HPLC法研究布洛芬混悬液在大鼠体内的药动学

建立布洛芬体内分析方法,研究儿童用布洛芬混悬液"美林"在大鼠体内药代动力学特征。以SD大鼠为实验动物,灌胃给予美林混悬液37.5 mg/kg(以布洛芬计)。采用高效液相色谱法测定布洛芬血药浓度,并用DAS 3.2.8软件计算药动学参数。结果表明,布洛芬体内分析方法专属性强,灵敏度高,符合生物样品测定方法,体内药动参数T_(max)、C_(max)分别为(1.21±0.64)h、(49.53±15.29)μg/mL,AUC_(0-t)和AUC_(0-∞)分别为(343.49±96.16)μg/mL·h~(-1)、(352.37±87.28)μg/mL·h~(-1),表明制剂在体内持续释放并吸收。     

吡蚜酮在大鼠体内的毒代动力学研究

采用LC-MS/MS分析方法研究不同染毒剂量下吡蚜酮在SD大鼠体内的毒代动力学特征。色谱柱为Phenomenex Luna C18(50mm×4.6mm,5μm),采用ESI离子源,定量离子对为218.30/105.30。结果表明,大鼠经口灌胃给予吡蚜酮后,由统计矩参数表示的低、高两个剂量组(100mg·kg-1、1 000mg·kg-1)主要毒代动力学参数如下:达峰时间(tmax)分别为4h和2h;峰值浓度(cmax)分别为36 180μg·L-1和69 388μg·L-1;消除半衰期(t1/2β)分别为18.972h和33.177h;表观分布容积(Vz)分别为2.65L·kg-1和8.236L·kg-1;体内总清除率(CLz)分别为:0.107L·h-1·kg-1和0.266L·h-1·kg-1;毒时曲线下面积[AUC(0~t)]分别为652 604.71μg·h·L-1和1 674 767.1μg·h·L-1;AUC(0~∞)分别为931 164.77μg·h·L-1和1 876 484.6μg·h·L-1。在毒性剂量下,吡蚜酮在大鼠体内的毒代动力学过程具有非线性动力学特征。值得注意的是,1 000mg·kg-1剂量组消除半衰期较长,易发生蓄积。该分析方法适用于大鼠血浆中吡蚜酮的测定。     

静脉注射柚皮苷在大鼠体内药代动力学研究

目的:建立LC/MS/MS法测定大鼠血浆中柚皮苷浓度,并考查其药代动力学特征。方法:采用Sepax HP-C18色谱柱:(100 mm×2.1mm,5μm),以甲醇-2 mmoL·L~(-1)醋酸铵溶液(65︰35)为流动相;流速:0.3 mL·min~(-1)。离子源为ESI源,正离子模式进行检测。结果:大鼠静脉注射给药柚皮苷后,血浆中可以迅速检测到大量的柚皮苷与少量的代谢产物柚皮素。柚皮苷的Tmax为0.083 h,达峰浓度C_(max)为56583.33 ng·mL~(-1);柚皮素葡萄糖醛酸结合物的T_(max)为12h,达峰浓度Cmax为653.68ng·mL~(-1)。结论:该方法选择性强、灵敏度好,可用于测定大鼠生物样本中柚皮苷及其代谢产物柚皮素的浓度。     

