虾过敏及虾过敏原

综述了虾过敏及虾过敏原,涉及过敏原的理化性质、生物活性、免疫学性质的研究,并对现存的问题做了简要介绍。      

虾过敏及虾过敏原

综述了虾过敏及虾过敏原,涉及过敏原的理化性质、生物活性、免疫学性质的研究,并对现存的问题做了简要介绍。     

大米蛋白的BN大鼠致敏动物模型建立

以大米蛋白为过敏原,腹腔注射致敏雌性棕色挪威大鼠(BN大鼠),建立大米蛋白过敏BN大鼠动物模型。观察BN大鼠全身主动过敏反应及体重、体温、免疫脏器指数变化,检测其血清特异性Ig G、总Ig E和特异性Ig E水平,并测定血浆组胺释放水平及各组大鼠的血象变化。结果显示,实验第42 d大米蛋白激发实验后,实验组大鼠全部呈过敏反应阳性,且体温降低,脾脏指数显著增大(p<0.01),体内白细胞和嗜酸粒细胞数目升高(p<0.05);实验组血清特异性Ig G显著升高(p<0.01),总Ig E以及血浆组胺释放量均高于对照组(p<0.05),实验第14 d和42 d血清特异性Ig E高于对照组,第28 d无明显变化(p<0.05)。本实验结果证明BN大鼠是评价大米蛋白致敏性较为理想的动物模型。      

虾蛋白过敏实验动物模型的建立

以卵白蛋白为阳性对照,以平衡盐溶液(PBS)为阴性对照,观察虾蛋白的全身过敏反应。同时,观察虾蛋白对致敏豚鼠离体回肠平滑肌过敏性收缩反应(Schultz-Dale 反应)的影响,以建立虾蛋白过敏实验动物模型。结果显示,用0.01～2g/100mL 卵白蛋白致敏并激发后,100% 豚鼠呈全身过敏反应阳性,0.1g/100mL 卵白蛋白组的豚鼠100% 死亡。相似质量浓度虾蛋白(0.01～1g/100mL)的全身过敏反应与卵白蛋白相近(与卵白蛋白组比较,P ＞ 0.05);Schultz-Dale 反应的实验结果与全身过敏反应结果相似。由此,初步建立虾蛋白过敏实验的动物模型。     

克氏原螯虾过敏小鼠动物模型的构建研究

为了更好地研究食用克氏原螯虾引发的食物过敏情况,利用Balb/c小鼠构建了食物过敏动物模型,提取克氏原螯虾过敏原蛋白,采用皮下注射致敏方法,考察致敏相关的效应因子组胺含量和致敏IgE抗体产生情况,并测定致敏过程中的细胞因子IL-4、IL-6、IFN-γ的含量,结合生理性状观察,对模型质量进行评价,结果表明,经注射致敏后,小鼠产生较多的特异性IgE抗体,血清中组胺含量也大量产生,与之相关的效应因子IL-4和IL-6均显著提高,而同时IFN-γ的含量明显减少。该研究为进一步开展克氏原螯虾食用过敏的研究提供帮助。     

虾青素对高脂HepG2细胞及高脂膳食饲喂C57BL/6J小鼠血脂代谢的影响

为研究虾青素对油酸诱导高脂HepG2细胞及高脂膳食饲喂C57BL/6J小鼠血脂代谢的影响。本实验建立油酸诱导HepG2细胞脂肪堆积体外模型,采用油红O对胞内脂滴染色测定脂滴含量,同时测定正常组、高脂组及虾青素组细胞内甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)浓度。通过高脂膳食饲喂C57BL/6J小鼠,测定正常组、高脂组及虾青素干预组小鼠血清中TC、TG及高密度脂蛋白胆固醇水平;苏木精和伊红染色观察肝组织形态学变化;应用实时荧光定量聚合酶链式反应检测肝脏中脂肪调控相关基因mRNA表达水平;应用气相色谱检测粪便中短链脂肪酸的排泄量。结果表明:虾青素能够显著抑制油酸诱导的HepG2细胞脂肪堆积,显著降低胞内TG、TC浓度(P<0.05);与高脂组相比,给予虾青素后,小鼠的TC和TG水平均显著降低(P<0.05);苏木精和伊红染色结果表明虾青素干预组脂肪变性程度明显减轻;同时虾青素干预后总短链脂肪酸的含量显著增加,且肝脏中脂肪合成相关基因SREBP-1C和FAS表达水平显著下调(P<0.05)。结论:虾青素通过降低HepG...     

