珠母贝糖胺聚糖抗肿瘤作用初步研究

目的:初步探讨珠母贝糖胺聚糖抗肿瘤作用。方法:采用MTT法检测珠母贝糖胺聚糖对人宫颈癌Hela细胞、小鼠白血病L1210细胞和人慢性粒细胞白血病K562细胞生长的抑制作用。采用动物体内模型检测马氏珠母贝糖胺聚糖对荷L1210小鼠生命延长率的影响。结果:珠母贝糖胺聚糖PGI、PGII在25¹00μg·mL-1浓度范围内对三种肿瘤细胞有显著抑制作用。在100μg·mL-1时PGI、PGII对小鼠白血病L1210细胞作用最强,抑制率分别达到48.2%与40.4%;PGII与抗癌药物（5-Fu、DDP）合用时对人宫颈癌Hela细胞、小鼠白血病L1210细胞有增敏作用;珠母贝糖胺聚糖具有延长荷L1210小鼠生命的作用,其中100mg·kg-1剂量组的生命延长率达19.3%。      

响应面法优化合浦珠母贝糖胺聚糖提取工艺

以合浦珠母贝全脏器为原材料,经解冻匀浆和热水浸提后,采用枯草杆菌中性蛋白酶和胰蛋白酶双酶酶解,sevage法除蛋白2次,清液醇沉得糖胺聚糖粗制品(GAG),粗制品经DEAE-52离子交换柱纯化后得精制品。在单因素试验基础上,以粗制品得率与糖胺聚糖含量的乘积Y/(×10-4)为响应值,加酶量、液料比、酶解时间为影响因子,利用响应面试验分析法优化GAG的粗提工艺,得最佳提取工艺:加酶量为1.14%(枯草杆菌中性蛋白酶与胰酶质量的比为7∶8);液料比为3∶1(m L∶g)酶解时间为4.1 h。在此条件下,糖胺聚糖粗制品得率为0.518%,糖胺聚糖含量为10.9%,经DEAE-52柱纯化后的糖胺聚糖含量为89%。     

王浆酸冻干粉的安全性毒理学评价

研究王浆酸冻干粉的食用安全性,为促进其合理开发利用提供科学依据。根据《保健食品检验与评价技术规范》对王浆酸冻干粉进行急性经口毒性试验,遗传毒性试验(Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验)和大鼠30 d喂养试验对王浆酸冻干粉的食用安全性进行毒理学评价。王浆酸冻干粉对雌、雄小鼠的急性经口LD_(50)20 mg/kg.bw;Ames试验、小鼠骨髓微核试验和小鼠精子畸形试验3项遗传毒性试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养实验中,实验动物生长情况良好,血液学检查结果、生化学检查结果、主要脏体比及组织学检查结果与对照组相比,均无明显差异(p0.05)。病理组织学检查未发现王浆酸对大鼠主要脏器产生组织结构的改变。王浆酸冻干粉无毒,无遗传毒性及亚急性毒性作用,具有较高的食用安全性。     

合浦珠母贝糖胺聚糖的分离纯化及理化性质分析

研究合浦珠母贝糖胺聚糖粗品经分离纯化得到的精制品的理化性质,通过琼脂糖凝胶电泳鉴定样品分离情况,并对样品进行红外分析。经枯草杆菌蛋白酶与胰蛋白酶双酶酶解提取糖胺聚糖粗制品后,将粗制品利用DEAE-52离子交换柱进行纯化,纯化时分别用0.5 mol/L Na Ac（p H=6.0）和1.5 mol/L Na Cl进行洗脱,得到精制品GAG₁和GAG₂。利用苯酚-硫酸法、Bradford法、明胶-氯化钡法、Orcinol法、Wagner法、红外光谱法分析GAG₁和GAG₂的理化性质。通过各实验结果,可以初步猜测GAG₁为肝素钠,GAG₂为硫酸软骨素。      

响应面法优化合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片的制备工艺

以合浦珠母贝糖胺聚糖为主料,甘露醇、微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素、硬脂酸镁、乳糖等为辅料,利用湿法制粒的方法制备合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片产品。采用单因素实验分别研究矫味剂、填充剂、粘合剂、润滑剂对咀嚼片感官品质的影响,结合响应面试验,以感官分值为指标,研究配方中影响较大的组分对咀嚼片感官品质的影响,结合实际生产筛选出最优配方。结果表明,合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片的最优配方(以质量百分比计)为:糖胺聚糖17%,甘露醇25%,微晶纤维素44%,羟丙基甲基纤维素2%、硬脂酸镁1%,其余为乳糖;质量指标检测结果均符合《中国药典》和营养健康食品的相关要求;急性经口毒性实验结果显示,咀嚼片对SD大鼠经口最大耐受剂量(MTD)高于15 g/kg,毒性分级为无毒;该制备工艺稳定可靠,制备方法简单易行。     

