低温碱性脂肪酶产生菌的筛选及产酶培养基的优化

以橄榄油为唯一碳源,从渤海湾盐碱地被油污染的土样中分离筛选出1株产低温碱性脂肪酶菌株34-5,初步酶学性质研究表明,该菌所产脂肪酶的最适温度为25℃,最适pH为9．6,该菌的16S rDNA基因序列与伯克霍尔德氏菌（Burkholderia）的同源性为99％摇瓶实验表明,该菌株最适产酶培养基为（g／L）;淀粉10,黄豆饼粉20,玉米浆20,K2HPO4 1,聚乙烯醇大豆油乳化液20．其最高酶活为6．87U／mL。     

具脂肪酶和酯酶活性酵母菌的选育及酶学研究

从青岛市区含油土壤中筛选得到一株酵母S9菌株，它可以同时产生较高酶活的脂肪酶和酯酶．对影响S9产脂肪酶和酯酶的各种因素进行了研究，1％的可溶性淀粉为最佳碳源，最适的初始培养pH和温度分别为pH 6．5和28℃，对S9脂肪酶和酯酶的各种酶学性质进行的研究表明，脂肪酶和酯酶的最适作用温度都为30℃，最适作用pH分别为7．0和8．0，两者都属于常温酶，在30～40℃范围内比较稳定，脂肪酶在中性偏碱的pH环境中比较稳定，酯酶属于碱性酶，在pH 7．5～10．5范围内相当稳定。     

脂肪酶产生菌的筛选及其酶性质

从５６个土样中分离获得２５３株脂肪酶产生菌,其中ＮＱ２３菌株产酶活性最高,从其形态特征确定为根霉属。对该菌株进行紫外线和硫酸二乙酯诱变,酶活力提高５２％。对该菌的产酶条件及部分酶性质进行了研究后发现该菌株所产脂肪酶具有良好的热稳定性,最适作用温度较高,为５０℃左右。     

一株低温碱性脂肪酶产生菌TS182的分离与鉴定研究

通过Tween-80平板初筛和摇瓶发酵复筛,从连云港海域海水及海泥样品中分离的菌株中筛选获得一株低温碱性脂肪酶高产菌株TS182。通过形态学、生理生化以及分子生物学鉴定菌株TS182为荧光假单孢菌（Pseudomonas fluorescens）。菌株TS182所产脂肪酶最适温度和最适pH分别为15℃和9．0。     

一株来源于酒曲的纤溶酶产生茵的鉴定及其酶学性质

从酒曲中分离到一株纤溶酶产生菌,经形态及ITS序列分析鉴定为菊芋小孢根霉（Rhizopus microsporusvar．tuberosus）．酶学性质研究表明,该纤溶酶的最适作用温度为37℃,最适作用pH为7．0．在37℃保温4h酶活力仍保存95％,57℃下保温4h后仍有一定酶活．该酶具有广泛的酸碱适应性,在pH〈3．4时仍残留部分活性;最稳定的pH范围是6～8．Zn2＋、Cu2＋对酶活有抑制作用,Na2＋、Ca2＋、Mn2＋对酶活具有明显的促进作用．该酶在人工肠液中具有较好的稳定性,37℃保温4h后残余酶活仍然保持在80％以上,有望制成注射剂应用于临床。     

土壤中产碱性脂肪酶霉菌的筛选

利用RhodamineB平板筛选模型，以PVA橄榄油为底物的NaOH滴定法为测酶活主要方法，从沈阳化工学院附近含油脂丰富的土壤中筛选得到产碱性脂肪酶能力较高的霉菌M20．对其产酶条件进行优化，最终得到培养基中最佳碳源为葡萄糖2％＋植物油3％，最佳氮源为4％酵母膏，最适初始pH为8．0，最适产酶时间36h，将酶液于4℃下保存，酶活力可在3d内保持稳定．     

产耐温漆酶菌的筛选及培养基优化

采用愈创木酚CPDA平板法对由广州地区多个不同场所采集的土样进行了菌种分离纯化,筛选出1株产耐温漆酶的菌株Tr0702,通过形态学观察初步判断该菌为木霉属．该菌所产漆酶的最适反应温度为65℃,在70℃下保温60min后残余酶活保留60％以上;发酵培养基经响应面法优化后关键参数如下：可溶性淀粉44．40g／L、吐温（80）9．00g／L、愈创木酚15．04mmol／L,以此优化培养基发酵酶活可达50．15U／mL     

