栽培菊苣籽总黄酮的细胞毒性及清除羟自由基活性成分的识别

采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT)法评价栽培菊苣籽总黄酮对小鼠巨噬细胞RAW264.7的毒性。从总抗氧化能力、清除2,2’-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐自由基(2,2’-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)diammonium salt cation radical,ABTS+·)能力、清除O_2~-·能力以及抑制Fe~(2+)诱发的卵黄脂蛋白脂质过氧化能力4个方面评价栽培菊苣籽总黄酮的抗氧化活性,并与常见的抗氧化剂VC和叔丁基对苯二酚(tertbutylhydroquinone,TBHQ)作比较。之后采用高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)法对栽培菊苣籽总黄酮中清除·OH的活性成分进行了识别。MTT实验结果显示,菊苣籽总黄酮质量浓度为1 mg/mL时,对RAW264.7细胞具有一定的毒性,而当其质量浓度适当减小后,则基本无毒性。抗氧化实验结果表明:栽培菊苣籽总黄酮的总抗氧化活性和清除ABTS~+·的能力弱于VC和TBHQ,但在低质量浓度时,其总抗氧化活性与TBHQ非常接近;在清除O_2~-·方面,活性由强到弱为VC菊苣籽总黄酮TBHQ;在抑制卵黄脂蛋白脂质过氧化实验中,栽培菊苣籽总黄酮强于VC,但弱于TBHQ。HPLC法结果显示,绿原酸比洋蓟素具有更高的清除·OH的活性,且二者对·OH的清除率分别为66.42%和46.00%。     

偶氮胭脂红B光度法测定Fenton反应产生的羟自由基及其应用

基于Fenton反应所产生的羟自由基（·OH）与偶氮胭脂红B作用后使其吸光度降低,利用吸光度值的变化,建立一种以偶氮胭脂红B作指示剂的分光光度法测定的羟自由基的新方法。在研究反应条件对测定影响的基础上,确定了体系的最佳测定条件,同时利用所建立的新方法对一些抗氧化剂清除羟自由基的能力进行了测定。结果证明该体系可作为筛选抗氧化剂的方法。     

羟基自由基的产生与测定

羟基自由基 (HO·)有强的与木素和碳水化合物反应能力 ,在纸浆的过氧化氢漂白过程中 ,由于存在过渡金属离子或升高温度的影响 ,使体系中产生羟基自由基 ,对漂白结果产生重要影响。有关羟基自由基测定方法的研究在医学、生物化学、环境化学等领域受到重视 ,已出现了多种检测方法。本文根据国内外有关文献介绍几种测定羟基自由基的方法 ,包括将HO·自旋加合物样品在低温下 (77°K ,液氨 )保存 2～ 3天再用ESR法测定 ;用二甲基亚砜和水杨酸捕集HO·然后用高效液相色谱和分光光度法测定 ;以及电化学法     

全叶青兰提取物抗氧化活性的研究

以全叶青兰经超临界CO2萃取后的萃取物为原料,采用乙醇提取后,根据极性差异经乙醚、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取,对所得提取物的抗氧化活性进行了研究。结果表明,3种提取物对DPPH自由基和羟基自由基均具有比较强的抗氧化活性。其清除DPPH自由基的能力比较接近,而对羟基自由基的清除能力三者差异较大。其中,乙酸乙酯和乙醚提取物清除羟基自由基的半数清除率要明显小于同等条件下的对照品芦丁和BHT的清除浓度,正丁醇提取物清除DPPH自由基的半数清除率的浓度明显要小于清除羟基自由基的浓度,乙酸乙酯萃取物和乙醚萃取物在两个体系内的差异较小。     

酸法降解浒苔多糖及其清除羟自由基活性研究

以自制的浒苔多糖为原料,利用三氟乙酸(TFA)对其降解,制得低分子质量的降解浒苔多糖。以对.OH清除率为指标表征降解浒苔多糖的抗氧化活性,并进行降解工艺优化。利用正交试验确定最佳降解条件为TFA浓度1.0mol/L、反应时间5h、温度80℃、料液比1:200(g/mL),降解浒苔多糖得率为40.05%,对.OH清除率达61.83%。降解和未降解浒苔多糖的.OH清除率IC50分别为0.3521mg/mL和1.8940mg/mL,降解浒苔多糖的抗氧化活性明显高于未降解浒苔多糖。通过黏度法测得降解前后浒苔多糖的特性黏度值由60.618mL/g降至22.789mL/g,平均相对分子质量由1.19×105降为6.41×104。     

