一株嗜酸乳杆菌产共轭亚油酸条件的优化

共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)是具有抗癌、减肥等许多生理功能的天然脂肪酸.生物法合成共轭亚油酸无毒且异构体单一,但目前产量较低.为提高CLA产量,以嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)为出发菌株,优化其培养条件.结果表明:发酵液初始pH为6.5,红花油添加量为0.15%,接种量5%,发酵温度为37°C,发酵时间为60h时最有利于共轭亚油酸的合成,此时CLA的合成最为94.7μg/mL.     

嗜酸乳杆菌转化菜籽油生成共轭亚油酸条件的优化

文中对嗜酸乳杆菌静息细胞转化菜籽油生成CLA工艺进行了优化研究,通过单因素试验,确定了最适转化液介质、介质浓度、pH、温度、转化时间和细胞浓度,同时,研究了不同金属离子对亚油酸异构酶活性的影响。在该基础上,利用Box-Benhnken中心组合设计和响应面法对转化时间、pH、温度、细胞浓度进行了工艺优化分析,确定了在菜籽油浓度为7.5 mg/mL、脂肪酶的加入量为2 mg/30 mL时,以0.1 mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液为转化液介质条件下,最优转化工艺条件是时间25 h,pH6.5,温度36℃,细胞浓度40 mg/mL,经优化后CLA的生成量可以达到230.12±7.52μg/mL。     

一株嗜酸乳杆菌合成共轭亚油酸的条件优化

以嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)1.1854为出发菌株,经紫外诱变和诱导处理,获得1株共轭亚油酸(CLA)高产菌株,通过五因素二次正交旋转组合设计对该菌株合成共轭亚油酸的条件进行了优化。其优化条件为:培养温度37℃、pH值4.5～5.5、LA浓度0.1%、接种量5%～7%、培养时间24h,此时CLA产率达31.2%。     

一株嗜酸乳杆菌突变株亚油酸异构酶的纯化及性质

亚油酸异构酶可以把亚油酸转化为共轭亚油酸。用硫酸铵沉淀、透析、凝胶过滤等步骤 ,从 1株嗜酸乳杆菌突变株中分离纯化了该酶。纯化倍数为 5 2 .0倍、比活力达 5 1 3 .0U/mg、活力回收 7.0 %。用SDS PAGE测得该酶亚基的分子量为 40 .7ku ;该酶的最适反应pH值为 4.0左右 ,最适反应温度为 3 0～ 40℃ ,在 pH 2 .0～ 7.0和 60℃以下较稳定。Fe2 + 、Mg2 + 、Zn2 + 、Na+ 能提高酶活性 ,Hg2 + 、Cu2 + 、Mn2 + 、Fe3+ 能抑制酶活性。以亚油酸为底物时该酶的动力学常数为 2 1 .6mmol/L。     

嗜酸乳杆菌发酵法制备亚油酸异构酶的研究

以正交试验确定了嗜酸乳杆菌的最佳发酵条件，对其产生的亚油酸异构酶以硫酸铵分级沉淀和Sephadex G100层析进行了分离，并测定了酶活力。结果表明，嗜酸乳杆菌适宜发酵条件为：温度40℃，初始pH6．5，接种量1％，发酵时间24h；以上条件下产生的亚油酸异构酶经纯化后测得酶活为4358．6U。     

植物乳杆菌转化亚油酸为共轭亚油酸条件的研究

研究了植物乳杆菌AS1.555转化亚油酸为共轭亚油酸的条件。该菌株在MRS培养基中经0.1%(v/v)的亚油酸诱导培养后,所得的洗涤细胞具有很强的转化能力。通过单因素实验和正交实验得到植物乳杆菌转化亚油酸为共轭亚油酸的优化反应条件:反应温度30℃、反应时间48h、游离亚油酸浓度1.5%(v/v)、0.1mol/L磷酸缓冲液pH7.0。     

产酶培养条件对一株嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶活力的影响

本实验用MRS培养基嗜酸乳杆菌,并通过添加亚油酸(LA)诱导其产亚油酸异构酶。单因素试验结果表明,在MRS培养基中添加糖类物质总体上不利于产酶,添加尿素、牛肉膏、酵母膏、酪蛋白等有机氮源后,酶活力比对照组有较大幅度提高,而添加无机氮源酶活力增加幅度不如有机氮源。在培养基中添加一定量的NaCl和卵磷脂也有助于酶活力的提高。由正交试验结果确定的最佳产酶条件为:培养温度37℃,培养时间24h,每100ml培养基中添加10mgLA,接种量3%(V/V)。     

嗜酸乳杆菌发酵脱脂乳生成CLA的条件优化

为提高发酵乳中共轭亚油酸(CLA)含量,以经化学诱变的嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)发酵添加亚油酸(LA)的脱脂乳,通过三因素二次正交旋转组合设计对该菌株发酵脱脂乳生成共轭亚油酸的条件进行了优化。结果表明:培养温度37℃、pH5.5、培养时间28h时为最佳优化条件,此时CLA产率达33.4%。      

