在乳腺癌细胞MCF-7中紫杉醇诱导硫氧还蛋白结合蛋白-2的表达

探讨紫杉醇在人乳腺癌细胞株MCF-7中诱导硫氧还蛋白结合蛋白-2表达及与其诱导的相关途径．用不同浓度的紫杉醇刺激MCF-7细胞,MCF-7细胞生长受抑制．通过荧光实时定量PCR检测,发现紫杉醇刺激MCF-7细胞后硫氧还蛋白结合蛋白-2mRNA的表达升高．经荧光素酶活性检测,得出紫杉醇诱导硫氧还蛋白结合蛋白-2基因启动子活性的增高．p38丝裂原激活蛋白激酶（p38MAPK）抑制剂,SB203580抑制了紫杉醇诱导的硫氧还蛋白结合蛋白-2mRNA的表达．因此,紫杉醇抑制MCF-7细胞生长,并通过p38丝裂原激活蛋白激酶途径诱导硫氧还蛋白结合蛋白-2表达．     

瓜蒌皮抗肿瘤活性成分的初步研究

采用改进的MTS法来探究瓜蒌皮石油醚相不同极性成分对结肠癌HCT-116细胞和乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用,探讨其抗肿瘤活性。利用硅胶柱色谱制备极性不同的五种成分,改进的MTS法检测细胞的增殖作用,Propidium Iodide染色法分析HCT-116细胞周期;Annexin V-FITC/Propidium Iodide染色法分析HCT-116细胞凋亡。在低浓度情况下发现,瓜蒌皮醚相极性成分促进MCF-7细胞生长,成分E诱导细胞停滞在S-期而起到抑制癌细胞增殖的作用,并且成分C及E抗癌细胞增殖作用是通过诱导细胞凋亡介导的作用机制,并以剂量依赖方式诱导其细胞凋亡。通过硅胶柱色谱制备的石油醚相不同极性成分具有抗肿瘤活性。     

水飞蓟宾对MCF-7和SK-OV-3诱导凋亡作用的不同敏感性

由于肿瘤的异质性,抗肿瘤药物作用不同的肿瘤模型时表现出不同的敏感性和不同的作用机制.将水飞蓟宾分别作用乳腺癌细胞MCF-7和卵巢癌细胞SK-OV-3,研究其对细胞增殖、细胞凋亡的影响及可能的作用机制.与卵巢癌细胞SK-OV-3相比,水飞蓟宾对乳腺癌细胞MCF-7具有明显的细胞增殖抑制及诱导凋亡能力,并都通过激活caspase 3的方式启动凋亡程序.此研究结果将为肿瘤的个体化治疗和临床实验提供可靠的保证.     

柠檬苦素类化合物对人乳腺癌细胞（MCF—7）的生长抑制及细胞周期动力学的影响

为了探讨柠檬苦素 类似物 对乳腺癌细胞MCF－7生长抑制和对细胞周期的影响,应用MTT法和流式细胞仪检测癌细胞株生长和细胞周期。结果显示柠檬苦素类似物明显抑制MCF－7的生长,抑制率高于70％,并随作用时间和剂量增加其效果增加;柠檬苦素可以影响细胞周期G2／M期,柠檬苦素类似物可以明显抑制MCF－7的增殖,并有可能是通过阻滞细胞在G2／M期而降低其生长能力。     

阿霉素耐药的乳腺癌MCF-7／Adm细胞系的建立及其耐药特性

建立肿瘤耐药细胞系是研究肿瘤细胞的重要手段之一,也是探讨肿瘤多药耐药机制及其逆转的基础。采用大剂量间歇诱导法诱导 MCF-7细胞,建立 MCF-7/Adm耐药模型;MTT 法检测耐药倍数;流式细胞术检测MCF-7细胞和MCF-7/Adm细胞中阿霉素的积累量;real-time PCR检测MCF-7/Adm细胞中 A BCG2、A BCC1、A B-CB1基因的表达。结果显示,阿霉素抑制 MCF-7和 MCF-7/Adm 细胞存活的 IC50值分别为0．535μg/mL 和173.275μg/mL ,耐药倍数为324;MCF-7细胞中的阿霉素积累量较MCF-7/Adm明显高;MCF-7/Adm细胞中mR-NA水平 A BCB1基因表达明显上调,A BCG2和 A BCC1基因表达下调。成功获得对阿霉素耐药的人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/Adm ,为进一步研究乳腺癌多药耐药机制及其逆转提供有利工具,并且对乳腺癌化疗药物的筛选具有一定的意义。     

