酶法提取海参脏器多糖条件优化研究

利用木瓜蛋白酶酶解海参脏器提取多糖,探讨酶解温度、酶解时间、pH值、料液比、加酶量等时海参脏器多糖得率的影响,确定最适提取条件为:酶解温度55℃,pH 8.0,加酶量3.0%,料液比1:30(g/mL),酶解时间4h,在此条件下,海参脏器多糖的得率为14.76%.     

鹿角盘成分提取及其工艺的优化

摸索鹿角盘提取条件,优化提取工艺。利用正交试验考察水提法和酶解法对鹿角盘提取率的影响。水提法:料液比1︰25 (g/mL), 100℃煎煮6 h,提取率为28.11%。单酶酶解法:胃蛋白酶酶解工艺为料液比1︰30 (g/mL),pH 1.8,加酶量4%,酶解温度37℃,酶解4 h,提取率为22.39%;胰蛋白酶酶解工艺为料液比1︰20 (g/mL), pH 8.0,加酶量4%,酶解温度55℃,酶解6 h,提取率为20.99%。复合酶解酶解工艺:先胃蛋白酶,处理条件为料液比1︰20 (g/mL),pH 1.8,加酶量1%,酶解温度37℃,酶解12 h;后胰蛋白酶,处理条件为料液比1︰20 (g/mL), pH 8.0,加酶量0.4%,酶解温度37℃,酶解2 h,提取率可达31.84%。按照复合酶解工艺,对水提法最佳条件下提取后的鹿角霜进行复合酶解,提取率仅为1.33%。利用水提和酶解的方法筛选出鹿角盘的最优提取条件,制备工艺合理。由结果看出,两个方法中得到的提取率差异不明显。复合酶解得到的提取物种类和含量多于水提法的种类和含量。     

东北林蛙卵蛋白酶解工艺及其酶解物的抗疲劳活性

研究复合蛋白酶对东北林蛙卵蛋白的酶解工艺及其酶解物的抗疲劳活性。分别考察pH值、加酶量、固液比、反应时间、反应温度对林蛙卵蛋白水解度的影响,并通过正交试验得到最佳酶解工艺条件：加酶量3000U/g pro、温度55℃、pH8.0、水解时间5h、固液比1:5.5(m/V)。以昆明小鼠为实验对象,通过测定小鼠的负重游泳时间、肝糖原及血乳酸含量,研究东北林蛙卵蛋白酶解物的抗疲劳活性,结果显示最佳优化条件下得到的林蛙卵蛋白酶解物具有较好的抗疲劳作用。     

白鲢鱼排酶解蛋白的制备及营养成分分析

以白鲢鱼排为实验材料,选用风味蛋白酶酶解制备蛋白水解液。考察起始pH值、酶解温度、料液比、加酶量、酶解时间对水解度的影响,采用Box—Behnken中心组合设计和响应面分析法,确定最佳工艺条件。结果表明：最佳工艺条件为起始pH7．59、酶解温度44．9℃、料液比30：100（g／mL）、加酶量4．02％、酶解时间5h,...     

蛋白酶水解蟹腿残肉制备抗氧化肽的条件研究

以蟹腿残肉为底物,研究了不同预处理方式、蛋白酶种类、温度、pH、加酶量及料液比对酶解效果(酶解液水解度及DPPH自由基清除率)的影响,并采用响应面优化法对上述条件进行优化。结果表明:碱性蛋白酶水解脱脂烘干的蟹肉可得到DPPH自由基清除率较高的酶解液,酶解液的水解度及DPPH自由基清除率均受到温度、pH值、加酶量、料液比的显著影响;利用响应面优化得到的酶解条件为:温度55℃、料液比1:19.02 g/m L、加酶量3257.61 U/g、p H8.45、酶解时间3 h,所得水解液DPPH自由基清除率可达到86.36%。     

蒲公英总黄酮复合酶酶法提取工艺及抗氧化活性研究

在考察加酶量、pH值、料液比、乙醇浓度、酶解温度和酶解时间对蒲公英总黄酮得率影响的基础上,进行四因素三水平响应面试验,优化得到蒲公英总黄酮复合酶酶法的最佳提取条件为料液比122(g/mL)、pH 4.5、乙醇浓度52%、酶解温度51℃,该条件下蒲公英总黄酮的得率为15.09mg/g。体外功能性试验显示,蒲公英总黄酮提取液的抗氧化活性及对自由基的清除能力均较强。     

