高效液相色谱法测定汉中茶叶中茶氨酸含量

目的以汉中市不同县区主栽茶叶品种鲜叶为试验材料,系统分析汉中茶区茶叶中茶氨酸的含量,并对其进行分析评价。方法采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC),Diamonsil C18(46 mm×250 mm,5μm);以乙酸铵和乙酸铵、甲醇、乙腈的混合溶液(乙酸铵:甲醇:乙腈=1:2:2,V:V:V)作为流动相,流速:1 mL/min;柱温:25℃;检测波长为338 nm;对不同地区不同品种的茶叶中的茶氨酸的含量进行测定。结果方法的精密度高和重复性好。加标回收率在87.85%~96.95%之间,相对标准偏差为2.25%。汉中茶叶茶氨酸含量总体较高,均值可达3.55 g/100 g。宁强县种植的龙井长叶茶氨酸含量最高,为5.3 g/100 g,远高于群体种茶氨酸最高值4.72 g/100 g。结论就茶氨酸而言,不同品种茶树的差异较大,且新引进品种优于群体种。     

茶氨酸的HPLC快速检测

建立了未衍生化高效液相色谱法(HPLC)快速检测茶叶及绿茶提取物中茶氨酸含量的方法。采用Zorbax SB-AQ色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈:0.1%磷酸溶液=5:95(体积比)为流动相,流速1mL/m in,进样量10μL,柱温25℃,检测波长196nm。结果表明茶氨酸在0.02mg/mL 0.20 mg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数r=0.9998,加样回收率为98.59%(n=5)。本方法检测快速,定量准确,可用于茶叶及绿茶提取物中茶氨酸含量的测定。     

UPLC-MS/MS测定代用茶中98种非法添加化学药物

目的 建立一种基于UPLC-MS/MS平台同时测定代用茶中98种非法添加化学物质的筛查方法。方法 样品采用50%甲醇溶液超声提取,以ACQUITY~?HSS T₃(2.1 mm×100 mm,1.8μm)为色谱柱,以乙腈(含0.1%甲酸)-10 mmol/L甲酸铵溶液(含0.1%甲酸)作为流动相,采用ESI离子源正负离子模式进行多反应监测(MRM)扫描,通过保留时间、质谱母离子及碎片离子确定非法添加的化学物质。结果 所测的98种化合物均在相应的线性范围内呈现良好的线性关系(r≥0.995),在1.0,5.0,25.0 ng/ml 3个浓度水平上回收率在60.1%～125.8%之间,检出限为0.0031～0.3432μg/g,定量限为0.0102～1.1440μg/g,分析时间为35 min。结论 该方法简捷、高效,能较好地针对代用茶中风险较高的98种非法添加化合物进行筛查,为代用茶的监管提供了有力的技术支撑。     

高效液相色谱分析乳清蛋白方法研究

建立测定乳清蛋白中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白含量的高效液相色谱分析方法,采用Agilent的ZORBOX Eclipse XDB-C8色谱柱(150 mm×4.6 mm),流动相A为10%乙腈中含0.1%三氟乙酸,流动相B为90%乙腈中含0.1%三氟乙酸。采用梯度洗脱,流速为0.25 mL/min,二极管阵列检测器,检测波长214 nm,柱温40℃。外标法定量,α-La和β-Lg两种组分线性关系良好,相关系数分别为0.993 1和0.990 9,检测限为3μg/mL、8μg/mL。     

两种高效液相色谱法测定茶叶中茶氨酸含量的比较

选取白茶为原料,比较了2种HPLC方法测定茶叶中茶氨酸含量,即不经衍生的三氟乙酸洗脱法和经邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生的国标法(GB/T 23193-2008)在茶氨酸含量测定上的数值差异。结果显示:以Wa-ters AccQ.Tag化学试剂包的测定结果作为参照,三氟乙酸洗脱法测定结果与AccQ-Tag试剂盒法的测定结果比较接近,而GB/T 23193-2008测定结果与AccQ-Tag试剂盒测定结果在5%的显著水平上差异显著。在此基础上,对GB/T 23193-2008法中的OPA衍生化反应时间进行了实验论证,发现在338 nm检测波长下,衍生化产物在衍生后15～20 min内最稳定且具有最大信号响应值。     

