铁皮石斛多糖对高脂饮食小鼠肠腔菌群的影响

目的 探究铁皮石斛多糖(Dendrobium officinale polysaccharides,DOP)对高脂饮食小鼠肠腔菌群的影响,为其功能性食品的开发提供参考.方法 以水提醇沉法提取DOP,分别以高脂饮食(high fat diet,HFD)、高脂饮食联合DOP对昆明小鼠干预8周,收集小鼠小肠段的内容物进行16...     

具有增强免疫作用的铁皮石斛灵芝酒的研制

以铁皮石斛、灵芝为主要原料,研制具有增强免疫力作用的保健酒。先采用提取、浸泡、配制等工艺制备铁皮石斛灵芝酒,再将ICR小鼠随机分为对照组和铁皮石斛灵芝酒低、中、高剂量组(8.33、16.67、50.00 m L/kg),连续灌胃30 d后通过脏器指数测定、二硝基氯苯诱导小鼠耳肿胀实验、碳廓清实验、脾淋巴细胞体外增殖实验及自然杀伤细胞(naturalkiucell,NK)细胞活性测定等方法评价铁皮石斛灵芝酒的免疫调节活性。结果显示铁皮石斛灵芝酒能提高小鼠胸腺指数;降低小鼠耳肿胀度;增加小鼠吞噬指数;促进淋巴细胞增殖;增加NK细胞活性。铁皮石斛灵芝酒具有增强免疫力的作用。     

铁皮石斛多糖对2型糖尿病小鼠降糖降脂的作用

目的:研究铁皮石斛多糖(Dendrobium officinale polysaccharide,DOP)对2型糖尿病小鼠降糖降脂作用,为铁皮石斛的充分利用提供药理学依据。方法:用四氧嘧啶对小鼠进行腹腔注射(100 mg/kg m_b),构建小鼠2型糖尿病模型。将供试小鼠分为6组:DOP高剂量组(450 mg/kg m_b)、DOP中剂量组(300 mg/kg m_b)、DOP低剂量组(150 mg/kg m_b)、正常对照组、阳性对照组(盐酸二甲双胍250 mg/kg m_b)、模型组,连续灌胃4周。对供试小鼠进行血液生化水平(甘油三酯和总胆固醇)、肾功能指标(血清肌酐和尿素氮)以及抗氧化能力检测。结果:1)与模型组小鼠相比,铁皮石斛多糖对2型糖尿病小鼠具有明显的降糖效果,其DOP高剂量组降糖效果极显著(P<0.01)。与模型组小鼠相比,铁皮石斛多糖能够显著提高2型糖尿病小鼠糖耐量(P<0.05),高剂量DOP的作用效果与盐酸二甲双胍基本一致。2)与模型组小鼠相比,DOP能...     

α-生育酚琥珀酸酯对过度运动小鼠NK细胞平衡及ApoE基因表达影响研究

通过α-生育酚琥珀酸酯作用于过度运动小鼠,观察其对小鼠NK细胞平衡及ApoE基因表达的影响。结果表明:α-生育酚琥珀酸酯对于克服过度运动小鼠免疫抑制现象具有显著作用,主要表现为CD3+、CD16+、CD56+细胞因子极显著下降(P0.01);ApoE mRNA及ApoE蛋白表达量极显著上升(P0.01)。不同剂量α-生育酚琥珀酸酯作用效果有一定差别,高剂量组NK细胞平衡及ApoE表达显著优于低剂量组(P0.05)。     

卵白蛋白对变应性鼻炎小鼠模型的影响

目的研究卵白蛋白(ovalbumin, OVA)对变应性鼻炎(过敏性鼻炎)小鼠模型的影响。方法小鼠随机分为7组:对照组、高浓度OVA模型+PBS组、中浓度OVA模型+PBS组、低浓度OVA模型+PBS组、高浓度OVA+阳性药组、中浓度OVA+阳性药组、低浓度OVA+阳性药组。采用OVA全身致敏及局部攻击相结合的方法构建变应性鼻炎小鼠模型,以PBS、丙酸氟替卡松(0.008 mg/kg)滴鼻,观察小鼠鼻部抓挠、喷嚏数症状和脏器指数; ELISA法定量检测血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)和干扰素-γ(IFN-γ)的含量;制备脾细胞悬液对比脾细胞悬液CD4+CD25+T细胞变化。结果建模成功后,高浓度OVA+阳性药组与高浓度OVA模型+PBS组相比,血清IgE、IL-10、IL-4、IFN-γ水平和CD4+CD25+T细胞水平变化不明显,差异无统计学意义(P0.05);中、低浓度OVA+阳性药组与中、低浓度OVA模型+PBS组相比,血清IgE、IL-10和IL-4水平显著降低, CD4+CD25+T细胞水平和IFN-γ水平显著升高, IFN-γ/IL-4比值升高,差异有统计学意义(P0.001或P0.05)。结论卵白蛋白的浓度选择对变应性鼻炎模型影响较大,致敏用卵白蛋白为中浓度时对阳性药的检测效率较高。     