HPLC测定千里光提取物及千柏鼻炎胶囊中金丝桃苷在大鼠体内的血药浓度及药动学研究

目的:建立RP-HPLC测定大鼠血浆中金丝桃苷浓度的方法,研究千里光提取物及千柏鼻炎胶囊中金丝桃苷的在动物体内药动学特征,评价复方中药物配伍对金丝桃苷药动学的影响。方法 :大鼠分别灌胃给予千里光提取物、千柏鼻炎胶囊内容物,眼眶后静脉丛取血,离心得血浆,加乙腈沉淀蛋白处理后测定金丝桃苷的血药浓度,DAS2.0软件处理数据。结果金丝桃苷血浆浓度在0.341～13.64μg·mL~(-1)之间线性关系良好,检测限为0.079μg·mL~(-1),高,中,低浓度样品回收率分别为96.46%,98.62%,98.99%。大鼠灌胃千里光提取物和千柏鼻炎胶囊后的药-时曲线均符合二房室模型。灌胃千柏鼻炎胶囊后测定的金丝桃苷较千里光提取物的Cmax和AUC_(0→∞)分别比其增加了1.25和1.74倍。结论:本研究建立的RP-HPLC测定法,专属、准确、灵敏,适用于千里光提取物及千柏鼻炎胶囊中金丝桃苷的药动学研究。且研究显示,千柏鼻炎胶囊中的其他药材配伍可以促进金丝桃苷的吸收,提高金丝桃苷的生物利用度。     

HPLC法测定乳舒合剂中4种有效成分的含量

采用HPLC法同时测定栀子苷、王不留行黄酮苷、黄芩苷、连翘苷的含量,C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5μm),乙腈-0.3%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长:238 nm,柱温:30℃,进样量:20μL。栀子苷、王不留行黄酮苷、黄芩苷、连翘苷之间分离度均大于1.5;栀子苷在0.051～102μg·mL~(-1)、王不留行黄酮苷在0.107～42.8μg·mL~(-1)、黄芩苷在0.072～72μg·mL~(-1)、连翘苷在0.093～37.2μg·mL~(-1)范围内线性关系良好,r=0.9990～0.9996;回收率为90.44%～93.16%。方法灵敏准确,可用于测定乳舒合剂中4种有效成分含量。     

LC-MS法研究当归四逆汤中芍药苷在大鼠体内的药动学

建立大鼠血浆中芍药苷浓度测定的LC-MS法,考察大鼠灌胃当归四逆汤后,芍药苷在大鼠体内的药代动力学特征。色谱柱为Symmetry C18(50mm×4.6mm,5μm),柱温为30℃,流动相为0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液梯度洗脱,流速为0.35mL/min。质谱条件:电喷雾离子源(ESI),选择性离子检测(SIM),负离子模式。5只雄性SD大鼠按照10g/kg的剂量灌胃当归四逆汤,药代动力学参数采用WinNonlin软件计算。药时曲线下面积(AUC)为(58431.9±6321.3)μg·min/L,最大血药浓度(Cmax)为(382.2±96.5)μg/L,达峰时间(T_(max))为(30.0±0.0)min,半衰期(t1/2)为(76.8±13.5)min。建立的大鼠血浆中芍药苷浓度测定的LC-MS方法准确、简单、灵敏度高、专属性好,适用于大鼠体内芍药苷药代动力学的研究。     

槲皮素嵌段共聚物胶束大鼠体内药动学研究

目的研究槲皮素嵌段共聚物胶束在大鼠体内的药动学。方法采用薄膜分散法制备槲皮素嵌段共聚物胶束。以槲皮素溶液剂为对照,考察胶束大鼠静脉注射后的药动学。采用3p97程序计算药动学参数。结果胶束在大鼠体内过程符合二室模型,其中溶液剂的t1/2β为9.15±4.91 min,AUC为36.55μg·min·m L-1;胶束t1/2β为40.28±2.53 min;AUC为84.97μg·min·m L-1。结论胶束能明显延长槲皮素在体内滞留时间,提高药物的生物利用度。     

