RP-HPLC定量分析人工北虫草中3种核苷类有效成分

分析5个不同品种泰山人工北虫草中主要核苷类成分的含量并比较其差异。采用反相高效液相色谱(RPHPLC)法检测5个样品中尿苷、腺苷、虫草素的含量。色谱柱为Kromasil C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(7∶93),流速1.0 m L/min,检测波长260 nm,柱温为室温。3种成分的进样量分别在5.4~540、5.2~520、5.0~500μg/m L范围与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r分别为0.999 4、0.999 4、0.999 2);平均回收率分别为97.83%、98.10%、98.41%,RSD分别为2.51%、1.46%、2.21%(n均为5)。5个品种泰山人工北虫草中主要核苷类成分含量有差异。该方法快速、准确、重现性好,能有效鉴别虫草的核苷类成分,可用于天然虫草和人工虫草中核苷类成分的分析,评价不同来源虫草的质量。     

固体培养蛹虫草核苷类次生代谢物的产率

为提高固体培养蛹虫草核苷类代谢物的产率，用高效液相色谱法对培养物的虫草素和腺苷含量进行检测，从菌株、氮源、氮源水平、加水量、培养时间和光照等方面进行研究，在以20％豆粉为氮源、按1：1加营养液、接种Cm-2菌株、遮光培养35d的条件下，培养物的虫草素含量可达5．49mg／g，高于蛹虫草全草，为保健食品增加了新品种和新原料。     

浅谈天然冬虫夏草中虫草素含量测定的实用性

虫草素是一种天然来源的药物,具有多种药理作用,有良好的临床应用前景。虫草素一般是从蛹虫草中提取的,虫草素在野生冬虫夏草中的含量极微。本文主要就天然冬虫夏草中虫草素的含量测定进行研究,以期为冬虫夏草提升质量标准提供依据。结果显示,天然冬虫夏草中虫草素的含量属于PPM级别甚至无法检出,所以用虫草素为指标评价冬虫夏草的优劣是不客观的。     

不同产地蛹虫草鲜干品核苷类含量测定

运用液相色谱法分别对山东、安徽、云南、湖北四种产地和烘干、冻干、新鲜三种加工后的蛹虫草中腺苷、虫草素、N-6-2羟乙基腺苷进行比较,考察不同地区、不同加工方法的蛹虫草核苷物质含量及种类差别,以期找到蛹虫草的较好来源及其加工方法。结果表明:热水提取法的效果明显比超声提取法好。云南产地蛹虫草中腺苷、虫草素、N-6-2羟乙基腺苷含量最高,分别为0.19,0.21和0.24 mg/g。新鲜蛹虫草超声水提后腺苷、虫草素、N-6-2羟乙基腺苷含量明显要比冻干、烘干含量高。     

HPLC法测定冬虫夏草菌丝体及发酵液中核苷类成分

以百令胶囊及野生冬虫夏草作为对照品,优化了HPLC法测定冬虫夏草菌F4539指纹图谱的色谱条件,并计算其中4种核苷成分的含量。结果表明:采用YMC-Pack Pro C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇∶水(20∶80,体积比)为流动相,流速0.6 m L/min,检测波长为260 nm时,待测样品得到较好的基线分离;冬虫夏草菌F4539发酵菌丝体及发酵液中含有与野生冬虫夏草及百令胶囊相同的有效成分;4种核苷物质在2、4、6、8、10 mg/L的浓度梯度下,线性关系良好;通过定量计算,冬虫夏草菌F4539菌丝体及发酵液中的腺苷含量分别为0.094 mg/g和2.53 mg/g,百令胶囊中腺苷含量为1.45 mg/g。本研究对于冬虫夏草F4539的功效评价、发酵后处理及产业化开发提供了重要技术参数。     

冬虫夏草与蛹虫草中虫草素和总糖含量测定

建立高效液相色谱法测定冬虫夏草与蛹虫草中虫草素含量的方法,比较不同产地冬虫夏草和蛹虫草中虫草素和总糖的含量。以水为溶剂超声波提取、高效液相色谱法测定虫草素含量;苯酚-硫酸法测定总糖含量。结果显示冬虫夏草中没有检出虫草素,而不同产地的蛹虫草中虫草素含量有一定区别,含量分别为1.39%、0.48%、0.11%;总糖含量是蛹虫草高于冬虫夏草,其中不同产地的冬草夏草总糖含量没有差别,而不同产地的蛹虫草总糖含量相差较大,分别为14.69%、20.61%、34.33%。     

