超声波对鸡骨蛋白酶解产物的影响及机理研究

利用超声波技术辅助酶解鸡骨架,制得鸡骨蛋白酶解产物,比较了超声功率、超声处理时间对鸡骨架酶解产物特性的影响。实验结果表明,不同超声波功率及超声处理时间对酶解液的水解度、多肽含量、滋味等特性的影响程度不同,800 W、30 min为最适超声条件,在此条件下,鸡骨蛋白酶解液的水解度及其多肽含量得到提高,DH可达24%,同时鲜味增强;蛋白结构分析表明,超声破坏了蛋白的网络结构,蛋白分子的活性位点被更多的暴露,使得酶解过程中的水解度、活性肽段释放效率、鲜味响应值得到提升。     

超声波对麦胚蛋白性质及其酶解物ACE抑制活性的影响

为了提高麦胚分离蛋白酶解产物的降血压活性,采用超声波处理麦胚分离蛋白。研究了超声波功率对麦胚分离蛋白的溶解度、表面疏水性、荧光光谱、巯基含量变化、水解度和酶解产物对血管紧张素转换酶(ACE)相对抑制活性的影响。结果表明:经超声波处理后,小麦胚芽球蛋白的荧光光谱和巯基含量均发生了显著的变化。麦胚分离蛋白的溶解度和表面疏水残基含量随着超声波功率的增加而提高,但当超声功率达到800 W后,增幅趋于平缓。经超声波前处理后,ACE抑制活性明显提高,而麦胚分离蛋白的酶解产物水解度没有明显变化,因此ACE抑制活性的提高是由于蛋白结构的变化造成的。在超声功率800 W时,酶解产物的ACE相对抑制活性提高了41.09%。     

超声波辅助酶解制备泥鳅蛋白源ACE抑制肽

以泥鳅为原料,采用超声波辅助菠萝蛋白酶水解泥鳅蛋白制备降血压肽。在单因素试验的基础上,通过正交试验优化超声及酶解处理工艺,得到最佳的试验条件:超声功率300 W,超声波酶解处理时间2 h,处理温度50℃,p H=6.5、底物质量分数30%,此时泥鳅蛋白酶解液的ACE抑制率为90.8%。同未经超声波处理的泥鳅蛋白酶解液相比,酶解时间降低了2 h,处理温度降低5℃,加酶量降低18%,而且酶解液的ACE抑制活性得到提高。试验结果表明,超声波辅助酶解泥鳅蛋白可显著提高酶解效率,增强活性肽的ACE抑制活性。     

变性脱脂豆粕酶解物的特性研究

为探讨变性脱脂豆粕在胰蛋白酶作用下的水解特性及酶解物的特性,选用国产胰蛋白酶为水解酶对变性豆粕进行水解。研究了变性豆粕中多肽溶出率随温度、pH值、时间、底物浓度及酶用量的变化规律。用正交实验法找出水解变性豆粕的最佳实验条件,并对脱脂豆粕酶解物的性质进行初步研究。结果表明:胰蛋白酶水解变性豆粕的最佳条件为:温度50℃、时间6h、底物质量分数5%、用酶量10000U/g、pH值8.0。在最佳酶解条件下的多肽溶出率为69.34%。脱脂豆粕蛋白酶解物的溶解度比大豆分离蛋白有很大提高,粘度明显低于大豆分离蛋白。此外脱脂豆粕蛋白酶解物有一定的乳化性和乳化稳定性。     

核桃蛋白的酶解工艺优化及产物特性研究

将核桃饼脱脂、碱溶酸沉制备核桃蛋白,再利用碱性蛋白酶对核桃蛋白酶解,采用单因素实验研究底物质量分数、酶解pH、酶用量、酶解温度、酶解时间对水解度的影响,在此基础上采用正交实验对酶解工艺条件进行优化,同时测定了酶解产物的溶解特性、乳化特性和起泡特性。结果表明：碱性蛋白酶酶解核桃蛋白最优酶解条件为底物质量分数5.0%、酶解pH 9.0、碱性蛋白酶（活性为10 000 U/g）用量4.0%、酶解温度50 ℃、酶解时间2 h;相较核桃蛋白,不同水解度的核桃蛋白酶解产物的表面疏水性下降,溶解特性、乳化特性和起泡特性提高。     

