蓝莓中花青素的抗氧化活性研究

本研究通过体外抗氧化实验和细胞损伤模型实验，研究蓝莓中花青素抗氧化能力。采用ABTS自由基清除实验、DPPH自由基清除实验、铁离子螯合能力实验和羟基自由基清除能力实验对100～500μg/mL不同浓度的花青素进行体外抗氧化活性评价。在氧化应激细胞模型实验中，通过测定H₂O₂诱导HepG2细胞中MDA含量、SOD活力、GSH含量探究100～500μg/mL不同浓度花青素对HepG2细胞氧化损伤的保护作用。结果表明，随着花青素浓度的增加，ABTS自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、铁离子螯合能力和羟基自由基清除能力均随之增加，且比模型组具有显著的抗氧化效果(P<0.05)。花青素可减少H₂O₂诱导HepG2细胞氧化损伤时MDA含量，提高HepG2细胞内SOD活力及GSH含量，减少氧化损伤后细胞凋亡情况的发生，对HepG2细胞氧化损伤有一定保护作用。蓝莓中花青素可用于开发功能性食品以及作为食品添加剂用作抗氧化的良好材料，本研究可为花青素资源的开发利用提供理论基础。     

英国红芸豆抗氧化肽组分对H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用

为了探究英国红芸豆抗氧化肽组分的抗氧化作用,采用超滤、葡聚糖凝胶G-15层析技术对碱性蛋白酶酶解英国红芸豆抗氧化蛋白质制备的抗氧化产物进行分级,研究抗氧化活性较高的组分对H₂O₂损伤的PC12细胞的影响。结果表明:抗氧化肽组分BRKBAPC-2能缓解H₂O₂对PC12造成的细胞生长抑制作用,随着肽浓度的提高,细胞内活性氧（ROS）水平,丙二醛（MDA）含量及乳酸脱氢酶（LDH）胞外活力均有所降低,超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力以及还原型谷胱甘肽（GSH）含量均具有所提高,尤其BRKBAPC-2浓度为200 μg/mL时,ROS水平为32.53%,MDA含量为0.96 nmol/μg prot,LDH胞外活力为202.12 U/L,与模型组相比,均极显著降低（P<0.01）;SOD活力为（555.48±3.64）U/mg prot,CAT活力为（14.77±1.30）U/mL,GSH含量为（140.88±8.19）μmol/g prot,与模型组相比,均极显著提高（P<0.01）,此外,其可抑制线粒体膜电位的降低,改善细胞周期的阻滞情况,阻止细胞凋亡关键酶Caspase-3和Caspase-9的激活。可见,抗氧化肽组分BRKBAPC-2对H₂O₂引起的PC12细胞氧化损伤具有一定的保护作用。     

桃胶多糖体内外抗氧化作用的研究

为了研究桃胶多糖体内外抗氧化的作用,实验采用体外测定桃胶多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、2,2'-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐阳离子自由基(ABTS+·)、羟基自由基(·OH)和超氧阴离子(O₂-·)等的清除率及对铁的还原能力,体内通过建立D-半乳糖小鼠氧化损伤模型,给予不同剂量(2、4、6 g/kg)桃胶多糖灌胃,测定血清及肝脏中丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果显示,桃胶多糖体外对DPPH·、ABTS+·、·OH和O₂-·的半数抑制浓度(IC₅₀)分别为6.95、0.56、1.10、0.11 mg/mL,且对铁还原力随着浓度(0.02~0.14 mg/mL)的升高而增大;在体内实验中,与模型组相比,连续服用不同剂量(2、4、6 g/kg)的桃胶多糖能够显著或极显著降低小鼠血清及肝脏中MDA含量、提高T-AOC能力、增强SOD及GSH-Px的活性(P<0.05或P<0.01),同时剂量间存在一定的量效关系。研究结果表明桃胶多糖具有良好的体内外抗氧化活性,可进一步申报成为新型的食品资源,应用于制药与食品工业中抗氧化、抗衰老、降血糖等保健产品的开发。     

