细点圆趾蟹含肉下脚料酶解物中抗氧化肽的分离与鉴定

目的：从细点圆趾蟹含肉下脚料的胰蛋白酶酶解产物中分离鉴定具有高ABTS+·清除率的抗氧化肽。方法：通过超滤系统、Sephadex G-15和半制备型RP-HPLC,从细点圆趾蟹含肉下脚料酶解产物中分离制备抗氧化肽,用超高效液相色谱-电喷雾飞行时间串联质谱（UPLC-ESI-TOF-MS/MS）对肽的结构进行表征,再通过合成肽对其结构与ABTS+·清除率进行验证。结果：获得2个ABTS+·清除能力较强的抗氧化肽,其氨基酸序列分别为Tyr-Glu-Gly（YEG）和Tyr-Glu（YE）。合成肽YEG和YE的分子质量分别为367.35 u和310.30 u,纯度分别为98.52%和98.04%,清除ABTS+·的IC50值分别为0.456 mg/mL和0.184 mg/mL,且YE的IC50值比L-还原型谷胱甘肽高30.30%。结论：细点圆趾蟹含肉下脚料的胰蛋白酶酶解产物含有抗氧化活性的肽类成分,为其抗氧化肽的开发提供理论依据。     

鲜活细点圆趾蟹中组胺菌的分离鉴定与生长特性

利用HBI培养基结合薄层层析法对活细点圆趾蟹腮条和内脏中的组胺菌进行筛选,并通过高效液相色谱法对组胺菌产组胺能力进行测定,再利用16SrDNA基因测序对其进行分子鉴定。同时,研究了温度、初始pH值、NaCl含量对组胺菌生长和组胺生成量的影响,以及壳低聚糖(COS)对组胺菌生长的抑制效果。结果显示,从细点圆趾蟹的腮条中分离获得1株组胺菌,经鉴定命名为Enterobacter aerogenes OP-G2,其组胺生成量为(46.96±1.94)mg/L(30℃培养48h)。低温(4℃)和/或高NaCl含量(≥10%)能有效控制E.aerogenes OP-G2菌株的生长和组胺的生成量,且对菌株组胺生成量的抑制率可高达92%以上。另外,当COS浓度≥0.5g/100mL时,对E.aerogenes OP-G2菌株抑菌率均在30.58%以上,且当pH 6.0时,1.0g/100mL浓度的COS对E.aerogenes OP-G2菌株抑菌率高达47.57%。     

响应曲面法优化复合酶水解河蟹工艺

研究木瓜蛋白酶和复合风味酶水解河蟹的工艺条件。在单因素试验基础上,通过SAS数据统计分析软件,运用四因素三水平的响应面设计方法,建立复合酶解蟹肉蛋白的二次多项数学模型,以水解度为响应值作响应面和等高线。结果表明：最适水解工艺为pH5、温度55℃、木瓜蛋白酶加酶量为5500U的条件下水解1.5h后再加入2LAPU的风味蛋白酶水解4.5h(酶解时间6h),此时的水解度预测值为31.19%、实测值30.08%,相对偏差为3.69%。最后,探索将水解液初步制成海鲜调味品。在上述条件下模拟出的酶解液鲜味明显且最后成品风味浓郁、色泽鲜黄、便于调味。     

东海细点圆趾蟹含肉率及肌肉营养价值的分析

对细点圆趾蟹的含肉率,以及利用常规肌肉营养测试方法对东海细点圆趾蟹的肌肉营养成分进行测定,结果表明:细点圆趾蟹的含肉率为23.67%,蟹肌肉粗蛋白质、粗脂肪、水分、灰分的含量分别为17.94%,1.37%,73.25%,4.7%。分析了肌肉蛋白质中17种常见氨基酸含量(色氨酸未测),其氨基酸总量为16.43%,其中必需氨基酸占氨基酸总量的38%,鲜味氨基酸占氨基酸总量的36%,其构成比例符合联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)标准,并且含有丰富的钾、钙、镁、铁等矿质元素。综合数据表明,细点圆趾蟹具有较高的营养价值,适合进一步开发利用。     

