抗表皮生长因子受体单克隆抗体——西妥昔单抗在结直肠癌治疗中的临床进展

最近,一些临床试验的结果肯定了西妥昔单抗(cetuximab)作为一种表皮生长因子受体(EGFR)单克隆抗体在结直肠肿瘤的治疗作用。本文从转移性结直肠癌治疗的角度综述西妥昔单抗这一EGFR抗体的临床观察结果,回顾分析了多篇近年发表的关于西妥昔单抗在结直肠癌和其它恶性肿瘤临床应用的文献。西妥昔单抗在转移性结直肠肿瘤的无进展生存期的延长上获得了肯定的疗效(3.9月vs2.56月,P<0.01)。然而,在作为第二线治疗时,西妥昔单抗与依立替康的联合治疗对比依立替康单药治疗并没有使平均生存期得到延长。在副作用方面,痤疮样皮疹的严重程度可以预示肿瘤对西妥昔单抗的应答强弱,外用糖皮质激素和润肤剂可以治疗这一副作用。低镁血症是该药引起的一个比较特殊的副作用,使用静脉补镁是治疗低镁血症的有效方法。     

PDCD4增强鼻咽癌细胞系CNE1对顺铂化疗敏感性机制研究

目的: 探讨抑癌基因程序性细胞死亡因子4（the programmed cell death 4,PDCD4）在促进化疗药物顺铂（CDDP）诱导肿瘤细胞凋亡中的作用及可能的机制。方法: CCK8法检测人鼻咽癌系CNE1细胞转染PDCD4前后对CDDP导致的细胞毒性作用影响;Annexin V/FITC和PI凋亡检测转染PDCD4前后对CDDP诱导凋亡的作用;Western blot实验初步探讨其可能的分子机制。结果: PDCD4增强CDDP对人鼻咽癌系CNE1细胞的杀伤作用;PDCD4增加CDDP诱导人鼻咽癌系CNE1细胞凋亡率;机制研究发现PDCD4显著降低人鼻咽癌系CNE1细胞中Twist及MDR1蛋白的表达量,从而促进化疗敏感性。结论: PDCD4通过抑制Twist蛋白增强化疗药物敏感性,提示其参与了鼻咽癌化疗治疗进程。     

扶正康复合剂联合顺铂抑制胃癌SGC7901细胞荷瘤裸鼠肿瘤增殖作用的实验研究

目的:探讨扶正康复合剂联合顺铂抑制小鼠移植性胃癌的增殖作用。方法:将28只裸鼠随机分为4组：模型对照组，扶正组，顺铂组，顺铂+扶正组，每组7只。皮下注射胃癌SGC7901细胞株，建立胃癌荷瘤裸鼠模型，顺铂及扶正康复合剂连续给药7 d，称取体重及瘤重，计算抑瘤率，并利用PCR法和免疫组化法分别检测瘤体内细胞凋亡靶点（Bcl-2、Bax、Survivin）和血管新生促进因子（VEGF）的mRNA和蛋白的表达情况。结果:在抑瘤率方面，与模型对照组相比，各组裸鼠瘤重均有不同程度的减轻（P<0.05），且顺铂+扶正组抑瘤率最高（66.67%）。在细胞凋亡方面，扶正康复合剂联合顺铂能明显上调Bax的表达，下调Bcl-2、Survivin和VEGF的表达（P<0.05）。结论:扶正康复合剂联合顺铂具有抑制肿瘤增殖的作用。     

顺铂软膏对小鼠皮肤颗粒细胞生成的影响

目的 观察顺铂软膏对小鼠皮肤颗粒细胞生成和体重的影响。方法 昆明种小鼠25 只,随机均分为5组:空白对照组、迪维霜组、0.1 %顺铂软膏组、0.5 %顺铂软膏组、1%顺铂软膏组。外用给药18d后,观察动物体重变化和皮肤病理学变化。结果 与空白对照组比较,0.1%~ 1 %顺铂软膏均明显增加皮肤颗粒细胞生成(P<0.01),对体重增加的影响均明显小于迪维霜(P>0.01),也未见明显的局部刺激。结论 顺铂软膏可促进皮肤颗粒细胞生成。     