脂肪酶固定化工艺

研究了以纸纤维素为载体,对－β－硫酸酯乙砜基苯胺为活化剂共价联法固定化脂肪酶的最适条件及固定化酶的稳定性。结果表明;醚化反应最适ｐＨ为１０．０,偶联最适条件为ｐＨ８．０,酶量控制在８００μｍｏｌ（ｍｉｎ．ｇ）,所获得固定化脂肪酶具有较高的酶活和酶回收率,且有较好的稳定性,其半衰期为３７５ｈ。     

制革污泥中产脂肪酶真菌的筛选及产酶条件优化

通过利用罗丹明B培养基和溴甲酚紫培养基初筛和酶活的测定法复筛,从制革厂含铬污泥（2．77mg／L）中筛选出一株产脂肪酶的真菌,经形态学观察、生理生化测定和分子生物学鉴定,初步鉴定该株菌为子囊菌门煤炱目下Teratosphaeriaceae科的一种,暂定名为Teratosphaneriacen8Crl2．同时对该菌株的摇床培养产酶条件进行了初步优化,得到最佳发酵条件为初始PH值为5．5,培养温度为35℃,种龄18h,接种量为2．5％（v／V）,发酵周期为72h,转速为150r／min,酶活力最高达到8．5U／mL．     

海洋微生物碱性脂肪酶生产菌的分离选育

从海水,海泥,海洋生物的消化道,碱厂土样等43个样品中分离获得碱性脂肪酶产生菌286株,其中Q53菌株产酶能力最高,达11．4IU/mL,初步鉴定为假单孢菌落属,对研究结果进行统计分析表明,D／d值与LA有线性相关关系,对Q53脂肪酶合成影响因素的研究表明,由尿素和玉米浆组成 的有机氮源为产酶培养基的最佳氮源,橄榄油和豆油有利于脂肪酶的合成,而可溶性淀粉不利于酶的合成,产酶最适条件,起始PH9．5,温度31度,摇瓶转速150r/min,发酵周期48h。     

Production and characterization of alkaline extracellular lipase from newly isolated strain Aspergillus awamori HB-03

A strain HB-03 to produce alkaline extracellular lipase was isolated from oil-rich soil samples and identified as Aspergillus awamori.The growth conditions and nutritional factors for lipase production by strain HB-03 were optimized,and the maximum lipase production of (45.9±2.3) U/mL was obtained at 30 °C and pH 7.0 after 36 h using olive oil (1%) and sucrose (0.5%) as carbon sources and combination of peptone (2%),yeast extract (0.5%) and ammonium sulfate (0.1%) as nitrogen sources.The lipase was purified...     

脂肪酶在表面活性剂介质中的催化反应动力学研究

运用三种阴离子表面活性剂（ＬＡＳ,ＡＥＳ,ＡＯＳ）和两种非离子表面活性剂（ＴＸ－１０,ＡＥ０９）进行了试验。表面活性剂与碱性脂肪酶相互作用的结果表明,对于阴离子表面活性剂而言,当表面活性剂浓度较低时激活了酶活,但表面活性剂浓度高于临界浓度时抑制了酶活;     

海参肠碱性磷酸酶的提取及粗酶的特性研究

碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)是最重要的磷酸酶之一,在生物体内直接参与磷酸基团的转移和代谢过程。本文研究了海参肠碱性磷酸酶粗酶的提取,并分析了其酶学特性。经含有0.2%Triton X-100的Tris-HCl缓冲液(pH 8.9)浸提、正丁醇处理、70%硫酸铵沉淀和超滤等步骤获得海参肠ALP粗酶,纯化倍数达到2.74倍,得率为63.32%。ALP粗酶的最适反应pH为11.0,在pH 10.0～12.0稳定性较好;最适反应温度为45℃,在20～45℃具有很高的稳定性。金属离子Mg2+(1～30mmol/L)、Zn2+(<10mmol/L)对海参肠ALP粗酶具有显著的激活作用;Fe3+、Fe2+、Cu2+和Mn2+(10mmol/L)可明显抑制该酶活力。EDTA-Na2、DTT、Na2WO4及Na2HPO4对海参肠ALP粗酶有明显的抑制作用,抑制程度依次为:EDTA-Na2>DTT>Na2WO4>Na2HPO4。     