罗非鱼下脚料酶解工艺的响应面法优化

采用AS．1398中性蛋白酶对罗非鱼下脚料进行水解，利用响应曲面分析法对酶解工艺条件进行优化，最终确定AS.1398中性蛋白酶水解罗非鱼下脚料的最佳条件为：酶浓度=0．56％，温度=53℃，pH=7．1，水解时间t=4h，液固比为3：1，此时水解度为36.2％。     

细点圆趾蟹蒸煮液β-环糊精包合及真空浓缩技术研究

目的:以细点圆趾蟹蒸煮液为原料,研究蒸煮液β-环糊精包合及真空浓缩技术。方法:利用电子鼻技术确定细点园趾蟹蒸煮液浓缩前β-环糊精的最佳添加量,提高蒸煮液挥发性物质在真空浓缩过程中的保留量。在单因素试验基础上,采用正交试验法优化真空浓缩工艺,得到较佳的真空浓缩工艺参数。结果:β-环糊精最佳添加量为0.7%;真空浓缩工艺条件是:浓缩温度50℃,浓缩时间110 min,相对真空度0.075 MPa。结论:在最佳工艺条件下所得蟹浓缩汁,氨基酸态氮含量0.92 g/100 m L,具有浓郁的蟹香味。     

响应面法优化玉米黄粉蛋白水解工艺

采用碱性蛋白酶制备高水解度的玉米蛋白酶解物,以水解度为考察指标,设计单因素及响应面实验,优化其水解工艺条件。实验结果表明:最佳水解工艺条件为底物浓度23 g/L,加酶量(E/S)3.5%,酶解温度49.7℃,酶解时间4 h,p H为9.0,在此条件下,水解度可达到27.18%。      

响应面法优化微波辅助桃胶水解工艺研究

将微波反应场引入到原桃胶的弱碱性水解工艺,借助于微波对反应场中反应物分子之间振动的加速达到最佳水解效果,并采用响应面法确定了其最佳水解条件。以水解液黏度为考察指标,首先使用单因素法探讨了微波时间、功率、反应pH和料液比对水解效果的影响。在此基础上,利用响应面法(Response Surface Methodology,RSM)优化了桃胶微波辅助水解工艺,因原桃胶分子难以溶胀,故而将其磨碎过筛获得一定目数的桃胶颗粒,进而对其颗粒进行水解处理,实验结果显示:颗粒度越细,其比表面积越大,因此吸水性增加;微波时间2h、微波功率200W、pH12和料液比1∶20(g/mL)时,理论最大黏度为223.2mPa·s。按照响应面法拟合得到的最优微波辅助水解工艺,验证实验得到水解液黏度为224.7mPa·s,与预测值接近,说明本模型预测桃胶多糖水解液的黏度可靠,具有可行性。     

电子束辐照对细点圆趾蟹肉营养及滋味成分的影响

以细点圆趾蟹蟹肉为材料,研究电子束辐照对蟹肉营养和滋味成分的影响,为电子束辐照技术在水产品加工中的应用提供依据。结果表明：辐照处理后7 kGy及以上剂量组蟹肉总氨基酸和非必需氨基酸含量下降比较明显;辐照没有改变蟹肉的第1和第2限制性氨基酸种类,各组蟹肉必需氨基酸与总氨基酸之比和必需氨基酸与非必需氨基酸之比均分别超过40%和60%,为质量较好的蛋白质;脂肪酸分析结果显示,电子束辐照对蟹肉饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸总量均无显著影响;随着辐照剂量增加,蟹肉中的游离氨基酸总量呈下降趋势,但呈鲜、甜鲜味的游离氨基酸含量有所增加,说明适当的辐照剂量对蟹肉氨基酸的呈味有改善作用;蟹肉中的主要呈味核苷酸是5’-肌苷酸二钠,辐照后蟹肉5’-腺苷酸和5’-肌苷酸二钠含量有所上升,而5’-鸟苷酸二钠含量有所下降,辐照对蟹肉鲜味有提升作用;结合鲜味氨基酸和呈味核苷酸的鲜味协同效应,各辐照组味精当量值均高于对照组,其中1 kGy组蟹肉的味精当量值最高,达到17.92%。综合蟹肉氨基酸、脂肪酸组成和滋味成分的变化规律分析,认为1～9 kGy剂量电子束辐照对蟹肉营养和滋味没有明显的负面影响,可用于对蟹肉进行前处理。     