超声波辅助酶解鲶鱼肉制备抗氧化肽及其活性评定

采用超声波辅助酶解鲶鱼肉制备抗氧化肽,以得率和抗氧化性为评价指标,研究超声时间、超声功率、超声温度、固液比、酶解时间等因素的影响,并通过响应面法优化工艺参数。结果表明:超声处理的水解度和得率大于水浴处理的水解度和得率,超声辅助酶解的最优条件为超声时间42min、超声温度40℃、超声功率320W、酶解时间3.3h,此条件下肽的得率为1.13%。超声辅助酶解法制备的多肽具有较强的抗脂质过氧化能力和清除DPPH自由基能力,其IC50值分别为0.55mg/m L和0.69mg/m L。     

豌豆蛋白深度酶解制备咸味肽的研究

以水解度、蛋白回收率和感官评价为指标,探究不同蛋白酶、酶解温度、pH及时间对豌豆蛋白酶解效率的影响,并对其酶解工艺进行优化,同时对最优酶解条件下获得的豌豆蛋白酶解产物的肽分子量分布和氨基酸组成进行分析。结果表明:豌豆蛋白最优酶解条件为采用风味蛋白酶酶解,温度50℃,pH 7.0,酶解时间24 h,在此条件下,豌豆蛋白水解度为22.63%,蛋白回收率为58.08%,且该酶解产物中小分子肽(1 kDa)约为65.60%。豌豆蛋白酶解产物中必需氨基酸含量为39.16%,鲜味氨基酸含量为36.79%,甜味氨基酸含量为15.03%。     

超声波辅助酶解黑豆蛋白工艺优化

利用不同蛋白酶酶解黑豆蛋白,根据水解度选择最佳用酶为碱性蛋白酶,采用超声波辅助酶法提取黑豆肽;分析超声波处理时间、功率、加酶量、pH、酶解时间及底物浓度对水解度及二苯代苦味酰基自由基( DPPH·)清除能力影响.在单因素实验基础上,依据响应面分析确定最优提取工艺条件为:超声功率1029.27 W、酶解pH 8.64、底...     

超声辅助酶解改性对花生分离蛋白功能性的影响

以花生分离蛋白为原料,研究了超声作用对碱性蛋白酶酶解改性花生分离蛋白的影响,并确定了超声辅助酶解改性的最佳反应条件。结果表明,超声作用不改变花生蛋白溶解度与反应温度、pH、底物质量浓度、加酶量之间关系曲线的变化趋势,但使花生分离蛋白的溶解度提高了30.9%。超声辅助酶解改性的最佳工艺条件为:底物质量浓度60 g/L,加酶量4%,反应温度50℃,pH 8.0,超声功率200 W。经超声辅助酶解改性后,花生分离蛋白的水解度、溶解度、乳化性、起泡性分别比无超声酶解改性提高了40.6%、30.9%、58.8%和85.9%,泡沫稳定性和乳化稳定性则降低了21.5%和47.9%。     

广西近江牡蛎酶解工艺研究

以水解度和酶解产物的抗氧化活性为指标,以超声波破碎功率、料水比、加酶量和酶解反应时间为因素,采用四因素三水平正交分解法研究广西近江牡蛎的胰蛋白酶最佳水解工艺条件。结果显示:以水解度为指标时,酶解条件的最优水平组合是超声波功率80 W、料水比1:3(g/g)、加酶量8%、反应时间4 h;以酶解产物的抗氧化活性为指标时,最优水平组合是超声功率80 W、料水比1:3、加酶量8%、水解时间3 h。     

