大豆胚芽异黄酮的提取分离与结构鉴定

利用柱层析法从大豆胚芽中分离到 8个异黄酮化合物 ,分别是黄豆素糖苷、大豆苷元糖苷、染料木素糖苷、丙二酰黄豆素糖苷、黄豆素苷元、大豆苷元、染料木素、染料木素葡萄糖苷 - 6″ -阿拉伯糖 ,其中化合物染料木素葡萄糖苷 - 6″ -阿拉伯糖在大豆中为新发现     

高效液相色谱-质谱法在大豆异黄酮测定中的应用

应用高效液相色谱 -质谱法检测东北地区生产的 6个品种的大豆及其胚芽中异黄酮的含量 ,检测到 6种类型的异黄酮。 6个品种的大豆全豆异黄酮含量为 0 .15 1%～ 0 .388% ,胚芽异黄酮含量为 1.4 5 6 %～ 3.0 3% ,所测大豆因品种差异而致异黄酮含量相差 1倍以上。在天然状态下 ,异黄酮主要以丙二酰形式存在 ,所测结果在 80 %以上。在全大豆中 ,异黄酮以染料木素糖苷 (genistin)及其衍生物为主 ,占异黄酮总含量的 5 6 %～ 6 8% ,在胚芽中 ,异黄酮以大豆黄素糖苷 (daidzin)和黄豆黄素糖苷 (glycitin)及其衍生物为主 ,分别占异黄酮总含量的 4 5 %～ 5 1%和2 1%～ 2 8%。     

热处理与大豆异黄酮苷元的转化分析

目的研究不同加热处理后大豆异黄酮苷元的含量和比例变化情况。方法大豆样品经烘箱50、100和150℃烘干,微波加热5min和炒熟等热处理后,由80%乙醇溶液超声提取,经高效液相色谱SB-C18柱(4.6mm×250mm,5μm)分离,0.2%冰乙酸+甲醇溶液梯度洗脱,紫外检测器260nm检测苷元和β-葡萄糖苷型大豆异黄酮含量。结果黄豆中检测出黄豆苷元、染料木素2种苷元和黄豆苷、黄豆黄苷2种β-葡萄糖苷。随烘箱加热温度升高,黄豆苷元含量增加1～5倍;染料木素增加3～15倍。炒豆中苷元和β-葡萄糖苷增加量最多。微波加热与50℃烘箱加热结果基本相同。青豆、黑豆与黄豆结果相近。结论加热使豆粉中部分糖苷型大豆异黄酮分解转化为苷元,活性成分增多,营养保健价值提高。     

青方腐乳发酵过程中大豆异黄酮的转化研究

本文比较了青方、红方、白方和低盐红腐乳中大豆异黄酮组成和含量差异,并对青方腐乳发酵过程中大豆异黄酮含量和构型变化规律进行研究。结果表明,四种类型腐乳中大豆异黄酮基本以苷元形式存在,青方腐乳大豆异黄酮含量明显低于其他类型腐乳,仅为红方腐乳的33.01%,从单一异黄酮来看,大豆苷元和染料木素在四种类型腐乳中的含量明显高于黄豆黄素;青方腐乳发酵过程中大豆异黄酮转化研究发现,白坯中大豆异黄酮以糖苷型为主,染料木苷含量高于大豆苷和黄豆黄苷,前酵过程中糖苷型大豆异黄酮转化为苷元型大豆异黄酮,盐腌过程中糖苷型大豆异黄酮含量有轻微降低,发酵过程中苷元型大豆异黄酮总量在后酵前30 d显著下降,其中大豆苷元可能部分转化为雌马酚,导致青方腐乳大豆异黄酮含量明显低于其他类型腐乳,对其转化物质需进一步鉴定。     

纤维素酶水解大豆异黄酮糖苷混合物的抗氧化活性

大豆异黄酮主要以糖苷类型的分子形式存在于大豆中,但是其具有生物活性的部分主要是苷元.为了建立一种体外生物转化大豆异黄酮糖苷为大豆异黄酮苷元的新方法,采用纤维素酶水解70%乙醇提取脱脂大豆粕得到的异黄酮粗提物,对比了水解前后两样品的异黄酮组成差异,并测定了其清除DPPH自由基的能力.结果表明:纤维素酶能完全水解大豆苷和染料木苷为大豆素和染料木素;而不能水解丙二酰基染料木苷和丙二酰基大豆苷.纤维素酶处理以后的大豆异黄酮糖苷混合物达到DPPH自由基50%清除率所需要的异黄酮浓度是未处理的大豆异黄酮糖苷混合物的1/2.56.     

淡豆豉、黄大豆及黑大豆中异黄酮苷元的提取与含量比较

为探讨淡豆豉、黄大豆及黑大豆中异黄酮苷元的提取与含量,本研究采用超声提取,用β-葡萄糖苷酶酶解大豆异黄酮中的糖苷键.以聚酰胺薄膜层析定性、HPLC定量检测不同原料中异黄酮苷元含量.实验结果表明,HPLC最佳流动相为甲醇-乙酸-水(12:1:10),染料木苷、大豆苷元和染料木素在20min内分离良好.大豆异黄酮苷元含量依次为:淡豆豉>黄大豆>黑大豆.精密度实验RSD分别为1.45%和1.6%,平均加样回收率100.93%,证明实验所建立的检测方法准确、可靠.     

