长坝蜜柚囊中柚皮苷提取纯化工艺研究

长坝蜜柚为国家地理标志产品。蜜柚囊为长坝蜜柚表层皮与果肉之间白色囊状物,目前研究极少。本文开展了长坝蜜柚囊中柚皮苷提取及纯化工艺研究,研究发现,该工艺最佳提取条件为:温度70℃、提取时间为1 h、乙醇浓度70%、料液比为25∶1,并应用HPD_(450)大孔树脂进行柚皮苷纯化:具体条件为采用570 mL浓度为0.348 mg/mL的样液以4 BV/h进行上样,340 mL 50%的乙醇以3 BV/h进行洗脱,对洗脱液旋转蒸发浓缩,随后再进行冷冻干燥,得到柚皮苷干制品。高效液相色谱图显示,柚皮苷干制品与市售标准品的峰型和保留时间一致,说明干制品的主要成分是柚皮苷。     

制备色谱分离纯化桑叶提取物的研究

选取桑叶中高附加值的活性成分异槲皮苷,以异槲皮苷制备率和纯度为评价指标,应用制备色谱技术,考察流动相体系及比例、流速和进样量等影响因素对异槲皮苷分离纯化的影响,通过分析、检测制备样品成分,开展高纯度异槲皮苷制备的效益分析。结果表明,异槲皮苷分离纯化的最优条件为:V_(乙腈)∶V_水=20∶80,进样量10 mL,流速20 mL/min时,异槲皮苷制备率26.36%,纯度为98.78%;同时可得绿原酸制备率30.37%,纯度为99.48%,芦丁制备率19.51%,纯度为98%和紫云英苷制备率11.47%,纯度为98%,为桑叶资源化及高值利用提供实验支撑。     

制备色谱分离纯化桑叶提取物的研究

选取桑叶中高附加值的活性成分异槲皮苷,以异槲皮苷制备率和纯度为评价指标,应用制备色谱技术,考察流动相体系及比例、流速和进样量等影响因素对异槲皮苷分离纯化的影响,通过分析、检测制备样品成分,开展高纯度异槲皮苷制备的效益分析。结果表明,异槲皮苷分离纯化的最优条件为:V_(乙腈)∶V_水=20∶80,进样量10 mL,流速20 mL/min时,异槲皮苷制备率26.36%,纯度为98.78%;同时可得绿原酸制备率30.37%,纯度为99.48%,芦丁制备率19.51%,纯度为98%和紫云英苷制备率11.47%,纯度为98%,为桑叶资源化及高值利用提供实验支撑。     

两步生物法转化柚皮苷制备L-鼠李糖

考察了利用柚苷酶和酵母静息细胞作为催化剂,两步生物法转化柚皮苷制备L-鼠李糖的工艺过程。柚苷酶水解柚皮苷的最佳工艺条件是ρ(柚皮苷)=14 g/L的水溶液为底物,加酶量10 mL/L(即每升底物中加入酶的体积,下同),pH=5.5,酶解时间22 h。酵母代谢葡萄糖的最佳工艺条件是酵母用量2.5 g/L(即每升水解液中加入酵母的质量,下同),温度32℃,pH=6.0,发酵时间120 min。在30 L发酵罐中进行了小试,最终获得了质量分数大于98.5%的鼠李糖结晶85.6 g,为理论得率的86.5%。     

磁性硅基壳聚糖微球固定化柚苷酶水解柚皮苷

在磁性Fe3O4外包覆一层SiO_2,再在其外包裹壳聚糖制备出磁性硅基壳聚糖微球(MSC),对MSC进行环氧基修饰后用于柚苷酶的固定化研究,并对磁性硅基壳聚糖微球固定化柚苷酶水解柚皮苷的pH、温度、操作和储藏稳定性进行了考察。通过单因素实验,确定了环氧基修饰的磁性硅基壳聚糖微球(MSCE)固定化柚苷酶的最佳工艺条件为:pH 3.0,温度30℃,时间4 h、给酶量57.48 U/mL。在该条件下,MSCE固定化柚苷酶的载酶率、酶活回收率和酶比活力分别为31.29%、88.92%和409.33 U/g。与游离柚苷酶相比,MSCE固定化柚苷酶用于水解柚皮苷具有良好的pH稳定性和温度稳定性,重复使用7次后仍具有53.36%的相对酶活力,4℃条件贮存30 d后仍具有80.97%的相对酶活力。     