益气补肾方药对顺铂致大鼠肾毒性及顺铂抗肿瘤活性的影响

目的: 探讨益气补肾方药对顺铂（DDP）致大鼠肾损伤及DDP抗肿瘤活性的影响。方法: 实验大鼠一次性尾静脉注射DDP ( 8 mg/kg )建立DDP损伤模型,分别用低剂量（10.8 g/kg）、中剂量（21.6 g/kg）和高剂量（32.4 g/kg）中药进行保护,通过检测大鼠肾脏系数、肾组织Pt含量、血清尿素氮（BUN）和肌酐（Cr）含量探讨不同浓度益气补肾方药对DDP致大鼠肾损伤的保护作用。昆明小鼠接种S180瘤株建立小鼠肿瘤模型,一次性尾静脉注射DDP (8 mg/kg),通过测定肿瘤抑制率探讨不同浓度益气补肾方药对DDP抗肿瘤活性的影响。结果: 益气补肾方药可以有效降低DDP引起的大鼠肾脏系数、肾组织Pt含量、血清BUN和Cr含量的增高。DDP可显著抑制荷瘤S180小鼠肿瘤的生长,益气补肾方药对DDP的肿瘤抑制率没有显著性的影响。结论: 适当剂量的益气补肾方药可以有效保护DDP引起的肾损伤,且不影响DDP的抗肿瘤活性。     

塞来昔布联合放射治疗对异位裸鼠人鼻咽癌模型中肿瘤细胞增殖与凋亡的影响

目的: 探讨塞来昔布联合放射治疗对异位裸鼠人鼻咽癌模型中肿瘤细胞增殖与凋亡的影响。方法: 建立裸鼠人鼻咽癌皮下移植模型,成瘤后40只裸鼠随机分成4组,即对照组、塞来昔布组、放射治疗组、联合组（塞来昔布与放射治疗）,观察肿瘤大小,计算抑瘤率;采用RT PCR方法考察肿瘤中COX-2的mRNA表达,并用免疫组化法以Ki-67为指标测肿瘤细胞增殖水平,末端脱氧核苷转移酶标记法（TUNEL）测凋亡细胞。结果: 对照组、塞来昔布组、放射治疗组、联合组瘤体体积分别为（1880±358）、（1574±265）、（1258±262）、和（881±197）mm³;塞来昔布组、放射治疗组、联合组抑瘤率分别为16%、33%和53%。四组中Ki-67阳性率分别为44%、29%、22%和11%;肿瘤细胞凋亡指数（AI）分别为9%、22%、30%和38%;塞来昔布组、联合组肿瘤组织中COX-2 mRNA表达显著低于对照组和放射治疗组。 结论: 塞来昔布可显著抑制裸鼠人鼻咽癌模型中肿瘤细胞COX-2 mRNA表达,抑制肿瘤细胞Ki-67表达,诱导肿瘤细胞凋亡,与放射治疗联合应用可提高抗肿瘤效果。     

顺铂与环磷酰胺联合应用剂量优化的实验研究

目的: 观察低剂量顺铂(DDP)和环磷酰胺(DTX)联合用药治疗恶性肿瘤疗效及其对免疫器官的毒性。方法: 采用小鼠肉瘤S180进行体内实验,观察两药单独及联合使用对小鼠S180 及胸腺和脾脏的影响。结果: DDP组和不同剂量的DTX 配伍应用与DDP组相比抑瘤率分别提高13.6%~29.6%,与相应剂量DTX 组相比抑瘤率分别提高33.5 % ~34.3 %,其中DDP+DTX 0.75 +7.5mg·kg^-1组与DDP及相应剂量DTX 组相比较有显著意义(P<0.01~0.001);DDP组及两药联合应用各剂量组使小鼠胸腺指数和脾指数明显低于对照组。结论: 低剂量DDP与DTX 联合使用加强了对肿瘤生长的抑制作用,与DDP组相比,联合应用引起的免疫器官的萎缩与DDP组无差别。     