铁皮石斛花化学成分及抗氧化活性研究

通过HPLC-MS/MSQQQ液相色谱串联质谱联合仪检测分析了铁皮石斛花中的氨基酸组成,并分别采用苯酚硫酸法、NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色体系、Folin-Cioealteau显色法测定铁皮石斛茎和花的多糖、总黄酮、总酚含量;结合清除DPPH自由基能力、还原力评价铁皮石斛花的抗氧化作用,并与铁皮石斛的茎条进行比较。研究结果表明:铁皮石斛花的氨基酸中主要以精氨酸为主、其次为脯氨酸;铁皮石斛茎条的多糖含量高于铁皮石斛花,而铁皮石斛花的总酚和总黄酮高于铁皮石斛茎;铁皮石斛花的还原力强于铁皮石斛茎。铁皮石斛花有广阔的开发前景。     

杨树菇凝集素诱导C57BL/6小鼠肝损伤和活化CD8+T细胞

该研究探究了食用蘑菇杨树菇凝集素AAL(Agrocybe aegerita lectin)对小鼠肝损伤的作用机制。通过小鼠尾静脉注射AAL的方式,根据不同的处理时间分0 h、6 h和9 h三个实验组,分别检测其血清AST(天门冬氨酸氨基转移酶)和ALT(丙氨酸氨基转移酶),对肝脏组织切片进行HE染色,RT-PCR检测肝脏细胞因子表达,流式细胞术对肝脏细胞进行分析。与0h组相比,对小鼠尾静脉注射AAL 6 h和9 h后,小鼠血清ALT和AST显著升高(p0.001);肝组织切片HE染色发现小鼠肝脏呈现明显的肝损伤,可见坏死区和免疫细胞浸润。注射AAL6h后肝脏细胞因子IL-10、IL-33、IL-27、IFN-γ和TNF-α的m RNA表达分别升高到25.14倍、4.62倍、5.14倍、16.51倍和28.10倍。6 h组小鼠肝脏中的T细胞、NKT细胞、CD8+T细胞比例分别由27.92%显著升高到45.95%(p0.05)、2.46%显著升高到6.36%(p0.05)、17%显著升高到27.15%(p0.05)。活化的CD69+T细胞和CD69+CD8+T细胞的比例分别由10.02%显著升高到18.28%(p0.01)和5.96%显著升高到16.20%(p0.01)。结果表明食用菌杨树菇AAL可诱导小鼠肝损伤,活化肝脏CD8+T细胞,显著上调细胞因子IL-10、IL-33、IL-27、IFN-γ和TNF-α的表达,提示食用菌凝集素成分是需要考虑安全使用剂量的。     

乳铁蛋白对环磷酰胺所致小鼠免疫失衡的保护作用

探讨乳铁蛋白对环磷酰胺所致小鼠免疫失衡的保护作用。Balb/c小鼠随机分为6组,正常对照组,模型对照组,乳铁蛋白组(5、25、50、500 mg/kg)。连续灌胃给药27 d,第27天给药后除正常对照组外,其他小鼠均腹腔注射环磷酰胺80 mg/kg,继续灌胃至第30天,末次给药24 h后,放射免疫分析方法测定各组小鼠外周血CD4+T、CD8+T细胞。酶联免疫分析方法检测血清细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4,IL-10的变化。与正常对照组相比,模型小鼠外周血CD4+T、CD8+T百分率明显增加;血清IFN-γ明显降低(p<0.01),IL-4明显增高(p<0.05),IFN-γ/IL-4比值明显下降(p<0.01);乳铁蛋白25、50、500 mg小鼠外周血CD4+T、CD8+T细胞百分率明显降低(P<0.01或P<0.05)。乳铁蛋白500 mg组小鼠血清IFN-γ较模型组明显增高(p<0.05),乳铁蛋白50、500 mg小鼠血清IFN-γ/IL-4比值趋于正常。乳铁蛋白能不同程度修复环磷酰胺所致小鼠免疫失衡状态,具有免疫保护作用。     

