德氏乳杆菌保加利亚亚种自发突变抗噬菌体菌株的选育及其特性

利用德氏乳杆菌L.bulgaricus KLDS08021为宿主菌,采用次级感染的方法筛选自发突变的抗噬菌体菌株,将筛选出的有抗性的7株菌株进行RAPD-PCR鉴定,然后进行EOP、遗传稳定性、溶源性检测,并对其中的2株抗性菌BIM1、BIM7及野生株进行发酵性能测定。结果显示,7株菌RAPD-PCR电泳图谱一致,均来自宿主菌,是遗传性稳定的非溶源性菌;无论噬菌体是否存在2株抗性菌BIM1、BIM7其发酵活菌数、产酸能力都比野生株高,且制作的发酵乳黏度与硬度也比野生菌株强,适于作为酸奶发酵菌株。     

德氏乳杆菌保加利亚亚种耐酸机制

德氏乳杆菌保加利亚亚种是最具经济价值的乳酸菌之一,其耐酸能力是影响其发酵性能和发挥益生功效的关键因素。本文就该菌的耐酸能力调节进行阐述。     

抗噬菌体保加利亚乳杆菌突变菌株L.actobacillus burglarious-23UN的选育

在酸奶发酵生产过程中,易遭受噬菌体的感染,使生产不能进行.以高密度噬菌体培养处理保加利亚乳杆菌菌株,筛选出1株噬菌体抗性菌株L-13,但其产酸、产黏、产香能力不如原菌株.通过照射距离20 cm照射时间60 s的紫外线诱变和NTG振荡70min的复合诱变,得到LUN-23菌株,其产酸力较敏感菌株提高了2.6%,产粘性提高了2.2%,产乙醛能力提高了1.1%,产丁二酮能力提高了3.8%,且具有遗传稳定性和抗109pfu/mL噬菌体浓度的能力.     

德氏乳杆菌保加利亚亚种发酵乳风味成分分析

本实验采用同时蒸馏萃取- 气谱- 质谱(SDE-GC-MS)联用技术对5 株德氏乳杆菌保加利亚亚种L.b-01、L.b-3、L.b-MYC、L.b-SP1.1 和L.b-M01A 发酵乳中风味物质进行了定性和定量测定,经分析分别有13、19、11、9、12 种成分为发酵乳的风味物质,共涉及酸类化合物、酯类化合物、醇类化合物、羰基化合物、芳环和杂环化合物6 大类、22 种物质。除L.b-M01A 菌产乙醇、乙酸含量较高外,其他各菌株间未发现存在明显的代谢差异。     

嗜热链球菌和德氏乳杆菌保加利亚亚种共生关系的研究进展

嗜热链球菌和德氏乳杆菌保加利亚亚种是组成酸奶发酵剂的主要菌种,在长期共处于牛乳环境的过程中形成多种协同共生关系.这些协同共生关系赋予发酵剂菌株产酸快、黏度高、活性物质丰富等优良性能,同时对酸奶品质产生重要影响.该文旨在从营养供给、抵抗环境胁迫及酸奶品质改良等方面讨论两菌的协同共生关系,为提高发酵剂菌株活力及酸奶品质提供...     

德氏乳杆菌保加利亚亚种atpA抗原的表达及抗体制备

利用原核表达德氏乳杆菌保加利亚亚种atpA抗原并进行抗体制备,以便用于Western blot分析.首先利用PCR的方法扩增出atpA蛋白的基因片段,利用大肠杆菌pQE 40原核表达系统表达重组atpA抗原,镍柱亲和层析纯化表达蛋白后,常规免疫两只新西兰长耳白兔.利用ELISA检测兔血清的效价来制备多克隆抗体,然后用Protein A纯化抗体.最后得到的atpA抗体进行Western blot检测验证抗体的特异性.结果表明,两只新西兰长耳白兔的血清效价分别为1∶20000和1∶80000;Western blot检测表明,制备的抗体能够与H+-AT-Pase蛋白进行特异性的结合.本研究成功的在大肠杆菌中表达了德氏乳杆菌保加利亚亚种的atpA蛋白,并利用其制备了效价较高的多克隆抗体,该抗体可作为一抗用于Western blot分析.     