微波辅助低共熔溶剂优化橘红花柚皮苷提取工艺及其对黄嘌呤氧化酶抑制活性研究

采用微波辅助低共熔溶剂(DES)对橘红花中的柚皮苷进行提取，在单因素试验结果的基础上，采用Box-Behnken响应面法对提取工艺进行优化，并研究柚皮苷对黄嘌呤氧化酶(XOD)的体外抑制作用。结果表明，橘红花柚皮苷得率的最佳工艺条件为：以氯化胆碱-乙醇为提取溶剂(物质的量比为1∶2),含水量38%,液料比20∶1(mL/g),微波时间20 s,微波功率为350 W。在该条件下橘红花柚皮苷得率为4.42%,与预测值接近。体外抑制XOD实验结果表明，柚皮苷对XOD的IC₅₀为2.229μg/mL。提取工艺稳定可靠，可用于橘红花柚皮苷的提取，并且柚皮苷具有较强的抑制XOD活性，为橘红花的进一步开发利用提供了科学依据。     

磁性硅基壳聚糖微球固定化柚苷酶水解柚皮苷的研究

本文在磁性Fe3O4外包覆一层SiO2,再在其外包裹壳聚糖制备出磁性硅基壳聚糖微球（MSC）,对MSC进行环氧基修饰后用于柚苷酶的固定化研究,并对磁性硅基壳聚糖微球固定化柚苷酶水解柚皮苷的pH、温度、操作和储藏稳定性进行了考察。通过单因素实验,确定了环氧基修饰的磁性硅基壳聚糖微球（MSCE）固定化柚苷酶的最佳工艺条件为：pH 3.0,温度30 ℃,时间4 h、给酶量57.48 U/mL。在此条件下,MSCE固定化柚苷酶的载酶率、酶活回收率和酶比活力分别为31.29%、88.92%和409.33 U/g。与游离柚苷酶相比,MSCE固定化柚苷酶用于水解柚皮苷具有良好的pH稳定性和温度稳定性,重复使用8次后仍具有53.36%的相对酶活力,4 ℃条件储存一个月后仍具有80.97%的相对酶活力。     

含柚皮苷单宁成分收敛水的制备及相关性质研究

研究含柚皮苷、单宁的化妆水,进行收敛、舒缓方面的功效评价实验。结果:提取液中单宁的含量为1.702 mg/mL,提取率22.693mg/g;保湿体系的最佳条件组合丙二醇︰甘油︰丁二醇︰吡咯烷酮为:20︰15︰5︰2;本实验化妆水配方柚皮苷用量1 mg/mL和单宁用量0.15mg/mL;筛选出最佳保湿体系配比,所配制的化妆水具有收敛、舒缓和抗菌等功效。     

柚皮苷二氢查耳酮工艺研究

以柚皮苷为原料制备了柚皮苷二氢查耳酮。考察了反应时间、催化剂用量、反应温度、反应压力、搅拌速度等因素对柚皮苷二氢查耳酮收率的影响。实验结果表明,制备柚皮苷二氢查耳酮优化反应条件为:pH值为13,反应温度45℃,反应时间6 h,氢气压力0.5 MPa,雷尼镍(用量为柚皮苷质量的7%)为催化剂,此条件下收率达90.0%。     

高效液相色谱法快速测定柑橘果皮中8种类黄酮

建立同时测定柑橘果皮中8种类黄酮(圣枸橼苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、香风草甙、柚皮芸香甙、柚皮素、橙皮素)的高效液相色谱法。样品经甲醇-丙酮(70:30)混合溶液提取,以甲醇-0.2%乙酸水溶液为流动相,采用梯度洗脱,二极管阵列检测器检测。在线性范围为0.5~200 mg/L时,8种类黄酮的峰面积与浓度呈现良好的线性关系。相关系数为0.999 6~0.999 8,在三个不同的添加水平条件下,回收率为85.0%~95.7%,相对标准偏差为1.32%~4.83%,方法检出限为0.2~0.8 mg/L,方法定量限为0.8~3.0 mg/L。该方法操作简便,成本低,重现性好,准确度高,是测定柑橘果皮中类黄酮的有效方法。     