副干酪乳杆菌L9对过敏小鼠淋巴细胞Th1/Th2平衡的调节作用

目的:研究副干酪乳杆菌L9对牛乳β-乳球蛋白(BLG)过敏小鼠淋巴细胞Th1/Th2平衡的影响,探讨L9缓解机体过敏反应的机制。方法 :构建BLG过敏小鼠模型,通过ELISA方法和流式细胞术分析L9对过敏小鼠原代淋巴细胞和骨髓源树突状细胞(BM-DCs)细胞因子分泌及调节性T细胞(Foxp3+Treg)数量的影响。结果:不同剂量的活/热致死L9均可显著提高过敏小鼠淋巴细胞上清中IFN-γ水平,显著降低IL-4含量,减少BLG特异性抗体的产生(P0.05);显著促进BM-DCs细胞上清中调节性细胞因子IL-10、TGF-β的分泌(P0.05),提高过敏小鼠CD4+T淋巴细胞中Foxp3+Treg细胞比例,并且活菌与热致死菌的调节效果相似。结论 :L9能够调节过敏小鼠淋巴细胞的Thl/Th2失衡,这可能与树突状细胞和Foxp3+Treg介导的免疫抑制有关。     

红毛藻多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫调节机理

本研究以环磷酰胺（cyclophosphamide,CTX）诱导的免疫力低下小鼠为模型,探究红毛藻多糖（Bangia fusco-purpurea polysaccharides,BFP）对免疫抑制小鼠免疫力的影响。结果表明,BFP干预能够显著提高免疫抑制小鼠自然杀伤细胞活性、巨噬细胞吞噬能力和清除碳颗粒能力;增强T淋巴细胞增殖作用,上调CD4＋ T细胞比例,降低CD8＋ T细胞比例并增加CD4＋/CD8＋,降低辅助性T细胞17和CD3－CD19＋ B细胞的比例;提高血清溶血素、免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）A和IgG、免疫相关细胞因子白细胞介素（interleukin,IL）-2、IL-6、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、干扰素-γ（interferon-γ,INF-γ）的质量浓度,对免疫抑制小鼠的非特异性免疫、细胞免疫及体液免疫均具有良好的调节作用。在明确BFP对免疫抑制小鼠免疫功能具有保护作用的基础上,分析其对免疫抑制小鼠肠道相关免疫细胞表面受体的影响,发现BFP能够显著或极显著下调Toll样受体（Toll-like receptor,TLR）2、TLR4、IL-6和TNF-α基因（P＜0.05）和蛋白（P＜0.01）的表达,推测BFP通过TLR2/TLR4下游相关信号通路调节轴发挥增强免疫力的功能。本研究可为深入认识海洋食品的营养价值,推进海洋食品在居民膳食中的应用提供科学依据。     

铁皮石斛膨化提取物的抗氧化和抗疲劳活性的评价

摘要：目的 探究膨化对铁皮石斛提取物抗氧化和抗疲劳活性的影响。方法 测定了铁皮石斛膨化前后提取物黄酮、多酚等活性成分含量以及提取物自由基清除能力,通过灌胃给予健康雄性小鼠低、高剂量膨化及未膨化铁皮石斛提取物,测定小鼠的最大游泳时间、血糖、血尿素氨（Blood urea ammonia ,BUN）、血乳酸（Lactic acid,LD）含量,肝脏及骨骼肌糖原水平、骨骼肌ATP含量以及谷胱甘肽（Glutathione,GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione?peroxidase ,GSH-px）、丙二醛（malondialdehyde ,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide?dismutase ,SOD）活性的变化。结果 膨化后,铁皮石斛活性成分提取率显著提高(P<0.05),自由基清除能力显著增强(P<0.05),总抗氧化值下降,表明膨化能够提高铁皮石斛膨化提取物的体外抗氧化能力。小鼠最大游泳时间延长(P<0.05),糖原在肝脏和肌肉的积累量增加(P<0.05),降低了疲劳相关标记物如BUN、LD含量,提高血糖、GSH含量以及GSH-px、SOD活性,降低MDA含量(P<0.05)。表明膨化能够提高铁皮石斛提取物的体内抗氧化及抗疲劳能力。结论 采用膨化方法能够有效增强铁皮石斛提取物抗氧化能力,缓解小鼠疲劳。     