酪蛋白酶解产物·OH清除和ACE抑制活性的稳定性

研究温度、pH值、金属离子和不同浓度的糖、盐对酪蛋白酶解产物羟自由基清除活性和ACE抑制活性的影响。结果表明:酪蛋白酶解产物的羟自由基清除活性对热不稳定,而ACE抑制活性对热稳定;在酸性条件下羟自由基清除活性和ACE抑制活性略有下降,在碱性条件下,活性丧失较多;金属离子能降低羟自由基清除活性,其影响大小顺序为Mg2+>Cu2+>Zn2+>K+>Ca2+,而对ACE抑制活性影响不大;在加热条件下,葡萄糖能增强羟自由基清除活性,而蔗糖和NaCl对其影响不大,葡萄糖和蔗糖对ACE抑制活性的影响均不显著,而质量分数为2%以上的NaCl可使ACE抑制活性明显降低。     

黄酮类化合物抗氧化活性的构效关系

分别应用DPPH分光光度法和连苯三酚自氧化法比较了4种黄酮类化合物及5种具有羟基的化合物的抗氧化活性。结果表明,这些化合物由于分子结构上的相似性而都具有一定的抗氧化活性,其清除DPPH作用大小顺序依次为:槲皮素>连苯三酚>芦丁>儿茶素>邻苯二酚>抗坏血酸>桑色素>间苯二酚>苯酚,并且这种作用随其浓度的增加而增大;而对连苯三酚自氧化反应的抑制作用强弱顺序依次为:抗坏血酸>邻苯二酚>间苯二酚>苯酚>芦丁>儿茶素>槲皮素>桑色素。结合试验数据从而推断除抗坏血酸以外的8种化合物的构效关系为:①邻位羟基清除自由基的活性强于间位羟基;②同样在B环上具有邻位羟基的条件下,C环的2,3位为双键结构时,清除自由基的作用增强;③C环3位上羟基被糖基化时可能减弱其他酚羟基活性。     

猪牙花乙醇提取物抑菌活性、抗氧化作用研究及猪牙花中微量元素的测定

目的：对猪牙花乙醇提取物的抑菌活性、抗氧化作用进行研究,并测定猪牙花中微量元素的含量。方法：以猪牙花全草80% 乙醇提取物为材料,采用滤纸片法对4 种常见细菌的生长抑制活性、最低抑菌浓度进行测定,并讨论温度、pH 值及紫外线对提取物抑菌效果的影响;采用羟自由基法测定其抗氧化作用;采用原子吸收分光光度法测定其微量元素铁、锰、锌、铜的含量,采用SPSS16.0 统计分析软件对实验结果进行统计分析。结果：猪牙花全草80% 乙醇提取物对金黄色葡萄球菌的最小抑菌质量浓度为12.5mg/mL,对沙门氏菌和枯草芽孢杆菌的最小抑菌质量浓度均为100mg/mL,对大肠杆菌的最小抑菌质量浓度为200mg/mL。热处理、酸性环境、紫外照射等对抑菌作用均无明显影响。猪牙花提取液在0.0025～0.32mg/mL 的质量浓度范围内,其清除率达到64.57%。其提取物IC50 值为0.051mg/mL。微量元素Fe 含量为633.25μg/g;Mn 为30.45μg/g;Zn 为39.95μg/g;Cu 为12μg/g。结论：猪牙花80% 乙醇提取物有着良好的抑菌效果及较强的抗氧化作用,且猪牙花中微量元素含量较高,具有很大的开发价值。     