碱性脂肪酶生产菌假单孢菌4631菌株的筛选

从３２个土样中分离获得碱性脂肪酶产生菌１６６株，其中４６３１号菌株产酶能力最高，达到９．１ＩＵ／ｍｌ。初步鉴定为假单孢菌属。对研究结果统计分析表明，Ｄ／ｄ值与ＬＡ呈线性相关关系。     

仿生合成SiO2载体及其固定脂肪酶的条件研究

采用L-脯氨酸为模板,仿生制备用于固定脂肪酶的二氧化硅载体．SEM、IR表征得知,制备的仿生载体为粒径约3um的SiO2微球,氮气吸附表征得知,SiO2微球内部孔径大小约16．8nm．载体固定脂肪酶的实验结果表明,固定化脂肪酶的相对最佳条件：酶液质量浓度5mg／mL,反应温度40℃,反应时间7h,pH=8,最高固载率可达82．3％,酶活1067U／g载体．     

激光打印废纸脂肪酶脱墨的工艺条件

研究脂肪酶对激光打印废纸的脱墨作用,优化脂肪酶脱墨的工艺条件,并与中性脱墨与碱法脱墨进行比较．结果表明,激光打印废纸的脂肪酶脱墨优于中性脱墨与碱法脱墨．脂肪酶脱墨的最佳工艺条件是：碎浆浓度10％～12％,碎浆温度55℃,碎浆时间40min,酶用量0．03％,浮选时间8min．在适宜的脱墨条件下可使脱墨浆ISO白度达到93．42％,残余油墨面积为O．01％．     

活性炭粒度与吸附条件对脂肪酶固定化的影响

以活性炭为载体固定化脂肪酶,研究了活性炭粒度和吸附条件对脂肪酶固定化的影响。结果表明,随着活性炭粒度减小,其吸附酶量和固定化酶活力增大,但吸附酶量过大会导致酶分子相互凝结,降低固定化酶的催化活性。当酶液质量浓度在0.01~0.05 mg/mL时,提高酶液质量浓度可以提高载体吸附酶量和固定化酶活力。酶液pH和温度仅对固定化酶活力有影响,而对载体吸附酶量无影响。在pH 7.0、30℃和150 r/min振荡条件下,采用40目活性炭吸附0.05 mg/mL酶液1 h,制得的固定化脂肪酶活力达65 U/g。     

High-temperature phase transition and the activity of tobermorite

The high-temperature phase transition of tobermorite was investigated by TGA/DSC, X-ray diffraction and Infrared spectroscopy(IR), respectively. The experimental results showed that Si-OH bonds were cleaved at 724 ℃ and dehydroxylation occured at the same time, implying that the crystal structure of tobermorite was broken. As a result, the dehydroxylation tobermorite was metastable state, exhibiting obviously hydrolysis activity. The suspension was alkaline and Ca2+ ions content reached a maximum value 4.76% after heat treatment at 724 ℃. The dehydroxylation tobermorite had potential reactive activity due to the strong hydrolysis activity. The disordered structure recombined to wollastonite, and the crystal structure became ordering and stable at 861 ℃. Finally, 2M-wollastonite structure can be found in the sample as the temperature reached up to 1 000 ℃.     

离子交换树脂固定化脂肪酶催化合成蔗糖乙酯

南极假丝酵母(Candida rugosa)脂肪酶具有优良的催化性能,对其进行固定化可以很方便地实现酶的回收和再利用.采用4种离子交换树脂为载体,对来源于南极假丝酵母的脂肪酶进行了吸附固定化,并对固定化酶催化合成蔗糖乙酯的活性进行考察.结果表明,以弱碱性丙烯酸系阴离子交换树脂214为载体的固定化酶活性最高.固定化酶制备过程中缓冲液的最适宜pH值为8.4,最佳固定化时间为3h,最佳酶液浓度为8mg/mL,最适固定化温度为35℃.所得固定化酶催化合成蔗糖乙酯,酯化率达57.12%,蔗糖-6-乙酯的选择性达到51.21%.10批反应后,该固定化酶仍有较高的酶活力.