溶剂回流法提取石榴皮总多酚及抗氧化活性的研究

采用溶剂回流提取方法,对石榴皮总多酚的提取工艺进行优化并测定其抗氧化活性。通过单因素和响应面优化设计确定了石榴皮多酚最佳提取工艺条件。同时研究了提取物对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除作用以及对脂质过氧化物的抑制作用。结果表明,乙醇体积分数70%、提取温度89℃、料液比1︰26(g/mL)的条件下提取2.5 h,总多酚含量214.58 mg/g。提取物对DPPH自由基的半清除浓度EC50为0.014 mg/mL;对羟自由基的半清除浓度DC50为0.034 mg/mL;对超氧阴离子的半清除质量浓度HC50为3.82 mg/mL;对体外脂质过氧化的半抑制质量浓度IC50为0.019 mg/mL。     

北五味子乙素清除自由基及体外抑菌作用的研究

对五味子乙素进行清除自由基及体外抑菌实验。结果表明：五味子乙素对自由基的清除效果明显,其中对羟自由基清除作用大于相同质量浓度的VC,其半数清除质量浓度为0.2mg/mL;对超氧阴离子自由基清除作用小于VC,其半数清除质量浓度为0.24mg/mL。五味子乙素提取液对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、沙门氏菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均有一定的抑制作用,其中对白色念珠菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用最强,最低抑菌浓度为0.25mg/mL,对根霉、黑曲霉、南洋酵母无明显抑菌活性。     

菟丝子总黄酮提取工艺及其抗氧化活性

采用响应面法优化菟丝子中总黄酮的提取工艺。在单因素实验的基础上,以乙醇浓度、提取温度、料液比、提取时间为自变量,总黄酮得率为因变量,运用Box-Behnken设计-响应面优化菟丝子中总黄酮回流提取工艺。并通过菟丝子总黄酮对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基的清除作用来评价其抗氧化活性。结果表明:菟丝子总黄酮最佳提取工艺条件为乙醇浓度90.0%、提取温度70℃、料液比1:15 g/mL、提取时间100 min。在此条件下,菟丝子总黄酮得率为(34.65±0.02) mg/g,与模型预测值(34.37 mg/g)相对误差为0.81%,说明回流提取菟丝子总黄酮的工艺稳定可靠。菟丝子总黄酮对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子的IC₅₀分别为0.067、7.209、0.119 mg/mL,抗坏血酸对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子的IC₅₀分别为0.082、1.731、0.054 mg/mL,体外抗氧化试验结果表明,菟丝子总黄酮对DPPH自由基具有较强的清除能力,明显高于抗坏血酸;而对羟自由基、超氧阴离子具有一定的清除能力,但清除能力低于同浓度的抗坏血酸。     

北五昧子藤茎三萜抗氧化活性研究

利用乙醇浸提法从北五味子藤茎中提取三萜类化合物,再经初步纯化后,进行三萜的抗氧化活性实验。通过总还原力测定法、Fenton法、改良的邻苯三酚自氧化法、DPPH法、猪油体系抗氧化法,分别对北五味子藤茎提取物的总还原力、羟自由基、超氧阴离子自由基及DPPH自由基的清除能力、过氧化值(POV值)进行测定。结果表明,北五味子藤茎三萜有较好的还原能力;对羟自由基和DPPH自由基有较强的清除作用,且清除率50%所对应的质量浓度IC50分别为0.6mg/mL和0.077mg/mL,但对超氧阴离子自由基清除效果不是很显著;有一定地抑制油脂氧化的作用但弱于抗坏血酸、TBHQ,抗坏血酸对三萜的抗氧化性有协同增效作用。     

中国蛤蜊多糖的抗氧化性及抑菌性

以中国蛤蜊全脏器为材料,碱提醇沉法进行多糖的提取,采用Sevag 法去除多糖中的蛋白,分别测定提取物中多糖的含量、清除羟自由基( ·OH)能力、清除超氧阴离子自由基(O2－ ·)能力及抑菌活性。结果表明：碱提法所提多糖含量较高,提取率为15.45%(以中国蛤蜊干粉计)。中国蛤蜊多糖具有较强的抗氧化能力,多糖质量浓度为0.8mg/mL时对O2－ ·的清除率达86.49%;对 ·OH清除率达49.31%。中国蛤蜊多糖对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌均有抑制作用,其最小抑菌质量浓度分别为12.5、25、25mg/mL,对金黄色葡萄球菌抑制作用最明显、枯草芽孢杆菌次之、大肠杆菌最不明显,。由此可知,中国蛤蜊多糖对 ·OH 和 O2－ ·具有一定的体外抗氧化性能,在一定实验质量浓度范围内,随着多糖质量浓度的增大,其抗氧化活性逐渐增强。多糖对革兰氏阳性菌的抑制效应强于革兰氏阴性菌。     

