杜仲叶树脂分离纯化产物体外抗氧化活性研究

为了研究杜仲叶的体外抗氧化活性,杜仲叶粗提物被XDA-8 型大孔吸附树脂吸附后,依次用不同体积分数的乙醇溶液进行梯度洗脱,得到4 种分离纯化产物,测定了4 种产物对·OH、O2·及DPPH 自由基清除能力,同时测定了各产物中多酚和总黄酮的质量分数。结果表明：4 种产物均具有良好的清除·OH、O2·及DPPH 自由基能力,且对各自由基的清除能力呈量效关系;产物抗氧化活性与总黄酮和多酚成分有关,且多酚类物质起主导作用;收集不同乙醇体积分数的洗脱液可以得到不同成分含量的抗氧化剂。     

高效液相色谱(HPLC)结合电喷雾电离源-质谱(ESI-MS)鉴定杜仲叶功能组分

为纯化、鉴定杜仲叶功能组分,采用70%乙醇对杜仲叶进行超声波辅助水提。经大孔树脂NKA-Ⅱ、聚酰胺、Sephadex LH-20柱层析逐步分离纯化,从粗提物中得到4种组分。通过薄层色谱(TLC)、紫外光谱(UV)、高效液相色谱(HPLC)及电喷雾电离源-质谱(ESI-MS)对4种组分进行分析与鉴别,结果表明:从杜仲叶中分离纯化的活性物质,经鉴定主要为绿原酸(Ⅰ)、金丝桃苷或陆地锦苷(Ⅱ)、槲皮素-3-乙酰葡萄糖苷(Ⅲ)、槲皮素(Ⅳ),其中槲皮素-3-乙酰葡萄糖苷(Ⅲ)在相关文献中未见报道。     

大孔树脂纯化龙眼核多酚及其组分分析

对龙眼核多酚进行分离纯化,探究4种大孔树脂、解吸液乙醇的浓度和pH对龙眼核多酚的静态吸附和解吸效果的影响,采用高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱对大孔树脂纯化后的物质进行结构鉴定。结果表明AB-8是纯化龙眼核多酚的理想树脂,其静态吸附率和解吸率分别为51.36%和96.40%。当解吸液为70%乙醇、pH为4时,其静态解吸效果最好。在70%乙醇洗脱液中鉴定出13种主要化学成分,其中8种化学成分在龙眼核多酚中未见报道。     

沙棘黄酮的分离纯化及其抗运动性疲劳作用

为优化大孔树脂纯化沙棘果黄酮提取物的工艺条件,通过等温静态吸附与洗脱试验,筛选适宜的树脂类型,研究其吸附机制后,利用动态吸附与洗脱单因素实验优化沙棘果黄酮提取物的纯化工艺,并考察其体内抗疲劳功效。结果显示,D101大孔树脂吸附沙棘黄酮性能较好,且易于被乙醇洗脱,吸附量随初始浓度的增加而增大,随温度的升高而降低,吸附等温线符合Langmuir等温吸附模型,吸附动力学过程符合准一级动力学方程。最佳纯化工艺条件为:70 mL 3 mg/mL上样溶液(pH5.0),以1 mL/min流速上样后,采用160 mL 70%乙醇溶液,于1 mL/min流速洗脱,产物的黄酮含量由18.25%提高至59.07%,约为纯化前3.2倍。与空白对照相比,不同剂量的沙棘黄酮纯化产物可显著延长小鼠的运动时间(P<0.05),同时,中、高剂量的纯化产物有助于改善运动后体内的肝、肌糖原与乳酸的浓度水平和乳酸脱氢酶活力(P<0.01),从而具有较好缓解机体疲劳的作用,该研究可为沙棘果的开发提供参考。     

