率、低成本、工业化生产纤维素酶提供科学依据.     

一株绿色木霉产纤维素酶的性质研究

摇瓶培养绿色木霉得到纤维素酶粗酶液,分别测定C1酶、Cx酶、β-葡萄糖苷酶的活力并测定温度、pH、底物浓度、金属离子对不同酶组分活力的影响。结果表明不同反应条件对不同酶组分的活力影响各异。     

绿色木霉JD-1固态发酵玉米芯产纤维素酶条件优化

以玉米芯与麸皮为主要原料,对影响绿色木霉（Trichoderma viride）JD-1固态发酵的因素如玉米芯与麸皮的比例、氮源浓度、发酵温度、时间、料水比等进行研究。在单因素试验的基础上,采取正交试验设计进行优化。结果表明,最佳固体发酵条件为即玉米芯与麸皮质量比为7∶3,培养温度30 ℃,料液比1∶2.0（g∶mL）,培养时间96 h,接种量为10%。在此优化条件下,羧甲基纤维素酶活力达8.95 IU/g,滤纸酶酶活力达2.00 IU/g。     

海藻酸钠包埋法固定化绿色木霉的研究

本实验以海藻酸钠包埋法固定化绿色木霉,研究了海藻酸钠固定化的最佳条件和固定化细胞理化性质。3%海藻酸钠包埋1.0×109/ml的绿色木霉的孢子溶液,用8号针头滴入3%CaCl2溶液中固化5h,缓冲液冲洗抽滤后。取10g固定化菌放入50ml/250mlpH为4.5的产酶发酵培养基的三角瓶中,在31℃、180r/min的条件下培养96h可达到最佳固定化效果,菌体经固定化后其耐高温性和耐热稳定性得到较大提高;重复使用六次后产酶率保持在80%左右。     

双真菌偶联固态发酵纤维素酒精的研究

研究了耐酒精绿色木霉与休哈塔假丝酵母偶联固态发酵纤维素酒精的发酵条件,考察菌种混合比例、总接种量、发酵温度与发酵时间对酒精得率的影响。结果表明,在固态酒精发酵过程中,菌种混合比例与发酵温度是影响酒精得率的关键性因素,最佳工艺条件是：绿色木霉与休哈塔假丝酵母菌种混合比例1：1、总接种量15%、发酵温度35℃、发酵时间132h。在此工艺条件下酒精得率为481ml/kg,酒精得率明显提高。     

绿色木霉菌液态发酵产黄色素动力学模型的建立

为构建绿色木霉菌液态发酵产黄色素动力学模型,在绿色木霉菌分批发酵过程中测定了菌体干重、总糖浓度、黄色素色价和pH变化,使用Origin软件将经典发酵动力学方程拟合后得到绿色木霉菌菌体生长、黄色素合成和基质消耗的动力学模型及参数。结果表明,模型与实验数据两者能较好地拟合,可以较好地预测发酵过程。     

响应面优化绿色木霉菌培养基

利用响应面分析法对绿色木霉菌的培养基进行优化。通过测量不同营养条件下绿色木霉菌落生长直径研究其生物学特性,在单因素实验的基础上,选定葡萄糖添加量、丙氨酸添加量和磷酸二氢钾添加量3个因素进行中心组合实验,建立二次回归方程,并应用响应面分析法进行优化。结果表明,绿色木霉菌最佳培养基为葡萄糖2.11 g/dL、丙氨酸0.15 g/dL、磷酸二氢钾0.30 g/dL。在此条件下培养的绿色木霉菌菌落生长直径达到78.00 mm,与预测值77.87 mm接近(CI>95%)。