红树莓花色苷的提取及抗氧化活性研究

采用酸化乙醇法提取红树莓中的花色苷,通过正交试验确定花色苷提取的最佳条件,同时对红树莓花色苷提取物的抗氧化活性进行研究。结果表明,以盐酸酸化的80%乙醇溶液(pH3)按1:20(g/mL)的料液比在60℃提取红树莓1.5h,此条件下,鲜果中花色苷提取量达0.625mg/g。在实验范围内,红树莓花色苷提取物的还原能力、对羟自由基和超氧阴离子自由基的抑制率均随质量浓度的升高而增加。红树莓花色苷提取物抑制羟自由基和超氧阴离子自由基的半数有效浓度(EC50)分别为0.175mg/mL和0.699mg/mL,说明红树莓花色苷提取物抑制羟自由基比抑制超氧阴离子自由基的能力强。     

微波辅助法提取火龙果果皮色素及其功能活性研究

优化火龙果果皮色素的微波辅助法提取工艺,并对色素的功能特性进行初步研究。以火龙果果皮为原料,在单因素实验的基础上,采用正交实验设计对火龙果果皮色素的提取工艺进行优化,并研究了真空干燥色素的抗氧化活性和抑菌活性。结果表明:在料液比1∶50 (g/mL)、乙醇浓度20%、微波功率440 W、微波处理时间60 s的条件下,火龙果果皮色素的提取效果最佳,色素得率为1.074%;2~10 mg/mL提取物对羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O₂-·)和DPPH·均具有清除作用,其中对O₂-·的清除效果最好,比V_C的清除效果略低;提取物对大肠杆菌的最低抑菌浓度为1.25 mg/mL,最低杀菌浓度为2.5 mg/mL,抑制效果最好,其次金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、志贺氏菌和蜡状芽孢杆菌。本研究优化了微波辅助提取火龙果果皮色素的工艺条件,所得提取物有较好的抗氧化活性,且对常见食源性病原菌有较强的抑菌活性。     

红花龙胆总多酚提取工艺优化及抗氧化活性检测

以红花龙胆全草为原料,采用超声辅助提取其多酚类化合物,通过单因素试验和响应曲面试验确定提取的最佳工艺,并进一步考察所得提取物的羟自由基清除能力和超氧阴离子自由基清除能力。结果表明,最佳提取工艺为：在提取时间30 min,乙醇体积分数49%,料液比1∶59（g/mL）的条件下,红花龙胆多酚得率为4.61%。其对羟自由基清除率和超氧阴离子自由基清除率的IC50分别为0.324 mg/mL和0.315 mg/mL。     

桑葚籽黄酮超声酶解提取工艺优化及其抗菌、抗氧化活性

采用复合酶超声辅助提取法提取葚籽黄酮,并分析其抗氧化活性和抑菌活性。通过单因素实验和Box-Behnken响应面分析法考察不同生物酶比例、复合酶酶添加量、酶解温度、酶解时间和超声时间对黄酮得率的影响,检测提取物对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除作用,并通过牛津杯法检测其抑菌活性。结果表明:最佳酶为2:1的果胶酶和纤维素酶组合的复合酶,最佳提取工艺条件为:复合酶添加量0.3 mg/mL、酶解温度55 ℃、酶解时间80 min、超声时间20 min。此条件下桑葚籽黄酮的提取得率为5.32 mg/g。提取所得黄酮具有较高的抗氧化活性,且抗氧化活性与黄酮质量浓度呈一定效量关系。桑葚籽黄酮对羟自由基的清除效果最强,当黄酮质量浓度为1.00 mg/mL时,其对DPPH自由基和羟自由基的清除率分别为 83.90%和87.27%,抗超氧阴离子自由基活力为165.51 U/L。桑葚籽黄酮对沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和酵母菌均具有抑制作用,且最低抑制浓度分别为0.75、1.50、1.00和2.00 mg/mL。     

