黄瓜枯萎病拮抗内生菌BPT-18的鉴定及抗菌物质性质

[目的]为有效防治黄瓜枯萎病,进行了菌种鉴定及其抗菌物质性质的试验。[方法]通过形态特征、生理生化特性以及16S rDNA序列的进化树分析,对拮抗内生细菌BPT-18进行鉴定;采用平板对峙法测定抑菌谱;采用平板扩散法测定经60%硫酸铵沉淀所得粗提液的性质。[结果]鉴定菌株BPT-18为短小芽孢杆菌,该菌对多种植物病原真菌均有拮抗作用。其抗菌物质粗提液耐高温,对酸碱稳定,对胰蛋白酶、胃蛋白酶和蛋白酶K均不敏感,对氯仿敏感,并能有效抑制枯萎病菌孢子萌发。[结论]该抗菌物质可能是一种抗菌多肽,为黄瓜枯萎病的防治提供新的生防资源。     

一株人参广谱拮抗菌株的筛选、鉴定及抗菌物质性质

[目的]筛选出对人参7种病原菌都具有很好抑菌效果的菌株,明确菌株种类和产生的抗菌物质性质,为进一步研究应用奠定基础。[方法]采用平板对峙培养法筛选获得1株广谱抑菌菌株LG2,通过形态学、生理生化和16S r RNA序列分析鉴定其种类;采用热、酸碱、蛋白酶和紫外照射处理,测定明确LG2产生的活性物质性质;通过田间试验测定发酵液对人参灰霉病的防治效果。[结果]通过筛选获得1株广谱抑菌菌株LG2,鉴定其为阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae);通过混菌法测定其产生抗菌物质具有很好的耐热、耐酸碱、耐蛋白酶和抗紫外线的性质;田间试验证明,LG2发酵5倍稀释液对人参灰霉病的防治效果达73.99%,与对照药剂50%嘧菌环胺WG 0.67 mg/L的防效相当(74.13%)。[结论]获得1株具有很好应用前景的菌株LG2。     

海洋放线菌BM-2菌株产生抑菌物质的发酵条件

海洋放线菌BM-2菌株在不同配方的培养基和不同的发酵条件对进行液体发酵,以植物病原真菌禾谷镰刀菌为指示菌,采用打孔法测定发酵液的抑菌活性,研究其产生抑菌物质的发酵条件.结果认为:海洋放线菌BM-2菌株产生抑菌物质的最佳培养基为可溶性淀粉14 g、乳糖16 g、黄豆粉16 g、磷酸氢二钾3 g、碳酸钙4 g、氯化钾0.4 g,海水1000 mL,初始pH值7.5;发酵条件为接种量7%(体积分数)、温度28 ℃、装瓶量80 mL(250 mL)、转速190 r/min、培养时间5 d.     

防治蔬菜灰霉病解淀粉芽胞杆菌的分离鉴定及抑菌特性

[目的]为研制防治蔬菜灰霉病的新型生物农药,进行高效生防菌的分离筛选及抑菌特性研究。[方法]通过形态学、生理生化和16S rDNA序列分析,对拮抗菌进行鉴定;采用平板扩散法测定发酵液的抑菌特性。[结果]分离筛选出1株对黄瓜灰霉病具有高效拮抗作用解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens);该菌株在生长对数期产生抗菌物质,并在30-38 h达到最大值;产生的抗菌物质有很好的热、酸碱稳定性,紫外线照射不敏感,常温储存6个月活性保持在80%以上;抗菌谱测定表明其对黄瓜灰霉病菌(Botrytis cinerea)、番茄叶霉病菌(Fulvia fulva)、黄瓜炭疽病菌(Colletotrichum orbiculare)、番茄早疫病菌(Alternaria solani)等多种病原菌具有显著抑菌效果。[结论]该菌株所产抗菌物质性能稳定,抗菌谱宽,抑菌力强,具有开发成新型广谱生物农药的潜力。     

蓝莓溃疡病生防链霉菌CX3的抑菌效果及其鉴定

[目的]为了明确从吉林省长白山保护区池西保护站马鞍山云杉人工林林下土壤分离,所获得1株拮抗菌株(编号记为CX3)的生防效果及分类地位。[方法]分别采用平板对峙法和杯碟法测定该菌株活菌及其发酵液的抑菌活性和抑菌谱;并通过形态学、生理生化特征、16S rRNA序列分析等方法研究了其分类地位。[结果]该菌株对13种供试植物病原菌均有抑制作用,抑菌谱广,其中对蓝莓溃疡病菌有极强的抑制作用,抑菌带达25.91 mm,发酵液的抑菌圈直径达31.73 mm;根据其菌株形态、生理生化特性、16S rRNA序列比对,最终鉴定菌株为链霉菌属Streptomyces sp.。[结论]该菌株对蓝莓溃疡病菌有显著的抑制效果,应用开发前景良好,此次是国内首次报道该菌株杀真菌活性。     