仿刺参雌性生殖腺皂苷的免疫增强活性研究

目的：以仿刺参雌性生殖腺皂苷(gonad saponins from female of Apostichopus japonicus,AGS)为研究对象,探究其免疫增强活性。方法：通过对巨噬细胞吞噬能力和细胞因子的测定,研究AGS的体外免疫调节活性;通过对免疫低下小鼠胸腺、脾脏指数,碳廓清指数与吞噬指数,腹腔巨噬细胞增殖活性,脾细胞增殖活性,自然杀伤细胞(natural killer cell,NK cell)活力,T淋巴细胞亚群水平及小鼠血清细胞因子的测定,分析AGS在小鼠体内的免疫调节活性。结果：体外实验表明,AGS能提高小鼠体外巨噬细胞吞噬能力,促进TNF-α、IL-6、IFN-γ的分泌,且各组与正常组相比差异显著(P<0.05);体内实验表明,与模型组相比,中剂量组和高剂量组AGS均能显著提高小鼠胸腺、脾脏指数、碳廓清指数和吞噬指数(P<0.05),显著增强腹腔巨噬细胞和脾细胞增殖活性(P<0.05),显著增强NK细胞的活性(P<0.05),显著提高CD4⁺/CD8⁺水平(P<0.05),显著促进TNF...     

菠萝蜜低聚肽的免疫调节作用研究

目的:探究菠萝蜜低聚肽(jackfruit oligopeptides,JOPs)免疫调节功能。方法:采用SPF级雌性BALB/c小鼠为实验对象,进行8项免疫实验测定,系统评价不同干预剂量(0.20、0.40、0.80 g/kg·bw)JOPs对小鼠免疫器官相对重量、细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能、自然杀伤细胞(nature killer cell,NK细胞)活性以及T淋巴细胞亚群的影响。结果:与空白对照组相比,JOPs 0.40、0.80 g/kg·bw剂量组脾脏指数显著提高(P<0.05),且JOPs 0.40 g/kg·bw剂量组脾脏指数显著高于乳清蛋白组(P<0.05);与空白对照组及乳清蛋白组相比,JOPs 0.40、0.80 g/kg·bw剂量组ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力、足跖增厚度、溶血空斑数、碳廓清吞噬指数a、巨噬细胞吞噬率与吞噬指数及NK细胞活性显著提高(P<0.05),JOPs 0.80 g/kg·bw剂量组血清溶血素含量、CD3⁺T细胞数量、CD4⁺T细胞百分比及CD4⁺CD25⁺/CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺比值显著提高(P<0.05);各JOPs剂量组对小鼠体重增长、胸腺指数均无显著性影响(P>0.05)。结论:JOPs可提高机体适应性免疫及固有免疫功能,起到免疫增强作用。     

石斛花鼓风干燥机理和感官品质变化规律

基于远红外鼓风干燥和低频核磁共振探索霍山石斛花和铁皮石斛花干燥过程,构建适合干燥不同种类石斛花的基础参数模型,并使用质构分析仪研究石斛干花的感官品质变化规律。结果表明:远红外鼓风干燥仪干制后的霍山石斛花和铁皮石斛花,通过低频核磁共振发现,干品水分含量均是结合水,干品泡制后的复水性佳;利用干燥动力学模型所得数据与试验数据的相关系数平方高于0.99,相关性很好;经质构仪测定,随着干燥次数增加,硬度和脆性也增加,干制品品质提高,延长了贮存期。     

免疫调节性袋泡茶配方优化及功能性评价

目的：以绿茶、黄芪、党参、枸杞子、大枣为原料研制一款具有增强免疫力的功能性袋泡茶。方法：以感官评价为指标,应用正交试验结合模糊数学综合评定法优化袋泡茶配方,采用苯酚-硫酸法检测样品中总多糖含量。将SPF级昆明小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组(1.40 mg/kg BW的蛋白粉)和袋泡茶低(0.52 g/kg BW)、中(1.04 g/kg BW)、高剂量组(1.56 g/kg BW),除空白对照组外,其余各组小鼠腹腔注射环磷酰胺制备免疫低下模型,连续给药21 d后测定小鼠体重和脏器指数;流式细胞术检测小鼠脾脏淋巴细胞CD3⁺细胞、CD4⁺细胞、CD8⁺细胞及CD4⁺CD8⁺细胞比例值;ELISA法测定小鼠血清中干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)含量。结果：袋泡茶的最佳配方为黄芪、党参、枸杞子、大枣、绿茶量分别为茶袋内容物总质量的13.00%、26.30%、20.50%、20.50%、19.70%,多糖含量为33.84±0.52 mg/g。药效实验结果...     