云南晒青毛茶提取物抗氧化活性研究

为研究云南晒青毛茶提取物的抗氧化活性,以芦丁和VC为对照,测定云南晒青毛茶不同溶剂提取物的清除DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基、亚硝酸盐的能力及还原力。测定结果表明:晒青毛茶不同溶剂提取物抗氧化活性与其浓度成正相关,对DPPH自由基、羟基自由基与超氧阴离子有较强的清除作用,具有一定的清除亚硝酸盐能力与还原力。晒青毛茶提取物中乙醇沉析物(IC5093.80μg/mL)、正丁醇提取物(IC50153.90μg/mL)、乙醇提取物(IC50161.20μg/mL)清除DPPH自由基的能力较强,在相同浓度下优于芦丁。晒青毛茶提取物对羟基自由基均有很强的清除能力,除氯仿提取物(IC5057.67μg/mL)与乙醇沉析物(IC5013.10μg/mL)外,其他提取物与VC的IC50值均很小。乙醇沉析物与水提取物对超氧阴离子的清除能力较强,在质量浓度20μg/mL时优于标准品VC,在相同浓度下优于其他提取物。乙酸乙酯提取物与乙醇提取物对亚硝酸盐的清除能力较强,但相同浓度下低于VC。水提取物、乙醇沉析物、乙酸乙酯提取物的还原力较好,在相同浓度下优于标准品芦丁。云南晒青毛茶不同溶剂提取物的抗氧化活性具有较大差异。     

紫苏提取物体外清除自由基能力的研究

以紫苏茎、叶为研究对象,采用不同溶剂获取各种提取物,用茶多酚、维生素E、TBHQ作为对照,采用DPPH自由基体系、烷基自由基引发的亚油酸氧化体系、超氧阴离子自由基体系、羟基自由基体系,研究各种提取物对不同自由基的清除作用。结果表明,提取物对四种自由基均有清除作用,其清除效果依次为羟基自由基>DPPH自由基>烷基自由基>超氧阴离子自由基。紫苏茎、叶的95％乙醇(v/v)与碱水混合物提取物(8:2v/v)的总黄酮得率最高,紫苏叶提取物的抗氧化性强于紫苏茎提取物。     

苹果皮不同溶剂提取物抗氧化活性研究

研究苹果皮不同溶剂提取物的抗氧化活性。依次用蒸馏水、60%乙醇、无水乙醇、乙酸乙酯提取苹果皮中的活性物质,用Folin-Ciocalteu法测定提取物中总酚含量,并以Vc为阳性对照,通过测定对羟自由基(.OH)、超氧阴离子自由基(O2-.)、亚硝酸盐(NO2-)的清除作用及总还原力,比较评价4种提取物的抗氧化活性。苹果皮60%乙醇提取物总酚含量显著高于其他提取物;在不同的抗氧化体系中,苹果皮的4种不同溶剂提取物均具有不同程度的抗氧化活性且与质量浓度呈明显的量效关系,60%乙醇提取物的抗氧化活性始终最强,其清除.OH和O2-.活性弱于Vc,而清除NO2-活性和还原能力较强且高于Vc。苹果皮抗氧化活性物质主要是60%乙醇提取物。     

4种龙眼核提取物的总黄酮含量、体外抗菌活性与抗氧化活性

以聚酰胺吸附-硝酸铝显色法测定龙眼核水提取物、95%乙醇提取物、丙酮提取物、乙酸乙酯提取物等4种不同极性提取物的总黄酮含量,同时采用管碟法、最小抑菌浓度(MIC)法测定比较4种提取物的抗菌活性,并测定评价在二苯代苦肼自由基(DPPH自由基)体系、羟自由基体系、超氧阴离子自由基体系及抗脂质体过氧化体系中各提取物的抗氧化活性。结果表明：95%乙醇提取物的总黄酮含量最高,为(3.90±0.12)%,其抗菌活性也强于其他3种提取物,在质量浓度100mg/mL时,对大肠杆菌、普通变形杆菌、枯草芽孢杆菌、藤黄八叠球菌、金黄色葡萄球菌、白菜软腐菌、甘蓝黑腐菌7种菌的抑菌圈直径均达15mm以上,对各菌的MIC均≤100mg/mL;在不同的自由基体系中,4种提取物均对超氧阴离子自由基的清除作用相对较弱,但对清除DPPH自由基、清除羟自由基、抗脂质体过氧化均表现出较强的效果;以清除率达50%时所对应的样液质量浓度IC50作为指标比较发现4种提取物对3种自由基的的抗氧化作用由强到弱依次是水提取物、95%乙醇提取物、丙酮提取物、乙酸乙酯提取物,其中水提取物对这3种自由基的IC50分别为0.20、0.15、2.69mg/mL。可见,龙眼核的95%乙醇提取物适宜作为植物源抗菌剂,水提取物则适宜作为植物源抗氧化剂以深度开发利用。     