响应面法优化斑点叉尾鮰鱼内脏油的水酶法提取工艺研究

酶解法提油具有提取率高、反应条件稳定、有效成分损失少等优点,本文通过对酶解法提油工艺进行改进,采用水酶法对斑点叉尾鮰鱼内脏油进行提取并对提取工艺参数进行响应面优化。在液料比、加酶量、酶解PH、温度、时间5个单因素试验的基础上,通过数学模型优化的最佳提取工艺参数为:时间75.2min、液料比(mL/g) 1∶1、温度61.51℃、pH7.23、加酶量3 000.06U/g,预测鱼油提取率为87.0%;为便于操作,确定最佳的提取工艺参数为:时间75min、液料比(mL/g) 1∶1、温度61.5℃、pH7.2、加酶量3 000U/g。在最佳条件下,得到的鱼油提取率为86.34%,实际值与预测值基本一致,这表明了响应面法优化得到的最佳工艺参数可信度较高。     

小黄鱼蛋白酶水解工艺研究

以小黄花鱼为原料,以水解度为指标,利用蛋白酶解技术对小黄鱼蛋白进行酶解。单酶水解实验中,选用碱性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶,结果表明,以木瓜蛋白酶酶解小黄鱼其水解度最高,故选择木瓜蛋白酶为最佳酶,并在此基础上进行酶解工艺的研究。小黄鱼蛋白酶解工艺研究中,主要研究料液比、酶解温度、加酶量和酶解时间对水解效果的影响。结果表明,水解度随加酶量、水解时间、料液比以及温度的增加而增加,但在加酶量0.2mg/dL、水解时间4h、料液比1∶3(g∶mL)之前水解度增加速度较快,之后其增加速率明显减慢;从正交实验中得到最佳组合为:水解温度为60℃,水解时间为4h,加酶量取0.2,料液比为1∶5(g∶mL)。各因素对水解度的影响顺序为:料液比>酶解温度>加酶量>酶解时间。经正交实验优化后,其水解度最高可达49.50%。     

水酶法提取榛子蛋白工艺优化

以榛子仁为原料,利用Alcalase碱性蛋白酶水解,进而提取榛子蛋白。以榛子仁总蛋白提取率为指标,对影响因素进行研究。在单因素试验的基础上采用响应面法优化工艺条件,得到最佳酶解条件：加酶量2.0%、温度55℃、酶解时间2.5h、料水比1:5(g/mL)、pH8.9。由F检验可得因素贡献率为x1＞x2＞x4＞x5＞x3,即加酶量＞酶解温度＞料液比＞酶解pH值＞酶解时间。     

蛋白酶水解鸡枞菌制备酶解液工艺优化及抗氧化活性

以鸡枞菌为原料,以DPPH·、ABTS⁺·、O₂^-·清除率及水解度为指标,采用蛋白酶对鸡枞菌进行水解,制备酶解液。以碱性蛋白酶为水解酶,以DPPH·清除率和水解度为参考值,采用单因素和正交试验分析法研究料液比、加酶量、pH、温度、时间对酶解效果的影响。结果表明:应用碱性蛋白酶制备的鸡枞菌酶解液抗氧化效果最佳,酶解条件为料液比1∶25(g/mL),加酶量3500U/g,pH 7,酶解温度45℃,酶解时间2.5h。此条件下所得酶解液的DPPH·清除率为73.23%,水解度为44.6%,酶解液对DPPH·、ABTS⁺·和O₂^-·3种自由基均有清除作用,其IC₅₀分别为0.25,0.39,1.09mg/mL,但清除能力明显低于同浓度Vc的清除能力。     

牛蒡菊糖酶法提取

采用固定化酶法提取牛蒡菊糖。结果表明酶水解提取牛蒡菊糖的最佳工艺为：13.5g/100mL 中性蛋白酶、pH 7、固液比1:15、50℃、酶水解6h,菊糖提取率为14.57%;固定化酶制备最佳工艺为：以甲醛(40%):NaOH(2mol/L)=2:3 为凝结液、pH7.5、壳聚糖2.5g/100mL、60℃、加酶量7.5mg/mL,固定8h,酶活力回收率可达到39.13%;固定化酶提取牛蒡菊糖最适条件为：pH7、固液比1:15、60℃、固定化酶加入量13. 5 g/100mL、酶解5h,在此条件下菊糖提取率达到12.89%。固定化酶的稳定性与游离酶相比有显著的提高,连续反应10 次后,固定化酶仍然具有良好的使用性能,此时牛蒡菊糖的提取率为9.42%。     