植物乳杆菌KLDS 1.0386对C57BL/6小鼠胆固醇代谢的影响

目的:本研究测定了植物乳杆菌KLDS 1.0386对模拟胃肠液的耐受力,并通过构建高脂血症模型小鼠评价该菌株对小鼠体内胆固醇代谢的影响。方法:体外模拟胃液肠液,菌落计数法检测胃液肠液耐受性,并以健康C57BL/6雄性小鼠为对象,设置空白组、模型组、低剂量组、高剂量组、普伐他汀对照组,分别以生理盐水、KLDS 1.0386悬浊液和普伐他汀连续灌胃4周,检测小鼠肝脏胆固醇和甘油三酯,粪便胆汁酸和胆固醇水平。结果:在p H为3的模拟胃液环境中,该菌株3 h存活率可达92.62%,在模拟肠液环境中,3 h存活率为83.91%,说明植物乳杆菌KLDS 1.0386能通过胃进入肠道并保持活性。植物乳杆菌KLDS 1.0386菌株可显著降低高脂小鼠肝脏甘油三酯和胆固醇水平(p<0.05),增加粪便胆汁酸和胆固醇的排出(p<0.05)。结论:该菌可以用做降胆固醇的潜在益生菌。      

低聚果糖对C57BL/6小鼠肥胖预防及其肠道菌群的调节作用

为探究低聚果糖（fructooligosaccharides,FOS）对C57BL/6小鼠肥胖预防及其肠道菌群的调节作用,将50只雄性5周龄C57BL/6小鼠随机分为5组,正常组食用正常饲料,其他组通过食用高脂饲料构建肥胖模型,正常组、模型组灌胃给予生理盐水,实验组灌胃给予高、低剂量的FOS,阳性对照组灌胃给予奥利司他,实验进行6周。采用高通量16S rRNA基因扩增测序、酶联免疫吸附测试等方法,分析FOS对C57BL/6小鼠的肥胖预防及肠道菌群的调节作用。结果表明,高、低剂量FOS都显著降低了肥胖模型小鼠的Lee’s指数、附睾脂肪指数（P<0.05）,并显著升高了肥胖模型小鼠血清高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）浓度（P<0.05）;高剂量FOS显著降低了肥胖模型小鼠的体质量增量及血清低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、脂多糖（lipopolysaccha...     

北五味子总木脂素对C57BL/6小鼠高脂血症的影响

目的：探讨北五味子总木脂素（Schisandra Chinensis lignans,SCL）对高脂饮食诱导的高脂血症小鼠血脂调节的影响。方法：雄性C57BL/6小鼠60 只,随机抽取30 只设为正常对照组（CON）和正常＋SCL 组（CON＋SCL 100 mg/kg）,每组15 只,以普通饲料喂养。其余30 只小鼠以高脂饲料喂养4 周,确定高脂血症小鼠模型建立成功后,将小鼠随机分为模型组和SCL治疗组（模型＋SCL 100 mg/kg）,全部小鼠连续灌胃给药12周后检测血清中总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、低密度脂蛋白胆固醇（lowdensity lipoprotein cholesterol,LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）含量并计算动脉粥样硬化指数（atherosclerosis index,AI）,检测小鼠脂/体比,检测肝组织中TC和TG含量。结果：与正常对照组比较,模型组小鼠血清中TC、TG、LDL-C、AI及脂/体比均显著增高（P＜0.01）,HDL-C含量降低,肝组织中TG和TC含量升高,与模型组比较,SCL 显著降低了小鼠血清TC、TG、LDL-C、AI及脂/体比（P＜0.01或P＜0.05）,升高了HDL-C含量,并降低了肝组织中TC和TG含量（P＜0.01）。结论：SCL 可以减轻高脂血症小鼠脂肪含量,对小鼠高脂血症具有一定的治疗作用。     

