食品多组分添加剂及非法添加物的HPLC—HRMS广谱筛查

采用离子阱飞行时间串联质谱(LCMS-IT-TOF)技术对葡萄酒、果汁等饮料中多组分添加剂和禁用染料进行快速筛查和确证。构建了合成色素、甜味剂、禁用染料等41种化合物的精确分子质量数和多级质谱碎片离子数据库。样品经甲醇—水(体积比1;1)稀释后,以C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm)分离,甲醇和2mmol/L乙酸铵为流动相梯度洗脱。筛查检出限为0.005~1.000 mg/kg。在3个添加浓度下平均回收率41.2%~114.1%,相对标准偏差(RSD)为4.3%~16.4%。利用精确质量数和数据库中质谱图的检索匹配度实现快速筛查;结合保留时间、同位素丰度和多级特征碎片离子对目标化合物进行确证。该方法具有简便快速、准确、灵敏度高等优点,同时可实现无标准物质的情况下,较短时间内完成对食品中可能存在的添加剂和非法添物进行筛查检测,缩短检测时间,提高检测效率。     

天然染料质谱数据库的建立与应用

为提高纺织品文物中天然染料鉴定的准确性和便捷性，利用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)技术对68种天然染料化合物标准品进行分析，收集化合物分子质量、碎片离子及丰度、检测离子模式、保留时间等信息，建立了基于美国国家标准技术研究院质谱数据库的天然染料质谱数据库。通过设置合理的检索条件，确定质谱库检索最佳参数，对代表性蒽醌类(茜素)、黄酮类(槲皮素、木犀草素)、生物碱类(小檗碱)化合物进行了分子碎裂机制解析。应用自建的质谱数据库成功实现了2件古代纺织品文物中天然染料的快速鉴定，质谱数据库检索结果显示其含有茜素、茜紫素、木犀草素、小檗碱、巴马汀等染料化合物，且在文物样品的检索过程中，质谱数据库正向检索匹配度与反向检索匹配度均大于800,匹配率均在95%以上。利用质谱数据库检索技术鉴定天然染料具有可行性，为纺织品文物中天然染料的研究工作提供了新思路。     

液相色谱/四级杆-飞行时间质谱对人造奶油中苏丹类染料的检测

建立了人造奶油中苏丹类染料化合物的液相色谱-四级杆飞行时间质谱的检测方法.样品经正己烷振荡提取和凝胶渗透色谱净化,液相色谱分离后采用四级杆-飞行时间质谱进行分析,8种化合物的检测限在o.75～5n/mL之间;通过飞行时间质谱的精确质量数功能与谱图数据库检索,对8种苏丹类染料化合物进行精确的匹配和鉴定,除苏丹红G外,其余其中染料匹配度均在94%以上,并通过二级质谱对化合物的结构进行了进一步确证.     

超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间高分辨质谱法筛查和确证猪肉中117种兽药残留

目的 建立117种兽药化合物的高分辨质谱一级数据库和二级谱库,建立应用超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间高分辨质谱对猪肉中多种类兽药残留进行筛查和确证的定性分析方法。方法 均匀分散的样品经提取、净化后,通过Acquity HSS T3超高效液相色谱柱（2.1 mm×100 mm, 1.8 μm）分离,流动相梯度洗脱后进入高分辨质谱检测。在正离子模式下,通过高分辨质谱一级全扫描对样品进行分析,与数据库中的目标化合物精确质量数、保留时间进行匹配。对疑似阳性样品进一步通过二级碎片离子扫描进行确证。结果 建立的分析方法对目标化合物选择性良好,检出限在1~80 μg/kg,满足对快速筛查分析的方法学要求。结论 该方法简单、灵敏、分析速度快,适用于猪肉中117种兽药化合物的筛查和确证。     

