碱提醇沉黑木耳多糖体外和体内降血脂功能

目的:探讨黑木耳多糖体内和体外降血脂功能。方法:采用离体实验模拟人体胃和肠道的p H值环境,探讨不同溶剂提取黑木耳多糖及其不同醇沉片段对胆酸盐的结合能力,评价其体外降血脂功能。以高脂饲料喂养小鼠建立高血脂模型,通过黑木耳多糖的治疗,比较治疗前后小鼠体质量、血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、总甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度总胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度总胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)含量及其关键酶卵磷脂胆固醇酰基转移酶(lecithin cholesterol acyltransferase,LCAT)、肝脂酶(liver lipase,HL)和脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)的活性,研究碱提黑木耳多糖对高血脂模型小鼠的降血脂作用。结果:体外降血脂实验结果表明:3种不同的黑木耳多糖样品中,碱提黑木耳多糖的结合效果最好;不同体积分数乙醇醇沉黑木耳多糖片段的结合效果比较显示,70%醇沉片段结合胆酸盐效果最好。体内降血脂实验结果发现,碱提+70%醇沉黑木耳多糖能够缓解小鼠体质量的增长,显著缓解TC、TG和LDL-C含量的下降,显著提升HDL-C水平,控制LCAT含量、HL和LPL活性的降低。结论:碱提+70%醇沉黑木耳多糖具有降血脂功能。     

桦褐孔菌纯化多糖体外降血糖活性研究

采用水提醇沉法得到桦褐孔菌发酵粗多糖,将粗多糖过DEAE-52纤维素柱分离纯化得到两种多糖(EIOP1、EIOP2),本文以α-葡萄糖苷酶抑制活性、正常HepG2细胞及胰岛素抵抗HepG2细胞的单位细胞葡萄糖消耗量为主要指标,探究桦褐孔菌两种纯化多糖不同浓度(10、20、40、80、160和320 μg/mL)的降血糖活性,其中α-葡萄糖苷酶抑制活性以阿卡波糖作为阳性对照,葡萄糖消耗实验以二甲双胍作为阳性对照。结果表明,EIOP1、EIOP2的α-葡萄糖苷酶抑制活性均高于阳性对照组阿卡波糖与粗多糖,IC₅₀值分别为39.18、29.87 μg/mL。EIOP1在浓度为80 μg/mL时,对HepG2细胞的葡萄糖消耗量极显著高于对照组,促进效果最好,比对照组提高了30.62%(P<0.01);EIOP2在浓度在40 μg/mL时,葡萄糖消耗量极显著高于对照组,比对照提高了75.99%(P<0.01);对胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗实验发现EIOP1在浓度为40 μg/mL时,促进效果最好,比胰岛素抵抗组提高了30.00%,EIOP2在浓度为80 μg/mL时,促进效果最好,比胰岛素抵抗组提高了90.49%,高于Met组(P<0.01)。因此,桦褐孔菌纯化多糖对正常HepG2细胞和胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗均具有促进作用,对α-葡萄糖苷酶的抑制活性显著高于粗多糖。     

水溶性黑木耳多糖体外结合胆酸盐能力的分析

本文通过水提醇沉提取黑木耳多糖,同时用除蛋白和不除蛋白两种方法处理,得到12种不同浓度醇沉水溶性混合多糖;并对12种多糖的体外结合胆酸盐能力进行分析。结果显示:70%乙醇醇沉得到的水溶性黑木耳多糖体外结合胆酸作用较强,并且除蛋白多糖比不除蛋白多糖体外结合甘氨酸胆酸钠的能力强。同时,多糖浓度0.8 mg/m L时,结合达到稳定,为最适宜加入量。实验结果为AAP在降血脂机制方面的进一步研究提供理论依据。      

黑木耳多糖的提取及降血糖作用

利用纤维素酶(EC 3.2.1.4)和蛋白酶(EC 3.4.14.9)从黑木耳当中提取出了2种多糖,相对分子质量分别为3.17×105和1.83×105。以正常小鼠和糖尿病小鼠为对象,对黑木耳多糖的降血糖功能进行了研究,使用剂量为100,200,400 mg/kg(以体重计)。结果表明,当质量分数在200 mg/kg以上,黑木耳多糖能够显著降低糖尿病小鼠的血糖值,但对正常小鼠的血糖值没有影响。黑木耳多糖能够增加糖尿病小鼠的糖耐量。     