加热预处理对大豆胚芽风味及其异黄酮存在形式的影响

大豆胚芽含有大量异黄酮化合物,天然异黄酮存在形式主要丙二酰型糖苷,此类异黄酮化合物是大豆胚芽的苦涩、豆腥味的主要呈味物质。研究显示采用加热处理可较大程度地降低大豆胚芽的苦涩味,从而改善胚芽的风味。采用HPLC分析显示,加热处理可使丙二酰型异黄酮糖苷转换为乙酰型糖苷,甚至糖苷化合物,后者的呈味显著低于丙二酰型异黄酮糖苷化合物。     

HPLC-ESI-MSn法鉴定大豆中12种大豆异黄酮的结构

为了鉴定大豆异黄酮的结构,采用高效液相色谱-电喷雾离子源-离子阱多级质谱联用仪(HPLC-ESI-MSn)法分离鉴定大豆粉乙醇提取物,通过多级质谱提供的准分子离子峰和多级碎片离子信息,分析得到了12种大豆异黄酮的相对分子质量、保留时间并推断了它们异黄酮糖苷的组成结构、异黄酮糖苷中糖的类型等,这12种大豆异黄酮分别是大豆苷元、大豆黄素、染料木素、大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、乙酰基大豆苷、乙酰基大豆黄苷、乙酰基染料木苷、丙二酰基大豆苷、丙二酰基大豆黄苷、丙二酰基染料木苷。     

高效液相色谱法快速测定大豆异黄酮制品中有效成分的研究

采用高效液相色谱法测定大豆异黄酮制品中染料木苷、黄豆苷、染料木黄酮和黄豆苷元含量.固定相为Agilent-1100 C18柱(3.9 x 150mm);以甲醇:水=35%～45%为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.0～2.0mL/min;柱温为室温;检测波长为260nm.实验结果表明,市售30%大豆异黄酮制品中,含大豆异黄酮糖苷近28%,其中染料木苷为4%、黄豆苷为8%,苷元形式异黄酮未检出;采用酶水解法制备的大豆异黄酮水解物中含染料木黄酮14.3%、黄豆苷元9.8%,其大豆异黄酮苷元占大豆异黄酮总含量的96%.     

丹贝异黄酮生物活性增强的机理研究

以少孢根霉RT-3孢子接种在含高浓度的大豆异黄酮提取物制成的发酵基质中，发酵36h后大豆异黄酮被部分水解成相应的苷元．用从丹贝中分离的β-葡萄糖苷酶与标准品染料木素糖苷和大豆苷元的糖苷作用10min，染料木素糖苷和大豆苷元的糖苷被水解成相应的苷元．结果表明：丹贝异黄酮生物活性增强是发酵剂RT-3孢子分泌的β-葡萄糖苷酶将异黄酮由糖苷水解成苷元，而苷元比糖苷有更强的活性．     

大豆异黄酮糖苷和苷元免疫功能研究

用大豆异黄酮糖苷和大豆异黄酮苷元喂养小鼠后,其鸡红细胞作免疫原的溶血素光密度值比在相同环境下空白对照组明显增加,这表明大豆异黄酮糖苷和苷元都能有效提高小鼠体液免疫功能;同时发现小鼠对大豆异黄酮苷元吸收效果强于大豆异黄酮糖苷,说明大豆异黄酮苷元免疫功能优于大豆异黄酮糖苷。     

Extraction yield of isoflavones from soybean cake as affected by solvent and supercritical carbon dioxide

Soybean cake has been shown to be a rich source of isoflavone and can be produced during processing of soybean oil as byproduct. The objectives of this study were to compare the extraction yield of isoflavone from soybean cake by solvent and supercritical carbon dioxide, and study the conversion of isoflavone glucosides to the biologically active aglycone by employing β-glucosidase. Results showed that with supercritical carbon dioxide extraction, a maximum yield of malonylglucoside and glucoside was generated at 60 °C and 350 bar, while a high level of acetylglucoside and aglycone was produced at 80 °C and 350 bar. Supercritical carbon dioxide extraction resulted in a lower yield of total isoflavone than solvent extraction, but the former was more applicable to extraction of acetylglucoside and aglycone, and the latter to malonylglucoside and glucoside. A peak level of aglycone was attained from conversion of isoflavone glucoside by β-glucosidase at 55 °C, pH 5, concentration 50 U/ml and incubation time of 2 h.     

