蒽酮－硫酸法测定泰山灰树花中海藻糖含量的研究

对蒽酮-硫酸法测定灰树花菌体海藻糖含量的条件进行了研究。结果表明,样液与蒽酮-硫酸试剂加入量的体积比为1:2,加热显色5min,625nm比色,测定灰树花菌体中海藻糖含量为3.88mg/ml,平均回收率为106.5%,稳定性和重复性较好。该方法简便、快速、准确,适用于菌体海藻糖含量的测定。     

灰树花深层发酵培养基优化研究

灰树花是药食两用真菌，富含多糖，氨基酸和矿物元素，可用液体深层发酵大规模生产。本试验研究分析了文献报导的营养因子对灰树花发酵的影响，并选择得到各因子及水平。以菌丝干重作为试验指标，通过四因素四水平的正交试验得到优化培养基的组成为：马铃薯250g／葡萄糖30g，麸皮20－35g，酵母膏1.0-2.5g，磷酸二氢钾取2－5g，硫酸镁取0.5-2g，水1L，菌丝生物量干重为19．7g／L。方差分析表明混合碳源的浓度比对试验指标有显著影响。与文献结论进行了对比，得到不同结论。     

海藻糖在灰树花深层发酵中的积累及多糖的提取

探索了灰树花深层发酵与多糖提取的工艺 ,并对海藻糖与多糖产生的规律进行了研究。结果表明 ,以土豆 6 %、麸皮浸汁 2 %、葡萄糖 1%为培养基 ,在 2 5℃下培养为灰树花适宜的培养条件 ;灰树花多糖提取的最佳工艺参数是 :加水倍数 2 5,醇沉浓度 90 % ;海藻糖累积于快速生长期之后的稳定期 ,用 37 5℃处理灰树花菌丝体可获较高的产量 ;灰树花胞内多糖含量与海藻糖含量同时在稳定期达到最大值。     

不同产地灰树花多糖含量测定

目的测定不同产地灰树花多糖含量,为灰树花多糖的综合开发利用提供科学依据。方法采用蒽酮-硫酸法,正交试验确定最佳工艺,测定不同产地灰树花粗多糖、可溶性糖含量。结果 18批不同产地灰树花粗多糖含量8.17%~34.82%,可溶性糖含量27.46%~55.65%。结论不同产地灰树花多糖含量具有显著差异。     

运用多元数学模型优化灰树花发酵培养基组成的研究

利用BoxBehnken3×3设计优化了影响灰树花深层发酵菌丝体和胞外多糖生产的主要培养基组成,碳源(葡萄糖)、氮源(蛋白胨)和无机盐(KH2PO4),响应面分析结果表明,各因素及其交互作用对响应值灰树花菌丝体和胞外多糖产量均存在显著的相关性。通过典型性分析,获得最大菌丝体量(17.61g/L)时,培养基组成为:葡萄糖45.2g/L,KH2PO42.97g/L,蛋白胨6.58g/L,MgSO4·7H2O1g/L和玉米浆15g/L;而获得最佳胞外多糖量(1.326g/L)时的培养基组成为:葡萄糖58.6g/L,KH2PO44.06g/L,蛋白胨3.79g/L,MgSO4·7H2O1g/L和玉米浆15g/L。与其他实验组的结果相比,优化后的灰树花菌丝体与胞外多糖的量都有较大的增加。15L发酵罐扩大培养的结果表明,在优化培养基组成的条件下,扩大培养后的菌丝体产量最大值达22.50g/L。     

天麻对灰树花液体深层发酵的影响

研究中药天麻对灰树花液体深层发酵的影响,应用Minitab15软件设计了Plackett-Burman筛选实验,筛选出葡萄糖浓度、蛋白胨浓度、天麻浓度、无机盐配比4个显著性影响因素,通过正交实验对其进行优化,结果表明天麻对灰树花液体深层发酵的最佳工艺条件为:葡萄糖质量浓度30g/L,蛋白胨质量浓度5.5g/L,天麻质量浓度7g/L,KH2PO4质量浓度1.5g/L,MgSO4质量浓度0.75g/L。每升发酵液中可得到灰树花胞外多糖为3.91g,与不添加天麻的对照组相比,胞外多糖产量提高了3.4%。     