液相色谱-四极杆飞行时间质谱用于快速筛查动物组织中多种激素残留的方法研究和应用

建立了一种采用液相色谱-四极杆飞行时间质谱（LC-Q-TOF/MS）用于快速筛查动物组织中多种激素残留的检测方法。样品通过乙腈和乙酸乙酯分步提取,提取液经增强型脂质去除吸附剂（EMR）净化,盐析后经N-丙基乙二胺（PSA）和官能化聚苯乙烯/二乙烯苯（PEP-2）进一步净化,以0.1%甲酸水?0.1%甲酸乙睛作为流动相进行梯度洗脱,在EclipsePlus-C₁₈（3.0 mm×100 mm,1.8 μm）色谱柱上进行分离,在Q-TOF/MS正离子全扫描模式下采集质谱数据,以保留时间、精确分子质量数、同位素丰度比和二级特征碎片离子定性,待测物准分子离子峰面积定量。结果表明,所有药物在各自浓度范围内线性良好,相关系数大于0.995,在10、50、100 μg/kg添加水平下,平均回收率在70.3%～116.2%之间,相对标准偏差为0.87%～8.97%,方法检测限为1～10 μg/kg,定量限为3～30 μg/kg。该方法通过构建一级精确质量数据库和二级谱库,结合保留时间、精确分子质量数、同位素丰度比和二级特征碎片离子,实现对目标化合物快速筛查和确证,具有简单快速、高灵敏度,高选择性和良好精密度的优势,适用于动物组织多种激素的快速筛查和定量测定。     

高分辨质谱快速筛查牛乳中10种禁用兽药残留

采用超高效液相色谱—四级杆飞行时间高分辨质谱(UHPLC-QTOF MS)技术建立了生鲜牛乳中10种雌激素类和氯霉素类药物的快速筛查方法,并建立了此10种化合物的精确分子质量数和二级质谱碎片离子数据库。牛乳样品经乙腈提取,采用QuECh?ERS(Quick,Easy,Cheap,Effective,Rugged and Safe)方法净化。目标药物经Agilent ZORBAX SB C18色谱柱分离,以乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,使用Dual AJS ESI源,在负离子模式下进行数据采集,基质匹配标准曲线法定量。结果表明,10种雌激素类和氯霉素类药物的定量下限为10～50μg/kg,在3个加标水平的平均回收率为61.2%～116.3%,相对标准偏差为2.3%～10.8%。结合精确分子质量数、保留时间、同位素丰度和二级特征碎片离子对目标化合物进行快速筛查与确证。该方法快速简便、准确、灵敏度较高,适用于牛乳中雌激素类和氯霉素类药物残留的高通量筛查与定性鉴定。     

超高效液相色谱-高分辨质谱法快速筛查水产品中邻苯二甲酸酯和酚类环境雌激素

目的建立超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱法同时快速筛查和分析水产品中14种邻苯二甲酸酯以及3种酚类(壬基酚、辛基酚和双酚A)环境雌激素的分析方法。方法样品经乙腈提取后,经Silica/PSA固相萃取小柱净化,用ACQUITY UPLC@BENC_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm)分离,以甲醇和0.01%氨水为流动相进行梯度洗脱,采用静电场轨道阱高分辨质谱正负子切换FullMS/ddMS~2扫描方式同时测定17种环境雌激素。以保留时间和全扫描获得的化合物的精确质量数,实现对目标物的快速筛查;以自动触发采集的二级质谱图进行定性确证。结果 17种化合物的精确质量数相对质量偏差小于5×10~(-6);线性良好,相关系数(r~2)大于0.99;该方法的检出限≤5μg/kg,回收率为70.6%~114.3%,相对标准偏差(relative standard deviations,RSDs)为5.5%~14.3%。结论该方法适用于水产品中多种环境雌激素的高通量快速筛查和定量分析。     

基于液相色谱-四极杆飞行时间质谱产莫能菌素芽孢杆菌筛选

目的 筛选产莫能菌素的芽胞杆菌菌株。方法 采用液相-四级杆飞行时间质谱的方法结合Metlin数据库检索分析35株芽胞杆菌菌株的发酵液胞外成分。运用安捷伦公司的MassHunter软件, 对数据进行分子特征提取, 并通过Metlin代谢物质谱数据库检索, 获得总体代谢物的信息。结果 筛选出含莫能菌素的芽胞杆菌菌株为波茨坦短芽胞杆菌(Brevibacillus borstelensis) FJAT-10006。其中, 莫能菌素的相对含量占其发酵液总代谢物的1.20%, 其匹配得分达到93.75, 保留时间为27.9518 min, 精确质量数为670.4308。结论 波茨坦短芽胞杆菌(Brevibacillus borstelensis) FJAT-10006为产莫能菌素菌株。为波茨坦短芽胞杆菌来源的抗真菌抗生素的开发与利用提供理论依据。     

