一株具高木二糖和木三糖形成活力木聚糖酶链霉菌的鉴定

对1株具高木二糖和木三糖形成活力木聚糖酶的链霉菌菌株进行了分离与鉴定。从土壤中筛选得到1株产木聚糖酶的链霉菌Streptomyces sp.F0107。从形态学特征、培养特征和生理生化特征等方面对该菌株进行了鉴定。PCR扩增得到16SrDNA序列全长为1406bp,从Genbank数据库中BLAST对比,并运用Clustalx1.8和MEGA3.1软件绘制系统发育树。分析结果表明,菌株与Streptomyces tauricusEU841578同源性达99.36%。结合传统生理生化实验结果,初步鉴定为公牛链霉菌。Streptomyces sp.F0107所产木聚糖酶水解不同木聚糖主要产物为木二糖和木三糖,在低聚木糖生产中具有潜在的应用价值。      

产溶菌酶白色链霉菌的筛选及鉴定

从广西各地土壤中取样,利用添加金黄色葡萄球菌的LB培养基初筛,然后用含金黄色葡萄球菌的营养盐平板复筛,所得突变株经摇瓶发酵后测定其用蛋白酶K处理前后的粗酶液活力变化,筛选到一株溶菌酶产生菌RJ-36b.通过菌株形态学和16S rDNA保守序列分析,鉴定其为白色链霉菌.对其发酵条件的初步研究表明,在32℃、200 r/m...     

橄榄绿链霉菌固体发酵产木聚糖酶的研究

本文研究了橄榄绿链霉菌(Streptomycesolivaceoviridis)E-86固体发酵产木聚糖酶,系统探讨了不同碳源、不同氮源、温度、初始含水量、初始pH、接种量及培养时间对该菌产木聚糖酶的影响。结果表明:麸皮是橄榄绿链霉菌E-86固体发酵产木聚糖酶的最优碳源。发酵条件为麸皮100%,酵母提取物(yeast)1% 胰蛋白胨(tryptone)1%,基本营养盐溶液200%,发酵温度35℃,初始pH值6.5左右。木聚糖酶活最高,达1558.5U/g。     

链霉菌发酵稻草粉产木聚糖酶的条件研究

以稻草粉为基质,采用单因素试验和正交试验,对链霉菌LH-3发酵产木聚糖酶的条件进行研究。结果表明,最佳产酶条件为:辅加碳源为麸皮,种子培养时间为24h,接种量为14%,摇床转速为140r/min,培养温度为37℃,培养基初始pH值为11,培养时间为5d,装液量为30%。在此最佳条件下培养,木聚糖酶活力最高达120.3U/mL。     

高产纤维素酶生二素链霉菌的鉴定与选育研究

从朽木中分离到1株产纤维酶活力高的NC-7菌株,经形态观察和生理生化测定,初步鉴定为放线菌,链霉菌属,生二素链霉菌(Streptomyces ambofaciens)。采用硫酸二乙酯60min与紫外70s、硫酸二乙酯60min与紫外80s的复合诱变方法对NC-7孢子进行诱变,得到产纤维酶活力高的2株菌,即X402菌株、P303菌株,其FPA酶活力分别为2.85IU/mL、2.52IU/mL,比NC-7出发菌株分别提高38.95%、22.44%;CMC酶活力分别为4.83IU/mL、5.29IU/mL,比NC-7出发菌株提高13.21%、23.92%。     

两株链霉菌的鉴定与酿造主要应激条件耐受性研究

放线菌作为酱香型白酒生产主要微生物之一,对酱香型白酒的风味有一定的影响,研究酱香型白酒生产过程中放线菌的种类和对窖池环境的适应性对于认识放线菌对酱香型白酒风味的具体影响方式有一定作用。以酱香型白酒生产过程中筛选获得的A2、A22为对象,对其进行多相分类鉴定,并考察其对窖池环境中p H值、乙醇、温度的耐受性。结果表明,A2菌株为灰色链霉菌(Streptomyces griseus),A22为白色链霉菌(Streptomyces albus),均能耐受p H值4.0及4%vol乙醇浓度。A2、A22两株链霉菌对酿造环境的适应能力较好,具有一定的研究价值。     

一株产壳聚糖酶芽孢杆菌的分离及鉴定

采用透明圈法,从黄河三角洲地区的腐败落叶分离出9株产壳聚糖酶的菌株。再经菌株分离纯化、液体发酵复筛及酶活研究,确定其中1株为壳聚糖酶高产菌株,命名为XHT-0903。通过形态学特征、生理生化特征及16S rDNA序列分析进行菌株鉴定,确定XHT-0903为蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）。其液体发酵酶活力达20 U/mL,具有较好的开发及应用价值。     