小麦纹枯病生防海洋放线菌的筛选与鉴定

[目的]筛选对小麦纹枯病菌有抑制作用的生防菌。[方法]采用平板对峙法、生长速率法和盆栽法筛选海洋放线菌对小麦纹枯病菌的抑制作用和防治效果;采用显微观察和分子鉴定对生防菌进行分类鉴定。[结果]2个菌株对小麦纹枯病菌具有较好的抑制作用。菌株YC_3发酵上清液对小麦纹枯病菌菌丝生长的抑制率为69.13%,盆栽防效为63.84%,菌株YC_1和YC_3分别为孢淡灰链霉菌(Streptomyces spororaveus)和肉桂地链霉菌(Streptomyces cinnamonensis)。[结论]菌株YC_3发酵液对小麦纹枯病具有显著的防效。     

海洋生境芽孢杆菌HTTAZ10-03菌株的抑菌作用

[目的]研究海洋生境芽孢杆菌HTTAZ10-03的抑菌应用潜力。[方法]通过gyr B序列同源性等分析鉴定菌株,96孔板和抑菌率法测试MIC值和抑菌谱,PCR扩增菌株2个重要生防基因,盆栽实验测定菌株对番茄叶霉病和油菜菌核病的防治效果。[结果]HTTAZ10-03菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),菌株具有与抑菌活性有关的fen D,itu C基因簇,茄链格孢病菌抑菌MIC值为2 m L/L,对番茄灰霉等8种植物病原菌抑制率74.1%~85.4%,番茄叶霉病和油菜菌核病菌的防效为62.1%~63.6%。[结论]芽孢杆菌HTTAZ10-03具有较好的杀菌剂开发潜力。     

蜡梅籽生物碱类成分及其抗氧化和抑菌活性

[目的]研究蜡梅(Chimonanthus praecox)籽中生物碱成分及其抗氧化和抑菌活性。[方法]应用硅胶柱层析法进行分离纯化并鉴定化合物结构。使用ABTS和FRAP法检测抗氧化能力,并考察其对甘蓝链格孢菌、葡萄灰霉菌、番茄叶霉菌的抑菌效果。[结果]分离得到1种化合物,鉴定为洋蜡梅碱(calycanthine)。其对ABTS阳离子自由基清除作用较强,IC_(50)值为(3.24±0.08)mg/L;抑菌结果显示其对3种菌株均具有一定的抑菌活性。[结论]洋蜡梅碱具有较强的抗氧化活性和抑菌活性。     

海洋微生物源农用抗生活性物质的筛选

对134株海洋微生物(其中49株海洋放线菌、54株海洋细菌、31株海洋真菌)进行农用抗生活性物质筛选,分别测定其发酵上清液和菌丝体浸提液的活体抗植物病源真菌、杀虫、除草活性,发现共有77株菌株具有农用抗生活性,其中7株海洋放线菌的代谢产物的活性较高:3株对植物病原真菌具有较好抑制活性的海洋放线菌代号为Y12–26、P10–16、JWH–09;两株具有较高杀蚜虫活性的海洋放线菌是P10–23、P12–21;两株除草活性较好的海洋放线菌是YY01–17和HH1901–45。     

拮抗性芽孢杆菌Y1的鉴定及其粗提物抗白色念珠菌特性的研究

目的：探讨并确定车前草组织内生拮抗性芽孢杆菌对白色念珠菌抗菌活性。方法：通过该菌株的形态特征、生理生化特征及16SrDNA序列分析对其进行分类鉴定;利用滤纸片法测试了该菌株发酵上清液对白色念珠菌的抑菌活性,在此基础上利用牛津杯法考查了发酵上清液抗菌物质粗提物特性及培养时间对抗菌活性的影响。结果：菌株Y1液体发酵液上清液对白色念珠菌具有明显抑制作用,平均抑菌圈直径达到（20.4±0.5）mm;根据形态特征、生理生化特征及16SrDNA序列比对,该菌株被鉴定为贝莱斯芽孢杆菌;抗菌物质粗提物经不同温度、pH及蛋白酶处理后其抑菌活性发生一些变化,当温度为90℃抑菌活性开始下降,到121℃完全丧失活性;pH>10.0时,粗提物抑菌活性降低;对蛋白水解酶的水解作用稳定性较好,培养到44 h抗菌活性最好。结论：拮抗性贝莱斯芽孢杆菌对白色念珠菌具有明显抑制活性,且其发酵液中存在相对稳定的抗菌活性成分,具有一定的开发潜力。     