采用Box-Behnken设计优化玫瑰花酵素发酵工艺及其抗氧化活性的测定

本研究以玫瑰干花瓣为主要原料,采用复合乳酸菌发酵,优化玫瑰花酵素发酵工艺技术。以发酵时间、初始pH、接种量、发酵温度为考察因素,以SOD（超氧化歧化酶）酶活力及总酚含量作为评价指标,采用响应面优化结合Box-Behnken设计试验获得最佳发酵工艺条件。此外,研究还利用DPPH（1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼）、ABTS（2, 2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）和FRAP（铁离子还原法）法检测玫瑰花酵素液发酵前后的体外抗氧化活性,并测定了玫瑰花酵素液发酵前后的SOD酶活力、总酚含量、黄酮含量、花色苷含量、pH和可滴定酸等指标。结果表明,玫瑰花酵素液发酵最佳工艺条件为:发酵时间68 h,初始 pH 5.4,接种量1 g,发酵温度32 ℃。该条件下测得玫瑰花酵素液SOD酶活力为132.07 U/mL,总酚含量为6.28 mg/mL,总黄酮含量为3.48 mg/mL,花色苷含量为5.64 mg/100 mL,可滴定酸为2.82 g/100 g,较发酵之前均有较大的提高。当发酵前后玫瑰酵素液、8 mg/mL Vc体积分数为0.45%时,DPPH自由基清除率分别为73.32%、83.70%、35.05%,ABTS自由基清除率分别为82.18%、92.74%、52.82%,FRAP值分别为0.25、0.28、0.115。DPPH、ABTS、FRAP三种不同的抗氧化方法结果均表明玫瑰酵素液发酵后的抗氧化能力最强。     

响应面法优化桂皮胶的提取工艺

对高温高压条件下以水作为提取剂提取桂皮胶的工艺进行研究。在粉碎粒度、pH、料液比、提取温度、提取时间5个因素的单因素实验基础上,采用响应面分析法建立多元统计回归模型,考察桂皮胶提取过程中的四个主要影响因子即pH、料液比、提取温度、提取时间及其交互作用对提取量的影响。结果表明高压浸提法提取桂皮胶最佳工艺条件为pH5.0,料液比1:44(g/mL),提取温度125℃,提取时间31 min,在此最佳工艺条件下进行验证得到桂皮胶提取量为186.5 mg/g,与预测值187.1219 mg/g接近。桂皮胶提取物中总糖含量达到96.06%,采用此模型对桂皮胶提取量进行优化具有可行性。     

响应面法优化碱性蛋白酶酶解酱渣的条件

为了更好的利用酱渣中残留的蛋白质物质,设计利用碱性蛋白酶酶解酱渣.利用响应面分析法(RSM)优化碱性蛋白酶酶解酱渣的条件参数.在pH、温度、料水比、酶加量、酶解时间单因素试验的基础上,根据中心组合(Box-Benhnken)试验设计,选择影响较大的三个因素开展响应面分析.通过Design-Export软件分析得到回归模型并进行方差分析,得到最优工艺参数是:酶解pH 10.03,温度47.20℃,料水比1:3.39,酶加量200 U/g.在优化工艺参数条件下测得的蛋白水解度为4.45％,与理论预测值相对误差仅0.45％,说明回归方程与实际情况拟合较好.最优酶解条件的蛋白水解度较对照(2.86％)提高了55.59％.     

