水稻白叶枯病菌受寄主诱导基因的鉴定

用一个具链霉素（Ｓｍ）抗性并含无启动子ＣＡＴ基因的广宿主启动子探针质粒ＰＩＪ３１００，用鸟枪法在ＣＡＴ基因上游的ＢａｍＨ１克隆位，或插入水稻白叶枯病菌（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｏｒｙｚａｅｐｖ．ｏｒｙｚａｅ），用ＢａｍＨ１完全酶切的染色体ＤＮＡ片段，将重组质粒转化大肠杆菌ＥＤ８７６７在含链霉素的ＬＢ单板上筛选转化子。得到容量为６０００个转化子的克隆群体，其中２％的克隆含有水稻白叶枯病菌启动子活性片段，在平板上表现氯霉素（Ｃｍ）抗性。在帮助质粒ＰＲＫ２０１３的帮助下，通过三亲支配，将含有水稻白叶枯病菌启动子片段的重组质粒转移进野生型的水稻白叶枯病菌中去，在含链霉素的ＰＳＡ平板上筛选１６００个接合子，其中一个在平板上表现氯霉素抗性及含有组成表达的水稻白叶枯病菌启动子。随机选取２００个平板上对氯霉素敏感的接合子，接种用氯霉素处理的水稻感病品种金南风，得到１５个比对照明显致病的克隆。用其中一个含受水稻特异诱导启动子的重组质粒为探针，在水稻白叶枯病菌野生菌基因文库中筛选到２７个阳性克隆。     

转抗菌肽B基因水稻植株的获得与鉴定

构建了一个适合在水稻中表达含有抗菌肽Ｂ基因的转化载体，应用基因枪转化法将其导入水稻未成熟胚，获得了一些转基因水稻植株。根据对选择标记基因和目的基因的分子检测和抗病性测定，证明抗菌肽Ｂ基因已整合入转化水稻基因组并在转基因水稻中表达了抗病性。     

天花粉蛋白基因在水稻中转化及抗虫研究

利用基因枪转化法将天花粉蛋白基因导入水稻。经ＰＣＲ、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和Ｎｏｒｔｈ－ｅｒｎ杂交分分析证明外源基因已整合到水稻基因组中并有转录。抗虫试验表明,与对照比较转基因水稻明显地增强了对螟虫、稻飞虱的抗性。     

略论水稻生殖发育基因研究的相关应用目标

从水稻遗传育种学角度探讨了研究水稻生殖发育基因的重大意义,提出了水稻生殖发育基因研究的６个相关应用目标。     

基因枪法转化水稻(Oryza sativa L.)获得可育的转抗虫基因水稻再生植株

应用基因枪（particle bombardment)转化技术成功地将豇豆胰蛋白酶抑制剂（cowpea trypsin inhibitor,CpTI)基因分别导入三个水稻粳稻栽培品种（Oryza sativa L.,japonica)中花8、中花10和中作321的幼胚和胚性愈伤组织中,并由此获得了可育的再生植株,抗性植株的筛选频率为6．1％－12．24％。经PCR、Southern blot分子检测和ELISA检测等证实所获得的潮霉素抗体植株为转基因植株。抗虫性分析结果表明,部分转基因水稻植株对玉米螟虫（Ostrinia nubilalis)有较好的抗性。     

铸造用无毒气体硬化树脂粘结剂的研究

介绍了一种可用于铸造生产的以聚丙烯酸钠为主要成分的快速无毒气体硬化树脂粘结剂,并给出了适用于树脂粘结剂性能参数。     

水稻细菌性条斑病抗性基因定位

以高感和高抗细菌性条斑病（细条病）的两个籼稻品种Ｈ３５９和Ａｃｃ８５５８为亲本，建立了一个重且自交系群体。利用该群体构建了一张包含２２５个分子标记的连锁图。１９９６年和１９９７连续两年对该群体进行了细条病抗性鉴定。采用ｔ测验法、复合区间定位法及多性状复合区间定位法对细条病抗性基因（ＱＴＬ）进行了定位分析。共检测出１１个ＱＴＬ，分别位位于第１、２、３、４、５、７、８和１１号染色体上，效应大小彼此接近     