刺五加籽乙醇提取物对小鼠抗运动疲劳作用的影响

研究刺五加籽乙醇提取物对小鼠抗疲劳作用的影响。将40只小鼠随机分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。小鼠每天灌胃1次低、中、高剂量的刺五加籽乙醇提取物,每天2次游泳运动训练,为期7周后,测定小鼠的体重,肌糖原、肝糖原、血乳酸(LAC)、血尿素氮(BUN)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)活力。结果表明:与对照组相比,刺五加籽乙醇提取物对小鼠体重无影响,可增加小鼠游泳的力竭时间,增加体内肝糖原与肌糖原的水平,减少血乳酸(LAC)的影响,增加超氧化物歧化酶(SOD)与乳酸脱氢酶(LDH)的活力,降低血尿素氮(BUN)的含量,并且刺五加籽乙醇提取物剂量越高,效果越明显。说明刺五加籽乙醇提取物对机体抗疲劳作用有良好的功效。     

白茅根黄酮纯化工艺及抗运动疲劳作用研究

采用大孔树脂纯化白茅根黄酮提取物，并比较不同产物的抗运动疲劳活性。通过静态吸附-解吸试验筛选适宜的色谱柱型号后，采用单因素试验探讨大孔树脂纯化白茅根黄酮提取物的最佳工艺条件，并利用动物试验考察不同产物的抗运动疲劳活性。结果表明，AB-8型大孔树脂纯化白茅根黄酮的最佳条件为上样液浓度2.0 mg/mL、上样液pH 5.0、上样液体积60 mL、上样流速2.0 mL/min、洗脱液乙醇的体积分数70%、洗脱流速1.0 mL/min、洗脱液体积100 mL，所得产物中黄酮化合物的含量为（64.2±1.5）%，约为纯化前2.24倍。动物试验结果显示，中、高剂量的白茅根黄酮纯化产物可明显延长小鼠的力竭游泳时间，降低体内乳酸与尿素氮的生成量并增加肝、肌糖原储备量，同时显著改善体内超氧化物歧化酶与谷胱甘肽过氧化物酶的活力，从而可知纯化后的白茅根黄酮产物具有较好缓解运动疲劳的作用。     

大孔吸附树脂分离纯化槲寄生中黄酮的研究

目的：筛选出分离纯化槲寄生总黄酮的最佳树脂,并对影响分离纯化的因素进行研究,得到优化的纯化条件。方法：选择了四种大孔吸附树脂（AB-8、NKA-9、NKA-Ⅱ和D101）用来分离纯化槲寄生中的总黄酮,采用动态吸附-解吸方法,利用分光光度法测定总黄酮的含量,研究不同的大孔吸附树脂及其不同的工艺条件对总黄酮分离纯化的影响。结果：AB-8分离效果最好,其最佳工艺为上柱原液pH值4左右,上柱速度2BV/h,以40%乙醇为洗脱液控制洗脱液流速1BV/h,洗脱液用量为4BV。经AB-8纯化后,槲寄生产品中黄酮的纯度由12.16%提高到43.56%。结论：AB-8大孔树脂可以较好地分离纯化槲寄生黄酮。     

树脂法制备高含量茶多酚工艺研究

本文以多酚含量及多酚得率为指标,比较了8种树脂对茶叶提取液的吸附解吸效果,筛选出适合茶多酚分离纯化的树脂。在此基础上,以单因素实验的方法研究了水洗液用量、乙醇浓度及用量、供试液浓度和澄清度对产品中多酚含量以及多酚得率的影响。结果显示,CG-8为纯化茶多酚的最佳树脂,当茶多酚供试液浓度为10 mg/m L,水洗液(2BV)、70%乙醇(2.5BV)时,澄清度为70.90%左右时,得到的产品多酚含量为98%,得率为85.8%。该方法所得的产品多酚含量高,工艺绿色,符合生产要求。     