一株拮抗辣椒疫霉的放线菌及其防治效果

[目的]为获得对辣椒疫霉Phytophthora capsici)具有生防效果的放线菌.[方法]采用平皿对峙法从辣椒根际56份土样中,分离筛选出1株对辣椒疫霉具有明显拮抗作用的放线菌LY26,测定了其对14种植物病原菌的抑菌效果.[结果]菌株LY26对供试病原菌中的卵菌均具有较好的抑制作用,对辣椒疫霉的抑菌效果最佳,抑...     

侧柏内生真菌G21抑菌活性及其鉴定

[目的]研究侧柏内生真菌菌株G21在不同培养基中发酵产物抑菌活性,并进行鉴定。[方法]利用生长速率法测定抑菌活性,结合形态分类及ITS-18S rDNA序列分析鉴定菌株。[结果]G21在所有不同培养基中的发酵产物对苹果腐烂病菌、白菜黑斑病菌、小麦纹枯病菌及番茄灰霉病菌均有不同程度的抑制作用;G21鉴定为异茎点霉属(Paraphoma),与菊异茎点霉菌(Paraphoma chrysanthemicola)处于同一分支。[结论]G21马丁培养基和淀粉铵盐培养基发酵产物活性值得进一步研究。     

一株广谱拮抗细菌的鉴定、发酵条件及其抗菌物质性质

[目的]菌株S46是一株对多种植物病原菌有较好拮抗作用的细菌,为有效防治植物病害,进行菌种的鉴定、发酵培养工艺及抗菌物质性质研究。[方法]通过培养特性、形态特征、生理生化特性和16S rDNA同源性序列分析明确菌株的分类地位;通过发酵单因素实验和各因素正交试验确定菌株的发酵工艺;通过热、酸碱、紫外和日光等处理测定明确活性物质的稳定性。[结果]鉴定菌株S46为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(Burkholderia gladioli),其对多种植物病原菌有拮抗作用,最适发酵培养基配方为大豆粉10g/L,玉米粉15g/L,蔗糖15g/L,磷酸氢二钾1 g/L,酵母粉5g/L;最适培养条件为接种量6%,发酵时间72 h,装瓶量30 mL/250mL,初始pH值7.0,转速180 r/min,温度30℃。该菌株发酵液有较好的热稳定性、紫外光和日光稳定性,但对强酸、强碱和有机试剂都较敏感。[结论]为植物病害的防治提供新的生物防治资源。     

2株杀萝卜蚜放线菌的筛选与鉴定

[目的]2株从土壤中分离的对萝卜蚜虫有活性放线菌及其分类鉴定。[方法]用平板稀释法对土样进行分离,以萝卜蚜为供试靶标昆虫,采用浸叶法进行杀虫活性测定,根据形态特征、培养特征及生理生化性状对活性菌株进行分类鉴定。[结果]菌株DY3和LY1发酵上清液48 h对萝卜蚜的校正死亡率分别为76.99%和73.45%,菌株DY3稀释16倍菌株LY1稀释4倍对萝卜蚜的校正死亡率分别为68.11%和52.59%。[结论]菌株DY3和LY1发酵液对萝卜蚜具有杀虫活性,均鉴定为链霉菌属(Streptomyces)。     

放线菌BOS-009的分离、拮抗活性及鉴定

对从长白山不同海拔环境中分离筛选出可以产生抗菌活性物质的BOS-009放线菌菌株进行了研究,测定了该菌的抗菌谱,发现该菌株对多种植物病原性真菌及细菌有拮抗作用.通过形态特征、培养特征观察,生理生化特性及抑菌谱等系列比较.发现该菌株与链霉菌属的除虫链霉菌(Streptomyces avermitilis)的特征基本相符;通过16s rDAN序列比对,发现该菌株16s rDAN与除虫链霉菌的16s rDAN同源性达99%.根据多项分类原则和系统进化树的构建分析,将该菌株暂归入除虫链霉菌类.     

