人工液体培养发菜与野生发菜营养成分比较

为了合理开发利用人工培养发菜,比较分析了人工液体培养发菜和野生发菜的营养成分。通过高效液相色谱(HPLC)、电感耦合等离子体发射光谱(ICP-OES)、苯酚硫酸、凯氏定氮和索氏抽提法测定了2种发菜的Ca、Mg、Cu、Zn、Sr、Fe、Se元素、氨基酸、粗多糖、蛋白质、脂肪的含量。结果表明:人工液体培养发菜中粗蛋白、脂肪含量分别为26.17%、0.23%,而野生发菜中为23.05%、0.31%;人工培养发菜的胞外多糖含量为36.95 mg/L,人工培养发菜与野生发菜的荚膜多糖含量分别为15.03 mg/kg和13.84 mg/kg,氨基酸总量分别为21.99 mg/g和21.20 mg/g,其中必需氨基酸含量分别为11.73 mg/g和7.97 mg/g。人工培养发菜的Mg、Cu、Zn、Se含量优于野生发菜,分别是野生发菜的2.9、3.4、3.8、1.6倍。综合分析认为,人工液体培养发菜能分离较多的胞外多糖;粗蛋白、脂肪、荚膜多糖、氨基酸和Ca、Sr、Fe元素含量与野生发菜相近。     

白灵菇产胞外多糖液体培养条件优化

以菌丝体生物量及发酵液中胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)含量为指标对白灵菇产胞外多糖的液体培养基组成和发酵条件进行了优化。结果表明,最适碳源是麦芽糖,最适氮源是酵母膏。正交实验确定最佳培养基组成为麸皮200g/L,麦芽糖25g/L,酵母膏3g/L,KH2PO41g/L,MgSO·47H2O1g/L。最佳发酵条件为起始pH8.0,培养温度25℃,摇床转速160r/min,装液量100mL/250mL,接种量0.50cm2菌种块,发酵时间4d。在此条件下,白灵菇菌丝体生物量(0.413g/100mL)及胞外多糖含量(2403.2mg/L)分别是对照(0.177g/100mL和664.533mg/L)的2.3倍和3.6倍。      

白灵菇产胞外多糖液体培养条件优化

以菌丝体生物量及发酵液中胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)含量为指标对白灵菇产胞外多糖的液体培养基组成和发酵条件进行了优化。结果表明,最适碳源是麦芽糖,最适氮源是酵母膏。正交实验确定最佳培养基组成为麸皮200g/L,麦芽糖25g/L,酵母膏3g/L,KH2PO41g/L,MgSO·47H2O1g/L。最佳发酵条件为起始pH8.0,培养温度25℃,摇床转速160r/min,装液量100mL/250mL,接种量0.50cm2菌种块,发酵时间4d。在此条件下,白灵菇菌丝体生物量(0.413g/100mL)及胞外多糖含量(2403.2mg/L)分别是对照(0.177g/100mL和664.533mg/L)的2.3倍和3.6倍。     

发菜多糖的提取及性质研究

采用热水浸提法提取发菜多糖,确定发菜多糖的最佳提取工艺条件为：提取温度80℃,水料比为90：1,浸提时间为70min,浸提次数为3次。采用乙醇沉淀法得到发菜多糖。紫外扫描显示发菜多糖不含核酸及蛋白质,红外光谱分析其具有多糖的特征吸收峰,为一种非硫酸化的以β-糖苷键为主的多糖,热重分析表明多糖的热降解温度为256.8℃。     

悬浮培养霍山石斛原球茎合成活性多糖的研究

本文考察了基本培养基、碳源、氮源以及有机添加物对霍山石斛原球茎液体培养合成活性多糖的影响。在MS、B5、N6、SH及各自1／2基本培养基中，以1／2MS和N6最适多糖合成，继代培养30d，总多糖产率分别达到479．47mg／L和417．05mg／L。使用单一碳源时，葡萄糖对多糖的积累优于蔗糖和果糖，在30g／L时，总多糖产率达到1034．96mg／L。在一定浓度范围内，氮源种类对多糖的合成影响不太明显，但氮源浓度是主要冈素，以10mmol／L最佳。另外，100g／L的马铃薯提取液与100g／L的香蕉提取液均有利于多糖的合成。     

多糖添加对固体基质培养发菜细胞生物量的影响

选用粗沙、细沙和PA6三种固体材料作为培养基质,以BG110为培养液,研究了不同浓度的阿拉伯胶、海藻酸钠和果胶对发菜细胞生物量的影响情况。实验结果表明,添加多糖有利于发菜细胞的生长,其中以细沙为固培基质,在培养液中添加0.3%的果胶,发菜细胞生物量最大,生长速率最快。     