基于液相色谱-四极杆飞行时间质谱产莫能菌素芽胞杆菌筛选

目的筛选产莫能菌素的芽胞杆菌菌株。方法采用液相-四级杆飞行时间质谱的方法结合Metlin数据库检索分析35株芽胞杆菌菌株的发酵液胞外成分。运用安捷伦公司的Mass Hunter软件,对数据进行分子特征提取,并通过Metlin代谢物质谱数据库检索,获得总体代谢物的信息。结果筛选出含莫能菌素的芽胞杆菌菌株为波茨坦短芽胞杆菌(Brevibacillus borstelensis)FJAT-10006。其中,莫能菌素的相对含量占其发酵液总代谢物的1.20%,其匹配得分达到93.75,保留时间为27.9518 min,精确质量数为670.4308。结论波茨坦短芽胞杆菌(Brevibacillus borstelensis)FJAT-10006为产莫能菌素菌株。为波茨坦短芽胞杆菌来源的抗真菌抗生素的开发与利用提供理论依据。     

高效液相色谱-四极杆轨道阱高分辨质谱对动物 源食品中抗生素类成分的快速筛查

目的 建立动物源食品中抗生素快速筛查的Q-Exactive方法。方法 采用酸性乙腈提取动物源食品中的抗生素类化合物, QuEChERS净化, 乙腈水定容, ACQUITY BEH C18色谱柱分离, 以0.1%甲酸-乙腈为流动相, 梯度洗脱分离。Q-Exactive一级全扫描得到的准分子离子的精确质量数用于快速筛选分析, 保留时间和离子阱的二级质谱数据用于进一步定性确证。结果 31 种抗生素的精确质量相对偏差小于5×10?6,线性相关系数均大于0.99, 最低检出限(limit of detection, LOD)均≤10 μg/kg。结论 应用该方法对鱼、牛奶、蜂蜜等实际样品筛查的分析结果良好, 说明该方法是动物源食品中抗生素类成分快速筛选和确证的有效方法。     

高效液相色谱-四极杆轨道阱高分辨质谱对动物源食品中抗生素类成分的快速筛查

目的建立动物源食品中抗生素快速筛查的Q-Exactive方法。方法采用酸性乙腈提取动物源食品中的抗生素类化合物,QuEChERS净化,乙腈水定容,ACQUITY BEH C18色谱柱分离,以0.1%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱分离。Q-Exactive一级全扫描得到的准分子离子的精确质量数用于快速筛选分析,保留时间和离子阱的二级质谱数据用于进一步定性确证。结果 31种抗生素的精确质量相对偏差小于5×10-6,线性相关系数均大于0.99,最低检出限(limit of detection,LOD)均≤10μg/kg。结论应用该方法对鱼、牛奶、蜂蜜等实际样品筛查的分析结果良好,说明该方法是动物源食品中抗生素类成分快速筛选和确证的有效方法。     

HPLC-Q-TOF法筛查鸡肉中48种兽药残留

利用高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)建立了鸡肉中48种兽药残留的快速筛查和检测方法。样品采用乙腈/水(7∶3,体积比)提取,经Oasis PRi ME HLB固相萃取柱净化,采用UPLC-Q-TOF/MS检测,正离子全信息串联质谱模式扫描,外标法定量。建立了目标分析物一级精确质量数据库和谱图库,通过化合物的精确质量数、保留时间等对检测结果进行检索,从而在无对照标准品的情况下可以对目标分析物进行定性鉴定。结果表明,鸡肉中48种兽药的定量限(LOQ,S/N=10)为3.0μg/kg~30μg/kg,在3.0μg/L~300μg/L范围呈良好线性,线性相关系数均大于0.99。该方法灵敏、简便、准确,可用于鸡肉中多种兽药残留的检测分析。     