费约果叶片总黄酮提取工艺优化及其抗氧化活性研究

对费约果叶片总黄酮的提取工艺和抗氧化活性进行了研究。结果表明:费约果叶片总黄酮最佳提取工艺为温度50℃、料液比1∶30(g∶mL)、提取时间50 min和甲醇体积分数70%。根据最佳提取工艺,重复3次得到总黄酮量分别46.89、44.51、48.27 mg/g,具有稳定性和可操作性;另外,通过半抑制浓度IC50衡量费约果叶片总黄酮提取物抗氧化活性,其抗脂质过氧化能力(IC500.275 mg/mL)和DPPH.自由基的清除能力(IC500.798 mg/mL)均优于抗坏血酸(IC500.643、IC500.917 mg/mL),而超氧阴离子自由基的清除能力(IC500.774 mg/mL)和羟自由基的清除能力(IC500.278 mg/mL)均弱于抗坏血酸(IC500.537I、C500.275 mg/mL)。     

不同溶剂提取乳苣的抗氧化作用研究

以乳苣全草为原料,75%乙醇为溶剂提取乳苣,提取液用不同极性溶剂依次萃取,得石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水萃取物,同时测定了各相提取物对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基的清除能力,并与VC进行比较。结果表明:各萃取物均具有一定的抗氧化活性,且随着浓度的增加而增强;对羟自由基的清除能力大小依次为乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>VC>水萃取物>石油醚萃取物;对超氧阴离子自由基清除能力大小依次为VC>正丁醇萃取物>乙酸乙酯萃取物>石油醚萃取物>水萃取物;对DPPH自由基清除能力大小依次为VC>乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>水萃取物>石油醚萃取物;各萃取物还原能力大小依次为VC>正丁醇萃取物>乙酸乙酯萃取物>水萃取物>石油醚萃取物。     

生何首乌体外抗氧化活性及抗菌活性的研究

研究生何首乌不同提取物的体外抗氧化活性及抗菌活性。在体外化学模拟的条件下,采用比色法,测定了何首乌水提物和醇提物对DPPH自由基的还原能力及抗脂质过氧化能力,羟基自由基的清除能力以及总体抗氧化能力。同时测定了何首乌水提物和醇提物的总酚酸和总黄酮的含量。利用滤纸片扩散法测定了何首乌水提物和醇提物对6种微生物的抗菌活性。何首乌醇提物的体外抗氧化活性强于水提物,具有显著的DPPH自由基和羟基自由基清除能力和较强的抗脂质过氧化能力,具有一定的还原能力,其总体抗氧化能力也比较强。何首乌水提取物和醇提取物的总酚酸和总黄酮含量分别126.52、77.25μg/mg和153.04、126.11μg/mg。另外何首乌的醇提物对金黄色葡萄球菌、四联球菌和大肠杆菌显示出较强的抑制活性,水提物对金黄色葡萄球菌和荧光假单胞菌显示出一定的抑菌活性。何首乌具有强的抗氧化活性与一定的抗菌活性。     

响应面优化酶法提取虎斑乌贼肌肉多糖的工艺及抗氧化活性测定

研究胰蛋白酶提取虎斑乌贼肌肉多糖的工艺及体外抗氧化活性,并与水提法和碱提法的多糖进行比较。在单因素试验基础上以响应面法优化酶法提取多糖的工艺,结果显示最佳工艺条件为:酶解温度55℃、料液比1∶40(g/mL)、酶解时间4 h、加酶量2.5%,此时虎斑乌贼肌肉多糖得率为4.15%,优于水提法和碱提法的多糖得率。体外抗氧化活性研究表明酶法提取的多糖比碱提和水提的多糖具有更好的抗氧化活性,当多糖质量浓度为4 mg/mL时,水提、碱提和酶提虎斑乌贼肌肉多糖对·OH的清除率分别为50.15%、55.14%和89.47%,其IC50值分别为4.51、3.56 mg/mL和0.82 mg/mL;对DPPH自由基的清除率分别为28.89%、31.48%和40.80%,其IC50值分别为16.66、15.43 mg/mL和11.50 mg/mL;对O2-·的清除率分别为75.43%、81.63%和97.00%,其IC50值分别为1.15、0.69 mg/mL和0.29 mg/mL;还原力大小分别为0.134、0.156和0.193。综合分析表明,酶提法得到的多糖得率较高且具有较好的体外抗氧化活性。     

