康宁木霉产纤维素酶固态发酵条件研究

对康宁木霉产纤维素酶的最佳固体发酵条件进行了优化,研究表明：最佳氮源为硫酸铵或磷酸氢二铵,最佳碳源为小麦秸秆：麦麸=3：2,添加0.1％的Tween80、含水量为300％,28℃条件下培养4d产酶活力最高．初始pH值对CMC酶活影响较大,当pH=3.0时CMC酶活最高,初始pH值对滤纸酶活影响较小,pH=5时酶活最高．     

康宁木霉与米根霉混合发酵生产纤维素酶和木聚糖酶的研究

对康宁木霉QF-02和米根霉NRRL395液态混合发酵生产纤维素酶和木聚糖酶的工艺进行了研究.实验结果表明:康宁木霉先接种培养48 h后再接种米根霉产酶效果最佳,在此接种方式下获得的优化培养温度为28℃,起始pH为5.0.混合菌在发酵罐中的产酶趋势与康宁木霉纯培养类似,最大酶活都出现在120 h,但混合培养物中FPA、B-葡萄糖苷酶活和木聚糖酶活比纯培养分别提高14.8%、45.4%和4.3%.米根霉的加入使混合培养物中还原糖浓度下降并维持在较低水平,而康宁木霉纯培养中还原糖呈不断增加的趋势.康宁木霉和米根霉混合发酵产酶的微生态原理应归于二者形成了相互促进的共生关系.     

固态发酵蚕沙生产蛋白饲料

对混菌固态发酵蚕沙进行了研究，结果表明在蚕沙和麸皮比例８：２，尿素３％，硫酸铵２％，水分７２％，ＰＨ自然，在３０℃先接康氏木霉Ｔ－１，培养７２ｈ以后再接入莫格假丝酵母Ｙ７，再继续培养２４ｈ，所得发酵产品的粗蛋白含量为２８．７％，粗纤维降解率为４２．２％，富含酵母活细胞和纤维素酶，转化率为８２．７％。     

绿色木霉3.3744产纤维素酶固态发酵条件研究

采用固态发酵研究了绿色木霉3.3744菌株产纤维素酶的最佳培养条件.结果表明:最佳碳源为小麦秸粉∶麦麸(4∶6),料∶水=1∶2.5,加入1%(NH4)2SO4,0.1%Tween80,初始pH值为5.0(滤纸酶活)或为3.0(CMC酶活),28℃下培养96 h时其产纤维素酶活力最高.     

多菌联合固态发酵生产酒糟菌体蛋白饲料的实验研究

利用米曲霉、黑曲霉和醇母组成的三菌发酵体系对啤酒糟进行高蛋白菌体饲料化生物转化,方法为以预处理过的酒糟粉为主要培养基,添加少许辅料,接种上述三种菌种进行固态发酵,该方法的培养周期为6d,所得酒精菌体蛋白饲料的粗蛋白含量高达35．9％,糖化酶活力达7564.1u/g,演粉酶活力达4824．4。     

混菌固态发酵小曲白酒糟生产蛋白饲料的研究

以小曲白酒糟为原料,添加纤维素酶制剂预处理原料,采用白地霉、假丝酵母混菌固态发酵,生产蛋白饲料。确立了糟麸比、纤维素酶预处理方式、初始pH值、初始含水量、料层厚度、发酵时间和温度。对发酵产品的分析表明：粗蛋白增幅87．5％,粗纤维降解率达20．1％,粗脂肪降解率为61．81％。     

康宁木霉cbh2基因在毕赤酵母中的表达

为拓宽酵母菌的应用领域,构建具有分泌纤维素酶能力的酵母工程菌,利用质粒pPICZαA构建了康宁木霉纤维素酶cbh2基因的酵母表达载体,经线性化后采用电穿孔法转入毕赤氏酵母菌中.以甲醇为诱导物进行诱导,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果证明该基因可成功表达.对重组蛋白进行了产酶活性测定,结果证明该重组蛋白具有纤维二糖水解活性,从而获得了一株可产生纤维素酶的酵母工程菌.     

康宁木霉cbh2基因cDNA的克隆及序列分析

采用植物叶总RNA提取试剂盒提取康宁木霉总RNA,利用依据木霉cbh2基因序列设计合成的一对特异性引物,采用RT-PCR方法扩增得到了康宁木霉cbh2基因cDNA,并成功转入大肠杆菌.序列测定结果表明该基因序列与已公布的木霉cbh2基因的同源性最高可达91.93%.     

参数振荡固态发酵生产纤维素酶

该项目主要研究工业化制备纤维素酶的主要技术：筛选了高产纤维素酶菌株康氏木霉W01；研究了康氏木霉菌种退化的原因，制定了工业可行的制种方法，解决了因菌种退化造成减产的关键技术问题；研究了混合发酵技术，解除反馈抑制，提高酶产量；参数振荡技术用于纤维素酶固态发酵，调整菌体生长周期，延长产酶期，提高酶产量。     

康氏木霉ZJ5纤维素酶发酵培养基的优化

采用响应面方法对康氏木霉(Trichoderma koningii)ZJ5生产纤维素酶的培养基进行了优化，首先通过全因子实验分析培养基组分；稻草粉、麦麸、大麦粉和(NH4)2SO4对纤维素酶三个组分活性的影响，确定主要影响因子为稻草粉和(NH4)2SO4，前者为正影响，后者为负影响，用最陡爬坡路径逼近最大响应区域，利用中心组合设计及响应面分析确定主要影响因子的最佳浓度，在优化培养基中发酵6d，CMC酶活、滤纸酶活和β-葡萄糖苷酶活分别达到了765．8、155．3U／mL和39．54U／mL。     