柱后补偿液相色谱与电雾式检测器结合测定茶氨酸含量

建立液相色谱柱后补偿与电雾式检测器(CAD)结合的方法测定了茶叶粗提物中的茶氨酸.结果表明:茶氨酸线性回归方程为Y=0.1412X-0.0614,相关系数r=0.9998,线性范围为1.50～50.00μg/mL,方法最低检出限为0.50μg/mL(以S/N =3计),定量限为1.50μh/mL(以S/N=10计);空白样品加标回收率为97.62％ ～ 112.13％;重现性实验表明(n=5),茶氨酸的保留时间差值小于0.2min,峰面积的相对标准偏差(RSD值)为0.62％,重现性较好.该方法重现性好、灵敏度高,操作简单,适用于茶叶提取物中茶氨酸的检测.     

同位素内标法—超高效液相色谱/串联质谱法测定六堡茶中苦参碱和氧化苦参碱残留量

目的:以广西六堡茶为例,建立超高效液相色谱—质谱/质谱(UPLC-MS/MS)分析方法测定苦参碱和氧化苦参碱残留量。方法:样品经乙腈水溶液(80%乙腈+0.2%氨水)超声提取,流动相为0.1%甲酸—水和0.1%甲酸—甲醇溶液,梯度洗脱,内标法定量。结果:苦参碱和氧化苦参碱在0.1～80.0 ng/mL质量浓度范围内呈线性,相关系数均>0.999 6,检出限均为1.0μg/kg,定量限均为3.0μg/kg,满足茶叶中苦参碱和氧化苦参碱残留量的监管判定要求。通过加标验证,回收率均为92.0%～104.7%,相对标准偏差(RSD)均<5.4%。结论:试验方法结合净化管净化(147.7 mg PSA,15.1 mg GCB,887.2 mg硫酸镁),以Kinetex~? 2.6μm Biphenyl 100?色谱柱(100 mm×3.0 mm)分离,解决了苦参碱和氧化苦参碱提取回收率低、前处理复杂的问题,使苦参碱和氧化苦参碱出峰良好,抗干扰性强。     

响应曲面法优化夏秋茶中茶多酚与茶氨酸的提取工艺

以夏秋茶为原料,利用热水浸提同时提取茶多酚与茶氨酸,并利用响应曲面法进行试验设计及工艺参数优化。结果表明:热水提取夏秋茶中茶多酚的最佳工艺条件为提取温度96.12℃、提取时间40.32min、液料比15.91:1(mL/g);热水提取茶氨酸的最佳工艺条件为提取温度98.55℃、提取时间40.97min、液料比12.61:1(mL/g);提取物抗氧化活性(IC50值)最强的工艺条件为提取温度96.34℃、提取时间40.27min、液料比16.09:1(mL/g)。在96℃、40min和16:1(mL/g)的提取条件下,茶多酚与茶氨酸的产率分别是其最优提取条件下产率的99.99%和96.68%。该方法准确、可靠,可用于夏秋茶中茶多酚和茶氨酸的同时提取。     

不同来源的苦荞茶中4种黄酮的含量测定

采用HPLC法同时测定不同来源的苦荞茶中芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素和山柰酚四种成分含量,并比较差异。应用PLATISIL ODS(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长为355 nm,流速为1.0 m L/min,柱温为30℃。结果,不同来源的苦荞茶中,4种黄酮类成分含量差别很大。以果实制作的苦荞茶,芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷的含量明显高于以皮层或全株制作的苦荞茶,而后者的槲皮素、山柰酚含量又明显高于前者。结果提示,以果实制作的苦荞茶含黄酮苷较多,更适宜冲饮。     

柱前衍生法测定茶叶中L-茶氨酸的含量

本文研究了柱前衍生测定茶叶中L-茶氨酸含量的方法。茶叶中的L-茶氨酸用热水提取后,经2,4-二硝基氟苯衍生后上高效液相色谱法测定。色谱条件为:色谱柱(Kromasil C18柱4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈︰磷酸盐溶液(pH=6.5)=15︰85梯度洗脱;检测波长:360 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:35℃;进样:5μL。本方法检出限4 mg/kg,在1.0~50.0μg/mL呈现良好的线性关系(r=0.999 9),衍生后的样品室温25℃放置6天内稳定,重现性试验相对标准偏差0.16%(n=6),回收率为96.4%~102.2%。本高效液相色谱法可以准确地测定茶叶中L-茶氨酸的含量。