木贼醇提物不同萃取部位总酚酸、黄酮含量测定及抗氧化活性研究

目的:对木贼的乙醇提取物不同萃取部位进行总酚酸、黄酮含量测定及抗氧化活性比较,以探知木贼抗氧化活性物质基础。方法:木贼经70%乙醇超声提取浓缩后,采用有机溶剂萃取法依次得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水相4个部位萃取物;利用紫外-分光光度法比较各萃取部位总黄酮、酚酸含量差异;以抗坏血酸为阳性对照,比较不同萃取部位还原能力、羟自由基(·OH)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)、2,2'-联氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS+·)清除率的差异,评价各部位抗氧化能力强弱。结果:木贼各萃取物总黄酮含量在5.70~61.55 mg/g 范围内,总酚酸含量在4.07~19.10 mg/g 范围内,乙酸乙酯萃取物总黄酮与酚酸含量明显高于其他萃取物,其还原能力、羟自由基、DPPH·、ABTS+·清除率也明显高于正丁醇、石油醚和水相萃取物,乙酸乙酯萃取物对羟自由基、ABTS+·、DPPH·清除能力IC₅₀值分别为:(0.321±0.0026)、(0.213±0.0010)和(0.169±0.0014) mg/mL。结论:经各相溶剂萃取后木贼有效成分得到初步分离,乙酸乙酯相萃取部位总黄酮和酚酸相对含量及抗氧化活性明显强于总提物和其他萃取部位,且其抗氧化能力呈量效关系。实验发现木贼中黄酮和酚酸类成分与其抗氧化能力密切相关。     

樟叶木脂素的提取纯化及其抗氧化性、抗癌活性

为了优化樟叶木脂素超声波技术提取条件,探究其抗氧化性、抗肝癌活性,本文通过单因素实验考察各个因素对木脂素提取量的影响,利用响应面试验优化提取工艺并建立相应的数学模型。粗品经过浓缩、萃取、柱色谱等步骤进行分离纯化;紫外色谱、红外光谱、质谱、核磁共振等技术进行结构鉴定。利用高效液相谱（High Efficiency Liquid Chromatography, HPLC）外标法进行纯度鉴定;同时利用1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼（1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH）法,羟基自由基清除法研究其抗氧化性; MTS （3-（4, 5-dimethylthiazol-2-yl）-5-（3-carboxymethoxyphenyl）-2-（4-sulfophenyl）-2H-tetrazolium）法研究其对肝癌细胞（HepG2）和人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的毒性作用。结果表明:樟叶木脂素的最优超声提取条件为浸提时间78 min,超声时间3 min,料液比1:22 g/mL,乙醇浓度60%,在此条件下樟树叶中木脂素提取量为45.31 mg/g;经过纯化和结构鉴定最终得到芝麻素和松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷,其纯度分别为94.84%和90.14%;抗氧化实验结果表明芝麻素,松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷具有较好的清除DPPH自由基、羟基自由基效果,其中松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷清除DPPH自由基的IC₅₀为0.31 mg/mL,清除羟基自由基的IC₅₀为0.71 mg/mL;芝麻素清除DPPH自由基的IC₅₀为0.55 mg/mL,清除羟基自由基的IC₅₀为0.94 mg/mL。细胞毒性试验发现芝麻素、松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷均对HepG2有抑制作用,且芝麻素对肝癌细胞（HepG2）、人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的作用大于松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷。综上可知响应面法可以用于樟叶木脂素的提取分离,且该提取物具有抗氧化和抗肝癌的功效。     

蓝莓多糖的抗氧化性与抑菌作用

利用水提醇沉法从蓝莓中提取多糖,再经初步纯化后,进行多糖的抗氧化性及抑菌作用实验。结果表明,蓝莓多糖对羟自由基和DPPH 自由基有较强的清除作用,且清除率50% 所对应的质量浓度IC50 分别为2mg/mL 和7mg/mL。但蓝莓多糖对超氧阴离子自由基几乎没有作用效果。蓝莓多糖对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母均有一定的抑制作用,最小抑制浓度MIC 在50～75mg/mL 之间,对热带假丝酵母、青霉和黑曲霉无抑制作用。