两种方法优选五味子糖蛋白纯化工艺的比较

确定五味子糖蛋白Sevage法除游离蛋白的最佳工艺条件。采用碱提酸沉法提取得到五味子糖蛋白,以蛋白清除率和多糖损失率作为考察指标,分别考察氯仿与正丁醇的比例、样液与Sevage试剂的比例、振摇时间、脱蛋白次数对除蛋白效果的影响,在单因素试验的基础上分别采用正交设计法与响应面法对比得到最佳工艺条件。五味子糖蛋白Sevage法除游离蛋白的最佳工艺条件为:氯仿与正丁醇的比例3︰1,样液与Sevage试剂的比例3︰1,振摇时间14 min,脱蛋白次数3次。正交设计和响应面法均可用于除蛋白工艺的优化,响应面法所得结果更加精确,正交设计试验更加简便。     

甘薯糖蛋白脱游离蛋白的研究

研究了用Sevage法脱除甘薯糖蛋白中游离蛋白的工艺条件，通过单因素试验，提出了影响甘薯糖蛋白脱游离蛋白的主要因素，并通过正交试验进一步优化工艺条件，确定影响甘薯糖蛋白脱游离蛋白的主次因素分别为样液与试剂的比例、脱蛋白次数、氯仿与正丁醇的比例、脱蛋白时间，试验结果表明，样液与试剂的体积比为2：1，氯仿与正丁醇的体积比为2：1，脱蛋白次数为3次，脱蛋白时间为20min时，脱游离蛋白的效果较好。     

蕨麻Sevage法脱蛋白工艺研究

实验选用Sevage法进行蕨麻粗多糖脱蛋白研究,采用正交实验研究了料液比、静置时间、摇振时间、氯仿∶正丁醇(v/v)对蕨麻粗多糖脱蛋白工艺的影响。最佳脱蛋白条件是料液比1∶1、静置时间25min、摇振时间30min、氯仿∶正丁醇(v/v)5∶1。     

硫酸软骨素脱蛋白工艺优化

为了提高硫酸软骨素的品质,采用Sevag试剂对硫酸软骨素提取液进行脱蛋白处理,通过单因素试验和正交试验对脱蛋白工艺进行优化,得到最佳条件为:氯仿与异戊醇体积比2:1,Sevag试剂用量为硫酸软骨素提取液体积的1/2,处理时间25min,处理次数3。各因素对脱蛋白效果影响大小依次为氯仿异戊醇比例处理时间处理次数Sevag试剂用量。在该最佳条件下,硫酸软骨素保留率为87.98%,脱蛋白率52.15%。经190~350nm紫外扫描,未见280nm处蛋白质特征吸收峰;经红外光谱分析,硫酸软骨的构型未发生变化,说明该方法稳定可靠,适合于工业化硫酸软骨素的脱蛋白。     

半枝莲多糖的Sevage法除蛋白工艺研究

以样品浓度、试剂添加量与供试液体积比、Sevage试剂中氯仿与正丁醇体积比、温度和料液比等为因素,采用正交试验设计,优化半枝莲多糖除蛋白的纯化工艺,结果表明:使纯化后半枝莲多糖中总糖含量最高的最佳工艺条件是A1B3C1,即:样品浓度5mg/mL、试剂添加量与供试液体积比1/5、Sevage试剂中氯仿与正丁醇体积比3/1。     

五味子糖蛋白的纯化及其抗氧化活性

本文研究了五味子糖蛋白Sevage法除游离蛋白的最佳工艺条件,采用碱提酸沉法提取得到五味子糖蛋白,以蛋白质清除率和多糖损失率作为考察指标,分别考察氯仿与正丁醇的比例、样液与Sevage试剂的比例、振摇时间、脱蛋白次数对除蛋白效果的影响,在单因素实验的基础上采用正交及响应面实验优化工艺条件,得到响应面优化后结果最佳,即氯仿与正丁醇的比例为3:1,样液与Sevage试剂的比例为3:1,振摇时间为14 min,脱蛋白次数为3次,此条件下的蛋白质平均清除率为30.09%,多糖平均损失率为4.71%,综合评分平均值为88.11。体外抗氧化活性结果表明,五味子糖蛋白对于DPPH自由基和超氧阴离子清除能力较强(IC₅₀为1.08 mg/mL和0.80 mg/mL),并具有一定的还原能力。研究表明响应面法优选工艺简便高效;五味子糖蛋白具有体外抗氧化活性,值得进一步研究。     

细脚虫草多糖液体发酵及分离纯化工艺研究

用Box-Behnken中心组合试验设计和单因素试验对虫草多糖发酵工艺、水提醇沉工艺及脱蛋白工艺进行优化。结果表明:细脚虫草最佳发酵工艺条件为葡萄糖33.3 g/L、蛋白胨29.2 g/L、接种量3.9%。胞外多糖最佳提取工艺条件为浓缩,加3倍乙醇,pH为6.0,沉淀24 h;胞内多糖最佳提取工艺条件为浸提比(m_菌丝∶V_水)1∶40 (g/mL),提取时间90 min,浸提次数2次,浸提温度80 ℃。多糖纯化中Sevage法脱蛋白的最佳工艺为氯仿与正丁醇配比(V_氯仿∶V_正丁醇)4∶1、Sevage试剂与发酵液配比(Vsevge_试剂∶V_发酵液)1∶2、振摇时间15 min、脱蛋白次数3次。优化后胞外多糖产量提高了37.89%,胞内多糖产量提高了24.59%,纯化后蛋白脱除率在75%以上。     