靶向药物曲妥珠单抗联合化疗对人类表皮生长因子受体2阳性局部晚期乳腺癌患者临床疗效研究

目的: 观察曲妥珠单抗联合化疗对人类表皮生长因子受体2(HER-2)阳性的局部晚期乳腺癌(LABC)临床治疗结果。方法: 将228例HER-2阳性手术无法切除的晚期乳腺癌病例随机分到曲妥珠单抗辅助疗法+化疗组或单纯化疗组。其中115例接受曲妥珠单抗+化疗,113例单纯接受化疗,经过10个疗程治疗后,观察两组患者中临床和病理的完全缓解人数及符合手术要求的人数。结果: 数据显示与单纯化疗相比,曲妥珠单抗+化疗组病例对治疗的临床完全缓解病例(cCR)(化疗+曲妥珠单抗组89%,单纯化疗组77%)、病理学完全缓解(pCR)病例(两组分别为43%和23%)以及乳房和腋下淋巴结完全缓解(tpCR)病例(分别为39%和20%)比例更高,同时可以使更多的患者获得手术和保留乳房的机会。结论: 曲妥珠单抗联合化疗药物治疗HER-2过度表达的局部晚期乳腺癌均有较好的临床疗效,是治疗晚期乳癌并延长生存时间的一种新方法。     

枸杞多糖对顺铂诱导小鼠睾丸支持细胞凋亡的影响

目的：研究枸杞多糖（lycium barbarum polysaccharides, LBP）对顺铂（cis-dichlorodiamineplatinum, CDDP）诱导小鼠睾丸支持细胞（TM4）凋亡的影响并探讨其可能机制。方法：体外培养TM4细胞,四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法检测LBP对CDDP诱导TM4细胞生存率的影响,Western blot检测LBP对CDDP诱导TM4细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化。结果：与Control组相比,CDDP组TM4细胞凋亡显著增加,细胞内抑凋亡基因Bcl-2表达量显著降低,促凋亡基因Bax表达量及Caspase-3表达量显著升高;与CDDP组相比,CDDP+LBP组TM4细胞凋亡显著减少,细胞内抑凋亡基因Bcl-2表达量显著升高,促凋亡基因Bax表达量及Caspase-3表达量显著降低。 结论：LBP作用于CDDP诱导的TM4细胞,能够通过增强细胞内Bcl-2的表达,抑制Bax及Caspase-3的表达来阻抑因CDDP诱导的TM4细胞凋亡,进而减轻CDDP对TM4细胞造成的损伤。     

顺铂对人肺腺癌细胞作用与ERCC1、Bcl-2表达的相关性研究

目的: 探讨ERCC1、Bcl-2表达与顺铂作用的关系,进而推测ERCC1、Bcl-2在顺铂耐药中的作用。方法: 选择人肺腺癌细胞A549及其耐DDP细胞株A549/DDP作为研究对象,采用MTT法检测A549/DDP细胞耐药指数;免疫细胞化学方法、RT-PCR方法检测不同浓度、不同作用时间干预后细胞中ERCC1、Bcl-2的表达。结果: 10 μg/mL DDP作用 12 h,A549细胞中ERCC1、Bcl-2 mRNA表达开始增高,随着作用时间的延长,ERCC1、Bcl-2 mRNA的表达逐渐增高,在 72 h 表达最强。浓度为 5 μg/mL 的DDP即可刺激A549细胞中ERCC1、Bcl-2 mRNA表达水平上升,随着DDP浓度的增加,其表达水平逐渐上升,ERCC1民mRNA表达水平在 20 μg/mL 组达到高峰。与亲本细胞相比,A549/DDP中ERCC1、Bcl-2表达明显增高。结论: 随着顺铂作用时间的延长和浓度的增加,A549细胞中ERCC1、Bcl-2 mRNA和蛋白的表达量增加,推测ERCC1、Bcl-2 可能参与了顺铂继发耐药的形成。     

