酶法制备豆粕抗氧化蛋白肽的研究

研究复合酶制备豆粕抗氧化蛋白肽的条件,采用响应曲面实验设计,优化酶解工艺,并采用高效液相色谱法对多肽酶解液进行分离纯化及抗氧化性能的测定。结果表明:胰蛋白酶与碱性蛋白酶的比例为2∶1,制备豆粕抗氧化蛋白肽的最佳酶解条件为:温度60℃,时间1.5h,底物浓度8%,酶用量0.4AU/g,得到蛋白肽含量14.08mg/g。高效液相色谱法分离出3个组分,且组分1的抗氧化效果好于其他组分。      

黑曲霉发酵豆粕制备抗氧化肽研究

研究黑曲霉发酵豆粕制备大豆多肽的工艺条件及多肽的抗氧化性能,并考察多肽的分子质量。结果表明：在接种量为2%、发酵液pH6.0、底物质量浓度9g/100mL、发酵时间34h 的条件下,所得发酵液中豆粕多肽的质量浓度最高,为3.38mg/mL。经凝胶层析分离后得到两个组分的大豆多肽(组分I 和组分II)。大豆多肽清除DPPH自由基和羟自由基活性及对脂质过氧化反应产物的抑制作用与其质量浓度均呈现良好的线性关系,且组分I 优于组分II。大豆多肽组分I 和组分II 的分子质量分别为675.58D 和1625.54D。     

响应面优化酶解核桃蛋白制备抗氧化肽的工艺

为优化碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备抗氧化活性肽的工艺条件,考察酶解条件对酶解产物的抗氧化活性的影响。以羟基自由基的清除率、超氧阴离子自由基的清除率、还原能力为考察指标,使用响应面分析法,研究温度、pH值、底物浓度和酶添加量对制备抗氧化活性肽工艺的影响。经过优化得出最优酶解条件为:温度51℃、pH值8.13、底物浓度3.16%、酶添加量3.30%,在此最优条件下核桃多肽对羟基自由基的清除率为55.93%、对超氧阴离子自由基的清除率为47.85%、还原能力为55.34%。在10mg/mL的浓度下,核桃多肽的还原能力是VC的55.3%,对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别是VC的93.8%和52.2%。     

不同菌种制备大豆多肽的抗氧化活性比较研究

分别采用枯草芽孢杆菌、啤酒酵母菌以及黑曲霉菌发酵豆粕制备多肽,利用SephadexG-15凝胶过滤层析、SDS-PAGE电泳等方法进一步纯化,并对各组分进行抗氧化能力的研究。结果表明:采用枯草芽孢杆菌、啤酒酵母菌以及黑曲霉菌发酵豆粕得到多肽分别为13.512、12.462、14.752mg/mL。通过SephadexG-15凝胶过滤层析分别得到的组分Ⅰ分子质量范围分布在1055.67、1374.16、675.58u,组分Ⅱ分子质量范围分布在2031.49、2283.46、1625.54u。黑曲霉菌制备多肽原液及各组分清除3种自由基的作用较强,且组分1的清除效果好于组分2,其中对脂质过氧化物清除能力大于TBHQ,并与VC相当。      

响应面法优化大豆分离蛋白提取及复合酶解制备活性肽

用碱提酸沉法从大豆中提取大豆分离蛋白,并经单因素及响应面优化法确定大豆分离蛋白最佳提取工艺为碱提时间60 min、碱提温度60℃、碱提pH值11.0、酸沉pH值5.0.使用最佳提取工艺提取大豆分离蛋白提取率为29.25％.用胰蛋白酶、糜蛋白酶分别酶解大豆蛋白产生的肽均具有抑菌活性,而采用胰蛋白酶与糜蛋白酶复合酶解大豆分...     

酶法制备豆清液多肽工艺优化及其抗氧化活性研究

为提高大豆蛋白资源的利用率,考察了不同蛋白酶(木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胃蛋白酶、风味蛋白酶)水解豆清液制备多肽,并选择风味蛋白酶进行工艺优化.以多肽得率为评价指标,探讨酶用量、酶解温度、初始pH和酶解时间对多肽产率的影响,并通过响应面优化提取工艺参数,确定了豆清液水解的最佳工艺条件为:酶用量0.09 g、温度54℃、p...     

大豆多肽微胶囊的制备及抗氧化活性研究

以碱性蛋白酶水解制备所得大豆多肽为芯材、β-环糊精为包埋壁材制备大豆多肽微胶囊.以包埋率为评价指标,通过单因素、响应面优化试验得到制备大豆多肽-β-环糊精微胶囊的最佳工艺条件,并探究大豆多肽微胶囊的抗氧化能力变化.结果 表明:大豆多肽微胶囊的最佳制备工艺条件为壁芯质量比2∶1、包埋时间16 min、包埋初始pH 7.0...     