对乙酰氨基酚口服混悬液在Beagle犬体内相对生物利用度研究

建立Beagle犬血浆中对乙酰氨基酚的药物浓度测定方法,考察对乙酰氨基酚口服混悬液受试制剂和对乙酰氨基酚口服混悬液(泰诺林)参比制剂的相对生物利用度。采用HPLC-MS/MS测定Beagle犬经口给予对乙酰氨基酚口服混悬液受试制剂和参比制剂(泰诺林)后体内血药浓度,计算两者药动学参数,用SPSS统计软件进行统计分析。结果表明,建立的HPLC-MS/MS检测方法重现性良好且稳定,达到了进行药代动力学试验的要求。对乙酰氨基酚在Beagle犬体内的血药浓度-时间曲线符合二房室模型;受试制剂和参比制剂的平均AUC_((0-t))分别为(10564±3157) mg/m L·h~(-1)和(10539±2643) ng/m L·h~(-1);平均C_(max)分别为(10162±1745)ng/m L和(9213±1315) ng/m L;两制剂的C_(max)和AUC_((0-t))经统计,均没有显著性差异(P0.05),相对生物利用度为100%。以同等给药剂量经口给予Beagle犬受试制剂和参比制剂,二者的生物利用度相同。     

HPLC测定当归芍药散中的芍药苷和芍药内酯苷的含量

目的:建立同时测定当归芍药散中芍药苷和芍药内酯苷含量的方法。方法:采用全波长HPLC,COSMOSIL 5C_(18)-MS-Ⅱ柱(4.6×250mm,5μm),流动相:0.1%H_3PO_4溶液-乙腈(体积比86∶14),检测波长为230nm,柱温为30℃,流速为1mL·min~(-1)。结果:芍药苷和芍药内酯苷分别在7.24～36.20μg·mL~(-1),4.08～20.40μg·mL~(-1)线性关系良好,平均回收率分别为99.00%,96.80%。结论:该法简便、准确、灵敏、重现性好,可用于当归芍药散中芍药苷和芍药内酯苷的同时测定。     

QCM实时监测人脐静脉内皮细胞在不同KRGD浓度自组装膜上的动态粘附

采用自组装及化学耦合技术将细胞粘附分子KRGD(Lys-Arg-Gly-Asp)与3-巯基丙酸(MPA)以及防止细胞非特异性粘附的三乙二醇单-11-巯基十一烷基醚(TGME)修饰于石英晶体微天平(QCM)的金电极上,制备了KRGD-MPA/TGME/Au传感界面;采用QCM实时监测人脐静脉内皮细胞(HUVEC)在不同KRGD浓度(0μg·mL~(-1)、25μg·mL~(-1)、50μg·mL~(-1)、75μg·mL~(-1)、100μg·mL~(-1))自组装膜上的动态粘附过程。结果表明,当KRGD浓度为50μg·mL~(-1)时,QCM频率变化Δf、动态电阻变化ΔR、细胞黏弹性指数CVI(ΔR/Δf)最大,表明该条件下HUVEC在QCM表面的粘附最强,显示出最有组织的细胞骨架结构而最硬;当加入肌球蛋白Ⅱ抑制剂blebbistatin后,粘附有细胞的QCM响应信号减弱,细胞粘附变弱,细胞变软。表明QCM可用于监测不同KRGD浓度自组装膜上HUVEC的动态粘附及细胞-药物作用,从而提供有关细胞粘附强度与黏弹性的动态信息。     

尼群地平片人体生物等效性预研究

以拜耳公司的尼群地平片为参比制剂,评价云南白药集团股份有限公司尼群地平片与参比制剂的生物等效性。采用双周期自身交叉对照设计,将16名受试者随机分为空腹组和餐后组,分别于餐后及空腹服用尼群地平片,采集血浆样品,用LC-MS/MS测定人血浆中尼群地平的浓度,以DAS3.3.0软件计算药动学参数,评价尼群地平片的生物等效性。结果表明,空腹状态下受试制剂与参比制剂的主要药动学参数:Cmax分别为(10.78±5.32) ng·m L~(-1)、(9.69±8.35) ng·mL~(-1),AUC0-t分别为(53.66±25.82) ng·h·mL~(-1)、(40.87±32.12) ng·h·mL~(-1);餐后状态下受试制剂与参比制剂的主要药动学参数:Cmax分别为(17.21±9.02) ng·mL~(-1)、(16.37±10.04) ng·mL~(-1),AUC0-t分别为(50.04±24.57) ng·h·mL~(-1)、(54.60±28.86) ng·h·mL~(-1),空腹状态或餐后状态服药Cmax、AUC的90%置信区间均超出80%～125%。尼群地平两制剂不具有生物等效性,云南白药集团股份有限公司需优化尼群地平片处方和改善尼群地平片生产工艺,提高尼群地平片质量。     