肉苁蓉总多酚纯化工艺及其抗运动性疲劳作用研究

为优化大孔树脂纯化肉苁蓉多酚提取物的工艺条件,通过静态吸附与洗脱试验筛选合适的大孔树脂型号,并研究其吸附等温与吸附动力学模型后,采取动态吸附与洗脱单因素实验确定最佳纯化工艺条件,同时进行动物的抗运动性疲劳研究。实验结果表明,HPD-400大孔树脂的吸附等温方程符合Langmuir模型,吸附量随温度升高而降低,且符合准二级动力学吸附过程。采用大孔树脂纯化肉苁蓉多酚提取物的最佳工艺条件为:配制体积60 mL,6 mg/mL上样溶液,以2 mL/min流速上样至HPD-400大孔树脂饱和吸附后,采用体积为180 mL,60%乙醇溶液,以1 mL/min流速洗脱,提取物中肉苁蓉多酚纯度由20.12%提高至42.63%。与空白对照组相比,不同剂量的肉苁蓉多酚纯化产物可显著延长小鼠游泳力竭时间(P<0.05,P<0.01),显著增加体内肝糖原、肌糖原含量与乳酸脱氢酶活力(P<0.05,P<0.01),并有极显著降低乳酸浓度水平(P<0.01),因此可较好地缓解机体疲劳,从而为肉苁蓉多酚化合物的后续开发利用提供参考。     

辣椒叶多酚纯化工艺研究

目的:建立并优化辣椒叶多酚的纯化工艺。方法:利用静态吸附与解吸附实验筛选出最适宜纯化辣椒叶多酚的大孔树脂,并利用单因素方法考察最优柱色谱条件。结果:HPD-100型大孔树脂具有较高的吸附率和解吸率,并确定其最优色谱条件为:树脂柱径高比1:4,样品多酚浓度在0.6～1.2mg/mL之间,吸附速率2BV/h,以5BV/h的流速水洗3BV,再用3BV70%乙醇洗脱,合并洗脱液真空干燥即得。结论:该工艺对辣椒叶提取物中多酚的纯化简单高效,纯化后产物中多酚含量自4%提高到68%。      

月桂酰基谷氨酸钠辅助微波萃取杜仲叶总多酚及提取物活性研究

摘要： 目的 优化氨基酸表面活性剂月桂酰基谷氨酸钠(lauroyl glutamate sodium, LGS)辅助微波萃取杜仲叶总多酚的提取工艺,并比较不同提取工艺得到的提取物(水提物、LGS水提物、醇提物)的体外抗氧化能力及对酪氨酸酶的作用。方法 采用单因素试验结合响应面法,以总多酚得率为评价指标,对杜仲叶LGS辅助微波萃取总多酚进行工艺优化;采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)对不同工艺得到的提取物进行活性成分对比分析,并对不同提取物的抗氧化活性及对酪氨酸酶的作用进行比较。结果 杜仲叶LGS辅助微波萃取的最佳工艺为：LGS浓度2.4×10-2 mol/L,料液比1:27(g/mL),静置时间78 min,微波功率 200 W,微波时间2.6 min,提取2次,得到的LGS提取液总多酚得率为(60.20±0.65 mg/g),显著优于水提液(45.75±0.38 mg/g,P<0.05),更接近醇提液(76.62±0.52 mg/g)。杜仲叶多酚特征成分绿原酸在提取物中的含量为醇提液13.18±0.33 mg/g) > LGS水提液(12.40±0.24 mg/g) > 水提液11.18±0.27 mg/g),与总多酚提取得率一致。三种提取物对DPPH?、ABTS?、?OH、PTIO?的清除率无显著差异（P > 0.05）,均随其质量浓度升高而增强。三种提取物对酪氨酸酶的促进作用表现为醇提物> LGS水提物>水提物,与总多酚/绿原酸提取得率保持一致。分子对接结果显示绿原酸能增强酪氨酸酶与左旋多巴的结合力,改变左旋多巴与酪氨酸酶的结合位点,从而推动左旋多巴氧化进程。结论 所选取的提取工艺合理、可行,LGS辅助微波提取可提高杜仲叶总多酚得率,得到的提取物具有良好的体外抗氧化能力,并可提高酪氨酸酶活性。     