谷物食品中红木素和降红木素的快速筛查方法的建立

该实验建立了超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MS）快速筛查谷物食品中红木素和降红木素的分析方法。样品用5%醋酸乙腈溶液提取后,采用ZORBAX SB-C18色谱柱分离,以乙腈-0.1%甲酸水溶液（含5 mmol/L乙酸铵）为流动相,梯度洗脱,UPLC-Q-TOF/MS电喷雾正离子模式分析检测。以准分子离子峰的峰面积定量,以化合物的色谱保留时间、精确质量数及碎片离子的精确质量数定性。结果表明,红木素和降红木素分别在1.0～70 mg/kg、0.5～70 mg/kg范围内具有较好的线性关系,相关系数（R）均大于0.99,其定量限分别为1.0 mg/kg、0.5 mg/kg,样品的加标回收率在71.5%～110.6%范围内,相对标准偏差（RSD）均不高于10.2%。该方法简便、快速、准确性高,适用于批量谷物食品的快速筛查。     

饮料中35种添加剂的超高效液相色谱/四级杆-飞行时间质谱筛查法

目的:建立超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(ultra performance liquid chromatography coupled with quadrupole-time of flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF MS)快速检测饮料中35种添加剂(3种防腐剂、5种甜味剂和27种色素)的分析方法。方法:样品用乙腈-水(8∶2)提取后,采用XBridge Peptide BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,3.5μm)分离,以乙腈-0.025%甲酸水溶液(含10 mmol/L的甲酸铵)为流动相,梯度洗脱,Q-TOF MS电喷雾正、负离子模式分析检测。在全扫描采集模式下,以准分子离子峰的峰面积定量,以化合物的色谱保留时间和精确质量数定性。在Target MS/MS采集模式下,通过碎片离子的精确质量数进一步确证化合物。结果:35种添加剂在0.002~100 mg/kg范围内具有较好的线性关系,相关系数均大于0.99,其定量限为0.01~10 mg/kg,添加回收率在70.5%~110.6%范围内,相对标准偏差(RSD)均小于2.8%~11.5%(n=6)。结论:该方法简便、快速、灵敏,适用于饮料中多类添加剂的同时检测。     

气相色谱-四极杆/飞行时间质谱法非靶向快速筛查凉茶中的农药残留

为建立QuEChERS法净化,结合气相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(QuEChERS/GC-Q-TOF/MS)非靶向快速筛查凉茶中农药残留的方法,将样品经乙酸乙酯提取,石墨化炭黑(GCB)和氨丙基粉(NH2)分散固相萃取净化,GC-Q-TOF/MS测定。利用20种质控化合物建立的筛查方法检出限范围为2.00~50.0 μg/kg,定量限范围5.00~150 μg/kg。3个不同加标水平(25,50,125 μg/kg)下的平均回收率为73.47%～106.3%,相对标准偏差为0.91%～9.11%(n=6)。在该定量方法基础上利用目标化合物特征离子的精确质量数、二级碎片丰度比、主要离子碎片的同位素丰度比等信息进行精确质量数据库筛查与确证,以数据库检索匹配得分≥80的最低浓度作为方法的筛查限,无标准品情况下实现了非靶向筛查凉茶中751种农药残留。方法快速、准确、分析通量高,可为凉茶中农药残留的非靶向快速筛查和质量控制提供重要依据。     

保健食品中非法添加药物的广谱筛查和确证

采用液相色谱仪—二极管阵列检测器-离子阱-飞行时间串联质谱仪(LCMS-DAD-IT-TOF)建立减肥类非法添加药物高分辨质谱数据库。样品经乙腈超声提取,提取液经QuEChERS吸附剂净化,以ZORBAX Eclipse AAA色谱柱(150mm×4.6 mm,4.5μm)分离,乙腈和0.1%乙酸为流动相梯度洗脱。筛查限为0.10~0.75 mg/kg,平均回收率在49.4%~88.1%;相对标准偏差为5.0~14.8%。该方法通过紫外光谱确定非法添加药物特征吸收波长,结合滥用药物高分辨质谱数据库,通过精确质量数的检索匹配对非法添加药物实现快速筛查,并使用保留时间、同位素丰度和多级特征碎片离子进行确证。根据多级碎片离子,推导出裂解途径。具有简便、快速、高效、准确等优点。在缺乏标准品或对照品的情况下,即可得到准确可靠的结论。适用于保健食品中非法添加药物的有效快速筛查。     