单亲灭活保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌抗噬菌体菌株融合子的选育

为获得具有抗噬菌体功能且发酵性能优良的乳酸菌酸奶生产菌株,将生产用保加利亚乳杆菌制备原生质体后高温灭活,灭活后的原生质体与嗜热链球菌抗噬菌体菌株的原生质体通过PEG6000诱导进行融合,并对融合子性能进行研究。结果从20株融合子中挑选出3株具有噬菌体抗性且发酵性能优良的乳酸菌融合子。融合条件为:以PEG6000（浓度为400 g/L,添加0.01 mol/L Ca Cl2、0.02 mol/L Mg Cl2）为促融剂,40℃融合2 min。此条件下,融合率可达1.85×10-6。获得的融合子在凝乳、产酸、产粘性物质、产香气成分及抗噬菌体方面性能优越,适合于酸奶生产。      

响应面法优化德氏乳杆菌保加利亚亚种增殖培养基

采用响应面方法对德氏乳杆菌保加利亚亚种LB14增殖培养基进行了优化。以MRS培养基作为基础培养基,采用Plackett-Burman(PB)设计法,对12种乳酸菌生长促进因子以及培养基的初始pH等13个因素对德氏乳杆菌保加利亚亚种LB14生长的影响进行评价。筛选出番茄汁与胡萝卜汁为LB14的生长强化因子,且培养基的初始pH值也是影响该菌体生长的关键因子,而其它物质对LB14增菌量的影响不显著。然后用旋转中心组合设计及响应面分析法确定强化因子的最佳浓度以及最佳的培养基初始pH值。在优化培养基中,LB14的菌体浓度达到1.1×109cfu/ml,比优化前的2.4×108cfu/ml提高了近5倍。     

具有优良发酵特性德氏乳杆菌保加利亚亚种的筛选及其益生特性

本研究对10株实验室保存的德氏乳杆菌保加利亚亚种产酸能力,产黏能力,产香能力和贮藏期稳定性进行测定,并通过测定乳酸菌对抗生素的耐药性、抑菌能力、β-半乳糖苷酶(β-Gal)活性、α-半乳糖苷酶(α-Gal)活性和乳酸脱氢酶(LDH)活性探究菌株的益生特性.单菌株发酵实验结果表明:菌株KSDB-1凝乳时间短(6.3 h)...     

德氏乳杆菌保加利亚亚种发酵对牛乳中β-酪蛋白抗原性的影响

复原脱脂牛乳经德氏乳杆菌保加利亚亚种发酵至凝乳,然后在4℃下冷藏5 d。用间接竞争ELISA法测定了其中β-酪蛋白(β-CN)的抗原残留量,并且对发酵样品的蛋白水解程度与滴定酸度进行了分析。结果表明,复原脱脂乳经90～95℃处理5 min后,β-CN的抗原残留量为60.25%,发酵过程中其抗原残留量持续下降,凝乳时下降到55.46%,而冷藏1 d后降到了最低值54.03%,随后又缓慢上升,冷藏3 d后为55.87%,继续冷藏至5 d,β-CN的抗原残留量基本没有变化,维持在55.5%与55.9%之间。因此采用德氏乳杆菌保加利亚亚种发酵能够在一定程度上降低牛乳中β-CN的抗原性,但是在冷藏5 d的过程中其抗原性又有一定程度的升高。     

具有优良发酵特性的德氏乳杆菌保加利亚亚种的筛选

对分离自青海、云南及蒙古国等地区的酸牦牛奶、酸山羊奶、乳饼、酸马奶、酸驼奶和酸山羊黄牛混合奶中的22株德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbeueckii subsp.bulgaricus)进行了筛选,通过对其发酵牛乳的发酵时间,pH值,滴定酸度,黏度,游离氨基氮和脱水收缩性等发酵特性进行分析,筛选出IMAU20094等7株具有优良发酵特性的试验菌,适于进一步应用研究.     

羊奶发酵中低膻味菌株的筛选

从商业发酵剂分离纯化出6株保加利亚乳杆菌和6株嗜热链球菌,研究其在羊奶酸奶发酵中脂肪酶活性、FFA以及膻味的变化。结果表明,用单一菌株发酵羊奶时,保加利亚乳杆菌L.b-883和L.b-211菌株、嗜热链球菌S.t-187和S.t-300菌株制作的羊奶酸奶中脂肪酶活性和FFA含量较低,羊奶酸奶膻味较轻;当杆菌和球菌配合应用时,L.b-211菌株与S.t-187菌株以2∶1比例配合,羊奶酸奶中脂肪酶活性和FFA含量最低,分别是11.62μmol/m L·min和3.28μequ/m L,感官评定几乎无膻味。     

分离自传统发酵乳制品中具有优良发酵特性的保加利亚乳杆菌的筛选

以分离自传统发酵乳制品中的11株德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbeueckii subsp.bulgaricus)为研究对象,通过全脂乳单菌发酵,对其发酵乳的发酵时间、pH值、滴定酸度、乙醛和双乙酰含量等指标进行分析,最终筛选出1株具有优良发酵特性的菌株IMAU20775。该菌株发酵时间较短,后酸化能力弱,产乙醛能力较好,产双乙酰能力较稳定,适于进一步作为发酵剂菌种的筛选和应用研究。     

