激光扫描共聚焦显微镜的技术培训探索

仪器共享平台可为用户提供多种实验技术服务,是高校和科研院所必不可少的教学科研支撑部门。激光扫描共聚焦显微镜是生命科学研究中常用的大型精密光学仪器,具有使用频率高、功能多、操作复杂等特点。仪器共享平台结合激光扫描共聚焦显微镜的共享使用情况尝试多种相关人员培训方式,探索出一套适用于多用户的培训模式以供仪器共享平台工作人员参考。     

激光扫描共聚焦显微镜图像的计算机处理

为了研究激光扫描共聚焦显微镜图像的计算机处理,首先对图像进行预处理,包括光线吸收和散射的补偿以及基于最大后验盲解卷积,以提高图像质量。然后采用光线投射算法重建三维结构,实现三维图像平移、旋转、缩放、光线设置等操作。实验结果表明,该方法能够应用于普通配置计算机,可以处理各大品牌激光扫描共聚焦显微镜拍摄的图像序列,具有较快的处理速度和良好的人机交互等优点。     

激光扫描共聚焦显微镜在石油地质上的应用

判断油层水淹状况在油田勘探开发中是非常重要的，过去采用普通荧光显微镜通过荧光颜色来区分油和水，但不能做到量化，且由于普通荧光显微镜采用的是场光源，来自样品内不同部位的荧光信号相互干扰难以区分，无法获得准确的定位和定量信息。现在我们利用激光共聚焦的多通道技术(用     

激光扫描共聚焦显微镜在微孔隙研究中的应用

激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)具有分辨率高、制样简单、具有一定穿透能力、集激光扫描和数字图像处理为一体等优点。用于研究储层中的微孔隙,其能够快速、准确、直观地提供微孔隙的孔隙结构与面孔率等信息,本文通过对致密砂岩粒缘微缝、砂岩长石粒内溶蚀孔、云母内微孔、火山凝灰岩脱玻化气孔和英安岩溶蚀微孔进行激光共聚焦三维扫描,可以检测出孔径在0.1μm以上的微孔隙,有助于分析微孔隙特征与油气集输之间的关系,对天然气储层和致密砂岩储层的勘探和开发具有重要意义。     

激光扫描共聚焦显微镜在骨髓基质细胞移植中的应用

目的：探讨激光扫描共聚焦显微镜（laser scanning confocal microscope,LSCM）技术在骨髓基质细胞（Bone Marrow Stromal Cells,BMSCs）移植中的应用。方法：使用活细胞示踪剂CM-DiI、细胞核探针DAPI和DNA合成前体物BrdU体外标记BMSCs,移植到动物模型体内,利用LSCM技术,观察BMSCs在受体组织内的分布和分化。结果：体外标记BMSCs后再移植到受体,使用LSCM技术可以观察到BMSCs定位于受体心肌组织和脑组织,并有部分BMSCs表达相应的组织特异性蛋白Cx43和GFAP。结论：利用LSCM技术观察BMSCs在受体组织内分布和分化是一种简单可行的方法。     

激光扫描共聚焦显微镜自动对焦研究

目的：针对激光扫描共聚焦显微镜在二维平面扫描样本时不能自动准确定位焦平面的不足,提出一种基于全自动光学显微镜自动聚焦原理的数字图像处理算法解决这个问题。方法：利用激光扫描共聚焦最微镜获得具有一定厚度的显微样本不同焦距下序型固傻,首先应用灰度方差算子全局搜索进行粗聚焦,对粗聚焦得到的焦平面附近各一个扫描步距范围内的图像再利用基于Sobel梯度的熵函数进,行目标区域的精确聚焦,单向搜索以提高聚焦速度.结果：实验表明该方法对于无荧光标记的样本的均可以准确对焦,粗细两次聚焦可以提高自动对焦的精度,基于Sobel梯度的熵函数对于图像边缘敏感,比以往的空域自动对焦方法更符合生物显微样本对焦精确度高的需求。     

激光扫描共聚焦显微镜在纳米毒理学研究中的应用

随着激光扫描共聚焦显微镜技术的不断更新,功能不断拓展,已成为新兴学科纳米毒理学及其交叉学科科学研究的重要工具.激光扫描共聚焦显微镜能够动态检测纳米颗粒在活细胞内的定位及其与细胞骨架、细胞内离子、生物大分子的相互作用,有助于深入研究纳米颗粒对机体的毒理学效应及其机制.     