响应面法优化淡水鱼内脏酶法水解工艺研究

通过对5种常见淡水鱼内脏基本成分及氨基酸组成进行分析比较,选择鲢鱼内脏为研究对象,并采用酶法对其进行水解,以提油率、蛋白回收率、水解度(DH)为指标,确定水解用酶及单因素试验各因素的优化范围。在单因素试验基础上,以pH、加酶量、温度为影响因素,提油率为响应值,响应面法优化得到鲢鱼内脏酶法水解最优工艺条件为:选用胰蛋白酶进行水解,pH 7.94,加酶量1.1%,温度47.24℃,时间2 h,料水比1∶1。在最优工艺条件下,提油率为91.24%,蛋白回收率为83.61%,水解度为53.57%。     

响应面法优化酶解制备核桃多肽工艺

以高蛋白核桃粉为原料,采用酶解法制备核桃多肽。在单因素实验基础上,根据Box-Behnken中心组合实验设计原理,以多肽质量浓度和水解度为响应值,研究p H、温度、加酶量和时间对其影响,在此基础上将酶解液通过超滤系统分离得到不同分子量多肽,并测定不同分子量多肽的抗氧化活性。结果表明:料液比1∶20 g/m L磨浆时蛋白质溶出较充分,碱性和木瓜蛋白酶按1∶1复配,风味蛋白酶添加量2000 U/g辅助酶解时水解效果较好,酶解法提取核桃多肽最优工艺:p H 7.10,温度50℃,加酶量8000 U/g,时间3.0 h,该条件下多肽质量浓度为10.01 mg/m L,水解度为11.45%,接近理论值。经超滤分离后得到≤5、5¹0、10³0和≥30 k Da四种分子量多肽,不同分子量多肽都具有一定的抗氧化活性,并且≤5 k Da多肽的还原力(IC₅₀=5.47 mg/m L)、DPPH·清除能力(IC₅₀=1.03 mg/m L)、·OH清除能力(IC₅₀=5.02 mg/m L)、O-2·清除能力(IC₅₀=0.68 mg/m L)和总抗氧化能力（14.18 U/m L）均高于其它三种多肽。本研究为核桃产品的深加工和开发提供了一定的理论指导。      

响应面设计法优化花生分离蛋白酶解条件的研究

以花生粕为原料,利用响应面设计对其花生分离蛋白的酶解条件进行了优化.通过对花生分离蛋白水解的最佳用酶进行了筛选,确定以碱性蛋白酶Alcalase水解效果最好.在单因素实验基础上,以水解度为指标,设计了响应面分析方案,通过数学推导及实验分析,得出Alcalase可控酶解花生分离蛋白的动力学模型及相关参数:Alcalase水解花生分离蛋白的最优工艺参数为反应温度53.11℃、酶浓度为135.94μL/g、pH为8.05、预测蛋白水解度为24.15％,实际结果与拟合方程预测结果(24.57％)基本吻合.     

响应面设计法优化花生分离蛋白酶解条件的研究

以花生粕为原料,利用响应面设计对其花生分离蛋白的酶解条件进行了优化。通过对花生分离蛋白水解的最佳用酶进行了筛选,确定以碱性蛋白酶Alcalase水解效果最好。在单因素实验基础上,以水解度为指标,设计了响应面分析方案,通过数学推导及实验分析,得出Alcalase可控酶解花生分离蛋白的动力学模型及相关参数:Alcalase水解花生分离蛋白的最优工艺参数为反应温度53.11℃、酶浓度为135.94μL/g、pH为8.05、预测蛋白水解度为24.15%,实际结果与拟合方程预测结果(24.57%)基本吻合。      

响应面法优化西藏核桃蛋白酶解工艺

目的研究西藏核桃蛋白酶解的最佳蛋白酶及酶解条件。方法以水解度为指标,筛选最佳蛋白酶,并在单因素试验基础上,通过Box-Benhnken试验设计及响应面分析法确定西藏核桃蛋白酶解最佳条件。结果碱性蛋白酶为最佳蛋白酶,最佳酶解条件为:加酶量3.09%,酶解温度50.48℃,pH为7.46,液料比为4.88:1(m L/g),酶解时间为3 h。测得西藏核桃蛋白水解度为20.40%。结论经响应面分析法优化酶解条件后,实际值水解值与理论值间相对误差较小,本研究为西藏核桃酶解生物活性肽的功能性研究提供基础。     