发酵液中水溶性热凝胶提取工艺的优化

为提取纯化发酵液中水溶性热凝胶,首先采用单因素结合响应面分析方法优化Sevag法去除发酵液中的蛋白,在单因素优化基础上,根据中心组合实验设计(Central Composite Design)实验原理,设计3因素5水平的响应面分析实验,最终得到最优去蛋白工艺:氯仿与正丁醇体积比为3.5的Sevag试剂,按发酵上清液与Sevag试剂体积比3.75的比例加入上述试剂,振荡混匀后静置33 min,重复上述操作5次;此条件下蛋白去除率为85.73%,水溶性热凝胶回收率为90.29%。对去蛋白后的处理液进行有机溶剂法的最佳提取工艺优化,优化得到乙醇为最佳提取试剂,加入乙醇至终浓度为90%,混匀后静置4 h,最后得到水溶性热凝胶的提取率为40.12%,纯度为89.10%。     

啤酒酵母多糖脱蛋白方法的应用研究

以提取的粗酵母多糖为原料,采用Sevag法及Sevag法与酶法结合对其进行脱蛋白.结果表明,Sevag法脱蛋白3次,Sevag试剂中的氯仿:正丁醇=5:1,糖液:Sevag=5:1脱蛋白效果最好,此时蛋白质残留量为6.392mg/mL,多糖损失率为24.62%.Sevag法与酶法结合脱蛋白,蛋白质水解的最佳工艺条件为:水解温度60℃,pH7.0,样液:酶液=3:1,时间为2h,此时蛋白质残留量为6.86mg/mL,多糖损失率仅19.74%.     

米糠多糖脱蛋白工艺的研究

米糠多糖存在于稻谷颖果皮层中,在提取过程中,常混有一定量的蛋白质,影响多糖的纯度。本文比较了Sevag法、三氯乙酸法、酶法、酶-Sevag法及酶-TCA法对米糠多糖脱蛋白的效果。在单因素试验基础上,通过蛋白质脱除率和多糖损失率的比较得出酶-Sevag法效果优于其它方法。选取酶的添加量、pH值、Sevag试剂添加量、脱蛋白次数为四因素,各取三个水平,以蛋白质脱除率和多糖损失率为指标,做L9(34)正交实验确定酶-Sevag法的最佳脱蛋白工艺。结果显示:最佳工艺为酶的添加量为2.0%,pH为6.0,Sevag试剂用量为1/6糖液体积,脱蛋白次数为1次,在此条件下蛋白质脱除率可达76.89%,多糖损失率仅为13.45%。因此,酶-Sevag法是一种有效的米糠多糖脱蛋白方法,本文可为米糠多糖的开发提供参考。     

黑木耳多糖酶法提取条件的优化及脱蛋白工艺的研究

对黑木耳多糖酶法提取的因素进行了条件优化,并以Sevag法为基础,进行了脱除蛋白质的正交实验。通过实验得出复合酶的添加量为2%,反应60min;蛋白酶的添加量为1.25%,反应80min时的提取率最高,为16.7%。脱除蛋白质的最佳条件是氯仿与正丁醇的体积比为5∶1,样液与Sevag试剂的体积比为4∶1。蛋白质的脱除率达82.07%,多糖含量为42.39%。     

金樱子粗多糖的脱蛋白研究

采用Sevag法、酶法、酶法与Sevag法相结合对金樱子多糖进行脱蛋白研究。结果表明,酶法与Sevag法结合脱蛋白效果最佳,具体操作条件为酶用量为底物浓度的1%、pH为6.0时、60℃水浴3h,再加入占总体积1/5的氯仿-正丁醇(5∶1)溶液进行脱蛋白,重复操作5次,此时蛋白脱除率为80.5%,多糖含量为84.3%。     

黄粉虫粗多糖的初步纯化及体外抗氧化活性研究

以黄粉虫粗多糖为原料,通过单因素脱蛋白试验,利用响应面法优化脱蛋白工艺,经DEAE-纤维素阴离子层析柱纯化,对多糖进行体外抗氧化活性分析。结果表明：各因素对黄粉虫粗多糖蛋白去除率的影响程度为：脱蛋白次数>振摇时间>静置时间。当Sevage试剂加入量与粗多糖溶液体积比为1:1时,优化条件为：振摇时间17 min、静置时间19 min、脱蛋白次数2次,蛋白去除率达61.25%。与未除蛋白的粗多糖相比,除蛋白后黄粉虫多糖对DPPH自由基、羟自由基清除能力的IC₅₀减小,分别为3.052、7.276 mg/mL,说明多糖抗氧化活性增强。黄粉虫多糖经不同浓度NaCl溶液梯度洗脱纯化获得4个主要组分,其中0.5 mol/L NaCl洗脱的多糖体外抗氧化性综合能力最强。     