制备型高速逆流色谱分离纯化木蝴蝶中的黄酮苷类化合物

采用制备型高速逆流色谱技术对木蝴蝶甲醇提取物中的活性黄酮苷类化合物进行分离纯化.实验过程中对二相溶剂体系、转速、流速、进样体积和进样浓度等参数进行了系统的优化,获得较优分离条件:溶剂体系,氯仿-甲醇-水(9.5:10:5),水相(上相)为固定相,有机相(下相)为流动相,正相洗脱;转速,800 r/min;流速,3.0 mL/min;进样体积,20 mL;进样浓度,2.0×104 mg/L;一步收集到五种高纯度黄酮苷类物质,经HPIC、MS和NMR鉴定分别为baicalein-7-O-glucoside (137.8 mg,98.3%),baicalein-7-O-diglucoside(78.6 mg,99.2%),chrysin-7-O-glucuronide(70.6mg,99.3%)和baicalin(57.2 mg,99.6%),及一种新的 chrysin-diglucoside(9.5 mg,98.8%).其中 chrysin-7-O-glucuronide和baicalin是首次通过制备型高速逆流色谱从这种植物中分离得到.     

交联柚苷酶聚集体水解柚皮苷制备普鲁宁

为了提高普鲁宁的收率、简化分离提纯的工艺、得到较高纯度的普鲁宁,本实验采用交联柚苷酶聚集体水解柚皮苷制备普鲁宁,以普鲁宁浓度为优化指标,研究了底物浓度、p H、温度、加酶量、反应时间对制备普鲁宁的影响。利用正交设计对水解过程进行优化,确定最佳工艺条件为:柚皮苷浓度13.79 mmol/L、p H=8.0、温度65℃、加酶量18.0 mg/m L、反应时间12.0 h,优化后制备得到的普鲁宁浓度为13.36 mmol/L、收率达到96.87%。连续使用3个批次后,普鲁宁的收率可以达到91.29%,交联酶聚集体的稳定性较好。采用聚酰胺树脂对水解产物进行吸附,体积分数为40%~60%的异丙醇线性梯度洗脱,从0.36 g柚皮苷反应液中可以分离得到0.22 g普鲁宁。     

HPLC-UV法同时测定强骨胶囊中新北美圣草苷和柚皮苷的含量

目的:建立反相高效液相紫外法同时测定强骨胶囊中新北美圣草苷和柚皮苷的含量测定方法。方法:采用CQ5-4069 ODS柱(4.6 I.D.×250mm),以0.1%甲酸水-乙腈为流动相梯度洗脱,流速为1.0 m L·min~(-1),检测波长为283 nm,柱温为35℃。结果:在15 min内,新北美圣草苷和柚皮苷完全分离,进样的质量与色谱峰面积呈现良好的线性关系,新北美圣草苷和柚皮苷的线性方程分别为:Y=2.36e+009X-5.80e+005 (r=0.9999),Y=2.54e+009X-8.766e+005 (r=0.9998),新北美圣草苷和柚皮苷的平均加样回收率分别为98.23%(RSD=2.61%)、97.36%(RSD=2.43%)。结论:该方法操作简便灵敏、结果准确可靠,样品回收率高,适用于强骨胶囊中新北美圣草苷和柚皮苷的含量测定。     

静脉注射柚皮苷在大鼠体内药代动力学研究

目的:建立LC/MS/MS法测定大鼠血浆中柚皮苷浓度,并考查其药代动力学特征。方法:采用Sepax HP-C18色谱柱:(100 mm×2.1mm,5μm),以甲醇-2 mmoL·L~(-1)醋酸铵溶液(65︰35)为流动相;流速:0.3 mL·min~(-1)。离子源为ESI源,正离子模式进行检测。结果:大鼠静脉注射给药柚皮苷后,血浆中可以迅速检测到大量的柚皮苷与少量的代谢产物柚皮素。柚皮苷的Tmax为0.083 h,达峰浓度C_(max)为56583.33 ng·mL~(-1);柚皮素葡萄糖醛酸结合物的T_(max)为12h,达峰浓度Cmax为653.68ng·mL~(-1)。结论:该方法选择性强、灵敏度好,可用于测定大鼠生物样本中柚皮苷及其代谢产物柚皮素的浓度。     