裸燕麦谷蛋白酶解条件的优化

以裸燕麦为原料,采用Osborne蛋白分级方法分离提取裸燕麦谷蛋白,利用蛋白酶水解后以水解度和对·OH清除率为指标,通过正交试验对酶解裸燕麦谷蛋白的工艺进行探索。SDS-PAGE电泳结果显示裸燕麦谷蛋白分子量范围在(20~97)ku,且最佳水解蛋白酶为碱性蛋白酶。谷蛋白酶解最佳工艺为:底物浓度10 g/L,酶用量10%,p H值8.5,温度55℃。在最佳酶解条件下水解度近40%,·OH清除率达60%以上。     

超声处理对玉米蛋白酶解效果影响的研究

通过单因素实验考察了超声处理对玉米蛋白水解度的影响;并在单因素实验的基础上,通过对超声波功率、底物浓度、酶与底物浓度比、水解时间进行四因素三水平正交实验,确定了在超声波作用下玉米蛋白最佳的酶解条件。结果表明,超声处理不改变玉米蛋白水解过程中底物浓度、酶浓度、反应温度、反应时间与水解度之间关系的变化趋势,但能使水解度明显提高。在超声波作用下,玉米蛋白酶解的最佳反应条件为:超声波功率200W,玉米蛋白粉浓度6%,酶与底物浓度比0.7%,pH9.0,55℃下水解1h。此时,玉米蛋白的水解度为25.14%,比对照提高了14.68%。     

扫频超声波预处理对玉米醇溶蛋白酶解特性的影响

目的:研究扫频式超声波预处理对玉米醇溶蛋白酶解特性的影响。方法:以ACE抑制活性和水解度为指标,考察扫频超声波对玉米醇溶蛋白制备ACE抑制肽酶解特性的影响;研究经扫频超声处理后,玉米醇溶蛋白二级结构、表面形貌、酶解产物氨基酸组成等特性的变化。结论:扫频超声波预处理玉米醇溶蛋白后,其水解度和酶解液的ACE抑制率显著提高;酶解产物的疏水性氨基酸和支链氨基酸含量大幅度提高。(40±2)k Hz/(68±2)k Hz组合双频扫频超声波预处理后,玉米醇溶蛋白酶解液的ACE抑制率为43.7%,与未超声对照组相比提高了1.21倍。玉米醇溶蛋白经超声处理后其二级结构发生变化;原子力显微镜对其表面形貌分析表明,双频扫频超声处理使玉米醇溶蛋白颗粒迅速疏松、细化,出现分子自组装聚集现象。     

双酶法制备牡蛎干酶解液及其体外抗氧化活性评价

以牡蛎干为原料,选用动物蛋白水解酶和风味蛋白酶对其进行酶解,获取营养丰富的蛋白酶解物。以水解度为试验指标,分别进行了酶解单因素及正交优化试验,结果表明最佳酶解工艺组合为:酶解时间5h,料液比1∶15(g/mL),加酶量3%。该条件下牡蛎干蛋白水解度为33.7%,蛋白质回收率为78.75%,酶解液中氨基酸总量达3 662.53mg/100mL,其中必需氨基酸含量达38.93%。对牡蛎干蛋白酶解物进行体外抗氧化活性评价,结果表明:该牡蛎干蛋白酶解物清除率DPPH自由基IC50为5.95mg/mL,清除ABTS自由基的IC50为10.8mg/mL,清除羟基自由基的IC50为14.56mg/mL。     

双酶分步酶解制备杏仁蛋白酶解物的工艺

以杏仁粕为原料,经脱脂和提取蛋白后,选用酶法制备杏仁粕蛋白酶解物。在3种蛋白酶单一酶解工艺条件的研究基础上,研究双酶分步酶解制备杏仁粕蛋白酶解物的最佳工艺条件。结果表明,调节pH 9,温度40℃,按酶添加量4 000 U/g加入碱性蛋白酶酶解90 min,灭活后,调节pH 5.5,温度50℃,按酶添加量4 000 U/g加入木瓜蛋白酶再酶解90 min,在这种条件下蛋白酶的酶解效果最佳,水解度达63.04%。     