天麻化学成分研究进展

本研究以天麻为研究对象,优化复合酶法处理天麻工艺,利用课题组自主分离的植物乳植杆菌STDA6作为发酵菌剂制备发酵天麻口服液,采用正交试验优化乳酸菌发酵天麻口服液的制备工艺。结果表明,将果胶酶、纤维素酶、单宁酶和α-淀粉酶等比例混合后对天麻进行酶解处理,复合酶酶解最佳工艺条件为：料液比（g:mL）1:11,加酶量0.4%,pH4.0,酶解温度50 ℃,酶解时间180 min;乳酸菌发酵天麻口服液的最佳工艺条件为：接种量1×10⁵ CFU/mL,发酵时间12 h,发酵温度37 ℃,蔗糖添加量10%,采用上述工艺制备的乳酸菌发酵天麻口服液乳酸菌活菌数为2×10⁸ CFU/mL,pH为3.5,菌落总数<10 CFU/mL,大肠菌群、霉菌和酵母菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌均未检出,符合GB/T 31326-2014《植物饮料》的相关要求。     

D-塔格糖3-差向异构酶的固定化研究

从14种离子交换树脂和吸附树脂中,筛选出固定化效果较好的大孔弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂D301-Ⅲ为载体,以戊二醛为交联剂,通过先吸附后交联的方法对D-塔格糖3-差向异构酶的固定化进行研究。结果表明,最佳固定化条件为:加酶量为2.00mL/g（粗酶液/树脂）,吸附pH7.5,吸附时间为8h,吸附温度为30℃,戊二醛浓度为0.05%,交联时间为3h,固定化酶活回收率可达50%以上。固定化酶重复使用10次,酶活仍能稳定保持在初始酶活的65%以上,具有良好的操作稳定性。      

超声辅助酶法提取柚子皮多糖工艺的响应面优化

以柚子皮为原料,采用超声辅助酶法提取柚子皮多糖。为提高柚子皮多糖提取率,通过响应面法对提取条件进行优化。实验结果表明:柚子皮多糖的最适提取条件为料液比1∶30 g/mL、pH6、加酶量为1.7%、纤维素酶与果胶酶之比1∶1、酶解时间1.2 h、酶解温度50 ℃、超声时间29 min、超声温度70 ℃。在此条件下,柚子皮多糖的平均提取率为82.4%,得率为27.3%,得到的粗多糖纯度46.2%。     

葵花籽多肽的制备及其降压活性研究

试验以低温脱脂葵花籽粕为原料,进行脱脂和脱绿原酸处理后,用碱性蛋白酶制备葵花籽多肽。以水解度和ACE抑制率为评价指标,对底物浓度、加酶量、酶解温度、酶解时间和pH值进行单因素试验,在此基础上采用响应面试验优化碱性蛋白酶制备葵花籽多肽的最佳水解工艺。结果表明:底物浓度为15g/mL、加酶量为3 700U/g、酶解温度为56℃和pH值为8.2的条件下水解3h,ACE抑制率可达63.74%。     

一株产胶原蛋白酶细菌的鉴定及产酶条件优化

采用形态学特征、生理生化特征结合16S rDNA对一株产胞外胶原蛋白酶的菌株AL-13进行鉴定。获得安全、高效、高产量的生产胶原蛋白酶工艺。以胶原蛋白酶活性为指标,采用单因素实验优化温度、pH、接种量等产酶培养条件后,利用单因素结合响应曲面法优化产酶培养基。结果表明,AL-13鉴定为侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus),最适产酶培养条件为:培养时间48 h、培养温度25 ℃、初始pH8.0、接种量6%(v/v),最适产酶培养基为:葡萄糖8.14 g/L、牛肉膏11.63 g/L、氯化钙0.17 g/L、磷酸氢二钾2.08 g/L、氯化钠9.48 g/L,在该产酶条件下胶原蛋白酶活力预测值为154.89 U/mL,验证结果显示酶活为(153.06±3.73) U/mL,此结果与预测值接近,相对误差为0.04%。本实验成功优化了一株产胶原蛋白酶细菌的产酶条件,产酶条件优化后的酶活(153.06 U/mL)较优化前(16.14 U/mL)提高了9.5倍。     

酶法水解鲢鱼蛋白的研究

研究鲢鱼蛋白酶解液制备的工艺条件,采用正交试验着重探讨蛋白酶酶量、酶解时间、酶解温度、初始pH值、固液比对鲢鱼蛋白酶解效果的影响.结果表明,最佳酶解条件为:中性蛋白酶:木瓜蛋白酶=2:1(质量分数),底物浓度为固液比1:2(g/mL),酶添加量为底物浓度的1.6%,初始pH7.0,温度50℃,酶解时间5 h.酶解后,水解度为68.71%,氨基氮为67.3 mg/100 mL,可溶性蛋白得率可达70.02%.