天麻对灰树花液体深层发酵的影响

研究中药天麻对灰树花液体深层发酵的影响,应用Minitab15软件设计了Plackett-Burman筛选实验,筛选出葡萄糖浓度、蛋白胨浓度、天麻浓度、无机盐配比4个显著性影响因素,通过正交实验对其进行优化,结果表明天麻对灰树花液体深层发酵的最佳工艺条件为:葡萄糖质量浓度30g/L,蛋白胨质量浓度5.5g/L,天麻质量浓度7g/L,KH2PO4质量浓度1.5g/L,MgSO4质量浓度0.75g/L。每升发酵液中可得到灰树花胞外多糖为3.91g,与不添加天麻的对照组相比,胞外多糖产量提高了3.4%。      

液体培养灰树花菌丝生产海藻糖

探索了灰树花(Grifola frondosa)GIM5.164深层培养中海藻糖积累的规律.结果表明,以培养基组分玉米粉4% 麸皮浸汁2% 葡萄糖1%,pH3.5及转速为130 r/min为适宜灰树花积累海藻糖的培养条件.海藻糖积累于快速生长期之后的稳定期,培养时间到第11天时,菌体内的海藻糖含量最高,达到1.20mg/mL,百分含量为11.48%;将已培养11d的灰树花菌体用37.5℃处理6 h后可使海藻糖的含量显著增加,达到1.59 mg/mL,百分含量为15.20%;在发酵培养基中添加0.1%～0.2%的花生油作为消泡剂可提高菌体的海藻糖含量;产物海藻糖为浅黄色的晶体.     

灰树花在米糠培养基上固态发酵产多糖研究

为高效利用稻谷加工副产品米糠并拟在固态发酵设备中发酵生产多糖保健食品,以米糠为基础培养基,对灰树花固态发酵米糠产多糖条件进行探索。针对定量米糠,选取水分、蛋白胨、葡萄糖和pH 值影响因素,以总多糖含量为评价指标进行试验,按L16(45)的正交试验方案得到优化培养基,并进一步通过单因素试验选择得到较优的固态发酵工艺条件。结果表明：优化固态培养基组成为原始米糠(水分为65%,按原始米糠质量计)、蛋白胨0.5%、葡萄糖4%、pH5.5、装样量20g/250mL 三角瓶,发酵条件为：接种量10%、培养温度25℃、摇床转速170r/min、培养时间11d,多糖得率以米糠为标准计算,可达4.52%。用SPSS 软件处理数据,得到表征多糖产量和培养基成分关系的回归方程。     

蒽酮-硫酸法测定酵母中海藻糖的含量

本文对酵母中海藻糖的含量测定进行了研究,确定了用0.2%蒽酮-硫酸溶液(料液比1:4)测定海藻糖的条件:吸收波长为590nm;加热时间为2min;样品显色后应在30min内测定.在冰水浴15mL0.5mol/L三氯乙酸溶液条件下从活性干酵母中提取海藻糖的次数为八次,每次30min.八次提取共从1g燕山低糖即发干酵母(水份:3.63%)中获得了149.42mg海藻糖.     

响应面法优化以中药为基质的灰树花菌丝体发酵培养基

以山药、莲子、黑米、党参、薏苡仁、枸杞6味药食两用中药培养基的灰树花发酵,并运用Box-Behnken试验设计及响应面分析对培养基进行优化。结果表明：枸杞、党参适合于作碳源,莲子适合于作氮源;以枸杞、莲子为基质的最佳发酵培养基为：枸杞质量浓度23.5g/L、莲子质量浓度4.3g/L、葡萄糖质量浓度28.8g/L,在此条件下,灰树花菌体生物量可达16.937g/L。     