超声波辅助葵花籽蛋白酶解条件优化

为进一步提高葵花籽蛋白酶解效率,以葵花籽粗蛋白为原料,酶解前期对其进行超声波预处理,利用碱性蛋白酶和风味蛋白酶进行分步酶解。酶解程度以水解度为评价指标并采用二次旋转正交组合设计优化超声波辅助酶解的工艺条件。结果表明:底物浓度为2%(g/mL),超声功率50W,超声波预处理时间35 min;碱性蛋白酶酶解温度55℃,pH=8.5,酶解时间1.5 h,加酶量1500U/g;风味蛋白酶酶解温度50℃,pH=7.0,酶解时间1.5 h,加酶量为3000 U/g。最终可达到最佳水解度为45.32%。     

超声预处理酶解与常规酶解鱼鳞胶原蛋白的比较

采用超声预处理和常规方法分别进行了木瓜蛋白酶酶解草鱼鱼鳞胶原蛋白的研究。在超声波频率20 k Hz,功率150 W,超声预处理时间10 min的条件下,从酶解温度、料液比值、p H、酶解时间、酶浓度和动力学参数角度对两种酶解过程进行了比较和分析。结果表明,在最佳工艺参数p H 7.0、料液比值0.2 g/m L、酶解温度65℃和酶浓度2%下酶解6 h,超声预处理酶解的水解度比常规酶解提高8.14%。在一定的条件下,超声预处理酶解比常规酶解可提高木瓜蛋白酶的最适宜活性温度,在高料液比值下获得较高的水解度,在较少的时间内或在较低的酶浓度下使反应体系趋于平衡状态,但对木瓜蛋白酶活性基团和底物的解离影响不大。在不同的温度下,超声预处理酶解的动力学常数Vmax和特征参数Km均分别大于和小于常规酶解,说明超声预处理增强了酶与底物的亲和力,提高了酶解的反应效率。     

超声波对蛋清蛋白酶解的研究

以蛋清蛋白和Alcalase为原料,研究了超声波功率对蛋清蛋白酶解的水解度的影响,进行了有、无超声波作用下蛋清蛋白酶解的优化实验。结果表明,40kHz、125W的超声波处理,能有效地促进蛋清蛋白的酶解,使其水解度提高13%～35.48%。超声波作用不影响蛋清蛋白的其他酶解条件,优化工艺参数为pH是9.15,加酶量(E/S,即酶相对于底物蛋白质质量)是4.85%,温度是70℃,且各因素对蛋清蛋白水解度影响的大小顺序一致,为pH>T>E/S。     

碱性蛋白酶酶解罗非鱼下脚料蛋白动力学研究

以加工罗非鱼片废弃的下脚料蛋白和碱性蛋白酶为原料,以水解度为指标,考察温度、底物质量浓度、酶用量及pH等因素对碱性蛋白酶酶解罗非鱼下脚料蛋白水解度的影响。得到碱性蛋白酶水解罗非鱼下脚料蛋白的适宜工艺条件为：酶解温度50℃、底物质量浓度20g/L、酶用量为0.067g/L、pH9.50、反应时间180min,此时水解度为22.00%。同时得到50℃条件下酶失活常数Kd为37.9min-1,反应速率常数K2为244.2min-1、米氏常数KM为29.27g/L、最大反应速度Vmax为28.41g/(min·L);并建立了相应的水解动力学模型。验证实验表明：建立的水解动力学模型与实际水解过程基本吻合。     

酶解制备菜籽蛋白肽条件的优化

选用碱性蛋白酶Alcalase对菜籽蛋白进行水解。在单因素试验研究不同处理条件对菜籽蛋白水解度和菜籽蛋白肽得率的影响的基础上,建立单因素对菜籽蛋白肽水解度影响的数学模型,通过响应面分析对酶解条件进行优化。确定菜籽蛋白酶解最佳工艺条件为:底物质量分数为4.49%、pH8.45、温度55℃、酶解时间180min、加酶量5000U/g pro,在该优化条件下,菜籽蛋白水解度理论值可达15.00%,实际值为14.71%。