放疗并局部注射IL-2 治疗鼻咽癌颈淋巴结转移残存的临床评价

目的: 探讨鼻咽癌颈淋巴结转移残存放疗并局部注射IL-2 治疗的疗效。方法: 初治鼻咽癌患者颈部常规照射DA 6000-6800 cGy, 颈淋巴结转移残存对照组常规深X 线垂直局部加量照射DA1000 cGy,治疗组除常规加量照射外, 尚给予颈淋巴结残存局部基底注射IL-2 40 万u, 每周1 、3 、5 各1 次。结果: 治疗组和对照组的淋巴结消失率分别为93. 8 %和71. 0 %( P <0. 05); 满3 年后颈部无瘤生存率分别为66. 7 %和33. 3 %( P <0. 05); 1 、2 、3 年生存率在治疗组分别为73.8 %、59.5%、42.9 %, 在对照组为51.2 %、36. 6 %、22. 0 %( P <0. 05) 。两组副反应的差异无显著性。结论: 加量放疗并IL-2 局部注射治疗鼻咽癌颈淋巴结转移残存可以显著提高颈淋巴结转移的局部控制率, 是一种有效的治疗或补救治疗手段。     

肝癌患者经导管动脉化学药物栓塞术前后血清肝细胞生长因子水平变化及其临床意义

目的: 研究肝癌患者经导管动脉化学药物栓塞术(TACE) 前后血清肝细胞生长因子(HGF)水平的动态变化及其影响因素, 探讨其临床意义。方法: 以30 例慢性乙型肝炎基础上的肝癌患者为研究对象, 用酶联免疫法(ELISA) 测定TACE 术前1 天, 术后第3 、7 、28 天血清HGF 浓度, 分析TACE前后血清HGF 水平动态变化及其影响因素。以10 例健康献血者为正常对照组, 10 例慢性乙型肝炎患者及10 例慢性乙型肝炎肝硬化患者为慢性肝炎组和肝硬化组。结果: 肝癌患者TACE 术前血清HGF 浓度为[(0.63 ±0.28) ng /mL], 显著高于正常对照组[(0.17 ±0.04) ng /mL] 、慢性肝炎组[(0.35 ±0.08) ng /mL] 以及肝硬化组[(0.39 ±0.09) ng /mL] (P <0.05) 。TACE 术后血清HGF浓度上升高峰出现在术后第3 天[(1.37 ±0.21) ng /mL], 术后第7 天逐渐下降[(0.79 ±0.14) ng /mL], 术后第28 天基本恢复术前水平[(0.66 ±0.19) ng /mL] 。TACE 术后有肿瘤转移的肝癌患者, 其术前血清HGF 水平显著高于无肿瘤转移的患者[(0.94 ±0.18) ng /mL vs (0.51 ±0.23) ng /mL, P <0.05] 。栓塞范围超过1 2 肝脏体积的肝癌患者术后第3 天血清HGF 水平上升更明显[(1.74 ± 0.16) ng /mL vs (1.16 ±0.17) ng /mL, P <0.05] 。结论: 血清HGF 水平可作为肝癌诊断和TACE 治疗后随访的肿瘤标记物之一, 肝癌患者TACE 术后血清HGF 水平的持续升高可能与术后肿瘤转移有关。     