杜仲叶乙醇提取物的降糖作用机理

为了阐明杜仲叶的降血糖功效及其机制,采用酶-抑制剂模型,筛选高抑制率的杜仲叶乙醇提取物并判断其对α-葡萄糖苷酶的抑制类型;借助Caco-2人结肠腺癌细胞模型,研究杜仲叶20%乙醇解吸物对α-葡萄糖苷酶活性及葡萄糖转运蛋白的影响;气相色谱-质谱联用分析杜仲叶20%乙醇解吸物主要成分。杜仲叶20%乙醇解吸物可竞争性地抑制α-葡萄糖苷酶,其抑制常数Ki值为32.90 mg/mL。它对Caco-2细胞中的α-葡萄糖苷酶有较强抑制作用,其IC50为0.57 mg/mL,且对Caco-2细胞摄取葡萄糖也有一定抑制作用,1 mg/mL时抑制率可达26.25%。气相色谱-质谱分析表明杜仲叶20%乙醇解吸物主要有DL-异柠檬酸内酯、百里酚、儿茶素、2,6-二羟基-苯甲酸和3,4-二羟基-苯丙烯酸等。这些结果表明,杜仲叶乙醇提取物可以通过抑制α-葡萄糖苷酶活性,降低葡萄糖吸收来实现降血糖的效果。     

杜仲叶抗α-葡萄糖苷酶成分的研究

通过正交试验优化了杜仲叶中抗α-葡萄糖苷酶成分的提取条件,并利用葡聚糖凝胶对杜仲叶水提液进行纯化分离,分析了杜仲叶水提物纯化液的黄酮含量。研究结果表明,杜仲叶的提取条件为提取料液比为1∶10,提取温度为90℃,提取时间为40min。杜仲叶水提物纯化液具有明显的抗α-葡萄糖苷酶效果,且杜仲叶中总黄酮含量为3.31%,纯化液中黄酮的含量为18.12%,杜仲总黄酮粗品得率为7.32%。     

响应面法优化杜仲叶中总多酚超声波辅助提取工艺研究

采用响应面法优化杜仲叶中总多酚超声波辅助提取工艺。考察了提取溶剂、液料比、提取时间、提取温度及提取次数对提取工艺的影响,在单因素实验分析的基础上采用Box-Benhnken中心组合进行4因素3水平的实验设计,以总多酚得率为响应值,进行响应面分析,建立二次多项回归数学模型,并优化提取工艺。结果表明杜仲叶中总多酚超声波辅助提取最佳工艺为:55%乙醇、液料比为25∶1mL·g-1、45℃下提取25min,提取两次,在此条件下,总多酚得率为4.678%。      

大孔吸附树脂对杜仲叶黄酮的富集纯化

应用大孔吸附树脂对杜仲叶超临界法提取液中的黄酮类物质进行富集和纯化,得到树脂富集杜仲叶黄酮的最优工艺条件。对4 种大孔吸附树脂NKA-2、X-5、D101、AB-8 的吸附和解吸能力进行比较的结果表明：AB-8 树脂的吸附率和解吸率都最高,最佳吸附洗脱工艺为上样液黄酮质量浓度193.92mg/mL、pH2、吸附流速2.6mL/min、洗脱流速1.6mL/min、解吸剂80%乙醇用量30mL。所得洗脱液中黄酮质量分数从纯化前的10.2%可增加到纯化后的42.6% 以上。     

杜仲叶超微粉馒头制备工艺及品质特性分析

目的 优化杜仲叶超微粉馒头制备工艺,并对其品质特性进行分析。方法 以馒头感官评分及质构特性为考量指标,以杜仲叶超微粉添加量、酵母粉添加量、水添加量为影响因素进行单因素试验;在此基础上,采用响应面试验优化杜仲叶超微粉馒头的制备工艺。结果 最优工艺条件:杜仲叶超微粉添加量1.3%、酵母粉添加量1.6%、水添加量49%。按此工艺制备得到的杜仲叶超微粉馒头的感官评分为95.33±0.83分。各因素对杜仲叶超微粉馒头品质的影响顺序为:杜仲叶超微粉添加量>酵母粉添加量>水添加量。馒头的质构特性表明:添加杜仲叶超微粉后馒头硬度、胶黏性、咀嚼性及黏度均显著优于对照组(P<0.05)。结论 优化后杜仲叶超微粉馒头营养丰富,且具有杜仲叶独特的风味,有较大的应用潜力。     