RP-HPLC法测定冬虫夏草发酵液冻干粉中虫草素和腺苷含量

目的 有效地控制冬虫夏草发酵液冻干粉的质量.方法 建立了测定虫草素和腺苷含量的反相高效液相色谱法（RP-HPLC）.色谱条件：C18柱（250 mm × 4.6mm ,5μm）;流动相为乙腈＋水＋甲醇（2＋85＋2）;流速为1.0 ml/min;紫外检洲波长260 nm.结果 虫草素浓度在0.45～18.00 μg/ml范围内与峰面积呈线性相关,r=0.999 3,平均回收率为96.5%,RSD为2.3%.腺苷浓度在1.76-17.60μmg/ml范围内与峰面积呈现性相关,r=0.9990,平均回收率为97.3%,RSD为1.0%.结论 该方法样品处理简便,结果可靠,重现性好,可有效地控制冬虫夏草发酵液冻干粉的质量.     

人工培养北虫草子座和培养基中多糖和核苷类成分的含量分析

目的建立分析北虫草中多糖和核苷类成分含量的方法,并对比分析北虫草子座和培养基中的成分.方法用硫酸-苯酚法测定北虫草中多糖含量;用RP-HPLC法同时测定北虫草中尿苷、腺苷和虫草素含量.结果北虫草子座中多糖含量分别为4.67%和4.34%,培养基中为3.42%.北虫草2006年样品与2007年样品比较,尿苷(0.267%vs 0.063%)、腺苷(0.247%vs0.082%)和虫草素(0.054%vs0.166%)含量均有显著差异,2007年样品子座与培养基相比,尿苷(0.063%vs0.052%)和腺营(0.082%vs0.117%)含量无显著差异,培养基中虫草素含量(0.318%)显著高于子座(0.166%).结论建立了北虫草多糖和核苷类成分定量分析方法.该方法简便,可靠,可准确测定北虫草中多糖和3种核苷类成分的含量.     

蛹虫草及其培养基中主要核苷类成分的分析比较

采用高效液相色谱法测定虫草中的核苷类成分,优化后的色谱条件为YMC-Polyamine 柱(250mm × 4.6mm,5μm);采用梯度洗脱,流动相：乙腈- 水(V/V)：0～15min 为90:10,15～20min 为86.5:13.5,20～30min 为75:25,30～35min 为70:30;流速：1mL/min;柱温：30℃;检测波长：259nm;进样量：10μL。结果表明：胸腺嘧啶、虫草素、尿嘧啶、腺苷、腺嘌呤、尿苷、鸟嘌呤、次黄嘌呤均能得到较好分离,该方法稳定性好、精密度高、重现性好,适用于虫草中的核苷类成分的分析。经分析发现,蛹虫草子实体核苷类物质组成大致相似,但含量差异非常显著,同时发现蛹虫草培养基残基及固体发酵产物中虫草素含量较高,其他核苷类成分很少,因此认定蛹虫草培养基残基及固体发酵产物是非常优良的分离纯化虫草素的原料。     

RP-HPLC测定虫草菌粉中核苷类成分

采用高效液相色谱法测定虫草菌粉中核苷类成分,尿苷、鸟苷、腺苷及腺嘌呤能很好分离,其优化的色谱条件为:AlltimaC1 8(2 5 0mm×4 .6mm ,5 μm)色谱柱,乙腈-水(V/V =4 :96 )为流动相,流速为1 .0ml/min ,检测波长为2 6 0nm。该方法灵敏度高、定量准确、重现性好、回收率高(98.7%～1 0 1 .5 %) ,适合用于虫草菌粉中核苷类成分的分析。虫草菌粉中尿苷、鸟苷、腺嘌呤和腺苷的含量分别为1 0 .5 2mg/g ,8.5 6mg/g ,0 .70 8mg/g和1 .79mg/g ,其测定RSD范围为0 .5 1 %～1 .30 %(n =5 )。     

无糖型虫草饮料的研制

对利用人工虫草子座开发无糖型饮料的生产工艺条件进行探讨。以感官品质为指标,采用对比实验和正交实验,优化虫草浸提条件和产品配方。结果表明,虫草粉选用80℃水温、料水质量比为1∶100,浸提40min,经过滤、离心得到精制虫草浸提液,每升饮料中加入精制虫草浸提液320mL、木糖醇30g、麦芽糖醇30g、结晶山梨醇15g、柠檬酸0.8g、复合稳定剂1g进行调配,经杀菌可得到风味浓郁、清爽宜人的无糖型虫草饮料产品。     