灰树花多酚的提取和活性研究

从灰树花菌丝体中提取多酚类物质，并研究其性质和活性，采用弱极性的大孔吸附树脂从灰树花菌丝体粗提物中吸附多酚类物质，吸附量大，解吸容易，获得褐色粉末状产物，应用红外、紫外扫描和鉴别试验证明其主要为多酚类物质，用F-D法以间苯三酚为标准测得酚类物质质量分数为9．3％,平板系列稀释法测定体外抗菌活性，灰树花多酚对金黄色葡萄球菌等具一定的抑制作用，红细胞氧化溶血和MDA试验测定其抗氧化活性，实验显示：对于红细胞的自氧化和H202所致的氧化均具有一定的抑制活性，可显著抑制小鼠肝匀浆自发生成MDA。碘呈色法和DNS比色法试验结果显示灰树花多酚可抑制α-淀粉酶活性，减少酶对淀粉的水解，树脂法适合从灰树花菌丝体中提取多酚类物质，灰树花多酚具有抗氧化、抗菌及抑制α-淀粉酶等活性。     

莲花菌菌株Sd的液态发酵特性研究

莲花菌是一种珍贵的药、食两用真菌。目前,国内外对于莲花菌的研究多以固态栽培及其多糖的提取为主,而不受自然气候等条件限制的可大规模工业化生产的莲花菌液态深层发酵技术国内外还未见有成功的报道。本研究采用固态栽培上广泛使用的莲花菌菌株Sd,用8L全自动机械通风搅拌发酵罐探讨其液态深层培养特性,并结合发酵生产实际施行了中间补料动态调控,通过观测和综合分析其pH、残糖浓度、溶氧及菌丝量的动态变化过程,可以确定菌株Sd的发酵前40h为发酵的适应期对数生长期在接种后94～104h之间,104～200h之间为稳定期;200h后菌丝开始自溶,处于衰落期,应该放罐。此结果对于指导莲花菌菌株Sd的发酵生产具有重要意义,也将为莲花菌的生理生化及遗传特性的研究奠定基础。     

灰树花中改善脂质代谢活性组分的筛选及其提取工艺优化

目的:筛选灰树花中具有改善脂质代谢的活性组分并获得其最佳提取工艺条件。方法:采用模拟胆汁胶束法和脂肪酶抑制法两种体外筛选方法筛选灰树花中具有改善脂质代谢的活性组分,采用单因素以及响应面法优化灰树花活性组分的提取工艺。结果:灰树花乙酸乙酯提取物(EAE)具有较强的改善脂质代谢的活性,其对脱氧胆酸钠和胆酸钠的结合量最高,抑制脂肪酶活性最强。最佳提取工艺条件:料液比1∶29(g/mL)、超声时间30 min、提取温度50℃。通过超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱仪(UPLC-QTOF-MS/MS)对EAE组分进行鉴定,其主要成分为野靛黄素和矢车菊素-3-O-芸香糖苷。     

灰树花液态深层发酵条件研究

以菌丝体生物量和多糖含量为评价指标,通过单因素试验研究了灰树花的液态深层发酵条件,并考察不同发酵罐类型对灰 树花生长的影响,在此基础上利用50 L发酵罐进行了扩大培养。 结果表明,利用7 L搅拌式发酵罐,灰树花的最优液体深层发酵条件为培 养温度23 ℃,搅拌速度120 r/min,通气量3 L/min。 在此优化条件下,菌丝体生物量和发酵液中多糖含量分别为11.659 g/L和3.658 g/L, 且高于气升式发酵罐。 在50 L搅拌式发酵罐中成功实现了扩大培养,其菌丝体生物量和多糖含量分别为13.238 g/L和3.178 g/L。     

多粘芽孢杆菌发酵培养基优化及发酵特性研究

采用正交实验方法,对多粘芽孢杆菌的发酵培养基进行优化,通过统计学分析,确定发酵培养基,并利用30L发酵罐进行实验,测定发酵过程中相关参数,确定生长代谢曲线。结果表明,发酵效价由优化前的8.6×104U/mL提高到12.9×104U/mL,提高近1.5倍。