羟基喜树碱联合丝裂霉素诱导人白血病K562细胞凋亡

观察羟基喜树碱与丝裂霉索联合应用对人白血病细胞K562的作用效果,并探讨其机制。不同浓度羟基喜树碱与丝裂霉素单独及联合作用于人白血病细胞K562后,应用台盼蓝拒染法检测细胞生长抑制率,计算合用指数（CI）,流式细胞仪（FCM）检测K562细胞凋亡率,吖啶橙（AO）荧光染色和透射电镜观察凋亡形态学变化。结果表明：单独应用时羟基喜树碱和丝裂霉素的IC50分别是8μ/mL和12．5μg/mL,联合应用时IC50下降为4μg/mL（HCPT）和3．6μg/mL（MMC）,CI=0．78,为协同效应。羟基喜树碱与丝裂霉素单独及联合应用均可诱导K562细胞凋亡。2种药物联合应用时的凋亡率高于各自单独用药。羟基喜树碱与丝裂霉素联合应用可以通过共同诱导细胞凋亡。协同抑制人白血病细胞生长。     

杏酒中有机酸类化合物的RP—HPLC法测定

建立了反相高效液相色谱测定杏酒中有机酸类化合物的方法．以金太阳杏为原料,经液体发酵法精心酿制成的低度杏酒作为检测样品,测定了杏酒中9种有机酸类化合物．采用AgilentC18色谱柱（4．6mm×250mm）分离,流动相2％的甲醇-0．01mol／L（NH4）2HPO4（pH2．8）洗脱,流速1mL／min,检测器波长为210nm,柱温30℃,采用色谱峰保留时间定性,面积外标法定量,并比较了不同杏发酵产品中有机酸的种类和含量,各成分的线性相关系数均大于0．99．方法的回收率大部分都在94％以上,RSD均在3％以下,说明该方法具有快速、分辨率高、重复性好等优点,可用于杏酒中有机酸类化合物的检测．     

阿霉素耐药的乳腺癌MCF-7/Adm细胞系的建立及其耐药特性

建立肿瘤耐药细胞系是研究肿瘤细胞的重要手段之一,也是探讨肿瘤多药耐药机制及其逆转的基础。采用大剂量间歇诱导法诱导MCF-7细胞,建立MCF-7/Adm耐药模型;MTT法检测耐药倍数;流式细胞术检测MCF-7细胞和MCF-7/Adm细胞中阿霉素的积累量;real-time PCR检测MCF-7/Adm细胞中ABCG2、ABCC1、ABCB1基因的表达。结果显示,阿霉素抑制MCF-7和MCF-7/Adm细胞存活的IC50值分别为0.535μg/mL和173.275μg/mL,耐药倍数为324;MCF-7细胞中的阿霉素积累量较MCF-7/Adm明显高;MCF-7/Adm细胞中mRNA水平ABCB1基因表达明显上调,ABCG2和ABCC1基因表达下调。成功获得对阿霉素耐药的人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/Adm,为进一步研究乳腺癌多药耐药机制及其逆转提供有利工具,并且对乳腺癌化疗药物的筛选具有一定的意义。     

半夏凝集素的分离纯化及其对HeLa细胞生长的影响

利用甘露糖-Sepharose4B亲和柱从半夏总蛋白中分离纯化得到一种12kD的半夏凝集素,经质谱分析明确其为半夏凝集素单体。将该12kD凝集素单体作用于体外培养的HeLa细胞,MTT法检测细胞活性并用倒置相差显微镜观察凝集素对HeLa细胞生长状态的影响。结果显示：低浓度（O．004、0．02、0．1mg／mL）半夏凝集素具有一定促进HeLa细胞增殖的作用;高浓度（0．5、1mg／mL）半夏凝集素有一定抑制Hela细胞增殖的作用。     

肺泡巨噬细胞在低氧诱导肺动脉内皮细胞向平滑肌样细胞转分化中的作用

研究低氧条件下肺动脉内皮细胞（PAEC）向平滑肌样细胞的转分化及肺泡巨噬细胞（PAM）在此转分化过程中的作用。将经免疫磁珠法（用血小板-内皮细胞粘附分子PECAM-1做免疫分选标记）纯化后的原代肺动脉内皮细胞分别在常氧（含21％O2、5％CO2和74％N2）和低氧（含1％O2、5％CO2,94％N2）条件下培养1、4、7d,并在低氧条件下用肺泡巨噬细胞条件培养基与肺动脉内皮细胞共培养,用免疫组化法检测平滑肌细胞标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α-SM-actin）的表达,结合形态学观察从而判定有无平滑肌样细胞的转分化。结果显示：随着低氧培养时间的延长,肺动脉内皮细胞转分化为平滑肌样细胞的比率逐渐增加（P〈0．05）;与肺泡巨噬细胞条件培养基共培养后,平滑肌样细胞的转化率明显升高（P〈0．05）。肺动脉内皮细胞中存在具有转分化为平滑肌样细胞潜能的细胞;低氧可明显促进转分化,肺泡巨噬细胞在此转分化过程中起重要作用。     