杜仲叶的营养评价及体外抗氧化活性分析

以杜仲叶为研究对象,采用常规理化方法对其干品的营养成分、主要功效成分进行系统分析,并利用营养评价手段及体外抗氧化实验评价其营养价值和抗氧化能力。结果表明,杜仲叶含有丰富的蛋白质(11.50 g/100 g),膳食纤维(38.40 g/100 g),α-亚麻酸(55.5%以脂肪计),以及钾(1.38×10⁴ mg/kg)、钙(1.21×10⁴ mg/kg)、镁(2.02×10³ mg/kg)、铁(164 mg/kg)元素和多种微量元素。杜仲叶氨基酸含量丰富且种类齐全,已达优质蛋白标准。杜仲叶中的粗多糖、总多酚、总黄酮的含量分别为0.989、8.360、1.590 g/100 g,桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷、京尼平苷和芦丁这六种最具代表性的活性成分含量分别为0.765、3.020、2.670、0.013、0.024、0.067 g/100 g。体外抗氧化试验表明,杜仲叶提取物具有良好的抗氧化活性,在试验浓度范围,清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、2,2-联氮-二-3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸自由基(ABTS⁺·)、羟基自由基(·OH)效果与质量浓度呈正相关,其半抑制浓度(IC₅₀)分别为32.89、28.09、235.3 mg/L。杜仲叶具有多种营养成分,且其提取物具有良好的抗氧化活性,作为新型食品资源具有广阔的应用前景。     

不同产地杜仲叶的水提取物体外抗氧化活性

研究陕西、四川和新疆产杜仲叶水提取物的DPPH自由基清除活性、羟自由基清除活性、抗脂质过氧化活性、金属离子络合力和还原力、杜仲叶萃取物中的总酚含量,以2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)、VE和VC为阳性对照。结果表明：四川和陕西产杜仲叶水提取物自由基清除力、羟自由基清除力、金属离子络合力和还原力以及总酚含量均高于新疆产杜仲叶,但是抗脂质过氧化活性略低于后者。陕西与四川产杜仲叶水提取物体外抗氧化活性样品特点相似,活性相近,新疆产杜仲叶与前两者特点不同。     

不同乳酸菌发酵杜仲叶水提液的香气成分分析

利用电子鼻辅助同时蒸馏萃取-气相色谱-质谱（Simultaneous distillation-extraction-gas chromatography-mass, SDE-GC-MS）联用技术研究不同乳酸菌（植物乳杆菌、德氏乳杆菌、嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌）发酵杜仲叶水提液的主要香气成分差异性。SDE-GC-MS分析结果表明,未发酵液的挥发性成分共鉴定出31种,以醛类相对含量最高（14.3591%）;植物乳杆菌、德式乳杆菌、嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌发酵后鉴定出的挥发性成分依次为45、38、51和43种,分别以酮类（18.8255%）、杂环类（25.7828%）、醇类（18.3376%）和醇类（14.1481%）相对含量最高。通过电子鼻分析,PCA和LoA主成分贡献率均大于95%,说明传感器识别效应和样品间的风味区分度较好。同时,ROAV分析结果显示,乳酸菌发酵增加了杜仲叶提取液关键香气成分含量,降低原本杜仲叶的青叶味。经乳酸菌发酵后的杜仲叶提取液,不仅挥发性成分数量较多,且关键香气成分含量增加显著,更有利于杜仲叶提取液香气提升。研究结果为杜仲叶产品后期研发提供了参考依据。