植物乳杆菌ZS2058转化亚油酸为共轭亚油酸条件的初步研究

研究了植物乳杆菌ZS2058转化亚油酸为共轭亚油酸的条件,在培养基中添加10g/L吐温-80制成LA-吐温-80胶束溶液,可以提高CLA的转化率,最佳转化温度为35℃,添加1mg/mL的LA有较高的转化率和CLA产量。在MRS、SKM、KPB三种转化体系中SKM的转化率较高。在含LA的培养基中预培养12h,可以提高CLA的转化率。最佳转化接种量在1%～2%之间。      

嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶活力测定的研究

亚油酸异构酶能催化亚油酸转化为具有生理活性的共轭亚油酸。有关该酶活力的测定方法在国内外不同的文献中差别较大,尚没有统一的方法。本文对嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶活力的测定方法进行了研究,以期为该酶分离纯化过程中酶活力的测定提供参考。通过单因素试验和正交试验,确定了该酶的最佳酶反应条件为:粗酶液添加量0.10ml,亚油酸0.70ml,Tween-802.00ml,反应温度37℃,反应时间3h。     

共轭亚油酸高产菌株选育及其发酵条件的研究

以嗜酸乳酸杆菌PB1 (Lactobacillusacidophilus )为出发菌株 ,经紫外线、亚硝基胍单独处理和复合处理 ,获得一株CLA高产菌株U N f3 4,通过单因子和正交试验对该菌株生产共轭亚油酸的发酵条件进行了优化 ,优化的发酵条件是 :培养温度 43℃ ,pH值 7 5 ,培养时间 48h ,在优化条件下 ,U N f3 4可以生产共轭亚油酸达 42 0 5 μg/mL。     

嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶的酶学性质研究

本实验对嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶的酶学性质进行了研究.结果表明:以亚油酸为底物,亚油酸异构酶的最适反应温度为40℃;最适反应pH值为4.0,pH值在3.0～6.0范围内有较高的稳定性;不同的金属离子和有机试剂对亚油酸异构酶的影响程度不同,同一种金属离子和有机试剂在不同浓度下也不相同;以亚油酸为底物的酶促反应米氏常数Km=33.33mol/L,Vmax=15.6mol/L·h.     

产共轭亚油酸德氏乳杆菌的诱变选育

以徳氏乳杆菌?永茄侵郑保保矗福?为出发菌株,经硫酸二乙酯、紫外线对细胞悬液进行诱变处理,筛选出一株共轭亚油酸高产菌株1616u,并优化其培养条件,在培养基初始pH值为5;培养温度为37℃;培养时间为30h时,发酵液中可积累共轭亚油酸平均为11.04μg/ml,最高可达11.61μg/ml。     

产共轭亚油酸鼠李糖乳杆菌的筛选与鉴定

从东北传统酸菜汁中筛选出具有产共轭亚油酸(CLA)能力的乳酸菌菌株15株,采用紫外分光度计法测定发酵液中共轭亚油酸产量,其中菌株A53.2的产量最高,在MRS培养基中添加0.4mg/mL亚油酸(LA),37℃发酵24h,CLA产量达14.91μg/mL。通过对菌体的形态特征和生化特性分析,并结合16SrDNA分子生物学以及系统发育分析鉴定菌株A53.2为鼠李糖乳杆菌。     

响应面法优化植物乳杆菌lp15-2-1产共轭亚油酸发酵条件

对植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)lp15-2-1 转化亚油酸生成共轭亚油酸(CLA)发酵工艺进行研究。通过单因素试验确定最佳接种量、培养温度、初始pH 值、培养时间、亚油酸添加时间、亚油酸质量浓度。采用响应面Box-Benhnken 试验设计,建立初始pH 值、培养温度和亚油酸质量浓度的二次多项式回归方程模型,所得植物乳杆菌发酵产共轭亚油酸的最佳参数为：温度30℃、亚油酸质量浓度0.21mg/mL、初始pH6.3,此条件下,CLA得率为44.77μg/mL,CLA 理论得率为45.326μg/mL,转化率为21.32%,与优化前转化率7.78% 相比,有了很大提高。     

植物乳杆菌亚油酸异构酶的分离纯化及其性质研究

经硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析和凝胶过滤,由植物乳杆菌(LactobacillusplantarumL 2 9)分离纯化得到亚油酸异构酶,分子量为4 3ku。对其酶学性质进行研究,结果表明,温度37℃、pH 6 0时酶活性较高;Co2 + 、Fe2 + 可提高酶的活性,Cu2 + 、Zn2 + 则对酶活力有抑制作用;该酶作用于亚油酸的Km=2 5 3×10 -5mol/L ,Vmax=2 5 7×10 -8mol/ (min·mg)。     

保加利亚乳杆菌诱导产亚油酸异构酶条件研究

亚油酸异构酶可由保加利亚乳杆菌经诱导产生,可以将亚油酸(LA)转化为共轭亚油酸(CLA)。本实验对诱导保加利亚乳杆菌产亚油酸异构酶的条件进行研究,利用紫外和气质联用仪(GC-MS)检测所生成的CLA。结果表明：在培养基中添加1.5‰(V/V) LA 时所产酶的共轭亚油酸转化率最高;温度为36℃,培养36h 为较适的培养条件;单独添加0.1%(m/V)的乳糖或0.1%(m/V)的氯化钠有利于诱导产酶;在培养基中直接添加LA 的效果优于培养3至12h 后再进行添加。诱导所产酶可将LA 转化为CLA,且含有9c,11t-CLA 异构体。