槲寄生总黄酮微波提取工艺及其抗氧化活性研究

目的：优化提取槲寄生总黄酮的最佳工艺条件及测定其体外抗氧化活性。方法：以产品中总黄酮的质量分数为指标,正交试验L9(34)对槲寄生的微波辅助萃取工艺参数进行优化,并测定其体外抗氧化活性。结果：槲寄生总黄酮的最佳提取工艺为乙醇溶液体积分数70%、微波萃取功率500W、固液比1:40(g/mL)、萃取温度70℃,提取率达1.88%。其体外清除DPPH 自由基及·OH 的IC50 值分别为0.036mg/mL 和0.572mg/mL。结论：槲寄生总黄酮抗氧化活性明显,且最佳工艺操作简单快捷,适用于工业化大批量提取槲寄生总黄酮。     

枇杷核黄酮类物质微波法提取及对羟自由基清除作用研究

本文对微波法提取枇杷核中黄酮类物质进行了研究，通过单因素及L9（3^4）正交试验，得到最佳工艺条件：m（乙醇溶液）／m（枇杷核）=15，提取功率为296W，时间120s提取3次，50％的乙醇溶液。按此最佳方法总黄酮提取率为1．41％。微波法与传统溶剂提取法比较，具有提取时间短、提取率高等优点。同时研究了该提取物对羟自由基清除作用，黄酮类物质对羟自由基的清除作用呈线性相关，相关系数R^2为0．9865。     

羟自由基诱导蛋白质氧化损伤的研究

作者利用Fe2+/H2O2/Asc氧化体系制备羟自由基,通过分光光度法、荧光分光光度法及FT-IR,研究不同浓度过氧化氢(H2O2)对牛血清蛋白(BSA)巯基及活性巯基、表面疏水性、羰基含量及蛋白质的二级结构的影响。结果表明:总巯基及活性巯基的含量都有着不同程度的减少,表面疏水性和羰基含量均随着氧化剂浓度的增加和氧化时间的延长而增加,蛋白质的二级结构也发生了改变。     

酶解法制备草鱼鱼鳞多肽及其清除羟自由基的研究

采用复合蛋白酶酶解草鱼鱼鳞制备多肽并研究其清除羟自由基能力,考察酶解条件对多肽清除羟自由基的影响,通过单因素试验和响应面试验优化得到清除羟自由基的多肽酶解工艺条件为：底物质量浓度为6g/100mL,酶解时间2.11h,加酶量为5.22g/100mL,酶解温度49.33℃,最高清除率为99.24%。层析分离的结果有5 个洗脱峰,第4 个峰的羟自由基清除率最高,达到98.34%。     

莲子心提取液对超氧阴离子和羟自由基的清除作用

本文采用正交实验的方法对不同提取条件下莲子心水提取液和乙醇提取液清除O2·和·OH的能力进行了研究。结果表明:无论是莲子心的水提液还是莲子心的醇提液都表现出了良好的清除超氧阴离子和羟自由基的能力。相比而言,莲子心水提取液清除超氧阴离子的效果比清除羟自由基的效果好,而莲子心乙醇提取液清除羟自由基的效果比清除超氧阴离子的效果好。以综合抗氧化能力为指标,莲子心水提取液中抗氧化的成分提取的最佳条件为料液比为1:12,在90℃时提取0.5h;莲子心醇提取液中抗氧化的成分提取的最佳条件为料液比为1:14,在60℃时提取6h。     

羟基自由基的测定及其对过氧化氢漂白的影响

用化学荧光法研究四种填料对H2O2漂白过程中羟基自由基(·OH)的行为及对H2O2漂白的效果的影响.结果表明,用邻苯二甲酰肼(即PtH)作为羟基自由基的稳定剂是可行的.反应时间为40min时羟基自由基的相对浓度为最高,各种填料对H2O2的稳定性及漂白效果等的影响不同.     

乳铁蛋白体外抗氧化性的研究

目的:研究乳铁蛋白的抗氧化活性。方法:利用分光光度法测定乳铁蛋白的脂质过氧化抑制率、羟自由基(.OH)清除率和DPPH自由基清除率。结果:乳铁蛋白对各种自由基的作用能力由大到小为:脂质过氧化抑制率>.OH清除率>DPPH自由基清除率。结论:乳铁蛋白对上述3种自由基有明显的清除作用,初步判断是由于乳铁蛋白结合上述反应所需铁离子从而起到抑制作用。     