响应面法优化组成型壳聚糖酶酶解条件

以壳聚糖为原料,通过蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）发酵所得壳聚糖酶水解壳聚糖产生壳寡糖,对酶解pH、温度、底物浓度和时间分别进行单因素试验,并在此基础上,通过响应面法研究这4种因素对壳寡糖产量的影响,优化酶解条件。结果表明,壳聚糖酶酶解的最佳条件为pH值5.6,酶解温度53 ℃,壳聚糖质量分数2.09%,酶解时间157 min。在该优化条件下,壳寡糖的浓度为35.73 μmol/mL,与模型预测值35.476 μmol/mL接近,则该模型可用于优化壳聚糖酶酶解条件。     

响应面法优化猕猴桃皮渣酶解取汁工艺

以猕猴桃皮渣为原料,研究了果胶酶对皮渣出汁提高率的影响。在单因素分析的基础上,采用Box-Behnken中心组合实验,建立二次回归方程模型,模型相关系数R2=0.9636,对模型进行方差分析,确定了猕猴桃皮渣的最佳酶解工艺参数:酶解温度48.98℃、p H3.42、酶解时间3.32h、果胶酶用量0.26mg/g,在此条件下,皮渣的实际出汁提高率为（44.21±1.22）%,与理论值45.73%的相对误差为2.46%。      

响应面法优化美味牛肝菌蛋白质的酶解工艺

为提高美味牛肝菌的食用价值,在单因素实验的基础上,选取酶解时间、酶解温度和料液比为影响因素,以美味牛肝菌蛋白质的水解度作为响应值,通过三因素三水平的Box-Behnken响应面分析法优化美味牛肝菌酶解条件。结果表明,最佳工艺条件为酶解时间5 h、酶解温度50℃、料液比1∶36,在此条件下,蛋白质水解度达到47.37%。水解液富含多种营养物质,可进一步加工为美味牛肝菌调味品。      

响应面法优化波纹巴非蛤肌肉蛋白酶解工艺条件

波纹巴非蛤广泛分布于我国沿海地区,是一种高蛋白低脂肪的海洋蛋白资源。本研究以水解度、蛋白质回收率和感官评价为指标,选取动物水解蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶,采用单酶酶解和复合酶酶解波纹巴非蛤肌肉蛋白,综合指标筛选出最佳酶种类及酶解方法。并且以时间,液料比,加酶量为单因素,采用响应面优化酶解条件,确定最佳酶解工艺。研究结果表明:动物蛋白酶和风味蛋白酶按1∶1比例同时添加,酶解3 h后,酶解产物的水解度和蛋白质回收率分别达到22.29%±1.02%和79.95%±0.51%,感官评价总分为15.6,与其他酶解方式相比较好。通过单因素以及响应面优化,得到最佳酶解条件:加酶量1700 U/g,酶解时间3.5 h,液料比为3.4∶1。在此条件下,水解度为30.04%±0.64%,蛋白质回收率为81.46%±0.70%,与预测值水解度30.54%±0.137%和蛋白质回收率82.62%±0.092%无显著性差异(p>0.05)。感官评价综合得分为15.8,风味较好,研究结果为波纹巴非蛤肌肉蛋白的精深加工利用提供参考。      

响应面法优化齐口裂腹鱼肉蛋白酶解工艺的研究

以齐口裂腹鱼肉为原料,采用不同蛋白酶水解鱼肉蛋白,筛选出最佳水解用酶为动物蛋白水解酶。在单因素实验基础上,根据Box-Benhnken中心组合实验设计原理,选择对实验结果影响较大的四个因素（水解时间、水解温度、加酶量、料液比）做响应面优化实验,以齐口裂腹鱼肉的水解度为响应值建立数学模型,依据回归分析各因素的影响和交互作用,得出齐口裂腹鱼肉水解最佳工艺条件为:水解时间为4.5h,水解温度为54℃,加酶量为5080U/g,料液比为1∶3.2（g/mL）,pH为8.0,在此条件下做验证实验,得到水解度为13.67%,与理论预测值13.33%相比,其相对误差约为2.55%。响应面法优化齐口裂腹鱼肉水解工艺能为实践提供一定的指导意义。