福建养殖仿刺参抗氧化多肽的酶解工艺优化及其对过氧化氢诱导的血管内皮细胞EA.hy926损伤的保护作用

目的:优化仿刺参抗氧化多肽的酶解工艺,并研究其对过氧化氢(hydrogen peroxide,H₂O₂)诱导的人脐静脉内皮细胞株EA.hy926损伤的保护效应。方法:以酶解产物的水解度、体外DPPH自由基清除率为指标,筛选出最适蛋白酶;在单因素实验基础上,选取温度、加酶量、pH作为影响因子,以体外DPPH自由基清除率为响应值,结合响应面试验优化酶解工艺条件;进一步探讨酶解多肽体外抗氧化活性。以MTS法检测低、中、高剂量组的仿刺参抗氧化多肽对H₂O₂诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用,以MDA含量、SOD活力测定细胞氧化及抗氧化水平。结果:动物蛋白水解酶为最适蛋白酶,酶解工艺优化条件为:料液比1:20 g/mL、酶解时间2 h、酶解温度50℃、加酶量7000 U/g、pH7.5,该条件下制备的仿刺参多肽体外DPPH自由基清除率为68.81%,与模型预测值(68.35%),相对误差为1%,回归模型可靠。酶解多肽对DPPH自由基、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O₂-·)和ABTS自由基(ABTS+·)的半数抑制浓度IC₅₀分别是9.01、0.63、10.89和20.53 mg/mL,说明其具有较好的体外抗氧化活性。选取200 μmol/L浓度H₂O₂建立细胞损伤模型,与H₂O₂组相比,中、高剂量组仿刺参抗氧化多肽能明显抑制H₂O₂诱导的血管内皮细胞氧化损伤,降低MDA含量,提高SOD活力。结论:采用动物蛋白水解酶酶解优化工艺制备的仿刺参抗氧化多肽对人脐静脉内皮细胞EA.hy926具有显著的保护作用并呈显著的剂量-效应关系。     

羊肚菌菌丝体锌多糖的体内、体外抗氧化作用

对羊肚菌菌丝体通过液体富锌培养获得锌多糖,对其体内、体外抗氧化作用进行了研究。采用Fenton法、 邻苯三酚自氧化法和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）还原法对羊肚菌菌丝体锌多 糖的体外抗氧化性进行了研究。通过腹腔注射D-半乳糖（100 mg/（kg?d））诱导致衰老小鼠为对照组,羊肚菌菌 丝体多糖和羊肚菌菌丝体锌多糖（320 mg/（kg?d））为治疗组。30 d后检测小鼠肝脏、肾脏和血清中超氧化物歧 化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）活力和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含 量,研究羊肚菌菌丝体多糖体内抗氧化作用。羊肚菌菌丝体多糖和羊肚菌菌丝体锌多糖清除羟自由基半数抑制浓度 （half maximal inhibitory concentration,IC50）分别为0.56 mg/mL和0.36 mg/mL;清除超氧阴离子自由基IC50分别为 0.62 mg/mL和0.46 mg/mL;清除DPPH自由基IC50分别为0.68 mg/mL和0.58 mg/mL。羊肚菌菌丝体锌多糖能够提高 衰老小鼠肝脏中SOD和CAT活力,显著降低MDA含量（P＜0.05）,与羊肚菌菌丝体多糖组相比使SOD活力提高了 9.32%,CAT活力提高了36.73%,MDA含量降低了90.71%。羊肚菌菌丝体锌多糖具有更强的抗氧化活性,并在设 定的质量浓度范围呈剂量效应关系。     

沙棘多糖清除自由基及抗脂质过氧化作用研究

目的:探讨沙棘多糖体外清除自由基及抗脂质过氧化作用。方法:采用体外抗氧化活性法测定沙棘多糖对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基清除能力及沙棘多糖总还原能力;制备5%小鼠肝脏匀浆,通过模拟建立体外小鼠肝匀浆自发性脂质过氧化模型、CCl₄体外诱导小鼠肝匀浆脂质过氧化模型、H₂O₂体外诱导小鼠肝匀浆脂质过氧化模型、Fe2+-V_C 体外诱导小鼠肝脏脂质过氧化模型,利用TBA显色法,观察沙棘多糖对脂质过氧化的抑制作用。结果:沙棘多糖对DPPH自由基、OH自由基和超氧阴离子自由基都具有一定的清除能力,其IC₅₀值分别为1.55、1.23、8.31 mg/mL,其浓度为2 mg/mL时,还原能力稍高于同浓度V_C。沙棘多糖对小鼠肝匀浆自发性脂质过氧化及CCl₄、H₂O₂、Fe2+-V_C所诱导的肝脏脂质过氧化均具有抑制作用,其IC₅₀值分别为1.10、1.59、9.13、1.39 mg/mL。结论:沙棘多糖具有一定的抗氧化活性及抗脂质过氧化作用。     