产胞外多糖泰山羊肚菌液体培养条件的优化

对泰山羊肚菌产胞外多糖 (exopolysaccharides,EPS)的液体培养基组成和发酵条件进行了优化 ,最适碳源是葡萄糖 ,最适氮源是NH4NO3 。正交试验确定最佳培养基组成为麸皮 2 0 0 g/L ,葡萄糖 30 g/L ,NH4NO3 1g/L ,KH2 PO42 g/L ,MgSO4·7H2 O 1 5 g/L。最佳发酵条件为 2 5℃ ,起始 pH值 6 5 ,装液量 10 0mL/瓶 ,接种量10 % ,摇床转速 2 0 0r/min ,发酵时间 4d。在此条件下 ,其胞外多糖含量 (2 135 4 4 1mg/L)比对照(14 5 4 6 39mg/L)提高了 4 6 8%。     

发菜多糖啤酒的研制

发菜多糖具有抗病毒、抗肿瘤的作用。在啤酒生产过程的不同阶段将经过提取的发菜多糖提取液添加到麦汁或成熟啤酒中，在保证传统啤酒风味和营养成分的基础上，初步确定了发菜多糖啤酒的工艺路线。     

发菜多糖的提取、纯化鉴定及理化特性研究

对发菜胞外多糖和发菜荚膜多糖分别进行提取研究,获得了2种多糖的理想提取工艺。分别将胞外粗多糖和荚膜粗多糖采用Sevag法脱蛋白,透析去除小分子杂质,DEAE-52柱层析分离纯化后,前者得到1种酸性糖(EPS),后者得到1种中性糖和2种酸性糖(CPSA、CPSB和CPSC),最后通过Sephadex G-100柱层析和紫外扫描检测,EPS、CPSA和CPSB均为单一多糖。     

泰山赤灵芝液体培养条件优化及多糖含量测定

本文探讨了泰山赤灵芝(Ganodermalucidum)液体培养中碳源、氮源、pH对灵芝多糖积累的影响。结果表明,培养基最适碳源、氮源、pH值分别为蔗糖、蛋白胨、5.0,其配方组成(质量分数,%)为:KH2PO40.1,MgSO4·7H2O0.05,(NH4)2SO40.2,蛋白胨0.3,蔗糖5,pH5.0,灵芝多糖含量可达11.77%,分别是子实体和孢子粉的2.5和2.2倍。     

发状念珠藻(Nostoc flagelliforme)多糖的抗氧化与抗突变性质分析

以野生发状念珠藻为试验材料,通过热水浸提、乙醇沉淀以及氯仿-异戊醇除蛋白质等步骤提取粗多糖,并进行凝胶过滤纯化,得到单一组分.对该组分进行抗氧活性、抗突变能力以及对抗氧化酶活性影响分析,结果显示:多糖具有较强的直接清除·O2-的能力,清除能力随多糖浓度增加而增强,低浓度下(<0.075 g/L)二者呈线性关系(y=2.991 x-0.003,R2=0.998);多糖具有显著的抗突变能力,可有效抑制丝裂霉素诱导的微核产生,试验中抑制率最高可达68.4%,且随多糖浓度升高而增强;多糖对SOD酶和POD酶的活性则有抑制作用,对SOD的抑制强于POD.     

简易气升光生物反应器发状念珠藻培养研究

利用5 L的玻璃抽滤瓶作为光生物反应器对发状念珠藻细胞进行开放及封闭式培养,考察了光强随细胞密度和光路长度的衰减变化.研究了光照强度,光照周期、pH、通气量对发状念珠藻细胞生长和胞外多糖产量的影响.结果表明,发状念珠藻生物量和胞外多糖产量均随着光照强度和通气量增加而提高.此光生物反应器能用于对发状念珠藻开放和封闭式培养,但封闭式培养更利于发状念珠藻生长及胞外多糖的产生.在光照强度60 μmol·m-2·s-1,pH 9.0,通气量0.7VVM的24 h全光照条件下进行封闭式培养,生物量和多糖产量达到最高,分别为1.7 g/L和89.32 mg/L.本研究为采用低成本、易维护的简易装置进行发状念珠藻大规模培养提供了参考依据.     