海洋放线菌AM8发酵条件的优化及抑菌活性物质的初步研究

以海洋放线菌AM8发酵液抑菌物质的活性为评价指标,采用单因素实验对海洋放线菌AM8的基础发酵培养基和发酵条件进行优化,并对抑菌活性物质进行了初步研究。确定最佳培养基为:胰蛋白胨17g·L~(-1),大豆胨3g·L~(-1),蔗糖2.5g·L~(-1),NaCl 5g·L~(-1),K2HPO42.5g·L~(-1),海盐20g·L~(-1);最佳发酵条件为:pH值7,温度28℃,接种量5%,转速200r·min~(-1),发酵时间5d。该抑菌活性物质为中等极性物质,具有良好的耐酸性和一定的热稳定性,在强碱、高温环境下易失活。     

海洋细菌B-9987的鉴定及其对植物病原菌的抑菌试验

对分离自渤海潮间带盐生植物的细菌B-9987菌株进行了分类鉴定和抑菌活性研究.经形态、生理生化特性和分子鉴定表明B-9987为海洋芽孢杆菌(Bacillus marinus).平皿测试结果表明:该菌株有较广的抑菌谱,且对多种植物病原真菌、细菌的抑菌效果明显优于微生物农药--0.1亿cfu/g多粘类芽胞杆菌细粒剂的生防菌HY96-2.     

复合诱变选育新型高产细菌素植物乳杆菌

目的从东北传统发酵肉制品中分离和再诱变选育广谱高产细菌素的植物乳酸菌,并对其进行鉴定。方法四轮复合诱变[微波诱变、亚硝基胍(nitroso-guanidin,NTG)诱变、常压室温等离子体(atmospheric room temperatureplasma,ARTP)诱变、紫外诱变突]具有降胆固醇能力的的植物乳杆菌M1株,获得还可产生广谱细菌素的植物乳杆菌。对其进行稳定性、微生物形态特征、生理生化特征及PCR鉴定。结果原始菌株经四轮复合诱变后获得1株高产细菌素菌株,该菌株兼具遗传稳定性、优良发酵特性和抑菌功效。鉴定该菌株为植物乳杆菌,命名为M1-UVs300,其分泌的细菌素命名为M1-UVs301;菌株保藏号为CGMCC No. 7972。结论通过四轮复合诱变获得的植物乳杆菌M1-UVs300抑菌谱较宽,且兼具降胆固醇和防腐的优良加工特性,工业化推广前景广泛。     

放线菌TL05-22菌株发酵液的抑菌谱及稳定性

[目的]研究放线菌TL05-22发酵液的抑菌谱及稳定性。以16种植物病原真菌和6种细菌为供试菌,采用菌丝生长速率法、杯碟法测定拮抗放线菌TL05-22发酵液的抑菌谱;以苜蓿尖镰孢根腐病菌为指示菌,杯碟法测定发酵液的传代稳定性、热稳定性、酸碱稳定性及紫外线稳定性。[结果]放线菌TL05-22发酵液对16种植物病原真菌和6种细菌均具有不同程度的抑菌活性,其中供试真菌以对苜蓿尖镰孢根腐病菌的抑菌效果最好,抑菌圈直径达33.68 mm;供试细菌中以对大白菜软腐病菌的抑菌效果最强,抑菌圈直径达29.12 mm。将发酵液于60~100℃处理30、60 min,抑菌活性没有明显变化;发酵液在pH值6~14时抑菌活性未发生明显变化,但在pH<6条件下抑菌活性明显下降;连续培养10代,发酵液抑菌活性无明显变化。[结论]放线菌TL05-22的代谢产物具有广谱抑菌活性和较强的稳定性,具有一定开发价值。     

轮丝链霉菌(Streptomyces Ys.03)代谢产物的抗植物病毒活性及其分类鉴定

[目的]1株从土壤中分离得到的放线菌的抗植物病毒活性及其分类鉴定。[方法]室内对峙培养、枯斑和系统寄主的保护及治疗试验,菌株形态观察并结合培养特征、生理生化性状及16S rDNA序列测定。[结果]菌株Ys.03对蜡状芽孢杆菌有稳定的拮抗作用;发酵液与烟草花叶病毒(TMV)混合后接种枯斑和系统寄主,对TMV抑制率分别为95.01%和88.67%;接种前、后叶面分别喷施发酵液抑制率均较高;菌株孢子链轮生,16S rDNA测序与师岗轮丝链霉菌(Streptomyces mormookaensis)同源性达100%。[结论]菌株Ys.03代谢产物对TMV有显著的抑制作用,鉴定为链霉菌属轮生类群师岗轮丝链霉菌。