顺铂与唑来膦酸序贯应用抑制肺癌细胞增殖的研究

目的: 探讨顺铂与唑来膦酸序贯联合应用对人肺巨细胞癌细胞株PLA-801D的生长抑制作用。方法: MTT法测定顺铂与唑来膦酸不同序贯方式处理后细胞生长的抑制率，并通过流式细胞术分析不同处理组细胞周期的变化。结果: 顺铂和唑来膦酸均能够抑制肿瘤细胞的生长，并在一定给药浓度范围内具有剂量依赖效应。两药联合应用对细胞生长抑制具有协同效应，其中以顺铂给药24 h后序以唑来膦酸处理对细胞生长的抑制效果最佳。顺铂与唑来膦酸序贯方式的改变，引起G0/G1期细胞比例下降，S期细胞比例显著提高。结论: 先顺铂后唑来膦酸的联合给药方式对肺癌细胞的生长抑制作用最强，不同序贯应用方式导致细胞生长抑制率的差异与细胞周期的变化具有一定的相关性。     

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂 BPI-2009的抗肿瘤作用及其机制的研究

目的: 探讨一种口服的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR) 酪氨酸激酶抑制剂(BPI-2009) 的抗肿瘤作用及其机制。方法: Western blot 方法检测 BPI-2009 对 酪氨酸激酶和EGFR自动磷酸化的抑制作用, MTT 法检测 BPI-2009对多种肿瘤细胞的生长抑制作用, 使用A431 肿瘤模型的荷瘤裸鼠进行体内的肿瘤抑制试验。结果: 通过对 EGFR激酶抑制剂化学文库的筛选, 发现 BPI-2009是一个有效的 EGFR 激酶抑制剂。BPI-2009 对EGFR 激酶的半数抑制浓度(IC₅₀) 为 5 nmol°L^-1, 当其浓度达到 62.5 nmol°L^-1 的时候可以完全抑制EGFR激酶的活性, 但在 100 nmol°L^-1 时对 Abl 、Abl相关基因(Abl-related genes, Arg) 以及 c-Src 酪氨酸激酶都没有明显的抑 制作用。 BPI-2009 可以 阻断EGFR介导的细胞内蛋白酪氨酸的磷酸化, IC 50 为45 nmol°L^-1。在肿瘤细胞生长抑制试验中, BPI-2009 对于肿瘤细胞的生长抑制作用与 EGFR在细胞中的表达密切相关。人类肿瘤细胞 A431 移植瘤抑制试验的研究表明 BPI-2009 经口给药每天 1 次在100 mg°kg^-1, 肿瘤抑制率达 64%, 有明显的剂量效应关系, 并没有发现明显的病态和体重下降。结论: BPI-2009 是一种有效的高选择性的以 EGFR 酪氨酸激酶为靶点的抗肿瘤药物。     

睑板腺癌中MMP-2的表达及其临床意义

目的: 探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metallop roteinase-2,MMP-2)在睑板腺囊肿和睑板腺癌组织中的表达差异及其与睑板腺癌临床病理特征的关系和临床意义。方法: 采用免疫组化SP法检测睑板腺囊肿和睑板腺癌组织中MMP-2、血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况,以CD34标记检测肿瘤内的微血管密度(microvessel density, MVD),分析MMP-2与临床病理因素、VEGF、MVD的关系。结果: MMP-2在睑板腺癌组织中阳性表达率高于睑板腺囊肿(56% vs 20%),差异具有统计学意义(P﹤0.05),而VEGF表达在睑板腺癌和睑板腺囊肿中差别无统计学意义;MMP-2蛋白表达与肿瘤复发和局部浸润有关 (P﹤0.05),与患者年龄、组织学分级、病理类型和病程无关 (P﹥0.05)。MMP-2阳性的肿瘤组织内MVD明显高于MMP-2阴性肿瘤(P﹤0.05),VEGF的表达与MMP-2无相关性(r=-0.049,P=0.748)。结论: MMP-2在睑板腺癌中高表达,可能通过非VEFG依赖途径促进肿瘤的血管生成,进而参与肿瘤浸润和复发。     