微波提取荷叶黄酮及其清除羟基自由基的研究

本文研究了水剂、无水乙醇、乙醇水溶液及乙醇水溶液结合微波照射浸提荷叶黄酮及其清除羟基自由基的作用。实验结果表明:以60%乙醇水溶液作提取剂,固液比1:30、微波照射1.5min、浸提2.5h,荷叶黄酮浸出最多;且荷叶黄酮提取物对·OH自由基有较明显的清除作用,其清除率与黄酮的浓度有一定的量效关系。     

Total Phenolic Compounds, Flavonoids, and Radical Scavenging Activity of 21 Selected Tropical Plants

ABSTRACT:  Free radical scavenging activity of 21 tropical plant extracts was evaluated using 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl assay (DPPH). Total phenolic compounds and flavonoids were determined using Folin–Ciocalteu and HPLC, respectively. Results of the study revealed that all the plants tested exhibited excellent antioxidant activity with IC₅₀ in the range of 21.3 to 89.6 μg/mL. The most potent activity was demonstrated by  Cosmos caudatus  (21.3 μg/mL) and  Piper betle  (23.0 μg/mL) that are not significantly different than that of     -tocopherol or BHA.  L. inermis  extract was found to consist of the highest concentration of phenolics, catechin, epicatechin, and naringenin. High content of quercetin, myricetin, and kaempferol were identified in  Vitex negundo ,  Centella asiatica , and  Sesbania grandiflora  extracts, respectively. Luteolin and apigenin, on the other hand, were found in  Premna cordifolia  and  Kaempferia galanga  extracts. Strong correlation ( R  = 0.8613) between total phenolic compounds and total flavonoids ( R  = 0.8430) and that of antioxidant activity of the extracts were observed. The study revealed that phenolic, in particular flavonoids, may be the main contributors to the antioxidant activity exhibited by the plants.
Practical Application: Potent antioxidant from natural sources is of great interest to replace the use of synthetic antioxidants. In addition, some of the plants have great potential to be used in the development of functional ingredients/foods that are currently in demand for the health benefits associated with their use.     

Changes in Structural Characteristics of Antioxidative Soy Protein Hydrolysates Resulting from Scavenging of Hydroxyl Radicals

Antioxidant activity of soy protein (SP) and its hydrolyzed peptides has been widely reported. During scavenging of radicals, these antioxidative compounds would be oxidatively modified, but their fate is not understood. The objective of this study was to evaluate the structural characteristics of SP hydrolysates (SPHs), compared to intact SP, when used to neutralize hydroxyl radicals (?OH). SPHs with degree of hydrolysis (DH) 1 to 5 were prepared with Alcalase. Antioxidant activity of SPHs was confirmed by lipid oxidation inhibition measured with thiobarbituric acid‐reactive substances, ability to scavenge 2,2′‐azino‐bis(3‐ethylbenzothiazoline‐6‐sulphonic acid) radicals, and ferrous ion chelation capability. Oxidation of SPHs was initiated by reaction with ?OH generated from 0.1 mM FeCl₃, 20 mM H₂O₂, and 1.0 mM ascorbate. After oxidative stress, carbonyl content of SPHs increased by 2‐ to 3‐fold and sulfhydryl groups decreased by up to 42% compared to nonoxidized samples (P < 0.05). Methionine, histidine, and lysine residues were significantly reduced as a result of inactivating ?OH (P < 0.05). Attenuated total reflectance‐Fourier transform infrared and circular dichroism spectroscopy suggested the conversion of helical structure to strands and turns. Oxidatively modified SPHs had a lower intrinsic fluorescence intensity but similar solubility when compared to nonoxidized samples. These structural changes due to ?OH stress may impact the ingredient interaction and functionality of SPHs in food products.     

大米草黄酮的提取工艺及清除羟自由基作用的研究

通过单因素实验及正交实验对大米草黄酮提取工艺条件进行探讨.结果表明,大米草黄酮提取的最佳工艺条件是料液比 1:10、温度 80℃、乙醇浓度 70%、提取时间 3 h、提取3次,此条件下黄酮的提取率为 0.478%.此外.还研究了对羟自由基的清除作用,发现大米草提取物对羟自由基清除能力低于抗坏血酸.略高于芦丁.