冬虫夏草无性型发酵技术研究进展

冬虫夏草无性型研究一直是热点和难点,相关研究尚无实质进展。但近年来,随着发酵技术日趋成熟,冬虫夏草开发利用研究已取得很大的进展。文章就冬虫夏草无性型、有关学名问题、固体和液体发酵技术研究进展进行综述,并对其未来发展作了展望。     

冬虫夏草与蛹虫草融合株的原生质体诱变育种

以冬虫夏草与蛹虫草融合株为研究材料,对其原生质体进行紫外诱变,筛选优质高产的新型菌株。得到了高产菌株Y-90,虫草酸产量是出发菌株的1.80 倍,高产菌株YP-42,虫草素产量是出发菌株的1.33 倍。采用随机扩增多态性DNA（random amplified polymorphic DNA,RAPD）分子标记技术和核糖体rDNA内部转录间隔区（internaltranscribed spacer,ITS）序列分析技术对突变株的遗传变异情况进行分析。结果表明突变株的ITS序列并没有发生变化。RAPD结果显示突变株的扩增片段与亲本菌株不同,说明发生了基因突变,其高产性状是可遗传的性状,可以将其用于进一步的育种研究。     

一株冬虫夏草菌的液态发酵条件研究

以菌丝体干质量、胞内多糖含量及腺苷含量为评价指标,研究了一株冬虫夏草菌的液态发酵条件。确定利用葡萄糖蛋白胨液体培养基发酵生产菌丝体、胞内多糖及腺苷的最佳条件为装液量100 mL/500 mL,接种量3%,温度24 ℃,培养时间4 d,摇床转速140 r/min;试验得菌丝体干质量为17.232 g/L;胞内多糖含量为78.34 mg/g;腺苷含量为633.7 μg/g。     

冬虫夏草液体发酵培养的研究进展

冬虫夏草是一种名贵的中国传统药用真菌,因其自身众多且独特的药用价值,已成为国内外学者研究的热点.由于野生虫草生长条件的局限性以及人类的过度采集,目前,野生自然资源已经面临枯竭.利用人工发酵冬虫夏草菌来获得与天然冬虫夏草化学组成成分以及药理作用基本相同的菌丝体,成为当下解决虫草资源短缺的一种最可行的方法.本文介绍了冬虫夏草菌株的分离、发酵条件的控制、发酵菌丝体与天然虫草中活性成分的比较以及发酵滤液的应用,为冬虫夏草的液态发酵培养提供参考.     

HPLC测定冬虫夏草中的虫草素

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定冬虫夏草中虫草素含量的方法。方法色谱柱为Poroshell 120SB-C8柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水系统,梯度洗脱,流速1.0 m L/min;检测波长260nm;柱温35℃;进样量10μL。结果虫草素检测的浓度范围为0.0476~9.520μg/m L,r=1.0000,线性关系良好。冬虫夏草中虫草素的平均加样回收率为93.26%,RSD为2.07%。结论方法简便可靠,精密度和回收率良好,可为提高冬虫夏草的质量标准提供参考和依据。     

固体发酵生产冬虫夏草多糖的研究

本研究以豆粕和米糠为固态培养基,固体发酵生产冬虫夏草多糖。通过对培养基组成配比、接种量、温度、培养基相对湿度、空气相对湿度和培养时间的研究,初步确定了在豆粕:米糠为1:2(W/W)固体培养基发酵生产冬虫夏草多糖的最佳条件为：接种量20%、温度26℃、培养基含水量为60%、空气相对湿度为60%和培养时间7d。经傅立叶红外光谱分析,本研究生产的冬虫夏草多糖为β-葡聚糖。     

冬虫夏草发酵条件的研究

通过对冬虫夏草菌Csll的深层发酵条件如pH、接种量、装液量、转速及其培养基碳源、氮源和无机盐的研究,得出其最适培养条件为24℃、170r/min、150mL/500mL、pH6.5,接种量10%,茵丝生长的最佳培养基:葡萄糖4%,豆饼粉2%,KH2PO40.2%,MgSO4·7H2O 0.075%.发酵结果得到虫草茵丝粉中有效成分含量:腺苷＞0.16%;甘露醇＞8.0%.     

番木瓜不同部位活性成分及抗癌功能研究进展

论述了番木瓜含有番木瓜碱、芸香苷、异硫氰酸苄酯、类胡萝卜素等多种活性物质,指出相关化合物在肠胃保护、护肝、抗炎镇痛、减肥美容、抗肿瘤、杀菌和抗氧化等方面表现出一定的生物活性,综述了番木瓜不同部位主要生物活性成分、抗癌作用效果等最新研究成果,指出其在功能食品、医药卫生及保健品等领域拥有广阔应用前景。