致敏小鼠血清代替过敏患者血清筛选Jug r 1 IgE线性抗原表位的可行性研究

目的:利用核桃过敏患者和核桃过敏原Jug r 1致敏小鼠血清筛选Jug r 1的IgE线性抗原表位,比较两者所筛选的表位的差异性,为今后利用小鼠血清替代人血清筛选食物过敏原表位提供理论依据,对食物过敏原研究及治疗具有重要意义。方法:利用固相合成肽法合成44个覆盖了Jug r 1一级序列的重叠短肽,通过圆点印迹试验利用核桃过敏患者血清和核桃过敏原Jug r 1致敏小鼠血清分别筛选出IgE抗原表位。结果:核桃过敏患者可以识别的IgE结合的线性抗原表位分别是肽段~1AALLVALLFVANAAA~(15)、4LVALLFVANAAAFRT18、~(16)FRTTITTMEIDEDID~(30)及~(125)CGISSQRCEIRRSWF~(139);核桃过敏原Jug r 1致敏小鼠所识别的抗原表位分别是1AALLVALLFVANAAA15和~(125)CGISSQRCEIRRSWF~(139)。结论:通过小鼠过敏血清筛选出的两个IgE线性抗原表位存在于过敏患者血清筛选出的4个IgE抗原表位中,提示在利用致敏小鼠血清代替过敏患者血清筛选IgE抗原表位时,可能出现假阴性结果,即有部分IgE线性抗原表位没有被识别。     

食物过敏原介导食物过敏机制研究进展

目前食物过敏已成为严重危害成人、儿童健康的公共卫生问题且发病率呈逐年上升的趋势。食物过敏可引起严重的不良反应甚至导致死亡, 但目前针对食物过敏尚无有效的治疗方法, 只能通过食物规避或针对食物过敏症状进行相应的治疗。由于复杂的环境和遗传因素, 食物过敏的致病机制尚不清晰。本文就近年来食物过敏致病机制研究的进展进行综述。     

食品致敏性评价的动物和细胞模型研究进展

食品过敏原致敏性的评价方法多种多样,而动物模型和细胞模型的致敏性评价是常用的方法之一。小鼠模型拥有繁殖周期短和遗传基因可操作性等优点,但却有着遗传背景差异性、伦理上等局限性;而体外培养细胞模型正好弥补了动物模型上的不足从而反映出机体中过敏反应从大体到细节上的变化。虽然目前有许多评价食品致敏性的方法,如常用的胃肠道消化实验法和热稳定性试验法,然而这些方法都存在着一定的局限性。本综述概括了动物和细胞模型在目前研究中的优缺点以及与其他实验方法的相互关系,客观分析其在评估食品过敏原的致敏性中的作用。     

食物过敏动物模型的研究进展

食物过敏是食品安全的重要问题之一,日益受到人们的关注。食物过敏动物模型不仅为食物过敏机制的研究提供重要的依据,而且还可有效地对食物过敏原进行准确的评价和检测。本文对小鼠、大鼠、豚鼠等啮齿类动物及幼猪和狗等非啮齿类常见食物过敏动物模型、动物模型致敏途径以及动物过敏模型检测、评价指标等研究进行了综述。     

DHA-磷脂对肥胖小鼠脂质代谢的影响

研究了二十二碳六烯酸-磷脂（DHA-磷脂）对实验性肥胖小鼠脂质代谢的调节作用及其机制。采用Folch法和硅胶柱层析法从鸢乌贼（文字Sthenoteuthis oualaniensis）卵中分离制备得到富含DHA的磷脂。C57BL/6J雄性小鼠随机分为3组：高脂模型组,1%大豆磷脂组,1%DHA-磷脂组。连续饲喂7周后,测定小鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量,肝脏TC、TG、磷脂（PL）含量以及肝脏脂肪合成酶（FAS）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PDH）、苹果酸酶（ME）、磷脂酸磷酸酶（PAP）、肉毒碱棕榈酸转移酶（CPT）、过氧化物酶体β-氧化活力。结果显示,DHA-磷脂能极显著抑制小鼠体重（P＜0.01）和肾周脂肪（P＜0.01）及精周脂肪（P＜0.01）蓄积,降低血清TC（P＜0.01）和肝脏TG（P＜0.01）水平,抑制肝脏FAS（P＜0.01）、ME（P＜0.05）、PAP（P＜0.05）的活力,提高CPT（P＜0.01）和过氧化物酶体β-氧化（P＜0.05）的活力,且效果优于大豆磷脂。DHA-磷脂具有良好的减肥作用,能够通过抑制肝脏脂质合成,促进脂质分解,有效调节肥胖小鼠的脂质代谢。     

Identification of hemocyanin as a novel non-cross-reactive allergen from the giant freshwater shrimp Macrobrachium rosenbergii