薤白多糖体外抗氧化活性及其对小鼠急性肝损伤的保护作用研究

本文研究了薤白多糖清除各种自由基及其对小鼠急性肝损伤的保护作用。采用浸提、分步醇沉法提取了三种薤白多糖,利用红外光谱初步分析了其结构组成。结果表明：AMP40在清除羟基自由基（?OH）、超氧阴离子自由基（O2-?）等抗氧化评价体系中比AMP60及AMP80具有更强的清除自由基活性,在实验最大浓度时清除率可分别达到40.96%和49.84%;在对小鼠急性化学性肝损伤的保护作用研究中,发现通过预先灌胃200、400和800 mg/kg BW的薤白多糖AMP40,可以抑制肝损伤小鼠血清中谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）活性的升高,同时能使小鼠肝脏中SOD活性、CAT活性、GSH活性以及T-AOC水平显著增加,而MDA含量显著减少（P<0.05或P<0.01）,且这种变化对AMP40呈现一定的剂量依赖关系,表明AMP40具有一定的肝保护作用。研究表明了薤白多糖的抗氧化活性与其分子量大小及糖醛酸含量密切相关。     

双孢菇蛋白粉废料中多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

目的:分析双孢菇蛋白粉废料中多糖组分及抗氧化活性。方法:以双孢菇子实体提蛋白后残渣为材料,采用超声波热水浸提,Sevage法去蛋白,D101大孔树脂除色素和醇沉的方法制备粗多糖,通过DEAE-52层析柱对粗多糖进行分离纯化。通过扫描电镜(SEM)、红外光谱(IR)等方法对纯化后多糖进行理化特性鉴定;采用清除DPPH、超氧阴离子、ABTS自由基实验,以及对H₂O₂处理的酵母细胞的保护作用实验评价其抗氧化活性,并对H₂O₂氧化损伤的酵母细胞上清液中的T-SOD、MDA、GSH-Px三种酶活性进行检测。结果:从双孢菇粗多糖中分离纯化到三种组分,分别命名为ABPS-Ⅰ、ABPS-Ⅱ和ABPS-Ⅲ。研究显示,ABPS-Ⅲ清除DPPH自由基能力最强。ABPS-Ⅲ多糖的含量为89.12%,SEM特征呈现六面体结构,IR分析结果显示其具有明显的糖类化合物的特征。ABPS-Ⅲ清除DPPH自由基、超氧阴离子、ABTS自由基的EC₅₀值分别为1.85、1.48、1.30 mg/mL。对氧化损伤酵母细胞保护实验结果显示,ABPS-Ⅲ可显著提高氧化损伤酵母细胞的存活率,在浓度为25 mg/mL时,保护率达到了42.58%;酶活性检测结果显示,添加ABPS-Ⅲ后,与氧化损伤组相比,酵母细胞上清液中T-SOD和GSH-Px的活力分别显著提高了337%和102%(p<0.01),MDA含量则显著降低了35.17%(p<0.05)。结论:双孢菇多糖ABPS-Ⅲ具有较强的抗氧化活性。     

薤白多糖体外抗氧化活性及其对小鼠急性肝损伤的保护作用研究

本文研究了薤白多糖清除各种自由基及其对小鼠急性肝损伤的保护作用。采用浸提、分步醇沉法提取了三种薤白多糖,利用红外光谱初步分析了其结构组成。结果表明：AMP40在清除羟基自由基（·OH）、超氧阴离子自由基（O2＋）等抗氧化评价体系中比AMP60及AMP80具有更强的清除自由基活性,在实验最大浓度时清除率可分别达到40．96％和49．840／0;在对小鼠急性化学性肝损伤的保护作用研究中,发现通过预先灌胃200、400和800mg／kgBW的薤白多糖AMP40,可以抑制肝损伤小鼠血清中谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）活性的升高,同时能使小鼠肝脏中SOD活性、CAT活性、GSH活性以及T-AOC水平显著增加,而MDA含量显著减少（P〈0．05或P〈0．01）,且这种变4e-AMP40呈现一定的剂量依赖关系,表明AMP40具有一定的肝保护作用。研究表明了薤白多糖的抗氧化活性与其分子量大小及糖醛酸含量密切相关。     

桦褐孔菌乙醇提取物对小鼠体内外抗氧化作用研究

目的:研究桦褐孔菌菌丝体乙醇提取物的抗氧化活性。方法:采用正交试验方法,设置不同因素水平,确定最佳提取工艺。使用丙二醛（MDA）测定试剂盒测定桦褐孔菌菌丝体乙醇提取物对小鼠体内外MDA含量的影响,通过测定脂肪氧合酶和清除DPPH自由基等对桦褐孔菌菌丝体乙醇提取物的抗氧化活性进行研究。结果:乙醇提取物的最佳提取方案是:60%乙醇,80℃,料液比1:20,提取3h,此时提取率为12.9%。0.5～5.0mg/mL的乙醇粗提物具有较强的体内外抗氧化能力,可减少小鼠肝匀浆MDA的生成,抑制H₂O₂诱导的小鼠红细胞溶血。5.0mg/mL乙醇提取物对DPPH的清除率高达89.73%,对脂氧合酶的酶活性抑制率超过50%,并具有一定的剂量-效应关系。结论:本研究结果为研发桦褐孔菌菌丝体抗氧化、降血脂等功能奠定了理论基础。     