氮元素对发菜生长及多糖含量的影响

为优化培养条件,研究含氮(BG11)和无氮(BG110)培养基对发菜(Nostoc flagelliforme)的色素、藻胆蛋白及胞内多糖和胞外多糖(EPS)含量的影响。结果显示：含氮组发菜的叶绿素a(Chl a)、类胡萝卜素(Carotenoids)、藻蓝蛋白(PC)、别藻蓝蛋白(APC)、藻红蛋白(PE)的含量均显著高于无氮组;胞内及胞外多糖含量无氮组高于含氮组,两者胞内多糖含量最大分别为1.03mg/mL 和0.78mg/mL,EPS 含量最大分别为243.8μg/mL 和74.9μg/mL。表明氮元素的缺乏对发菜的色素合成有抑制作用,但在一定程度上能够促进胞内及胞外多糖的合成和分泌。     

高温对液体悬浮培养发状念珠蓝细菌生长及生理生化的影响

研究高温对液体悬浮发状念珠蓝细菌细胞生长及生理生化的影响,将活化后菌种分别于30℃、35℃和40℃下培养,以25℃培养作为对照,测定细胞生长速率、胞外多糖和脯氨酸含量及SOD活性的变化。结果表明随着培养温度升高,细胞生长速率明显下降,SOD活性呈现先升高后降低的趋势;30℃和35℃培养条件下,胞外多糖和脯氨酸含量随培养温度的升高而增加,在40℃培养条件下,胞外多糖和脯氨酸含量先升高后下降。高温条件下,SOD为液体悬浮发状念珠蓝细菌提供快速的应激保护,而脯氨酸和胞外多糖为细胞提供较缓慢但更为持久的保护。     

发状念珠藻藻蓝蛋白分离纯化及性质研究

采用冻融法破碎发状念珠藻细胞,经过磷酸缓冲液提取、硫酸铵分步沉淀、离子交换层析和凝胶层析分离纯化发状念珠藻藻蓝蛋白,其纯度(A615/A280)达到5.321,纯化因子为7.623。纯化的藻蓝蛋白最大吸收峰为615 nm,其室温荧光发射峰为646 nm,SDS-PAGE电泳显示其α和β亚基的分子质量在14.4～18.4 ku。稳定性实验表明,低温、避光、pH 6～8以及低浓度的蔗糖等条件下发状念珠藻藻蓝蛋白是稳定的。实验结果将为开发利用发状念珠藻藻蓝蛋白提供参考。     

温度和盐碱度对液体培养发菜生长和生理特性的影响

比较不同温度和不同浓度盐碱处理对液体培养发菜(Nostoc flagelliforme)细胞生长和生理特性的影响。80μmol/(m2·s)光照下,采用含有不同浓度的Na Cl和Na2CO3的BG-11培养液,分别在25、35和45℃温度下培养发菜细胞,在培养8、12、16和24h时,分别测定发菜细胞生物量、质膜透性、超氧化物歧化酶活性、丙二醛、脯氨酸、可溶性蛋白以及可溶性糖含量。结果表明,在高温和盐碱作用下,发菜细胞相对外渗率增加,最高达193.2%;丙二醛含量先上升后下降;随着处理程度的提高,发菜细胞超氧化物歧化酶活性和脯氨酸含量先上升后下降;可溶性蛋白含量呈上升趋势,与处理程度呈正相关;可溶性糖含量先上升后下降;与对照相比,随着温度和盐碱浓度的提高,发菜细胞生长速率明显下降。研究表明在不同培养温度下,应用含有不同浓度盐碱的液体培养基人工培养发菜的过程中,发菜可溶性蛋白和可溶性糖具有重要的生理作用,发菜细胞对不同温度和盐碱浓度产生生理的应激响应。     

液体发酵灵芝菌胞外多糖的研究

现代临床和药理表明:灵芝具有多种生理活性和药理作用,其中灵芝多糖是灵芝的主要有效成分,通过本课题的研究,建立一套液体发酵培养灵芝菌体和生产胞外多糖的方法,并建立相关的灵芝多糖的测定方法.通过液体发酵灵芝菌,我们得到胞外多糖为3.4558g/L,高于国内文献报道的最高值3.07g/L.     

发菜胞外多糖硫酸化条件的优化及红外光谱分析

液体培养发菜细胞,发菜细胞经去藻体、浓缩、透析、脱蛋白、醇沉、DEAE-52离子交换柱层析分级、Sephadex-100葡聚糖凝胶柱分级处理得到发菜胞外精多糖。以硫酸根的取代度为指标,在单因素试验的基础上,利用Box-Behnken设计进行响应面试验,建立因素与响应值之间的数学模型,确定适宜的发菜胞外多糖硫酸化条件。结果表明,发菜胞外多糖硫酸化修饰最佳条件为反应温度71 ℃、反应时间3 h、氯磺酸-吡啶体积比1∶7,在此条件下,硫酸化取代度为5.05。红外光谱检测表明,硫酸基团已与多糖分子结合。