一株新的海洋放线菌所产黄色素稳定性研究及其16S rDNA序列分析

对一株分离自威海海域的产黄色素的海洋放线菌新菌株MA01进行了色素提取方法及其稳定性的研究。测定其最大吸收波长,考察了pH、光照、温度、金属离子、氧化剂和还原剂、防腐剂等因素对黄色素稳定性的影响。此外,对菌株MA01进行分子鉴定,利用PCR技术扩增其16S rDNA序列,并构建了系统进化树。实验结果表明,该黄色素在300nm处有最大吸收峰,超声波法提取色素优于溶剂法。该黄色素为水溶性色素,易溶于甲醇和乙醇,在弱酸性、中性和碱性条件下稳定,温度小于60℃时热稳定性良好,对紫外光和可见光照射稳定性良好,基本不受金属离子K+、Na+、Mg2+、Mn2+、Ca2+影响,防腐剂食盐和蔗糖对其均无不良影响。该黄色素不耐氧化剂,还原剂也会降低其稳定性。16S rDNA序列分析和系统进化树显示菌株MA01与多株Streptomyces sp.的16S rDNA具有99%的相似性,初步鉴定菌株MA01是链霉菌属Streptomyces sp.的一种。菌株MA01具有较高的研究和开发价值。      

两株土壤放线菌ZSM-1和ZSM-2的分离与鉴定

对分离自土壤的2 株编号为ZSM-1和ZSM-2的放线菌进行分类鉴定,提取基因组脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid,DNA）后经聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）扩增菌株16S rDNA,基因测序并进行同源性分析,构建进化树并进行系统发育分析,结合培养特征、生理生化特征,将该2 株菌分别鉴定为纳士维尔链霉菌（Streptomyces nashvillensis）与土地戈登氏菌（Gordonia terrae）。     

一株牛蒡表面产纤维素酶细菌的分离鉴定

从牛蒡表面获得的多株产纤维素酶细菌中筛选到一株产酶活性较高的菌株NP10。使用生物技术方法获得了NP10长度为1419bp的16S rDNA序列。利用生物信息学方法在美国国立生物技术信息中心NCBI基因库比对分析了该序列,通过分析初步确定该菌为Bacillus sp.。本文为食品科学中进行细菌鉴定提供了方法参考,并为开发新型纤维素酶提供了资料。      

一株硫化物氧化细菌的分离、鉴定和脱硫效果初步验证

从无锡市某硫酸厂采集的土样中分离到一株具有硫化物氧化能力的细菌,对该细菌的16S rDNA序列进行测定,并根据16S rDNA构建了系统发育树.结果表明,TL-1与硫杆菌属有较高的同源性,与那不勒斯硫杆菌 (Thiobacillus neapolitanus) 同源性为95.3%,结合菌落、细菌形态鉴定菌株为硫杆菌属( Thiobacillus ),并命名为TL-1.同时,对TL-1的脱硫效率进行了初步研究.结果表明,在硫化物为惟一硫源且其质量浓度分别为60,120,180,240 mg/L时,4 h时硫化物去除率分别达到87.92%、71.25%、63.45%和13.31%.     

一株产L-乳酸菌株的筛选、鉴定及营养条件的初步研究

作者对筛选的一株产L-乳酸的菌株进行了菌种鉴定,根据16S rDNA序列测定结果,结合其形态特征及生理生化性质,确定该菌株为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)。进一步对其营养条件进行了研究,初步确定玉米糖化液为最适碳源,采用1g/dL酵母粉与1g/dL棉籽蛋白的混合氮源,L-乳酸产量不仅有所提高且成本大大降低,金属离子Mn2+、Fe2+、Mg2+都可在一定程度上提高L-乳酸的产量。     

一株产抗菌活性物质解淀粉芽孢杆菌的筛选及鉴定

从菜园土壤中分离筛选到1 株产广谱抗菌活性物质的菌株K6,其抗菌活性物质对藤黄微球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、酿酒酵母、匍枝根霉和白色念珠菌均有抑制作用,其中对革兰氏阳性菌的抑菌作用最强,对霉菌的抑制作用相对较弱。通过形态特征、16SrDNA 序列分析和系统发育分析,菌株K6 与B. amyloliquefaciens 位于同一簇群,同源性达99%,将其初步鉴定为解淀粉芽孢杆菌。     

一株产纳豆激酶菌株的分离筛选及鉴定

对能产生纳豆激酶的菌群进行了筛选,分离得到了1株具有较高纤溶活性的菌株N391,其纳豆激酶相当于1722.4U/mL尿激酶的酶活。利用细菌16S rDNA通用引物对其16S rRNA进行PCR扩增,得到1511bp的片段,该PCR产物序列通过Blast软件在NCBI网站中进行同源性比较,通过DNA MAN和MAGE3.1软件绘制系统发育树,结果表明,菌株N391的16S rRNA序列(DQ906100)与枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)的16S rRNA序列的同源性在99%以上,在系统发育树中,菌株N391与Bacillus subtilis在同一分支,且遗传距离最短。结合常规的形态、生理生化鉴定,N391的形态及大部分生理生化特征与Bacillus subtilis极为相似,表明菌株N391属于Bacillus subtilis的1个菌株,由此初步确定该菌在微生物系统发育学上的地位。     