萌芽-低温打浆技术制备高苷元类异黄酮豆乳粉

在传统湿法工艺技术制备豆乳粉的基础上,以萌芽大豆为原料,对热烫后的大豆进行低温打浆处理,提高豆乳粉苷元类异黄酮含量。在单因素试验基础上,采用响应面法对萌芽-低温打浆制备高苷元型异黄酮豆乳粉工艺进行优化,确定最优萌芽-低温打浆的工艺参数为萌芽温度25?℃、萌芽时间75?h、浆液pH?6.0、打浆温度57?℃、打浆时间3.5?h,响应值苷元类异黄酮含量有最优值,为6.43?mg/g。利用高效液相色谱测定豆乳粉中异黄酮种类及含量,结果发现萌芽-低温打浆可显著提高豆乳粉中总异黄酮含量及苷元类异黄酮含量（P＜0.05）,与传统湿法工艺相比,其异黄酮总含量及苷元类异黄酮含量分别增加了1.09?倍和9.37?倍。     

β-葡萄糖苷酶的固定化及其用于制备大豆异黄酮的研究

采用25%脱乙酰壳聚糖滴入15%的NaOH与30%的CH3OH组合的成球凝结溶液制备中空球形脱乙酰壳聚糖。适量的β-葡糖糖苷酶用4%戊二醛与中空球形脱乙酰壳聚糖偶联,实现β-葡糖糖苷酶的固定化。中空球形壳聚糖固定化的β-葡萄糖苷酶适宜pH值为4.0、适宜温度为68℃、相对酶活力为87.9%。在50℃用60%乙醇提取大豆异黄酮糖苷,得率约为4.0mg/g。再用固定化β-葡糖糖苷酶水解异黄酮糖苷,70℃、1h后,再经超滤、固定化酵母细胞等处理,可制备纯度达94%的大豆异黄酮甙元。     

大豆异黄酮糖苷及其苷元调节免疫功能的比较研究

目的:比较大豆异黄酮糖苷及游离型大豆苷元对小鼠免疫功能能力的影响。方法:将实验室提取大豆异黄酮糖苷和苷元(纯度为41%左右)的产品按照40～100mg/kg,连续灌胃21d后,与对照组相比能显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力及小鼠脾重。结果:大豆异黄酮糖苷和苷元具有较强的调节小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力,能刺激小鼠脾脏和胸腺器官的发育;同一剂量的大豆异黄酮糖苷和苷元雌鼠的效果要好于雄鼠,游离型大豆苷元的吸收效果明显好于糖苷。     

发酵对黑豆营养及活性成分的影响研究

本试验采用百粒重为12克的黑豆为原料，对黑豆、蒸煮黑豆及发酵黑豆的营养及活性成分进行了哆究，黑豆经发酵处理后糖苷型大豆异黄酮在β-葡萄糖苷酶的作用下，可转化为游离型大豆异黄酮，使游离型大豆异黄酮含量明显提高。蛋白质、多肽、可溶性糖、游离氨基酸的含量也有所提高。     

Ripening temperature affects the content and distribution of isoflavones in sufu,a fermented soybean curd

Sufu, a fermented soybean curd, was prepared by ripening the salted tofu cubes in the Aspergillus oryzae‐fermented rice–soybean koji mash at 25, 35 or 45 °C for a period of 16 days. It showed that the 16‐day ripened sufu contains less total isoflavone content (629.29–739.68 μg g^?1 dried matter) than the salted tofu before ripening (942.59 μg g^?1 dried matter). Regardless of ripening temperature, ripening causes a major reduction in the content of β‐glucoside and malonylglucoside isoflavones along with a significant increase of aglycone isoflavone content. These changes were enhanced as the ripening period extended. Among the various treatments examined, sufu ripened at 45 °C showed the greatest increase in aglycone content coupled with the greatest decrease in malonylglucosides. The distribution of malonylglucosides decreased from an initial 40.32% in the tofu cube to 9.78% after 16 days of ripening at 45 °C. Meanwhile, the distribution of aglycone increased from 13.17% to 39.88%.     

几种水解法制备高纯度大豆异黄酮甙元工艺比较研究

以低纯度商品大豆异黄酮为原料,利用酸水解法、超声波辅助酸水解法及酶水解法制备高纯度大豆异黄酮甙元产品。通过实验,比较这三种水解制备方法水解率、产品回收率和产品纯度,并对制备得到产品进行成分分析,选择出较佳制备高纯度大豆异黄酮甙元方法。实验结果表明,采用β―葡萄糖苷酶水解分离纯化工艺制备大豆异黄酮甙元产品,操作简单,安全环保,其产品得率、异黄酮回收率和产品纯度分别为15.1%、77.1%和92.7%,分离纯化效果较理想。     

永川豆豉传统发酵过程中的大豆异黄酮变化

为了探明永川豆豉在传统发酵过程中大豆异黄酮总含量和构成变化,采用高效液相色谱技术对永川豆豉传统发酵过程中大豆异黄酮总量和构成进行测定。结果表明：永川豆豉在发酵加工过程中大豆异黄酮总含量由发酵起始的3117mg/kg下降到豆豉成熟时的1754mg/kg;大豆异黄酮构成变化显著,游离苷元型大豆异黄酮含量迅速增加由发酵起始的3.2%上升到豆豉成熟时的95.7%,同时结合糖苷型大豆异黄酮含量迅速降低。