气相色谱高分辨飞行时间质谱法快速筛查水果中283种农药残留

目的建立气相色谱高分辨飞行时间质谱法(gas chromatography time-of-flight mass spectrometry,GC-TOF/MS)快速筛查水果中283种农药残留量的分析方法。方法利用气相色谱高分辨飞行时间质谱结合MassHunter、PCDL软件建立283种农药的EI精确质量谱库,试样经QuEChERS方法进行萃取净化后,采用EI全扫描监测,通过PCDL谱库全离子筛查模式检索,以保留时间、特征离子精确质量数、分子离子同位素信息等作为定性依据。由谱库选择质量数较大、丰度比较高的精确质量离子为定量离子,进行定量测定。结果在空白苹果、葡萄、橙3种水果中添加10、20、40μg/kg 3个浓度水平下,方法的平均回收率65.9%～129.1%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)2.8%～11.6%,方法的最低检出浓度可达0.5～10μg/kg。结论该方法简便、快速、灵敏、精密度好,是水果中常见农药残留有效快速筛查技术。     

LILIC-Q/TOF对乳粉中羟脯氨酸的确证分析

建立亲水作用色谱-四极杆飞行时间质谱测定乳粉中羟脯氨酸的确证方法。乳粉样品经盐酸水解后,以HLB固相萃取柱净化,经亲水作用色谱柱分离后,使用超高效液相色谱-四极杆/飞行时间质谱分别进行全扫描和羟脯氨酸的二级质谱扫描分析,以羟脯氨酸的色谱保留时间、母离子和碎片离子的精确质量数对其进行确证分析。方法的检测限优于0.1 mg/kg,可满足乳粉中非法添加羟脯氨酸的确证分析要求。     

吉氏芽胞杆菌来源来氟米特分析与检测

目的对吉氏芽胞杆菌Bacillus gibsonii FJAT-10019来源的来氟米特成分进行分析与检测。方法 采用高效液相四级杆飞行时间质谱分析吉氏芽胞杆菌Bacillus gibsonii FJAT-10019发酵液中胞外代谢物的成分。运用安捷伦公司的Mass Hunter软件,对数据进行分子特征提取(MFE),并通过Metlin代谢物质谱数据库检索,获得总体代谢物的信息。结果 在吉氏芽胞杆菌Bacillus gibsonii FJAT-10019发酵液中,用液相质谱检测到561种代谢物,通过Metlin谱库搜索得到初步鉴定结果的有15种。其中,来氟米特是相对含量和匹配率最高的成分。来氟米特的匹配得分达到90.89,占其发酵液总代谢物相对含量的1.14%。来氟米特的保留时间为6.522分钟,精确质量数为270.0623。结论 为吉氏芽胞杆菌来源的该免疫调节剂的开发与利用提供理论依据。     

超高效液相色谱-四极杆/飞行时间质谱检测猪肉和牛肉中30 种食源性兴奋剂类药物残留

建立猪肉和牛肉中30 种食源性兴奋剂的超高效液相色谱-四极杆/飞行时间质谱的快速筛查和确证方法。样品经37 ℃酶解16 h,体积分数1.0%甲酸-乙腈溶液提取后,经PRiME-HLB通过式固相萃取小柱净化,用Waters XBridge BEH C18柱分离,在飞行时间质谱模式和数据依赖扫描串联质谱模式对目标物进行检测,通过一次数据采集,可同时完成化合物的定性筛查和确证。结果表明：30 种食源性兴奋剂的精确质量数偏差小于5.0×10－6,在0.5～100.0 ng/mL范围内线性良好,相关系数大于0.998 0。检出限范围为0.1～2.0 μg/kg;定量限范围为0.2～4.0 μg/kg。方法回收率范围为77.99%～109.2%,相对标准偏差为0.29%～9.68%（n=6）。该方法有效提高了食源性兴奋剂检测的效率和准确度,具有较强的实用价值。