珠子参总皂苷对大鼠成骨细胞的保护作用及其机制初探

离体培养大鼠原代成骨细胞,分别采用MTT法、EdU成像法、测定碱性磷酸酶法、茜素红染色法考察了不同浓度珠子参总皂苷对成骨细胞活力、增殖、分化、矿化等的影响;并采用Western bloting法研究了不同浓度珠子参总皂苷对成骨细胞OPG和RANKL蛋白表达的影响。结果表明,珠子参总皂苷浓度为100μg·mL~(-1)时可提高成骨细胞活力;浓度为50μg·mL~(-1)、100μg·mL~(-1)、200μg·mL~(-1)时可显著促进成骨细胞增殖、分化和矿化;珠子参总皂苷呈浓度依赖性地提高OPG/RANKL相对表达比值。     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中的艾普拉唑浓度

建立大鼠血浆中艾普拉唑浓度测定的高效液相色谱法(HPLC)法,考察艾普拉唑在大鼠体内的药代动力学特征。色谱柱为Diamonsil C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温为室温,流动相为25 m M磷酸氢二钾缓冲液(p H 6.86)—甲醇(40:60,v/v),流速为1 m L/min,检测波长为302 nm,进样量为25μL。6只雄性SD大鼠按照5 mg/kg的剂量静脉滴注艾普拉唑。测定大鼠血浆中艾普拉唑的浓度,药代动力学参数采用DAS ver2.0计算。建立的大鼠血浆中艾普拉唑浓度测定的HPLC方法准确,快速,简单,灵敏度高,重复性好,适用于大鼠体内艾普拉唑药代动力学的研究。     

HPLC-ELSD法测定银杏内酯B脂微球中溶血磷脂酰胆碱的含量

目的:建立HPLC-ELSD法测定银杏内酯B脂微球中溶血磷脂酰胆碱的含量。方法:采用硅胶色谱柱(Platisil Silica,250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-冰醋酸(500∶10,三乙胺调节pH值至6.0),流速为1.0mL·min~(-1),柱温为40℃,检测器为蒸发光散射检测器。结果:溶血磷脂酰胆碱在38.4～480μg·mL~(-1)时,线性关系良好(r=0.9987),平均回收率(n=9)为102.13%,RSD为3.46%。结论:该方法准确,重现性好,可用于银杏内酯B脂微球中溶血磷脂酰胆碱的含量测定。     

芹菜素茶油微乳的制备及其透皮性能的考察

通过溶解度实验和不同辅料之间的配伍实验确定芹菜素茶油微乳的组成成分。通过绘制伪三元相图确定芹菜素茶油微乳的微乳区域。通过星点设计-效应面法确定芹菜素茶油微乳的最优处方:即由22.71%的茶油/GTCC(1∶1,w/w),60.19%Cremorphor RH40,17.1%PEG400组成油相混合物,每克油相混合物中加入35 mg芹菜素,经蒸馏水稀释20倍后得到最终微乳液。初步透皮实验表明,芹菜素茶油微乳12 h单位面积累积经皮渗透量(Q_(12 h))为79.47μg·cm~(-2),透皮速率常数(J)为6.45μg·cm~(-2)·h~(-1),较芹菜素茶油溶液有所提高。     

银杏内酯药代动力学及其剂型的研究进展

银杏内酯是银杏叶的重要活性成分,主要包括银杏内酯A、B、C和白果内酯等,具有调节血压和拮抗血小板活化因子等多种药理作用。本文总结分析了近年来有关银杏内酯药代动力学的研究,主要包括银杏内酯在体内吸收、分布、代谢和排泄的过程。为了提高其生物利用度和药效,现研究者采用多种新剂型、新技术制备银杏内酯制剂。文中归纳总结了银杏内酯制剂的制备和特点,旨在为提高银杏内酯生物利用度的研究提供参考。     