珠母贝糖胺聚糖PG-Ⅱ诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的研究

目的:探讨珠母贝糖胺聚糖PG-II诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡,从而抑制其增殖。方法:MTT法检测珠母贝糖胺聚糖PG-II对人宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用。倒置显微镜、荧光显微镜观察HeLa细胞凋亡的形态学特征,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂片段,流式细胞仪定量检测细胞凋亡的百分率及对其细胞周期的影响。结果:MTT法显示PG-II可抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖。倒置显微镜和荧光显微镜形态学观察可见HeLa细胞凋亡的形态明显变化。琼脂糖凝胶电泳显示PG-II作用HeLa细胞24h,出现分子质量为200bp到2000bp不等的细胞凋亡的特征性DNA梯状条带。流式细胞术测试表明:PG-II可使HeLa细胞阻滞于G1期,剂量为100mg/L作用24h阻滞作用最明显,凋亡指数为42.6%。结论:珠母贝糖胺聚糖PG-II可能通过诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡而抑制其增殖。     

大豆肽胶囊的安全性毒理学评价

为探讨大豆肽胶囊的安全性,根据我国卫生部《保健食品检验与评价技术规范(2003年版)》进行了大豆肽胶囊的急性毒性试验、遗传毒性试验和30天喂养试验。结果表明:大豆肽胶囊对雌雄性小鼠急性经口毒性试验的LD50均大于20 g/kg·BW,属无毒级。遗传毒性试验中的小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸变试验、小鼠Ames试验结果均为阴性。30 d喂养试验结果表明:采用受试样品1.25、2.5、5.0 g/kg·BW剂量分别对大鼠连续喂养30 d,大鼠未见中毒症状和死亡,各剂量组大鼠体重、摄食量、增重、食物利用率、脏器绝对重量、脏体比、血液学、生化学及组织病理学等指标与对照组比较,均无显著性差异(P0.05)。通过以上实验可以判定大豆肽胶囊无任何毒副作用。     

茶黄素的毒理学评价研究

目的：对酶促合成茶黄素的毒理学安全性进行系统评价，为其应用安全提供科学依据。方法：通过急性经口毒性试验、Ames试验、骨髓细胞微核试验、精子畸形试验和大鼠30 d喂养试验等毒理学评价试验，评估茶黄素的生物安全性。结果：茶黄素对小鼠经口急性毒性的LD₅₀值介于2.33～3.16 g/kg·BW。遗传毒性试验结果未观察到受试物引起致突变作用，大鼠30天喂养试验发现，大鼠体重、进食量、食物利用率以及血液学指标、末期血生化指标(不含血糖)、脏体比等与对照组相比均无显著性差异(P> 0.05)。脏器组织病理学等正常，各剂量组均未见引起大鼠中毒性损伤改变。结论：酶促合成茶黄素急性毒性分级属低毒级，无遗传毒性，在该试验研究剂量和条件下未见明显毒性作用。     

粉葛氨糖复方毒理学安全性评价

按照保健食品安全性毒理学评价程序,采用急性毒性试验、遗传毒性试验（Ames试验、小鼠骨髓微核试验、小鼠精子畸形试验）和30 d喂养试验进行粉葛氨糖复方的安全性评价。结果粉葛氨糖复方对雌、雄昆明种小鼠的最大耐受剂量（MTD）均大于20.0 g/(kg?bw);三项遗传毒性试验（Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验）结果均为阴性;30 d喂养试验未见大鼠的生长发育、血液学、生化及组织病理学有异常变化。粉葛氨糖复方急性毒性分级属无毒级、无遗传毒性,在本实验剂量范围内,属安全性保健食品。     

马氏珠母贝综合利用的研究进展

马氏珠母贝是我国南方沿海地区人工养殖生产珍珠的主要贝类,目前已在养殖生态、插核育珠、营养成分和生物活性等方面对其进行了广泛的研究。文章综述马氏珠母贝所育珍珠、贝壳和贝肉营养成分、生物活性分析及其应用等方面的研究进展,为马氏珠母贝的进一步研究利用提供理论依据。     

珠母贝糖蛋白分离提取工艺条件优化

采用单因素实验与正交实验,研究珠母贝全脏器中糖蛋白的分离提取工艺条件.结果表明:珠母贝全脏器中糖蛋白的最佳分离提取条件为:以1.0 mol/L NaCl溶液为浸提剂,料液比为1:10,浸提温度为65 ℃,浸提时间为60 min,提取液经透析浓缩、醇沉后得到珠母贝糖蛋白,得率为3.37%,总糖和总蛋白含量分别为7.49%和25.33%.     