激光扫描显微镜

激光扫描显微镜李银祥，谈正雄（武汉工业大学，武汉４３００７０）１．工作原理激光扫描显微镜的工作原理与扫描电子显微镜相似，它与电镜不同之处是用激光束代替电子束工作。经过聚焦的激光束射到样品上，由样品上的反射光形成图像。在激光扫描显微镜中采用了自动聚焦装...     

利用激光共聚焦显微镜观察骨骼肌肌纤维中的钙火花现象

钙火花(Ca^2 sparks)现象是近年来在骨骼肌、心肌兴奋收缩偶联研究中发现的重要生理现象，但目前确切的机制还不清楚。我们利用激光扫描共聚焦显微镜对经Flou-3AM染色的人工剥离的蟾蜍骨骼肌肌纤维进行连续扫描分析，在骨骼肌肌纤维中捕获到钙火花现象，并对钙火花现象的发生进行了初步探讨。     

3D激光扫描共聚焦显微镜计量特性分析及测试

为了合理评定激光扫描共聚焦显微镜（Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM）的测量性能,提出了一种用于检验LSCM计量特性的测试方法。首先,依据LSCM成像原理,对其技术特点,特别是轴向分辨率和横向分辨率等进行了理论分析;然后对其计量特性的参数指标进行了归纳,并提出相应的性能测试方法。具体包括采用线间隔为微纳米级的网格板等作为标准器,测试LSCM的放大倍数和光学横向分辨率;采用纳米级高度台阶样板测试LSCM的光学轴向分辨率和轴向定位特性;采用激光干涉仪测试样品台工作性能等。实验证明:该方法能够满足当前普遍应用的LSCM的性能测试需求。     

激光扫描共聚焦显微镜的基本原理及其使用技巧

介绍了激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)的原理和构造,分析了LSCM的优点和缺点,并以花粉为例,详细介绍了共聚焦针孔直径、光电倍增管检测器增益、激光强度、扫描速度、扫描方式和Z轴步距等重要参数设置对共聚焦成像的不同影响。探讨了正确使用LSCM的方法与技巧,如获取高质量的图像、图像保存及图像处理,以便为科技人员利用LSCM开展更多植物学与环境科学相关的研究提供参考。     

ZEISS LSM 780激光扫描共聚焦显微镜的三维成像及分析

针对ZEISS LSM 780激光扫描共聚焦显微镜的三维图像获取步骤做了系统的介绍,详述了光学切片的设置和获取过程,后期应用Zen2011 black和blue软件进行三维重构的渲染及图像分析、数据采集。列举出三维成像中常见问题及解决办法,使仪器为教学和科研工作提供更优质的服务。     

激光扫描共焦显微镜图像的亮度补偿

用自适应亮度补偿方法改进了激光扫描共焦显微镜所获图像的视觉效果。提出了一种简单的修正方法,实践表明通过这种简单的图像处理方法．可提高三维重建模型的亮度连续性和视觉质量。     

激光扫描共聚焦显微镜在人胆管癌组织免疫荧光染色切片观察中的应用

目的：探讨利用激光扫描共聚焦显微镜鉴定单克隆抗体特异性。方法：正常人胆管组织、正常人肝组织及人胆管癌组织切片经免疫荧光染色后置于普通荧光显微镜及激光扫描共聚焦显微镜进行观察,比较二者效果。结果：与普通荧光显微镜相比,激光 聚焦显微镜能清晰地显示染色组织的荧光染色部位及强弱,能较好地显示染色组织的形态,显示出良好的准确性及精确性。结论：激光扫描共聚焦显微镜在免疫荧光染色切片的检测中具有准确、特异、清晰的特点,在单克隆抗体的鉴定中具有良好的应用前景。     