miR-106 b在乳腺癌组织中的表达及其增强乳腺癌细胞顺铂化疗敏感性的机制研究

目的:探讨miR-106 b在乳腺癌组织中的表达及其增强乳腺癌细胞顺铂化疗敏感性的机制。方法:随机选取2015年10月至2018年5月在本院进行手术切除的乳腺癌患者58例,取乳腺癌组织和癌旁组织提取细胞DNA,用荧光定量PCR的方法检测miR-106 b的表达量。购买乳腺癌MCF-7细胞系,构建促进miR-106 b表达的高表达组、抑制miR-106 b表达的低表达组细胞系。用不同浓度的顺铂处理,48 h后观察在体外和裸鼠皮下肿瘤的受抑制情况。荧光定量PCR法检测PTEN/PI3K/AKT信号通路相关基因的表达。结果:荧光定量PCR显示乳腺癌组织中miR-106 b的相对表达量高于癌旁组织（P<0.05）。在20、30和40 μmol/L浓度时,对照组和高表达组的相应浓度下的细胞抑制率均显著高于低表达组,对照组相应浓度下的细胞抑制率均显著高于低表达组（P<0.05）。在20、30和40 μmol/L浓度时,对照组和高表达组的相应浓度下的荧光强度均低于低表达组,且高表达组均显著低于对照组（P<0.05）。低表达组PTEN的相对表达量显著低于对照组,而高表达组PTEN的相对表达量显著高于对照组（P<0.05）。低表达组的PI3K和AKT的相对表达量显著高于对照组,高表达组的PI3K和AKT的相对表达量显著低于对照组（P<0.05）。结论:miR-106 b在乳腺癌中高表达,且表达量越高,乳腺癌细胞对顺铂的化疗敏感性越强。     

泛素连接酶hrd1在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的: 研究泛素连接酶hrd1(hydroxymethylglutaryl reductase degradation 1,hrd1)在胃癌及癌旁组织中的表达水平,以此探讨hrd1在胃癌发生发展中的意义。方法: 收集临床胃癌组织及距癌灶边缘 5 cm 以上胃壁组织,应用免疫组织化学SP法研究63例胃癌(实验组)及其癌旁正常组织(对照组)中hrd1蛋白的表达水平,应用荧光定量PCR(Q-PCR)方法分别检测实验组及对照组hrd1基因表达水平,并用统计学方法分析hrd1表达水平与胃癌临床病理参数之间的关系。结果: 免疫组化及Q-PCR结果均显示,胃癌组织中hrd1表达水平明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。hrd1在癌灶≥5 cm 的胃癌组织中表达水平高于癌灶＜5 cm 的胃癌组织,差异有统计学意义(P<0.05);胃癌组织中hrd1的表达与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结有无转移和临床分期均无关(P>0.05)。结论: 泛素连接酶hrd1在胃癌组织中表达明显高于癌旁正常组织,提示hrd1可能与胃癌的发生有关。     

羟基喜树碱依赖Caspase3途径诱导人乳腺癌Bcap37细胞凋亡

目的: 探讨羟基喜树碱(HCPT)诱导人乳腺癌Bcap37细胞凋亡所涉及的信号转导途径。方法: 采用MTT法测定细胞的增殖活力,琼脂糖凝胶电泳观察细胞调亡,流式细胞仪进行细胞周期分析,Westernblot法研究细胞调亡途径。结果: HCPT对Bcap-37有明显的生长抑制作用。10~100μmol·L^-1HCPT作用细胞后,琼脂糖凝胶电泳检测到典型的DNA梯状条带。Caspase3在细胞凋亡过程中发生降解,Caspase3抑制剂DEVD-CHO可抑制HCPT诱导的Caspase3的降解和细胞凋亡。结论: HCPT对Bcap-37有明显的生长抑制和诱导调亡作用。Caspase3在HCPT诱导人乳腺癌Bcap37细胞调亡中起着重要作用。