啤酒花多糖的提取及脱蛋白工艺研究

以超临界液态二氧化碳萃取后的啤酒花残渣为原料,采用正交实验和单因素实验,确定了啤酒花多糖的热水微波辅助萃取的最佳工艺条件:提取时间2h,料液比1∶10,提取温度90℃,微波功率750W作用时间12min;此条件下多糖提取率为2.76%。对得到的粗多糖,以蛋白脱除率和多糖保留率为指标,在比较Sevag法,盐酸-正丁醇法,三氯乙酸-正丁醇法,木瓜/菠萝蛋白酶法对粗多糖中蛋白质的脱除效果的基础上,考察了酶法和化学法联用脱蛋白工艺,并最终确定菠萝蛋白酶-三氯乙酸-正丁醇的脱蛋白效果最好,最佳条件为温度45℃,酶解时间0.5h,酶添加量22.5U/mL,pH5.5,三氯乙酸-正丁醇法除蛋白1次,蛋白脱除率和多糖保留率分别为86.77%和77.37%;而木瓜蛋白酶-盐酸-正丁醇的脱蛋白工艺在有效脱除蛋白质的同时,多糖损失最少,最佳条件为温度55℃,酶解时间0.5h,酶添加量36U/mL,pH5.5,盐酸-正丁醇法除蛋白1次,蛋白脱除率和多糖保留率分别为77.37%和84.43%。     

五味子多糖脱蛋白工艺的研究

为建立五味子多糖脱蛋白工艺,对三氯乙酸-正丁醇法、Sevag法、酶法+三氯乙酸-正丁醇、酶法+Sevag处理脱除蛋白进行了研究,并测定处理后多糖液中蛋白质含量。结果表明:酶法+三氯乙酸-正丁醇脱蛋白效果最好,即蛋白酶用量为1%、处理温度为50℃、处理时间为140min、pH为5,酶处理后再用等体积的三氯乙酸-正丁醇溶液重复处理4次,蛋白质含量低于0.005mg/mL。     

富贵菜功能成份多糖提取纯化工艺优化

目的：研究富贵菜多糖提取纯化工艺,为有效开发利用功能性食品--富贵菜提供方法学基础。方法：通过正交试验,优化提取方案;采用Sevag 法脱蛋白,双氧水和活性碳脱色,蒽酮- 硫酸法测定多糖含量。结果：在温度100℃,固液比1:7(富贵菜:水,g/mL),提取时间3.5h,提取次数2 次的条件下,所得多糖含量最高。以氯仿:正丁醇的体积比4:1 为脱蛋白剂,加入0.15g/mL 的活性炭溶液,80℃脱色45min,脱色2 次或加入多糖供试液体积70% 的双氧水试液于60℃脱色120min 效果最佳。结论：该工艺条件简单可行,多糖提取率高,稳定性好,可作为富贵菜多糖的提取纯化工艺。     

香菇多糖脱蛋白工艺的研究

从香菇菌丝体中提取的香菇多糖经脱蛋白提纯后,其生物活性更高。对酶法、Sevag法、三氯乙酸-正丁醇法脱蛋白效果进行了比较研究,确定了最佳的脱蛋白工艺为酶法和三氯乙酸．正丁醇结合法,脱色4次,蛋白含量为1．97％,多糖损失率为4．58％。     

鹿茸多糖提取工艺的优化

通过响应面分析法与旋转正交回归法对鹿茸多糖的提取工艺进行优化,以期得到最佳工艺.应用响应面分析法对酶解温度、时间、pH值进行考察,得到最佳工艺参数为:温度54℃,时间11h, pH8;确定醇析最适浓度为70%;对三氯乙酸除蛋白法、单宁除蛋白法及酶-Sevag除蛋白法进行比较,并采用旋转正交回归法对酶-Sevag法进行分析,证明当多糖溶液:Sevag试剂=1:1,氯仿:正丁醇=4.2:1时,除蛋白效果最佳.应用最佳工艺后,多糖提取率比传统方法提高了48.35%.     

香菇多糖脱蛋白工艺的研究

从香菇菌丝体中提取的香菇多糖经脱蛋白提纯后,其生物活性更高。对酶法、Sevag法、三氯乙酸-正丁醇法脱蛋白效果进行了比较研究,确定了最佳的脱蛋白工艺为酶法和三氯乙酸．正丁醇结合法,脱色4次,蛋白含量为1．97％,多糖损失率为4．58％。     

米糠多糖的脱蛋白研究

采用Sevag法、三氯乙酸法和酶法对米糠多糖进行脱蛋白研究.结果表明,酶法脱除蛋白的效果最好,Sevag法的多糖损失较小,结合酶法和Serag法脱蛋白可大大提高蛋白脱除率,具体操作条件为:0.0055mg/mL木瓜蛋白酶、pH6.0、60℃水浴,再加入总体积为1/2的氯仿-正丁醇(2:1)溶液进行脱蛋白,重复操作4次,此时蛋白脱除率为71.23%.多糖损失率为17.38%.