黑木耳多糖的酶法生物转化工艺优化及其体外降血糖性能

以黑木耳为原料,利用生物酶法进行多糖的提取,并研究其体外降血糖性能。以降血糖性能和黑木耳多糖得率为双指标,筛选最适复合酶体系,并通过正交试验确定最佳酶转化工艺条件。采用Sevag法脱蛋白、H₂O₂法脱色,对提取的木耳粗多糖进行精制处理。利用高效液相色谱法对多糖的分子质量分布进行分析,并通过其α-淀粉酶抑制率和葡萄糖透析延迟指数对多糖的降血糖性能进行分析比较。结果表明:综合考虑木耳多糖降血糖性能与多糖得率,选择糖化酶、木瓜蛋白酶、果胶酶作为木耳多糖生物转化的酶制剂,总加酶量700 U/g,三种酶配比1:1:1,料液比1:60、pH5.0、酶解时间1.5 h、酶解温度50 ℃时,在此条件下,木耳多糖得率32.57%,α-淀粉酶抑制率为26.72%。精制处理后,黑木耳多糖提取液的颜色由棕黄色变为淡黄色,脱色率为43.15%,多糖损失率为31.27%。酶解后多糖发生了部分降解,产生了大小不一的多糖片段。此外,酶解木耳多糖的降血糖性能优于非酶解水提多糖,其α-淀粉酶抑制率提高了10.09%;葡萄糖透析延迟指数30 min时提高了13.09%,60 min时提高了3.24%,表明经酶法生物转化的木耳多糖有很好的降血糖性能。本试验通过复合酶解法对木耳多糖进行生物转化,改善木耳多糖的生物活性,对木耳多糖在保健功能方面的利用与临床应用提供了理论依据。     

薯蔓提取物降血糖作用机理初探

研究徐薯18和大地1号两个品种红薯茎叶多糖和黄酮提取物对四氧嘧啶治糖尿病小鼠血糖水平和α-葡萄糖苷酶活性的影响。结果表明,红薯茎叶多糖和黄酮提取物对四氧嘧啶致糖尿病小鼠具有显著的降血糖作用。红薯茎叶多糖和黄酮提取物具有体外抑制α-葡萄糖苷酶活性的作用,但均弱于阿卡波糖。黄酮提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用强于多糖提取物,且呈现明显的量效关系。徐薯18红薯茎叶黄酮提取物和多糖提取物的降血糖作用和对α-葡萄糖苷酶的抑制作用均好于大地1号。     

葡萄籽原花青素的体内降血糖作用研究

本文研究了原花青素的体内降血糖作用。通过腹腔注射链脲佐菌素建立小鼠糖尿病模型,检测不同剂量原花青素(150mg/kg、100 mg/kg、50 mg/kg)对糖尿病小鼠的体重、空腹血糖(GLU)、糖耐量、血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)以及糖尿病小鼠盲肠中短链脂肪酸含量等指标的影响。结果表明:低中高剂量原花青素分别增加糖尿病小鼠体重13.23%、20.85%、30.03%;降低空腹血糖10.96%、17.18%、20.89%;显著改善糖耐量(p0.01);高剂量原花青素降低糖尿病小鼠血清TC 18.03%、TG 32.54%、MDA 22.88%,提高SOD活力30.28%;各剂量原花青素均可显著增加糖尿病小鼠盲肠内容物中总短链脂肪酸的含量(p0.05或p0.01)。因此原花青素具有体内降血糖,减轻自由基损伤、抑制脂质过氧化,进而改善糖尿病小鼠的糖、脂代谢异常的作用,这一研究发现将对人类血糖异常的控制提供有效途径,对于人体健康具有重要意义。     

酸性黑木耳多糖协同抗凝血作用分析

为了研究酸性黑木耳多糖(Ac-AAP)与其他多糖的抗凝血活性协同作用,选用茶多糖(TP)、红枣多糖(JP)、海藻多糖(SP)三种多糖与Ac-AAP分别组合,以纤维蛋白原(FIB)转化为纤维蛋白抑制率、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT)为考察指标,结合Chou-Talalay联合指数(CI),确定Ac-AAP与三种多糖协同抗凝血效果。试验结果表明,组合Ac-AAP:SP(1+2)的协同抗凝血效果最强(p0.05),联合指数CI达到0.63175。抗凝血综合评价显示,统一多糖浓度至2.0 mg/m L,Ac-AAP:SP(1+2)各项抗凝血指标均优于其它多糖(p0.05),其中FIB转化为纤维蛋白抑制率为91.06±0.79%,血浆的APTT值为95.47±0.61 s,TT值为62.24±0.53 s,但其对血浆PT值与阴性对照无显著性差异(p0.05)。     