Scope : Sensitization to giant freshwater shrimp Macrobrachium rosenbergii (Mr) was recently reported. However, the allergens have yet to be identified. This study aimed to identify and characterize a novel allergen of Mr shrimp. Methods and results: Extracted proteins were separated and purified by anion and in some experiments, size‐exclusion chromatography. Serum IgE from shrimp allergic donors identified a candidate protein, which was characterized by LC‐MS/MS. The specificity of IgE binding was tested using immunoblotting and inhibition ELISA. The IgE‐binding profiles from 12 of 13 Mr allergic subjects that were pre‐incubated with an extract of Penaeus monodon showed residual binding to ～60–80 kDa proteins. The 60–80 kDa IgE‐bound proteins were fractionated in the flow‐through of anion chromatography showing a high IgE reactivity. Peptides identified by LC‐MS/MS showed the proteins closely match subunits of hemocyanin (Hcs). Purified Hcs from hemolymph markedly inhibited binding of IgE from sera of Mr allergic subjects to solid‐phased Mr proteins in inhibition ELISA. Conclusion: Hcs were identified as heat‐stable, non‐cross‐reactive, high‐molecular‐weight (MW) allergens from Mr shrimp. Since circulatory organs are not always removed during food preparation, high concentrations of Hcs may be present along with shrimp meat, which contains the known cross‐reactive tropomyosin protein.     

维生素B族复合TRP肽和SOD对焦虑性抑郁症C57BL/6小鼠行为学改善的影响

研究了维生素B族复合TRP肽和SOD对焦虑性抑郁症C57BL/6小鼠行为学、血清炎症因子水平的改善作用以及对脑部组织抗氧化活性的影响。维生素B族复合TRP肽和SOD(V_B3V_B6TRP肽SOD=21034;VBPS)高、中、低灌胃剂量分别为260,195,130mg/(kg·d)。研究表明,VBPS能够逆转焦虑性抑郁症小鼠的焦虑样和抑郁样行为、改善其体重增加缓慢的症状,VBPS高剂量组效果显著。VBPS能够降低血清炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-γ)水平和降低大脑组织丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量和SOD、CAT、NOS抗氧化酶的活性。此外,VBPS可诱导色氨酸—犬尿氨酸(TRP-KYN)代谢下调和犬尿氨酸—烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(KYN-NAD⁺)代谢上调。综上所述,与焦虑性抑郁症对照组小鼠相比,VBPS治疗的小鼠具有抗炎、抗氧化、逆转焦虑性抑郁症小鼠行为障碍和体重增加缓慢的作用,从而证明膳食补充VBPS具有显著的改善焦虑性抑郁症的作用。     

(-)-Secoisolariciresinol attenuates high-fat diet-induced obesity in C57BL/6 mice

Flaxseed lignan, secoisolariciresinol has been reported to possess health benefits. We previously synthesized each stereoisomer of secoisolariciresinol and found that (-)-secoisolariciresinol reduces lipid accumulation and induces adiponectin production in 3T3-L1 adipocytes. Here we show the effects of (-)-secoisolariciresinol on high-fat diet-induced obesity in C57BL/6 male mice. Oral administration of (-)-secoisolariciresinol for 28 consecutive days significantly suppressed the gain of body weight. Increased serum adiponectin level and decreased gene expression of fatty acid synthase and sterol regulatory element-binding protein-1c in liver, which are related to fatty acid synthesis, were observed in the mice orally administered with (-)-secoisolariciresinol. In addition, subcutaneous injection of (-)-secoisolariciresinol also significantly suppressed the gain of body weight. Serum leptin levels were significantly increased by treating with (-)-secoisolariciresinol or (-)-enterolactone. Subcutaneous injection of (-)-secoisolariciresinol, (-)-enterolactone, or (-)-enterodiol promoted gene expression of acyl-CoA oxidase, carnitine palmitoyl transferase-1, and peroxisome proliferator-activated receptor α, which are related to β-oxidation. Overall results suggest that (-)-secoisolariciresinol exerts a suppressive effect on the gain of body weight of mice fed a high-fat diet by inducing gene expression of adiponectin, resulting in the altered expression of various genes related to the synthesis and β-oxidation of fatty acids.     

Red pepper seed water extract suppresses high-fat diet-induced obesity in C57BL/6 mice

Food Science and Biotechnology - In this study, the protective effect of red pepper seed water extract (RPS) against the obesity in high fat diet (HFD)-fed mice was investigated (HFD control group,...