家蝇蛹凝集素的纯化及对巨噬细胞免疫活性的影响

采用缓冲液浸提、亲和层析、超滤和离子交换4种方法,从家蝇蛹中分离纯化出一种D-半乳糖特异性结合的凝集素（MPL-1）,该组分具有明显的凝血活性和免疫调节活性．聚丙烯酰胺凝胶电泳和高效液相色谱分析结果表明,MPL-1为单一成分的蛋白,其分子质量为80ku．中性红吞噬实验结果显示,此种凝集素能提高巨噬细胞的吞噬活性,其作用效果具有时间和浓度依赖性．扫描电镜（SEM）观察结果表明,MPL-1作用后的巨噬细胞呈现明显的活化状态,证明MPL-1对巨噬细胞具有明显的免疫调节作用．     

响应面法优化家蝇幼虫中抗氧化成分的提取工艺

以家蝇幼虫为原料,以1,1-二苯基苦基苯肼（DPPH）自由基清除率为指标,采用响应面法对其抗氧化成分的提取工艺进行优化．在单因素试验的基础上,采用全因子试验的方法,分别对提取条件中的甲醇体积分数、温度、时间三因素进行研究;通过二次回归方程解得出最佳配比为甲醇体积分数为36％,提取时间为4．8h,提取温度为18℃。经试验表明,在此条件下提取液对1,1-二苯基苦基苯肼（DPPH）自由基清除率为81．9％,与理论值接近．     

凋亡因子（TRAIL）对癌细胞凋亡的机制研究

凋亡因子TRAIL（Tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand）能诱导肿瘤和转化细胞凋亡而不伤害正常细胞.TRAIL与细胞膜上死亡受体（death receptors,DR）结合,引发受体蛋白构象变化,经胞膜内受体死亡域（death domain,DD）募集接头蛋白FADD（Fas associateddeath domain）,再经过FADD的死亡效应域（death effector domain,DED）与凋亡蛋白解酶原-8/10（procaspase-8/10）的DED相互结合,形成DISC（death-inducing signaling complex）,引起凋亡蛋白解酶（caspase）级联反应,促使癌细胞凋亡.目前,可溶性重组人性化TRAIL（rhTRAIL）和抗DR4/5单克隆抗体已进入临床Ⅰ/Ⅱ期实验阶段.但绝大部分癌细胞对TRAIL有耐受或引起耐受,耐受机制主要是由于IAP（Inhibitor of Apoptosis Protein）,Bcl-2（B-cell lymphoma-2）及cFLIP（cellular FLICE/caspase 8-like inhibitory protein,胞质凋亡抑制蛋白）家族蛋白的过表达而产生.因此,为了克服TRAIL的耐受,已有多种小分子IAP和Bcl-2拮抗剂在研发并进行临床实验.至今尚无cFLIP拮抗剂的报导.     

柞树枝化学成分研究

干燥的柞树枝用无水乙醇浸泡提取,浸出液减压浓缩依次用正己烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取,制得正己烷、乙酸乙酯和正丁醇提取物。乙酸乙酯提取物通过硅胶柱色谱、高压液相色谱等方法分离得到7个化合物。依据理化性质和波谱数据分析鉴定它们的结构分别为：（-）-开环异落叶松树脂酚（1）、（-）-表松脂醇（2）、β-谷甾醇葡萄糖苷（3）、（-）-表儿茶素（4）、β-谷甾醇（5）、水杨酸（6）和高根二醇（7）。化合物1、2、4、6和7为首次从该植物中分离得到。     

新型含非共轭单元的光伏材料的合成及表征

基于高性能半导体聚合物给体聚［（2,6-（4,8-双（5-（2-乙基己基）-噻吩-2-基）-苯并［1,2-b:4,5-b’］二噻吩））-alt-（5,5-（1’,3’-二-2-噻吩基）-5’,7’-双（2-乙基己基）苯并［1’,2’-c:4’,5’-c’］二噻吩-4,8-二酮）］（PBDB-T）,通过Stile偶联聚合反应,首次合成了一种含非共轭单元的新型聚合物给体材料聚［（2,6-（4,8-双（5-（2-乙基己基）-噻吩-2-基）-苯并［1,2-b:4,5-b’］二噻吩））-（5,5-（1’,3’-二-2-噻吩基）-5’,7’-双（2-乙基己基）苯并［1’,2’-c:4’,5’-c’］二噻吩-4,8-二酮）-1,3-双（2-噻吩基）丙烷］（PDBS-5）,并将其应用于有机太阳能电池。紫外-可见光谱表明:相比于PBDB-T,非共轭单元的引入降低了PDBS-5吸收光谱中堆积峰的吸收强度,表明分子间π-π堆积减弱;循环伏安测试表明非共轭单元的引入降低了聚合物的能级。基于PDBS-5:IT-4F共混膜制备出能量转换效率达到7.42%的有机太阳能电池。研究结果表明含非共轭单元的聚合物PDBS-5是有潜力的有机太阳能电池给体材料。