柑橘皮柚皮苷提取工艺研究

采用乙醇-乙酸浸提法提取柑橘皮中的柚皮苷,通过单因素实验研究了不同因素对柚皮苷提取率的影响,并在此基础上进行正交实验,得出优化工艺条件为:料液比1∶25 g/m L,乙酸比例10%,提取温度80℃,提取时间3 h。在此工艺条件下,柚皮苷提取率为5.78%。此方法成本低、毒性低、重复性好,能够用于工业化生产。     

山香圆有效成分的制备及HPLC测定质量标准建立

制备山香圆中有效成分女贞苷，并通过高效液相色谱(HPLC)建立了质量标准。以70%乙醇为溶剂加压提取山香圆中有效成分女贞苷，并以女贞苷得率为指标优化提取条件。结果显示，山香圆中有效成分女贞苷的较佳提取工艺：料液比为1∶30 (g∶mL)，提取温度为90℃，萃取时间为2.0 h；较佳纯化工艺：提取溶剂流速为1.0 mL/min，洗脱溶剂流速为2.0 BV/h，洗脱溶剂体积为2.0 BV/h。采用HPLC,C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)，流动相A相为甲醇，B相为0.5%磷酸，流速为1.0 mL/min，检测波长为360 nm，柱温为室温；结果表明，女贞苷均在0.309～39.126μg/mL范围内线性关系良好(r²=0.999 9)，重复性RSD<4.0%(n=6)，稳定性(24 h内)RSD<2.0%(n=6)，平均加样回收率为95%～105%。山香圆有效成分制备工艺简单，HPLC测定质量标准方法简便、准确，重复性好，可为将来山香圆有效成分含量质量控制提供实验依据。     

淫羊藿总黄酮提取物树脂纯化工艺条件的优化

以D1400大孔树脂、HZ-841大孔树脂、PA03060聚酰胺树脂,通过动态吸附与洗脱,对淫羊藿总黄酮提取物进行纯化,HZ-841大孔树脂的纯化效果最优。通过正交试验得到最佳纯化工艺条件为:2g HZ-841大孔树脂,上样总黄酮含量2mg/mL的提取液30mL,分别以80mL水、40mL 20%乙醇、40mL85%乙醇和20mL 95%乙醇进行梯度洗脱,流速1.5mL/min。最优条件下,利用HZ-841树脂纯化淫羊藿总黄酮提取液,得到干浸膏收率3.25%,其中总黄酮含量71.8%,淫羊藿苷含量9.44%。     

HPLC-MS法测定黄芪中黄酮类成分的含量

采用Acclaim 120 C_(18)色谱柱,以乙腈-0.3%甲酸溶液为流动相,流速为1.0 mL/min,以离子监测(SIM)为扫描模式测定黄芪药材中黄酮类成分含量。研究发现毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素检测的线性范围分别为0.0084～2.217 mg/mL(r=0.9991)、0.0049～1.287 mg/mL(r=0.9995)、0.0027～0.6847 mg/mL(r=0.9994)、0.00194～0.482 mg/mL(r=0.9998);精密度试验、稳定性试验、重复性试验RSD均2.0%;平均加样回收率(n=6)分别为100.31%、99.85%、100.45%、100.72%。该方法简便,可靠,准确,可用于黄芪药材质量控制。     

半制备高效液相色谱法分离纯化川木通中齐墩果酸

采用半制备高效液相色谱法对川木通中有效成分齐墩果酸进行分离纯化,纯化齐墩果酸的制备色谱条件:半制备型色谱柱ZORBAX SB-C18(9.4 mm×150 mm,5μm),流动相乙腈-水=87∶13,流速3 mL/min,柱温室温,检测器VWD检测器,波长210 nm,进样量20μL。对制备出的馏分进行定性分析。该法具有纯化效果好、操作高效、快速的特点。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定艾宁颗粒中黄芪甲苷的含量

建立了高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定艾宁颗粒中黄芪甲苷含量的方法.以甲醇提取,水饱和正丁醇萃取,D101大孔吸附树脂纯化的方法处理样品,色谱柱为Hypersil-Keystone C18;流动相为乙腈-水(33∶67);流速是1 mL/min;漂移管温度105 ℃,空气流速2.7 L/min.黄芪甲苷的线性范围为1.13～5.65 μg,平均回收率为96.24%,RSD为2.02%.该方法重复性好,专属性强,准确可靠,可用于艾宁颗粒的质量控制方法.