铁皮石斛多糖水解工艺优化及甘露糖含量的测定

优化高温高压辅助硫酸水解铁皮石斛多糖工艺,测定了不同栽培方式的铁皮石斛不同部位多糖及甘露糖含量。利用苯酚-硫酸法测定3种栽培方式的铁皮石斛茎、叶、花多糖的含量;以单因素实验为依据,固定料液比、硫酸浓度,根据中心组合试验设计（Central Composite Design,CCD）原理建立两因素五水平响应面法优化硫酸水解铁皮石斛多糖的温度及时间,采用柱前衍生化-高效液相色谱法测定甘露糖含量。结果表明,以1 mol/L的硫酸溶液为催化剂,料液比1:1.5、水解温度112 ℃（压强0.15 MPa）,水解44 min,甘露糖含量达64.35%±0.76%;同一栽培方式的铁皮石斛茎、叶、花多糖、甘露糖含量表现出极显著差异（P<0.01,茎>叶>花）,茎的多糖及甘露糖含量分别在29.32%~33.78%、18.17%~21.05%;叶分别在15.91%~17.31%、10.28%~11.11%,花分别在8.37%~8.68%、5.30%~5.75%之间。高温高压辅助硫酸水解铁皮石斛多糖工艺高效可行,铁皮石斛茎、叶、花是制备甘露糖的优质天然资源。     

复方铁皮石斛叶超微粉改善高脂血症小鼠的脂质代谢作用

观察复方铁皮石斛叶超微粉不同配比对高脂高糖致高脂血症模型小鼠的影响。采用高脂高糖饲料喂养制备高脂血症模型小鼠,造模成功后灌胃给予复方铁皮石斛叶超微粉(铁皮石斛叶超微粉和山楂精提物不同配比依次为1:1、1:2、1:4、2:1、4:1)连续9周。检测血清中胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、谷草转氨酶(ALT)和谷丙转氨酶(AST)水平;末次给药后,检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)水平;检测肝脏中胆固醇(TC);HE染色观察小鼠肝脏组织形态学。结果表明,复方铁皮石斛叶超微粉(4:1)能有效缓解高脂血症,降低血清TC、LDL-c、MDA、Ox-LDL水平,下降幅度分别为40.84%、36.67%、5.69%、8.22%(p<0.01),血清SOD活性提高5.48%(p<0.01);肝脏TC水平下降14.10%(p<0.05);肝脏重量降低31.35%(p<0.01),能改善肝脏中脂肪沉积。上述结果明确了复方铁皮石斛叶超微粉(4:1)给药组效果较好,可以改善高脂高糖致小鼠血脂异常、肝脏病变。     

嗜酸乳酸杆菌对自主活动受限型应激小鼠肠道黏膜免疫状态的影响

目的：探讨嗜酸乳酸杆菌（Lactobacillus acidophilus,LA）对自主活动受限型应激小鼠肠道黏膜免疫状态的影响。方法：以健康雌性BALB/c小鼠为受试动物,分为常规饲养组（NC组）、常规饲养条件灌胃LA组（NC＋LA组）、应激组（S组）、应激条件灌胃LA组（S＋LA组）,小鼠的LA灌胃剂量为108 CFU/d;应激组小鼠每天被限制自主活动3 h;15 d后取材,采用流式细胞术、酶联免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）等方法,对肠系膜淋巴结（mesenteric lymph nodes,MLN）中CD4＋T细胞、CD8＋T细胞和CD11c＋树突细胞（CD11c＋ dendritic cell,CD11c＋ DC）比例,结肠组织白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）和白细胞介素-17（interleukin-17,IL-17）水平,以及小肠总分泌型免疫球蛋白A（secreted immunoglobulin A,sIgA）水平进行检测。结果：常规饲养条件下,LA能极显著提高小鼠MLN中CD4＋T细胞比例（P＜0.01）,显著提高MLN中CD11c＋ DC比例、小肠总sIgA水平和结肠组织IL-10水平（P＜0.05）,显著降低结肠组织IL-17水平（P＜0.05）,而对MLN中CD8＋T细胞比例无显著影响（P＞0.05）;应激条件能极显著降低小鼠MLN中CD4＋T细胞比例和CD11c＋ DC比例（P＜0.01）,显著降低CD8＋T细胞比例（P＜0.05）,极显著降低小鼠结肠组织IL-10水平和小肠总sIgA水平（P＜0.01）,极显著提高结肠组织IL-17水平（P＜0.01）;应激条件下,LA能显著提高小鼠MLN中CD4＋T细胞比例和CD11c＋ DC比例（P＜0.05）,显著提高小鼠结肠组织IL-10水平和小肠总sIgA水平（P＜0.05）,并显著降低结肠组织IL-17水平（P＜0.05）,而对小鼠MLN中CD8＋T细胞比例无显著影响（P＞0.05）。结论：给予自主活动受限型应激小鼠LA干预,可提高小鼠MLN中CD4＋T细胞和CD11c＋ DC比例,上调结肠IL-10和小肠总sIgA分泌水平,下调结肠IL-17分泌水平,调节应激小鼠的肠道黏膜免疫状态。