枳椇果梗与枳椇子体内外降血糖活性及其物质基础研究

枳椇是食药同源的传统食品或药品,具有降糖降压、醒酒护肝等功效。然而,枳椇果梗和种子的混用给其应用和检验带来诸多不便。为确定枳椇降血糖的确切活性部位,对果梗与种子的水和95%乙醇提取物在体外抑制α-葡萄糖苷酶的活性,以及在体内对链脲佐菌素(STZ)诱导的II型糖尿病模型小鼠降血糖活性及其物质基础进行研究。结果表明:枳椇子醇提物(SEE)是种子抑制α-葡萄糖苷酶的主要活性物质,属于竞争型抑制剂,IC50为0.97 mg/mL;枳椇果梗水提物(PWE)是果梗的主要活性物质,属于混合型抑制剂,IC50为2.28 mg/mL。SEE和枳椇子水提取物(SWE)抑制α-葡萄糖苷酶活性均大于PWE和枳椇果梗醇提物(PEE)。动物实验表明:4种提取物都能不同程度地降低小鼠血糖,提高其糖耐量和体质量,而SEE降血糖效果最显著(P<0.01)。整体来看,降血糖活性顺序是SEE>SWE>PWE>PEE,枳椇子是枳椇降血糖的主要活性部位,其降血糖功效强于果梗。利用硅胶、C18中压液相色谱、Sephadex LH-20柱色谱对枳椇子醇提物进行分离纯化,得到5个化合物。采用ESI-MS、1HNMR、13CNMR、HSQC和HMBC等方法确定化合物1~5分别是:槲皮素、二氢槲皮素、杨梅素、二氢杨梅素和槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。本研究结果为解决枳椇果梗和种子的混用问题提供了理论依据,为进一步开发利用枳椇资源提供了新途径。     

黑木耳多糖的羧甲基化及其对肝癌细胞H ePG2的抑制作用

对提取分离的黑木耳多糖进行羧甲基化,并对人体肝癌HepG2细胞株进行干扰研究,探讨其增殖抑制作用.将HepG2细胞进行贴壁培养,对处在对数生长期的HepG2细胞进行对照试验.结果表明,黑木耳中性多糖组、黑木耳酸性多糖组对HepG2细胞毒试验得到细胞存活率50%时的药物浓度范围在200～600 μg/mL.两种未经羧甲基化改性的黑木耳多糖在体外对人HepG2细胞具有抑制作用,而经羧甲基化改性的黑木耳多糖则没有.     

白藜芦醇与黑木耳多糖协同清除ABTS自由基活性的研究

本文研究了白藜芦醇与黑木耳多糖对ABTS+自由基清除的协同作用。采用ABTS+自由基清除实验与Chou-Talalay联合指数(CI)方法相结合,对白藜芦醇和黑木耳多糖单独和复配的清除效果、联合指数(CI)及剂量减少指数(DRI)进行分析评价,结果显示:单独白藜芦醇和黑木耳多糖的IC50值分别为3.56 mg/L、61.46 mg/L,复配(质量比1:1)后的IC50值为2.50 mg/L,表明复配物对ABTS+自由基有明显的清除作用;联合指数(CI)分析,从清除率5%至97%相互作用指数都小于1,且随着清除率的增加,联合指数(CI)也随之降低;剂量减少指数(DRI)分析,从清除率5%至97%剂量减少指数都大于1,且随着清除率的增加,剂量减少指数(DRI)也随之增加,证实在质量比1:1时,白藜芦醇与黑木耳多糖之间存在着显著协同抗氧化效应。     

黑木耳多糖与浆果多酚的协同抗氧化研究

本文在前期试验的基础上,获得了树莓、红豆越橘、蓝靛果、猕猴桃、山楂和山荆子6种多酚以及黑木耳碱性多糖提取物,检测单一组分和复配物(浆果多酚与黑木耳多糖质量比1:1)对羟基自由基、ABTS+·和DPPH·的清除能力和总还原能力。通过Chou-Talalay联合指数(CI),分析它们是否具有协同抗氧化作用。树莓与黑木耳多糖的复配物对羟基自由基和DPPH·清除率达50%时,CI羟基自由基和CIDPPH分别为0.56±0.09和0.45±0.19,表明复配后可以提高对这两种自由基的清除效率,起到协同抗氧化作用。猕猴桃与黑木耳多糖的复配物对ABTS清除率和总还原力达50%时,CIABTS和CI总还原力分别为0.48±0.11和0.42±0.05,揭示其复配物的抗氧化能力明显增强。深入研究多成分的协同作用将更有利于开发新的、安全和高效的天然抗氧化保健品和相关药物,为植物功能性成分的开发利用提供理论依据。     