酶法制备汉麻籽蛋白抗氧化肽

采用不同蛋白酶酶解汉麻籽蛋白,确定Alcalase 2.4L碱性蛋白酶是酶解汉麻籽蛋白制备抗氧化肽的优良酶源。通过单因素和响应面回归分析,得到Alcalase 2.4L碱性蛋白酶酶解汉麻籽蛋白的优化条件为:底物浓度50 mg/mL、水解时间2 h、温度50℃、加酶量2.2%、pH 9.4。优化酶解条件下,水解度约为20%,10 mg/ mL酶解产物的DPPH自由基清除率为82.65%,显示出较好的抗氧化活性。     

鸭肉蛋白源抗氧化肽的酶法制备工艺

以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除率为指标,采用响应曲面法（response surface methodology,RSM）优化胃蛋白酶制备鸭肉抗氧化肽的最佳酶解工艺条件。结果表明：以底物质量浓度、酶与底物质量比和酶解时间为自变量,以DPPH自由基清除率为响应值,得到的回归方程拟合度高（R2=0.995 7,R2Adj=0.992 7）。其中酶与底物质量比对DPPH自由基清除率的影响最大,其次是酶解时间,底物质量浓度的影响最小。胃蛋白酶的最优酶解工艺条件为底物质量浓度10.89 g/100 mL、酶与底物质量比0.013%、酶解时间3.54 h,此时DPPH自由基清除率的理论值可达84.23%,通过优化验证实验测得,在最优酶解条件下,DPPH自由基清除率的实际值为（83.57±0.20）%。     

超声辅助复合酶酶解制备大豆多肽工艺的优化

以大豆分离蛋白为原料,采用超声辅助复合酶酶解制备大豆多肽,以单因素实验为基础,选择复合酶添加量、酶解时间、酶解温度以及酶解p H为自变量,大豆多肽得率为响应值,采用响应面分析法研究各自变量及其交互作用对大豆多肽得率的影响,并对大豆多肽的相对分子质量分布进行测定。结果表明,影响大豆多肽得率的各因素强弱顺序为:酶解温度复合酶添加量酶解时间酶解p H;超声辅助复合酶酶解制备大豆多肽的最佳工艺条件为超声功率180 W、超声时间10 min、超声温度35℃、碱性蛋白酶与中性蛋白酶质量比3∶1、复合酶添加量2.04%、酶解时间4.0 h、酶解温度59℃、酶解p H 8.0,在此条件下大豆多肽得率为63.27%,相对分子质量大部分集中在1 000以下。     

混合菌种固态发酵大豆粕生产大豆肽研究

大豆肽系由大豆蛋白经水解所得由3～6个氨基酸残基组成低分子肽混合物,分子量以低于1000Da为主。以大豆粕为原料,采用黑曲霉、米曲霉混合菌种固态发酵法生产大豆肽,所得大豆肽具有较好理化特性和生理活性,克服酶解法产品苦味重、口感差等缺点,可在很多领域得以广泛应用。     

混合菌种固态发酵法发酵豆粕生产大豆肽的研究

大豆肽是由大豆蛋白经水解所得到的由3～6个氨基酸残基组成的低分子肽混合物,分子量以低于1000Da的为主。以豆粕为原料,采用黑曲霉、米曲霉混合菌种固态发酵法生产大豆肽,制得的大豆肽具有较好的理化特性和生理活性,克服了酶解法产品苦味大和口感差等缺点,在很多领域得到了广泛应用。     

大豆源生物活性肽研究进展

与具有相同氨基酸组成大豆蛋白质相比,大豆蛋白酶解物大豆多肽具有许多独特理化特性与生物学活性;目前,从大豆蛋白中已分离出多种纯化大豆生物活性肽,如降血压肽、免疫调节肽、抗氧化肽等。该文对这些大豆活性肽研究进展进行综述,以期为大豆活性肽研究开发提供基础资料。     

液态发酵大豆肽分子量分布与酶分布关系研究

大豆肽在食品和保健品领域应用广泛,是一种颇有前途功能性食品,大豆粕含45.0%～55.0%大豆蛋白,经水解可得由3～6个氨基酸组成功能性大豆肽。发酵过程中,低分子量肽百分含量、肽转化率和酶分布与发酵条件有关,利用枯草芽孢杆菌1389、黑曲霉3.350和米曲霉A–9005发酵大豆粕,通过这些微生物所分泌各种蛋白酶对大豆粕蛋白质合适位点切割,及对某些肽基团和疏水性氨基酸末端进行修饰和重排,可达到降低成本、提高利用率和产率目的。该实验研究枯草芽孢杆菌1389分别和黑曲霉3.350、米曲霉A–9005混合发酵大豆粕制备大豆肽动态发酵过程中低分子量肽百分含量、肽转化率和酶分布之间相关性;结果表明,发酵温度30℃,接种量为10%,底物浓度3%,枯草芽孢杆菌1389与黑曲霉3.350菌种混合比3∶2,发酵36h时,低分子量肽百分含量65%以上,肽转化率70%左右,为最佳发酵条件。     