Effect of 'ropy' strains of Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus and Streptococcus thermophilus on rheology of stirred yogurt

The TA-TX2 Texture Analyser and the Brookfield RVT Viscometer have been used to investigate the contribution of ropiness to the texture of stirred yogurts made using ropy strains of bacteria. Back extrusion and texture profile analysis, not commonly used to quantify rheological properties of semi-solid foods, have been found useful in distinguishing the contribution of exopolysaccharides to different texture attributes (Toba et al ., 1990). Thus ropiness, a characteristic which is imparted to the product as a result of fermentation with particular polysaccharide-producing strains, contributes to 'adhesiveness', while 'firmness' and 'elasticity' are likely to be influenced more by the protein matrix of the yogurt than by secretion of the polysaccharide by the ropy strains. Effects on viscosity and ability to recover viscosity after disruption were apparent, although the contribution of ropiness was not always positive. Ropy strains increased viscosity of stirred yogurts when compared to yogurt made with non-ropy cultures. But, whilst a ropy Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus (Lb r⁺) combined with a non-ropy Streptococcus thermophilus (St r⁻) produced a viscous product which recovered its viscosity well, a yogurt made by combining both ropy strains did not recover its viscosity as well as yogurt made by combining two non-ropy cultures and lost its structure more rapidly during the destructive testing. These results show therefore that inclusion of a ropy strain will not always lead to improved texture attributes, that while ropy strains may increase viscosity they may not influence 'firmness' and lend support to the view that this latter attribute is more influenced by protein–protein interactions.     

L-瓜氨酸生产菌株的筛选及鉴定

通过选择性培养基初筛(利用精氨酸双水解酶筛选培养基)和复筛(高效液相色谱法测定L-瓜氨酸质量浓度),从杭州市勾庄地区西瓜大棚的土壤中筛选获得45株产L-瓜氨酸菌株.其中一株细菌(菌株编号11)转化L-精氨酸生产L-瓜氨酸的能力最强,产生的L-瓜氨酸浓度最高,0.344 g湿菌,在60 mL转化体系中转化一天,可将20 g/L的底物L-精氨酸转化为9.31g/L的L-瓜氨酸.对11号菌株分别进行形态学观察,生理生化试验及分子生物学鉴定,初步鉴定该菌株为粪肠球菌(Enterococcus faecalis).     

优良保加利亚乳杆菌菌株的筛选及增殖培养

以24株德氏乳杆菌保加利亚亚种菌株为材料,通过发酵特性分析,包括产酸、产粘、后酸化及发酵风味质地等感官特性,从中筛选出具有优良发酵特性的菌株L3,LB和M28.并对LB菌株的增殖培养基进行了初步探讨,为酸奶发酵剂的开发奠定一定基础.     

酸性葡聚糖水解酶生产菌株的选育

从淀粉厂附近的酸性土壤、酒醅、醋渣等样品中筛选到了7株产酸性葡聚糖水解酶的微生物菌株,通过复筛发现醋渣来源的B-1-1菌株产生的酸性葡聚糖水解酶活性较强.初步鉴定B-1-1为嗜热脂肪芽孢杆菌.对该菌株的产酶条件及酶学特性进行了研究,结果为:在优化后的培养基上,37 ℃,220 r/min摇床培养48 h,产酶pH=5.0,温度为70 ℃时B-1-1产酶活性最高,可达185.3 U/mL.     

广谱高效肽类天然微生物防腐剂产生菌的筛选

从酸菜发酵液中分离到能产生抑菌物质的菌株,采用中和法、无糖发酵、浓缩10倍、20倍试验验证,确实能产生具有抑菌作用的非酸类物质。经酶解、提取纯化和电泳证明抑菌物质为小肽类物质。抑菌谱试验表明该小肽抑菌谱广、抑菌能力强。     

油污土壤中脂肪酶产生菌的筛选

为了获得脂肪酶产生菌的菌种,进而获得高酶活菌株.通过添加橄榄油作为唯一碳源进行富集培养,然后以透明圈平板筛选法从富油土样中筛选出能够在溴甲酚紫培养基上形成黄色透明圈的菌落,再在罗丹明B的培养基上得到高活菌种以及水解圈大小,摇瓶复筛得高活菌株,进而测定酶的活力,经筛选有10株脂肪酶产生菌酶活力较高.