东北林蛙皮精制多糖的体外抗氧化活性研究

以抗坏血酸(VC)为对照,采用邻苯三酚自氧化法、邻二氮菲-Fe氧化法、DPPH法和总抗氧化能力测定林蛙皮精制多糖的体外抗氧化活性。结果表明:林蛙皮精制多糖对超氧阴离子自由基(O2-.)、羟基自由基(.OH)、DPPH自由基均有不同程度的清除能力,当多糖浓度为0.1mg/mL时,多糖的总抗氧化能力为1.48mmol/g。随着林蛙皮多糖浓度的增加,抗氧化能力均进一步提高,说明林蛙皮精制多糖具有良好的抗氧化活性。     

骨蛋白酶解物的抗氧化作用

研究了骨胶原蛋白酶解物的总抗氧化能力、羟自由基(·OH)清除作用和抑制超氧阴离子自由基的能力.通过与谷胱甘肽(GSH)的比较发现,溶液质量浓度在100～150 mg/mL时,该骨胶原多肽的总抗氧化能力为GSH的71.92%.溶液质量浓度在2.5～20 mg/mL时,该多肽羟自由基清除作用为谷胱甘肽的1.36倍.溶液质量浓度为10～150 mg/mL时,多肽抑制超氧阴离子自由基的能力低于谷胱甘肽.     

平菇多糖硫酸酯制备工艺优化及抗氧化活性研究

以取代度为考察指标,研究了浓硫酸加入量、反应温度和反应时间等因素对平菇多糖硫酸化的影响;在单因素的基础上,通过L9(34)正交试验优化平菇多糖硫酸酯的制备工艺条件;采用FT-IR光谱仪对平菇多糖和平菇多糖硫酸酯进行结构鉴定,并通过测定还原力、DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基清除率探索了平菇多糖硫酸酯的抗氧化活...     

铁皮石斛复配花茶制作工艺及其功能性研究

以铁皮石斛花为主要原料,将其与菊花、茉莉花进行复配,采用混料设计,以多糖、黄酮、多酚含量为考察指标,结合感官评价进行权重分析,确定铁皮石斛花复配茶的最佳复配比例并研究其体外抗氧化、降血糖活性。试验结果表明,m(铁皮石斛花)∶m(茉莉花)∶m(菊花)=5∶1∶4为最佳复配比例,多糖、多酚、黄酮含量分别为18.89、30.85、51.27 mg/100mL。铁皮石斛花茶与铁皮石斛复配花茶水提物对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基、ABTS自由基清除率IC 50分别为:石斛花茶0.89、3.51、8.76、1.34 mg/mL,石斛花复配茶0.49、4.20、5.70、0.78 mg/mL;铁还原能力测定最大吸光值分别为0.88、1.28。对α-葡萄糖苷酶及α-淀粉酶的抑制活性IC 50值分别为:铁皮石斛花茶4.47、3.26 mg/mL;铁皮石斛花复配茶5.86、5.50 mg/mL,制备得到的铁皮石斛花复配茶具有良好的抗氧化能力及一定的降血糖效果。研究结果为铁皮石斛花资源的有效利用及多元化产品开发提供了理论依据,最终得到兼具口感与功能性的铁皮石斛复配花茶,为铁皮石斛复配花茶的规模标准化加工提供理论支撑。     

菊苣多糖体外抗氧化能力及抗疲劳作用

目的:研究菊苣多糖(chicory polysaccharide,CP)体外抗氧化能力及抗疲劳作用。方法:通过测定CP对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基的清除作用、还原力及其体外抗氧化能力,以小鼠耐力实验(负重游泳)和生化改变的检测评价CP的抗疲劳功效。结果:当浓度为2.4 mg/mL时,CP对羟自由基、超氧阴离子自由基及DPPH自由基清除率分别为40.93%、67.11%和58.17%,还原能力稍低于同浓度V_C;与空白组相比,口服CP组小鼠负重游泳时间明显延长,且血尿素氮、血清乳酸和丙二醛水平显著降低(p<0.05),超氧化物歧化酶、肝糖原和肌糖原水平显著升高(p<0.05)。结论:CP具有较强的抗氧化能力和抗疲劳作用。     

