磁性壳聚糖微球固定化脂肪酶的研究

目的:制备具有高活性的固定化脂肪酶;方法:以磁性壳聚糖微为载体,用物理吸附法固定化脂肪酶,对影响固定化的各种因素进行考察,确定最优条件,并比较游离酶和固定化酶的pH和热稳定性,研究固定化酶的使用稳定性;结果:固定化的适宜条件为采用加酶量600 U/g,温度5℃.pH 7.0,固定时间2 h,固定化酶的pH和热稳定性都优于游离酶,固定化酶连续使用5次,其相对酶活仍为使用前的57.8%,具有较好的操作稳定性;结论:磁性壳聚糖微球是固定脂肪酶的良好载体.     

磁性壳聚糖微球固定化脂肪酶研究

以磁性壳聚糖微球为载体,通过戊二醛交联进行脂肪酶固定化,对影响脂肪酶固定化各种因素进行考察,确定最佳条件,并比较游离酶与固定化酶pH和热稳定性。结果表明,固定化适宜条件为:脂肪酶加入量5.0 mg/100 mg载体、温度40℃、时间5 h、pH 8.04、戊二醛浓度10%、最高固载率可达90.56%,酶活4034 U/g载体;与游离酶相比,固定化酶pH和热稳定性都有较宽适用范围。     

环氧化聚苯乙烯的制备及其在果胶酶固定化中的应用

将环氧聚醚接枝于胺化的聚苯乙烯微球,制备环氧化聚苯乙烯微球,研究胺化聚苯乙烯微球的溶胀时间、反应体系、反应时间、温度等因素对微球环氧化的影响.结果表明,该反应的最佳条件:反应溶剂用二氧六环,反应温度80℃,反应时间25 h,溶胀时间4 h,胺基担载量2.1 mmol NH2/g 时反应的环氧基固载量达到最大,最大环氧基担载量可达1.59 mmol/g.并用该环氧微球作为载体,对果胶酶进行固定化,研究微球吸附温度、吸附pH值、吸附时间对果胶酶固定化效果的影响,得到活力较高的固定化果胶酶,酶活力回收率约为56.4%,最适反应温度由游离酶的50℃上升至65℃,最适pH由游离酶的3.5升至4.5,Km值由游离酶的5.14 g/L降低为3.11g/L.操作稳定性很强,连续使用10批次,酶活仍为77%.     

海洋脂肪酶YS2071的固定化及酶学性质研究

为提高脂肪酶的利用效率,更好应用于工业化生产,研究了脂肪酶YS2071的固定化技术,筛选最优载体,通过单因素实验法对脂肪酶固定化的条件进行优化,并对其性质进行了研究。采用MI-BSI伯胺功能基吸附树脂为载体,京尼平为交联剂,吸附-交联的方法,分析了加酶量、吸附时间、吸附温度、初始pH、交联剂的浓度、交联时间等因素对脂肪酶固定化效果的影响,并通过PB实验和响应面实验,确定了最佳固定化条件:加酶量为8 mg,吸附时间8 h,吸附温度为20℃,初始pH 8.6,交联剂质量浓度为0.48 g/L,交联时间为1 h时,固定化效率最高,酶活回收率达到60%以上。     

沙蒿胶磁性微球固定化脂肪酶及部分理化性质的研究

以沙蒿多糖-壳聚糖复合磁性微球为载体,采用物理吸附法固定化脂肪酶,对固定化过程中对酶活力有影响的各种因素做了研究,同时对固定化酶的部分理化性质、最适pH、最适温度、酶的热稳定性以及表现米氏常数与游离酶做了比较.固定化酶的Km小于游离酶的Km,其最适pH和最适温度分别为8.0和50℃,而且固定化脂肪酶具有良好的热稳定性、可应用性和重复使用性.     