激光扫描共聚焦显微镜在石油地质学中应用改进

激光扫描共聚焦显微镜(CSLM)被应用于石油地质学各方面的研究目前仍处于探索之中,为了更有效开发该仪器的功能应用于石油地质学领域,本文以东海盆地西湖凹陷秋月一井致密砂岩储层岩石薄片为例,应用CSLM观察和计算了孔喉直径、结构、形态和油气赋存状况,同时改进了孔隙度计算方法,提高了精度;以塔里木盆地顺904井志留系储层流体包裹体薄片为例,改进了测量油包裹体的气液比的方法,减少了油包裹体的荧光遮盖效应,提高了精度,并结合热动力模拟软件恢复了古压力值.     

激光扫描共聚焦显微镜样品制备的改进方法用于8种纤毛虫表膜的观察

采用KMnO4作为固定剂,对传统的免疫荧光细胞化学技术进行改进,将制备好的样品用激光扫描共聚焦显微镜进行连续断层扫描和三维重建,清晰地呈现了8种纤毛虫的表膜以及纤毛模式,为原生动物纤毛虫表膜研究提供了一种可供借鉴的样品制备方法。     

基于激光扫描共聚焦显微镜的蛋白质相分离研究方法

激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)具有高分辨率、高对比度和可定量测量等优势,其在细胞及组织成像等方面的广泛应用极大地推动了生命科学领域的发展。相分离的研究极度依赖显微成像技术,本文着重总结了基于激光扫描共聚焦显微镜的相分离研究方法,并探讨了相分离研究的难点,为相关研究人员了解蛋白质相分离及显微镜在相分离领域的应用提供了参考,也为开展相分离研究提供了技术依据。     

共聚焦激光扫描显微镜系统及其在生物学研究中的应用

本文介绍了共聚焦激光扫描显微镜系统的工作原理及其优良性能。文中还介绍了利用此系统进行两种动物视觉显微结构的三维重建和定量分析。     

激光扫描共聚焦显微镜观察细胞在丝素纤维织物上的生长情况

利用激光扫描共聚焦显微镜（laser scanning confocal microscope,LSCM）技术,用活细胞荧光示踪剂标记细胞,观察细胞在天然丝索纤维和再生丝索纤维上的生长情况。用含10μmol／L Cell—Tracker CM-Dil（Molecular Probes Company）的尤血清RPMI1640培养液,室温标记V79．333和原代心肌细胞30min,接种于Glass Bottom Dish中,将两种受试材料分别放入Glass Bottom Dish中,继续培养。在加入受试材料后1．2．3．4、5,7天,利用LSCM技术,采用双通道同时扫描的方式,一个通道的激发波长为5341ma,发射波长为540—650nm,另一个通道使用微分干涉差成像技术,动态观察细胞在再生丝素纤维受试材料的生长情况。实验发现V79细胞和3T3细胞在天然丝素纤维上是接种后5天明显增多,在再生丝素纤维上生长数量是接种后4天明显增多,而且比在天然丝素纤维生长的数量多。原代心肌细胞在天然和再生丝素纤维上生长得非常少。     

激光扫描共聚焦显微镜技术用于eIF-5A与syntenin及TIMP4的共定位及相互作用研究

eIF-5A是真核细胞内普遍存在的一种蛋白质，是唯一含有独特氨基酸hypusine的蛋白质。其功能与肿瘤细胞的生长和凋亡密切相关，已被认为是一个潜在的抗肿瘤药物作用靶点，但其作用机制尚不十分清楚。激光扫描共聚焦显微镜（laser seanning confocal microscope，LSCN以下简称共聚焦显微镜）因其独特的设计原理，有效地排除了非焦来面信息，提高了分辨率及对比度，使图像更为精确清晰，