黑木耳多糖的提取、纯化及降血脂作用的研究

为明确黑木耳多糖的组分及其生理功能,以复合酶法对黑木耳多糖进行了提取,并以柱层析法对其进行了纯化;以纯化的黑木耳多糖喂饲大鼠,考察了其降血脂的功能。通过试验得到两种黑木耳多糖,即APE I和APE II;各剂量的APE I对大鼠体重没有显著影响;100mg/kg体重及以上的APE I可以显著降低高脂大鼠血清的TG、TC、LDL-C水平,提高其HDL-C水平;200mg/kg体重的黑木耳多糖对高脂大鼠血清的TG、TC、LDL-C和HDL-C的影响与70mg/kg体重的脂必妥的效果没有显著差异,并能够显著提高高脂血症大鼠的HDL-C/TC水平。黑木耳多糖(APE I)具有降血脂功能,对高脂血症的发生有一定的预防作用,同时对冠心病和动脉粥样硬化也有一定的预防作用。     

酶法提取黑木耳多糖

研究了酶法提取黑木耳多糖的最佳工艺条件。以提取率为指标,分别考察了浸提剂倍数、酶解pH、温度、时间、加酶量对果胶酶或纤维素酶酶解反应的影响。试验确定了果胶酶酶解木耳的最佳工艺条件:浸提剂倍数50,pH5.0,温度55℃,时间80min,酶加量1.1%,在此条件下,黑木耳多糖的提取率为4.15%;纤维素酶酶解木耳的最佳工艺条件:浸提剂倍数50,pH5.0,温度50℃,时间80min,酶加量为1.3%,黑木耳多糖的提取率为4.71%。     

黑木耳多糖的酶法提取、纯化及性质研究

本文以双酶法提取黑木耳粗多糖,利用DEAE-Cellulose 52和Sepharose CL-4B柱层析对其进行纯化,以Sephadex G-100凝胶柱层析测定了多糖的分子量。结果表明黑木耳多糖含有两个主要组分APE Ⅰ和APE Ⅱ,分子量分别为31.7×104和18.3×104,均为非淀粉类多糖,不含单糖、蛋白质、核酸及多酚类物质。     

黑木耳多糖对猪肉糜质构及氧化特性的影响

以丁基羟基茴香醚（butylated hydroxyanisole,BHA）和卡拉胶为对照,研究黑木耳多糖对猪肉糜的质构特性和氧化特性的影响。分别将0.6%、1%、3%的黑木耳多糖,0.2%的BHA和0.1%的卡拉胶添加到猪肉糜中,4 ℃冷藏9 d,测定其硬度、弹性、回复力、硫代巴比妥酸反应产物（thiobarbituric acid reactive substances,TBARS）值、总巯基含量及羰基含量的变化。结果表明：添加3%的黑木耳多糖可以显著降低猪肉糜的初始硬度（P＜0.05）,添加1%的黑木耳多糖可以延缓猪肉糜硬度的增加,但对弹性和回复力没有明显的影响;经过9 d的贮藏,添加黑木耳多糖的各组猪肉糜TBARS值均小于空白组（2.09 mg/kg）,而总巯基含量则高于空白组,此外添加3%的黑木耳多糖可以较好地抑制羰基的产生,这种作用效果与0.2%的BHA相近。黑木耳多糖作为一种天然产物添加到猪肉糜制品中,可以改善肉糜的质构特性并起到一定的抗氧化作用,能够部分替代合成类抗氧化剂BHA。     

多酚类化合物与黑木耳多糖协同抗氧化作用研究

选取白藜芦醇、原花青素、蓝莓花青素、儿茶素、阿魏酸和咖啡酸6种多酚分别与黑木耳多糖复配。检测单一组分和复配物（多酚与黑木耳多糖质量比1∶1）对ABTS+·和DPPH·的清除能力。通过Chou-Talalay联合指数（CI）,分析它们是否具有协同抗氧化作用。白藜芦醇、原花青素分别与黑木耳多糖的复配物对ABTS+·和DPPH·清除率达50%时,CIABTS值分别为0.47±0.08和0.41±0.06,CI DPPH值分别为0.74±0.08和0.91±0.09,表明白藜芦醇、原花青素与黑木耳多糖具有协同抗氧化作用。咖啡酸、儿茶素分别与黑木耳多糖的复配物对DPPH·清除率达50%时,CI DPPH值分别为0.71±0.07和0.80±0.06,表明咖啡酸、儿茶素分别与黑木耳多糖具有协同抗氧化作用。因此,结果表明人们可以通过改变日常膳食搭配来增强机体自身的抗氧化能力。