无毒网箱防污涂料的制备及性能研究

以松香为成膜物,通过添加可塑剂和防污剂壬酸香草酰胺,制成了网箱防污涂料,讨论了可塑剂的选择和防污剂用量对涂膜防污效果的影响,检测了涂膜的急性毒性.防污效果海上对比试验结果表明,选用邻苯二甲酸二辛酯和氯化石蜡复合可塑剂(邻苯二甲酸二辛酯∶氯化石蜡=1 ∶ 1),防污剂用量为5％时,3个月后海上挂样网片增重量仅为3％,涂料...     

人类遗传病的家系收集疾病基因定位克隆与疾病基因功能的研究

介绍了中国医学遗传学国家重点实验室在遗传病家系收集、疾病基因定位、疾病基因克隆和疾病基因功能研究方面的研究工作。用细胞遗传学G显带技术于1975年发现了一条与鼻咽癌相关的标记染色体t(1:3)(q44;p11);1981年将睾丸决定基因（TDF）定位于Yp11.32带;1991年以来收集遗传病家系345种共590个;1996年用显微切割、PCR、微克隆技术克隆了EXT2基因;1998年用基因家族－侯选疾病基因克隆方法克隆了遗传性神经性耳龙聋基因GJB3;1999年用连锁分析和全基因组扫描将一种遗传性弥漫性浅表性光敏性汗孔角化症定位于12q23.2带,并在基因功能研究中发现了一个新的细胞内转运蛋白。     

嗜冷杆菌EastSeaG5-1415脂肪酶基因的克隆和序列测定

从东海深海底泥中筛选到一株产低温碱性脂肪酶的海洋细菌EastSeaG5-1415,经鉴定为嗜冷杆菌Psychrobacter glacincola。将其染色体DNA用Sau3AI部分酶切后,低熔点琼脂糖回收2～10kb的。DNA片段,用Klenow大片段酶半补齐,与用Sal I酶切半补齐的质粒pUC19连接后,转化E．coli．JM109构建基因文库。用平板测活法从基因文库初步筛选到两株产碱性脂肪酶的阳性克隆,采用ELISA反应进一步鉴定。序列测定分析表明,两个重组质粒中都包含长度为951bp的碱性脂肪酶基因的完整开放阅读框架(ORF)和上游基因调控序列。此片段编码有317个氨基酸组成的酶,计算分子量为35000 Dal。通过Southem杂交证实了此片段来自于嗜冷杆菌Psychrobacter glacincola EastSeaG5-1415基因细。     

田黄标准初步研究

田黄标准初步研究是在前人的研究基础上总结而成的。本文阐明田黄的产地、矿物组成、鉴定特征、分类等,明确田黄的定义,并从质地、质量、颜色、工艺艺术综合特征四个方面对田黄质量进行等级评价。本文最后列举了田黄常见作伪方法。     

O139霍乱弧菌LPS基因和O抗原基因在大肠杆菌中的克隆表达及O抗原基因结构的初步研究

本研究采用构建基因文库的方法,构建了O139霍乱弧菌的粘粒基因组文库及重组粘粒的亚克隆文库.另外构建了质粒基因组文库.从文库中筛选到可以表达O139霍乱弧菌LPS和O抗原的重组克隆,经鉴定重组克隆表达的LPS和O抗原不但具有与O139霍乱弧菌的LPS和O抗原具有相同的反应原性,而且还具有相同的免疫原性.O抗原基因的部分测序分析表明,O139霍乱弧菌的抗原基因与O1群霍乱弧菌的O抗原基因不同源.     