智能手机比色法测定食品和水样中亚硝酸根的研究

在弱酸性条件下,亚硝酸根和对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物,再与盐酸萘乙二胺偶联反应,生成紫红色的偶氮染料,将显色产物点样于微孔板,用安卓智能手机在自制测试盒抓取微孔板内样斑RGB颜色空间数值进行定量分析。在最佳实验条件下,在2.0~25μg·mL~(-1)范围,颜色强度与亚硝酸根离子浓度呈线性关系,线性回归方程为I=8.91 C/μg·mL~(-1)~3.07μg·mL~(-1)(R~2=0.9988)。方法的检出限LOD和定量限分别为0.5μg·mL~(-1)和1.7μg·mL~(-1)。该方法可用于午餐肉、腊肠、榨菜、腌蒜、火腿肠等腌制食品和环境水样中亚硝酸盐的快速测定,加标回收率在95.6%~107.8%之间。该方法具有较高的灵敏度、选择性和重现性,手机测试盒携带方便,易于实现快速现场测定需求。     

HPLC法测定抗结核新药CZYS03-04的有关物质和含量

采用Thermo BDS HYPERSIL C18(250×4.6 mm,5.0μm)色谱柱,流动相A为30 m M磷酸二氢钾溶液(p H值6.8),流动相B为乙腈∶甲醇=50∶50,流速1.0 m L·min-1,检测波长为220 nm,柱温40℃。建立了测定抗结核新药CZYS03-04的含量和有关物质的高效液相色谱方法。主成分及其有关物质分离良好,主成分检测浓度线性范围为0.2838μg·mL~(-1)~425.6469μg·mL~(-1)(r=0.999 9),检测限为0.02 ng(0.001μg·mL~(-1)),定量限为0.08 ng(0.004μg·mL~(-1))。重复性RSD=3.4%(n=6),中间精密度RSD=7.8%(n=9)。样品溶液在24 h内稳定。     

气相色谱法快速测定水体中残留的六种菊酯类农药

建立固相萃取气相色谱法快速测定水体中残留的6种菊酯类农药。水样经固相萃取柱(Supelco HLB)富集,乙酸乙酯洗脱,经气相色谱定量分析,6种菊酯类农药达到良好的分离,待测物浓度在0.05~5.0μg·mL~(-1)范围内线性关系良好,相关系数均不低于0.995;精密度相对标准偏差均小于5%(n=6);定量限分别为甲氰菊酯0.005μg·mL~(-1),氯氟氰菊酯0.005μg·mL~(-1),氯菊酯0.01μg·mL~(-1),氯氰菊酯0.01μg·mL~(-1),氰戊菊酯0.005μg·mL~(-1),溴氰菊酯0.005μg·m L~(-1);加标回收率在80%~120%之间。实验证明,该方法具有简单、准确、快速等优点,可用于测定水体中残留的6种菊酯类农药。     

HPLC-ELSD同时测定知母药材中3种主要皂苷含量

目的:首次建立同时测定知母药材中3种主要皂苷含量的HPLC-ELSD法。方法:采用Diamonsil C18(2)柱(250×4.6mm,5um),流动相为甲醇(A)-水(B),梯度洗脱;流速1.0m L·min~(-1);柱温30℃;蒸发光散射检测器雾化器流速2.0L·min~(-1);漂移管温度50℃;进样量10u L。结果:知母皂苷O、知母皂苷BII、知母皂苷BI浓度分别在64.13~1026μg·mL~(-1)(r=0.9989)、57.15~1028μg·mL~(-1)(r=0.9965)、67.32~1077μg·mL~(-1)(r=0.9998)的范围内呈良好的线性关系。加样回收率平均值为99.43%~102.8%,RSD为1.78%~2.58%。结论:该含量测定方法简便,准确,可靠,能同时测定知母皂苷O、知母皂苷BII、知母皂苷BI 3种有效成分含量。