菌酶协同制备大豆肽的工艺优化及其抗氧化特性的研究

主要研究了枯草芽孢杆菌1398和碱性蛋白酶协同酵解大豆分离蛋白（简称菌酶协同酵解）制备大豆肽的最佳工艺条件及粗提纯样品的抗氧化能力。以大豆肽含量为主要指标,通过对加酶量、接种量、加水量、发酵温度、发酵时间的单因素和响应面实验,确定了菌酶协同制备大豆肽的最优工艺条件:蛋白酶添加量为240U/g、接种量2.0%、加水量165%、培养温度44℃、培养时间36h。在此条件下,大豆肽含量达到（336.8±24.2）mg/g。与实验室制备的酶解肽相比,其DPPH·、O-2·清除率分别提高了106.92%、38.63%。实验表明,菌酶协同处理能够显著提高产物的大豆肽含量及其抗氧化能力。      

豆粕制备ACE抑制肽最优酶筛选及其条件优化

以ACE抑制率为指标,筛选得到碱性蛋白酶水解产物的ACE抑制率远高于中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶。采用正交实验和Box-Behnken实验相结合的方法进一步对碱性蛋白酶的水解条件优化,确定碱性蛋白酶最佳水解条件为:温度60℃,底物浓度为5%,酶浓度为3000U/g,水解时间为4h,pH为8.1。通过验证实验,得到产物的ACE抑制率达到51.91%。     

酶解扁杏仁粕制备抗氧化肽工艺

为优化酶解扁杏仁粕制备抗氧化肽的工艺条件,采用响应面分析法,研究了加酶、底物浓度、温度和p H对酶解扁杏仁粕的影响。以还原力为响应值,优化参数加酶量6725U/g,底物浓度3%、温度60℃和p H8.28。酶解液的还原力为0.743,与模型预测具有较好的拟合性。此工艺制备的扁杏仁抗氧化肽具有较强的体外抗氧化性,且其含有较高的抗氧化氨基酸。      

发酵豆粕制备大豆肽饮料发酵条件的研究

文中对米曲霉液态发酵豆粕制备大豆肽发酵液进行了研究.以发酵液中大豆肽转化率为指标,研究豆粕浓度、碳氮比(C/N)、发酵温度和发酵时间对其影响.正交试验确定最佳的发酵条件,即豆粕浓度为3％、C/N为14、发酵温度为30℃、发酵时间为46h,得到的大豆肽发酵液大豆肽转化率达到55.6％.所得的大豆肽分子量分布在204u～1335u之间的百分比为43.28％.     

酶法制备大豆肽的相对分子量分布及降压作用研究

目的:为了研究双酶复合酶解大豆分离蛋白制备大豆肽的相对分子量分布及活性片段对实验性高血压大鼠的降压效果。方法:通过单因素实验优选,采取正交实验优化复合酶的酶解工艺,以酶解液对血管紧张素转换酶(ACE)抑制率为指标优选最佳工艺;通过超滤、纳滤后得到最佳分子量片段,应用左硝基精氨酸(L-NNA)诱导大鼠高血压模型,分别给予不同剂量的活性片段进行实验。结果:双酶复合酶解的最佳条件为:在料液比为1:20 g/mL的情况下,酶解温度50℃,酶底比3.0%,酶解pH7.0条件下先用菠萝蛋白酶酶解2 h后,再以酶底比4.0%加入胰蛋白酶,控制温度为40℃、酶解pH为8.0条件下酶解4 h,大豆分离蛋白的水解度35.31%。经过高效液相对酶解液的相对分子量分布得出,大豆分离蛋白原液含有的蛋白质及多肽的相对分子质量主要区间在5000~1.0×10⁵ Da,在双酶复合酶解下,酶解液的蛋白质及多肽的相对分子质量主要区间均在500~4000 Da;通过超滤得出最佳活性片段为1000~3000 Da,药理实验表明,与模型对照组相比各组血压均有降低,且大豆肽剂量组有显著性差异(p<0.05);其中大豆肽高剂量组和卡托普利组相当。结论:双酶复合酶解制备的大豆肽相对分子量较小,活性片段对高血压大鼠模型降压作用显著。