固定化脂肪酶的制备及其酶学性质的研究

以大孔树脂为载体进行脂肪酶的固定化,通过优化固定化条件得到高活性固定化脂肪酶并对其酶学性质进行研究。结果表明:弱碱性大孔阴离子交换树脂D301R是最佳的固定化载体;最优固定化条件为加酶量10%(以大孔树脂质量计),加水量30%(以大孔树脂质量计),4℃下在异辛烷中固定5 h。与游离脂肪酶相比,固定化脂肪酶具有良好的热稳定性、储存稳定性、吸附稳定性和对有机溶剂的抗逆性,循环使用6次,水解橄榄油的酶活回收率仍可达到50%。     

磁性松香基高分子固定化交联脂肪酶聚集体的制备及性质研究

制备了磁性松香基高分子固定化交联脂肪酶聚集体(固定化CLEAs-L)。研究制备条件对固定化CLEAs-L活性的影响,并研究了固定化CLEAs-L的结构与性质。结果表明,固定化CLEAs-L的最佳制备条件为:沉淀剂无水乙醇用量30%,脂肪酶质量浓度4 g/L,一次交联反应中添加0. 3%的戊二醛,交联反应2 h,二次交联反应中添加1%的戊二醛,交联脂肪酶聚集体与载体的质量比2. 5∶1。在最佳条件下,固定化CLEAs-L的酶活回收率为86. 52%,固定化CLEAs-L的最适温度和pH分别为45℃和7. 0。与游离脂肪酶、CLEAs-L相比,固定化CLEAs-L热稳定性和储存稳定性明显提高;重复操作6次后,固定化CLEAs-L的酶活回收率仍保持在60. 00%以上。     

聚丙烯-TiO2/CA复合膜固定化脂肪酶最佳条件的研究

以聚丙烯-TiO2/CA复合膜对脂肪酶进行吸附固定,研究了最佳固定化条件:温度20℃,pH8.0,振荡速度100 r/min,吸附时间2h,膜酶活力最高为4.5U/cm2。膜固定化酶转化反应最佳条件:温度35℃,比游离酶降低了5℃;最适pH 8.5,与游离酶相比pH向碱性偏移,间歇水解橄榄油132h酶活为原酶活的56.7%。     

磁性多孔微球固定化假丝酵母脂肪酶的研究

通过悬浮聚合法制备了含环氧基团的聚合物载体高分子磁性多孔微球(GHD),用TEM、 SEM和Micromeritics ASAP 2010等对聚合物载体进行了表征。考察了载体中交联剂含量、固定化时间、给酶量等因素对固定化脂肪酶催化活性的影响。结果表明,Fe3O4纳米粒子粒径20 nm,分布均匀,磁性多孔微球粒径从几十微米到一百多微米,粒子大小大体呈正态分布且分布较窄,平均粒径为110 μm,直径在区间80μm~150μm范围内的粒子占90%以上。微球表面呈皱褶态且呈现多孔性,孔径从几个纳米到几十纳米,为闭孔,且孔间互相贯穿。固定化酶最适条件为给酶量125 mg/g,固定化时间7 h,此时酶的吸附量为118 .5mg/g,比酶活7.56×105 U/g,酶的活力回收率0.95。以GHD为载体制备的固定化脂肪酶最佳反应温度从37 ℃上升到42 ℃,最适反应pH从7.2提高到7.5,固定化后酶对温度和pH的敏感性降低,重复使用12次,固定化酶的活力都能保持在92 %以上。     

家蚕丝素固定化单宁酶的研究

以家蚕丝素为载体,采用交联-吸附法固定化单宁酶.正交试验结果表明,最佳的固定化条件为戊二醛浓度为0.45%,固定化pH值为5.0,给酶量15mg/g载体,固定化时间9h,固定化温度10℃.与游离酶相比,该固定化单宁酶的热稳定性明显提高,25℃贮存6d后酶活仍保持57.5%.以没食子酸甲酯为底物,固定化单宁酶经连续6次酶促反应后,酶活仍保持77.4%.