稻草生物发酵饲料菌株选育和发酵条件的研究

试验从１４株酵母和２株纤维分解菌中筛选到适应固态发酵生产草生物发酵饲料的株菌。     

以豆粕为原料固态发酵产纳豆激酶工艺的优化

以食品级豆粕为唯一培养基成分,通过纳豆芽孢杆菌固态发酵产纳豆激酶的培养基的优化实验,确定优化条件为：接种量5%,装量为40,g于250,mL锥形瓶,培养基含水量60%,浸泡水pH,7.5,发酵温度37,℃.在培养24,h后达到产酶高峰,产酶活力达到1,662,FU/g.比较了在相同的发酵条件下,以食品级豆粕为培养基比大豆为培养基获得的酶活力和活菌数,都高出50%左右.     

产木聚糖酶黑曲霉LN0601的液体发酵

利用黑曲霉LN0601 菌株液体发酵生产木聚糖酶。分别考察培养基碳源、培养基氮源、培养时间、培养温度、培养起始pH 及孢子悬液接种体积分数等因素对该菌株产木聚糖酶性能的影响。确立了黑曲霉LN0601 产木聚糖酶的最优条件, 即以质量分数为5 %的玉米芯粉作为培养基碳源;质量分数为1 %的NaNO₃ 作为培养基氮源;培养时间为2 d ;培养温度为28 ℃;培养起始pH 为6.5;孢子悬液接种量体积分数为20 %, 接入装有100 mL 液体发酵培养基的250 m L 三角瓶内, 150 r/ min 振荡培养。此条件下黑曲霉LN0601 的木聚糖酶活力可达2 000 U/m L 以上。     

葡萄废渣固体发酵生产单细胞蛋白

以葡萄废渣为唯一的碳源, 对固体发酵生产单细胞蛋白(SCP)进行了一系列的研究。选用2 株酵母菌和2 株霉菌进行不同组合的培养, 选取最佳的组合方式, 考察了影响单细胞蛋白生产的各个因素, 如菌种的接种量, 培养基中水的质量分数、发酵时间、发酵温度、培养基外加氮源的种类以及氮源的添加量等。并设计正交实验,初步确定了优化的培养条件, 即菌种接种量为15 %, 培养基中水的质量分数为60 %, 30 ℃培养72 h , 以尿素为氮源,发酵样品中添加质量分数为6 %的尿素。在此培养条件下发酵产物的粗蛋白的质量分数可达到发酵前葡萄废渣粗蛋白质量分数的2 倍以上。     

一株假丝酵母Candida sp.发酵稻草水解液制取乙醇

从土壤中筛选到一株能发酵葡萄糖和戊糖制乙醇的菌种,通过形态观察初步称该菌为假丝酵母Candidasp;研究发现pH值、发酵供氧情况、总糖浓度等对该菌种发酵稻草水解液制取乙醇的效率都有一定的影响,并且实验结果发现稻草水解液经过氢氧化钙处理后,总糖的利用率与乙醇转化率都有所     

产纤维素酶黑曲霉LN0401液体发酵条件的分析

利用黑曲霉LN0401菌株液体发酵生产纤维素酶。分别考察培养基碳源、培养基氮源、培养时间、培养温度、培养起始pH及孢子悬液接种的体积分数等因素对菌株产纤维素酶性能的影响。确定了黑曲霉LN0401产纤维素酶的最优条件。即以质量分数为5%的稻草粉作为培养基碳源;质量分数为1%的蛋白胨作为培养基氮源;培养时间为3 d;培养温度为30℃;培养起始pH为6.0;孢子悬液接种的体积分数为6%~8%接入装有100 mL液体发酵培养基的250 mL三角瓶内,150 r/min振荡培养。此条件下黑曲霉LN0401的CMC酶活为195.6~198.5 U/mL,FPA酶活为27.7~30.4 U/mL。     

组合菌种发酵制备酒糟饲料的研究

利用选育的降解纤维素霉菌（CM-4）、酵母菌（Y-7）、产酯霉菌（EM-3）进行组合发酵试验,制备酒糟蛋白饲料,探讨菌种组合和培养条件对酒糟发酵的影响。试验结果表明,混合酒糟粉100克,麸皮10％,豆饼粉5％,硫酸铵3．0％,pH5．5,接种菌液9％,含水量50％以上,在30℃条件下培养4天,发酵饲料粗蛋白由19．63％提高到29．71％,粗蛋白增幅为5i．35％,粗纤维由19．55％降低到14．51％,粗纤维降幅为25．78％,总糖含量为8．55％,发酵饲料具有明显的酯香,饲料适口性更佳。     

有机固废厌氧发酵气体对三峡库区大气环境影响

三峡库区固体有机废物厌氧发酵产生的气体有CH4、CO2、H2S、NH3、H2及多种微量气体。通过分析,三峡库区城镇每年产生垃圾约394万t,人畜禽粪尿每年约为380万吨,整个三峡库区每年填埋垃圾平均产生的甲烷气的量为2.9亿kg,人畜禽粪尿厌氧发酵产生的甲烷量为2.3亿kg,甲烷是一种比较重要的温室气体,对温室效应的贡献率仅次于二氧化碳,其他气体除了对产生区域有较大影响外,由于量小(二氧化碳除外),对整个大气环境影响相对较小。