正常马氏贝与黑壳病马氏贝的氨基酸及其美拉德反应产物的对比分析

通过对正常马氏珠母贝和黑壳病马氏殊母贝的氨基酸及其美拉德反应产物的分析比较,黑壳病对马氏贝肉氨基酸的影响不大,方差分析的单尾概率值p=0.93>0.50.黑壳病对美拉德反应产物的影响很大,正常贝桩嘲恒0 19种物质,大部分为酯类.醇类和烷烃类,黑壳病贝检测到31种物质,大部分为烷烃类和醇类,酯类物质较少,且只有2种相同物质;正常贝中呈味物质相对含量占总物质的58.8l%,黑壳病贝呈味物质占18.26%.     

马氏珠母贝肉ACEIP分离及提取的初步研究

选用合适的蛋白酶对马氏珠母贝肉(Pinctada martensii)进行水解,水解液经过分离提取后,得到血管紧张素转换酶抑制肽(ACEIP)。2个较高 ACE 抑制活性的组分样品 A 和样品 B 的 IC_(50)分别为0．033mg/mL 和 0．041mg/mL。2个样品氨基酸含量最多的是 Phe,分别达到57．5%和53．2%,其相对分子量分别为1042和 256。     

马氏珠母贝酶法抽提物美拉德增香工艺研究

运用美拉德反应改良马氏珠母贝酶法抽提物的风味,以感官评定和美拉德反应程度为指标,采用单因素实验考察了还原糖种类及其配比、还原糖添加量、反应起始pH、反应时间和抽提物含水量对风味的影响;以单因素实验结果为依据,采用正交实验对美拉德反应条件进行了优化。结果表明:葡萄糖3%(w/v)、水分含量70%(w/w)、起始pH6.5条件下反应22min,可以得到头香天然圆润、贝类特征香气突出、体香浓郁丰满、尾香留香持久、整体香气协调统一的调味基料。     

黄芪茎叶的安全性毒理学评价

为评价黄芪茎叶的急性毒性、遗传毒性及亚慢性毒性,为黄芪茎叶安全应用提供实验依据,采用国家标准食品安全性毒理学评价程序和方法标准对黄芪茎叶进行急性经口毒性试验、三项遗传毒性试验及90 d亚慢性毒性试验研究。发现雌雄大小鼠急性经口LD50>250.00 g/kg BW,属实际无毒级。三项遗传毒性试验结果显示检测结果均为阴性,未见致突变作用。大鼠90 d经口毒性试验显示,试验期间各组动物生长发育良好,未见中毒表现和体征,大鼠眼部检查、体重、增重、进食量、食物利用率、血液学及血生化、尿常规、脏器重量及脏体比等指标均未见损害性影响,解剖及组织学观察也未见明显与试验因素有关的病理组织学变化,未观察到有害作用剂量为15.00 g/kg BW。结果表明黄芪茎叶在本条件剂量下安全无毒。     

胰酶酶解珍珠贝分离蛋白制备低苯丙氨酸寡肽制品

苯丙酮酸尿症(PKU)是一种常见的氨基酸代谢性疾病,低苯丙氨酸饮食对于PKU患者非常重要。本研究以珍珠产业副产物马氏珠母贝肉为原料,提取分离蛋白后,采用胰酶酶解、超滤分级及活性炭吸附分离技术制备低苯丙氨酸寡肽营养功能基料。研究结果显示:随着酶解时间的进行,酶解液中<5 ku的寡肽含量呈现先增加后减少趋势(p<0.05),酶解1 h时,酶解液中所含的寡肽含量最多;经过超滤分级后,>5 ku和<300 u的酶解液中仍存在一些寡肽残留,其中>5 ku组分中寡肽含量为10.43%,<300 u组分含量为24.52%,而300 u~5 ku组分中寡肽含量达到了68.38%;<300 u组分的苯丙氨酸含量最高达到9.52%,活性炭对芳香族氨基酸的吸附量均高于其他氨基酸,300 u~5 ku组分经过活性炭吸附后得到1.29%的低苯丙氨酸寡肽溶液。可以以此为基料开发辅助治疗苯丙酮尿症、吸收率高的低苯丙氨酸寡肽营养功能制品。      

Extracting bio-zinc and taurine from Pinctada martensii meat

Recently, intensive processing of marine resources has attracted considerable attention. In order to further utilize the byproducts of aquatic shellfish (Pinctada martensii meat) with high value, this study proposes a method of extracting zinc and taurine from P. martensii meat. Zinc was first extracted from P. martensii meat with an ultrasonic crusher, and then taurine was further extracted by ultrasonic-assisted water extraction from the remaining shellfish. After optimization, the biological zinc extraction rate reached 8.63%, and the taurine extraction rate reached 0.71%. Meanwhile, the parameters for cation exchange separation and taurine purification were optimized, in which the injection volume, pH value, and elution rate were set to 8.0 mL, 4.5, and 3.0 mL/min, respectively. Ultimately, the purity the extracted taurine reached 98.16%. This study provides a novel method for the extraction of biological zinc and taurine by deep processing of shellfish meat.