美味牛肝菌多糖的抗氧化性

采用超氧阴离子自由基体系、羟基自由基体系,研究了美味牛肝菌多糖的抗氧化活性,并与Vc进行了比较。结果表明,美味牛肝菌多糖具有强的清除自由基能力,且随着浓度的增大其抗氧化作用亦增大。美味牛肝菌多糖浓度约为0.04mg/mL时,其清除.OH的能力与0.02mg/mLVc的能力相当;对浓度为0.1mg/mL的多糖溶液,其清除率达到71.78%。对于O2-.自由基,在浓度为0.04mg/mL时,抑制率达到79.34%。     

中国蛤蜊多糖的抗氧化性及抑菌性

以中国蛤蜊全脏器为材料,碱提醇沉法进行多糖的提取,采用Sevag 法去除多糖中的蛋白,分别测定提取物中多糖的含量、清除羟自由基( ·OH)能力、清除超氧阴离子自由基(O2－ ·)能力及抑菌活性。结果表明：碱提法所提多糖含量较高,提取率为15.45%(以中国蛤蜊干粉计)。中国蛤蜊多糖具有较强的抗氧化能力,多糖质量浓度为0.8mg/mL时对O2－ ·的清除率达86.49%;对 ·OH清除率达49.31%。中国蛤蜊多糖对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌均有抑制作用,其最小抑菌质量浓度分别为12.5、25、25mg/mL,对金黄色葡萄球菌抑制作用最明显、枯草芽孢杆菌次之、大肠杆菌最不明显,。由此可知,中国蛤蜊多糖对 ·OH 和 O2－ ·具有一定的体外抗氧化性能,在一定实验质量浓度范围内,随着多糖质量浓度的增大,其抗氧化活性逐渐增强。多糖对革兰氏阳性菌的抑制效应强于革兰氏阴性菌。     

罗非鱼肉蛋白酶解液的制备及体内外抗氧化活性研究

采用木瓜蛋白酶酶解罗非鱼肉蛋白,通过测定不同剂量罗非鱼肉蛋白酶解液的还原力,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-diphenyl-1-（2,4,6-trinitrophenyl）hydrazyl,DPPH）自由基、·OH和O2－·清除率及对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗氧化作用,评价罗非鱼肉蛋白酶解液的体内外抗氧化特性。结果表明：罗非鱼肉蛋白酶解液具有较高的还原力,清除DPPH自由基、·OH和O2－·的半数有效质量浓度分别为1.57、1.68 mg/mL和2.76 mg/mL;罗非鱼肉蛋白酶解液能显著提高小鼠血清和肝脏组织中超氧化物歧化酶活力、谷胱甘肽过氧化物酶活力和总抗氧化能力（P＜0.05）,同时使血清和肝脏组织中的丙二醛含量显著降低（P＜0.05）。罗非鱼肉蛋白酶解液有较强的体内外抗氧化活性。     

阿魏酸体外抗氧化作用研究

为研究阿魏酸的抗氧化作用,以分光光度法测定其对红细胞溶血和肝线粒体肿胀的保护作用;用TBARA法测定其对血清自氧化、肝匀浆自发性及Fe2+ 诱导性脂质过氧化的抑制作用;并测定其对·OH、O2·以及DPPH自由基清除能力和对铁离子的还原能力。结果表明：阿魏酸对Fe3+ 具有很强的还原能力,相对还原力是VC 的2倍;能有效清除Fenton 反应生成的·OH 和次黄嘌呤- 黄嘌岭氧化酶系统产生的O2·以及DPPH 自由基,其IC50分别为1.09mmol/L、0.62mmol/L 和23.56μmol/L;对红细胞溶血和血清自氧化均具有很好的保护作用,并能有效的抑制肝匀浆自发性和Fe2+ 诱导性脂质过氧化。这些结果说明阿魏酸具有明显的抗氧化活性。     

响应面法优化金蝉花多糖提取工艺及抗氧化活性分析

通过考察液料比、浸提时间及浸提温度对金蝉花多糖含量的影响,在单因素试验基础上进行响应面优化提取工艺条件,并通过测定金蝉花多糖总还原力、清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine,DPPH）自由基、羟自由基（·OH）和超氧阴离子自由基（O2－·）的能力研究其体外抗氧化活性。结果表明,金蝉花多糖适宜的提取工艺参数为浸提时间130min、浸提温度80℃、液料比50∶1（mL/g）,在此条件下金蝉花多糖含量实际值为26.14mg/g。金蝉花多糖具有较好的抗氧化能力,其清除DPPH自由基、·OH、O2－·的半抑制质量浓度（IC50）分别为28.99μg/mL、0.19mg/mL和0.30mg/mL。