脂质体包裹猪白细胞介素6基因对猪带绦虫抗原基因免疫小鼠的影响

比较研究了BALb/c小鼠分别肌肉注射猪带绦虫抗原基因VTS76、猪白细胞介素6（VPIL－6）联合VTS76及其阳离子脂质体包裹质粒等5个处理的免疫效应。结果表明，VTS76联合VPIL－6共注射小鼠的IgG含量和抗体滴度，脾细胞增殖反应和IL－2诱生活性以及免疫细胞数量，均比注射VTS76的显著增强。经阳离子脂质体包裹的VTS76＋VPIL－6在减少质粒用量80％时，免疫应答水平仍显著高于脂质体包裹VTS76，且明显高于VTS76＋VPIL－6，证明VPIL－6能显著增强基因疫苗（VTS76）免疫小鼠的免疫应答。     

基于OPC Systems.NET智能建筑系统集成初探

论文以智能建筑集成的系统研发为应用背景,介绍OPC Systems.NET特性和智能客户端部署,分析与系统集成关联的技术,并深入探讨基于OPC Systems.NET平台的集成方法。     

利用易错PCR随机突变技术突变EPSPs基因研究草甘膦抗性机理

运用易错PCR介导的随机突变技术使高抗草甘膦的菌株的5-烯醇式丙酮酸-3-磷酸莽草酸合酶(5-Enolpyruvylshikimate-3-phosphate,EPSPs)基因发生随机突变,转入EPSPs基因缺陷型的大肠杆菌ER2799中,通过互补试验获得对草甘膦抗性明显降低的突变株AZ100。测序结果发现AZ100的EPSPs基因与未突变基因相比,碱基序列发生了两个位点变化,第792位的碱基由鸟嘌呤(G)突变为胸腺嘧啶(T),第1203位的碱基由胞嘧啶(C)突变为鸟嘌呤(G)。氨基酸序列也发生了相应的变化,第264位由甘氨酸(Gly)突变为缬氨酸(Val),第401位由丙氨酸(Ala)突变为甘氨酸(Gly)。二级结构预测显示此两个突变的氨基酸的位点恰好位于EPSPs与底物结合的关键部位。这两个氨基酸位点的突变,导致EPSPs在有草甘膦存在的情况下活性降低,从而导致菌株的草甘膦抗性降低。将这两个突变的碱基位点与美国的专利保护位点比较,发现这两个突变位点均不在专利保护范围之内。     

TUB2基因重组质粒的构建、鉴定及其在毛壳菌中的转化

根据苯并咪唑类杀菌剂抗性基因的核酸序列 ,在其阅读框架外的上、下游设计一对特异性引物 ,并在其 5′ 端分别加上PstI位点。以pRB12 9质粒为模板 ,PCR扩增得到一条长约 1 4kb的片段 ,经酶切鉴定证明是TUB2基因。将此PCR产物经消化后与同样酶切的pTA质粒连接 ,构建出 pTA TUB2质粒并转化大肠杆菌。再以pTA TUB2质粒为模板 ,PCR扩增该目的基因 ,通过对其核苷酸序列分析证明构建的质粒是含TUB2基因的 pTA TUB2质粒。利用PEG方法 ,将该质粒转化毛壳菌 ,使得对多菌灵非常敏感的毛壳菌能够在 30 0 μg/ml多菌灵的培养基上正常生长 ,其抗药性提高 30 0倍以上 ,且转化稳定性试验表明 ,其抗药性在非选择性培养基上连续培养 10代保持不变。结果表明质粒pTA TUB2对毛壳菌的转化率为 2 7/ (2× 10 5)。     

小白鼠心肌核DNA片段中的基因表达的分子开关的研究

原位染色发现,LDH（1－5）…nNAD^ (LDH：乳酸脱氢酶,NAD^ ,氢化型辅酶）可以进入核孔,可能与自己编码基因特异结合,体外表达实验中,稀释心肌DNA片段,促进LDH／DNA表达LDH（1－5）,LDH（1－5）表达量与LDH／DNA中可解离的LDH（1－5）量呈正相关性。同位素^14C标记L if impglk ty LDH(1-5)…NAD^ 可以抑制LDH／DNA体外表达,LDH（1－5）表达抑制量与加入LDH（1－5）…nNAD^ 量呈正相关性,AFM直接观察到活性基因两头的调控序列可能结合自己编码的蛋白等活性因子,基因表达与调控的分子开关主要是自己编码的蛋白等活性因子,展示了未来运用AFM和同位素标记法相结合研究生物学反应的前景。