一株他克莫司产生菌的筛选及鉴定

添加75μg/mLK2Cr2O7和2μg/mL青霉素对土样进行预处理,采用抑菌圈法初筛得到71株能抑制白色假丝酵母生长的菌株,高效液相色谱法检测代谢产物复筛,获得一株他克莫司产生菌株。对菌株形态学特征、培养特征、生理生化特征、细胞化学组分和16SrDNA序列进行分析。结果表明:NJYH2618为革兰氏阳性菌,生长温度15～38℃,最适生长温度28℃,生长pH6.5～8.5,最适pH7.0,能利用葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、木糖、果糖、乳糖、鼠李糖等常见碳源。细胞水解产物成分和16SrDNA序列分析表明,此菌株属链霉菌属,命名为Streptomyces sp.NJYH2618。     

产蓝色素放线菌的初步鉴定和蓝色素性质研究

对一株从土壤中筛选出来的产蓝色素的放线菌进行了初步鉴定, 命名为天蓝色链霉菌－１００（Ｓｔｒｅｐｔｏｍ ｙｃｅｓ ｃｏｅｌｉｃｏｌｏｒ－１００ ）,并对蓝色素的性质进行了研究．结果表明此色素无臭无味,水溶性较强．酸性条件下,溶解度随ｐＨ 降低而减小．ｐＨ＜ ８ 时为红色,ｐＨ≥８ 时为蓝色,颜色随ｐＨ 增大而加深．于１００ ℃短时间处理,比较稳定．在ｐＨ 中性的条件下对光（包括紫外光）较稳定．大多数金属离子如Ｂａ２＋ 、Ｋ＋ 等对此色素无影响,Ｍｇ２＋ 使色素增色．Ｆｅ２＋ 在５×１０－４ ｍ ｏｌ／Ｌ时,使色素变性,但在５×１０－５ ｍ ｏｌ／Ｌ时,对色素没有多大影响．Ｐｂ２＋ 可以络合色素,使之沉淀;加入０．２５％ 盐酸乙醇后,色素再溶解．该蓝色素可作为天然色素或天然ｐＨ 指示剂开发．     

纤维素分解菌BSX5的分离、鉴定及产酶条件

利用透明圈法从袋装降解的笋干中分离到一株分解纤维素的细菌菌株. 该菌株呈长杆状、革兰氏染色为阳性、产芽孢,命名为BSX5.其生理生化特征和16S rDNA序列同源性分析,发现该菌株与Bacillus subtilis的同源性为99%,系统发育树分析与Bacillus subtilis遗传关系最近,确定该菌株为Bacillus subtilis. 采用以3,5-二硝基水杨酸（DNS）为显色剂、羧甲基纤维素钠（CMC-Na）为底物,测定不同培养条件下BSX5菌株的酶活力,结果最适产酶时间为8-12 h,最适产酶温度为50 ℃,最适产酶pH值为5.5～6.5.     

产耐热普鲁兰酶菌株的分离、筛选与鉴定

从某火山口的土壤样品中分离筛选得到了一株产耐热普鲁兰酶菌株T-10,酶活力为1.22 U/m L。经形态特征观察、生理生化特征实验以及16S r DNA序列同源性分析,确定该菌株为解淀粉芽孢杆菌。酶学性质研究表明:该普鲁兰酶的最适温度是60℃,在70℃保温4 h后活力残留60%以上;最适p H值为6.0,p H 3.0~8.0在室温保存4 h后相对酶活力大约为70%。目前,鲜有发现产耐热普鲁兰酶的菌株为解淀粉芽孢杆菌,其具备良好的应用前景。     

产纤溶酶菌株的分离和鉴定及纤溶酶基因在酿酒酵母中的表达

目的:从豆豉中分离具有强纤溶活性的菌株,实现纤溶酶基因在酿酒酵母中的表达.方法:通过纤维蛋白平板法从豆豉中分离具有强纤溶活性的菌株,结合形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析鉴定该菌株;通过PCR扩增豆豉纤溶酶基因,构建pYES2-DFE重组质粒,转化酿酒酵母H158感受态细胞,经β-半乳糖诱导表达后,用纤雏蛋白平板法分别检测发酵液上清和菌体破碎上清的纤溶酶活性.结果:鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);活性检测结果是酿酒酵母发酵液上清具有纤溶酶活性,而菌体破碎上清没有活性.结论:豆豉纤溶酶基因在酿酒酵母中实现了分泌表达.