基于指标成分指纹图谱技术结合LC-MS的蜂蜜质量分析

蜂蜜抗氧化活性的高低与其黄酮含量有关,黄酮是一种常见的抗氧化成分,将黄酮类化合物作为蜂蜜指标成分进行分析已成为评价蜂蜜质量和蜂蜜溯源的重要手段。鉴于蜂蜜活性成分复杂,且常规检测手段具有一定的局限性,本试验结合色谱指纹图谱和LC-MS方法,以优化的黄酮提取方法和色谱质谱条件,对市售的6种蜂蜜进行指纹图谱分析,以槲皮素为对照峰,共筛选出12个共同峰,结果表明其相似度均大于0.9,选择响应最大的4个共有峰,转移至质谱进一步分析,所测4种化合物分别为芦丁,槲皮素,杨梅酮和山奈酚,且在6种蜂蜜中各组分含量差异较大,应该与蜜源植物以及加工工艺影响有关。本研究建立的分析方法前处理简单,色谱分离度好,稳定性高,结合了指纹图谱分析的全面性和质谱分析的准确性,能更加全面的评价蜂蜜及其他蜂产品的质量。     

微乳液相色谱法对蓝莓叶黄酮类化合物的分离和测定

目的：利用微乳液相色谱分离并测定蓝莓叶中儿茶素、芦丁、山柰酚、槲皮素和杨梅酮5 种黄酮成分。方法：从表面活性剂、助表面活性剂、pH值、有机相4 个方面对微乳液相色谱分离蓝莓叶黄酮的条件进行优化。结果：分离蓝莓叶黄酮的最优条件为：使用2.5%聚氧乙烯（23）月桂醚作为表面活性剂,8%正丁醇为助表面活性剂,0.8%乙酸乙酯为有机相,0.5%乙酸调节体系pH值为3.2,在以上条件下蓝莓叶黄酮在20 min内能够得到有效分离。结论：蓝莓叶中提取的黄酮类化合物含有儿茶素9.76 mg/g、芦丁13.12 mg/g、山柰酚31.04 mg/g、槲皮素26.42 mg/g、杨梅酮20.30 mg/g。     

高效液相色谱法测定山楂中芦丁、金丝桃苷和槲皮素的含量

旨在建立HPLC-DAD测定山楂总黄酮提取物中芦丁、金丝桃苷和槲皮素含量的方法。以70%乙醇为提取溶剂,采用Develosil C30色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）分离,以乙腈和0.4%磷酸水溶液为流动相,流速1.0mL/min,检测波长360nm,采用峰面积和保留时间对3种黄酮进行定性定量分析。结果表明:芦丁、金丝桃苷和槲皮素这3种黄酮在30min内较好分离,其质量浓度分别为0.0050～0.1600mg/mL、0.0016～0.0500mg/mL和0.0005～0.0150mg/mL时与峰面积线性关系良好,相关系数分别为0.9999、0.9996和0.9997;该检测方法精密度的相对标准偏差（RSD）为0.48%～0.78%,回收率为92.36%～98.64%,说明该HPLC检测方法适用于山楂果粉等干植物原料中芦丁等3种黄酮类化合物的精确定量。      

液质联用分离测定山西苦荞黄酮

采用液质联用仪对山西苦荞中的黄酮类化合物进行分离鉴定,发现山西灵丘地区产的苦荞提取液中黄酮类化合物以芦丁为主;并分离出5种黄酮类化合物,分别为六取代黄酮(万寿菊素-葡萄糖醛酸苷),槲皮素-3-芸香糖葡萄糖苷,芦丁、槲皮素和槲皮素-3-双鼠李糖苷,其中六取代黄酮(万寿菊素-葡萄糖醛酸苷)和槲皮素-3-双鼠李糖苷为首次发现;并测定出这5种黄酮类化合物的含量分别为3.03%、5.05%、63.23%、4.19%和6.19%.     

反相液相色谱法测定新疆野蔷薇果中的黄酮类化合物

为建立一种简单、快速测定野蔷薇果中黄酮类化合物含量的反相液相色谱方法。利用甲醇、异丙醇和水以一定比例1mL/min 流速梯度洗脱,360nm 波长检测,芦丁和槲皮素在4min 内即可达到基线分离。经与标准品对照,野蔷薇果中含有芦丁和槲皮素,含量分别为17.7、94.7μg/g md。芦丁和槲皮素回收率较好,分别为95.6%和97.3%;相对标准偏差均小于5%,方法重复性较好。本法可用于野蔷薇果中黄酮类化合物的快速分析检测。     

云南普洱茶中黄酮含量的测定及槲皮素、芦丁的提取分离

研究了部分云南普洱茶中黄酮类化合物的含量及槲皮素、芦丁的提取分离方法。实验结果表明,新工艺原料黄酮含量最高,达24.576mg/g,新工艺特级最低,仅有3.660mg/g。从中选取黄酮含量较高的三个样品进一步提取分离槲皮素、芦丁,得到了纯度在30%以上的粗制品。     

燕麦中的黄酮提取与结构鉴定

通过响应面分析法确定了以燕麦为原料提取黄酮的最佳工艺:70%乙醇、温度55℃、料液比1∶16、提取时间90min,提取率达3.091%。将燕麦黄酮经AB-8大孔树脂、聚酰胺和ODS反相柱层析分离,得到三种黄酮化合物A、B、C,利用核磁共振技术鉴定出A为芦丁;B为莰菲醇-3-O-芸香糖苷;C为莰菲醇-3-O-果糖-α-葡萄糖苷。其中化合物C在禾本科植物中属首次报道。     

高效液相色谱法测定山楂中芦丁、金丝桃苷和槲皮素的含量

旨在建立HPLC-DAD测定山楂总黄酮提取物中芦丁、金丝桃苷和槲皮素含量的方法.以70％乙醇为提取溶剂,采用Develosil C30色谱柱(250mm ×4.6 mm,5μm)分离,以乙腈和0.4％磷酸水溶液为流动相,流速1.0mL/min,检测波长360nm,采用峰面积和保留时间对3种黄酮进行定性定量分析.结果表明:芦丁、金丝桃苷和槲皮素这3种黄酮在30min内较好分离,其质量浓度分别为0.0050～ 0.1600mg/mL、0.0016～0.0500mg/mL和0.0005～0.0150mg/mL时与峰面积线性关系良好,相关系数分别为0.9999、0.9996和0.9997;该检测方法精密度的相对标准偏差(RSD)为0.48％～0.78％,回收率为92.36％ ～98.64％,说明该HPLC检测方法适用于山楂果粉等干植物原料中芦丁等3种黄酮类化合物的精确定量.     

云南普洱茶中黄酮含量的测定及槲皮素、芦丁的提取分离

研究了部分云南普洱茶中黄酮类化合物的含量及槲皮素、芦丁的提取分离方法。实验结果表明,新工艺原料黄酮含量最高,达24.576mg/g,新工艺特级最低,仅有3.660mg/g。从中选取黄酮含量较高的三个样品进一步提取分离槲皮素、芦丁,得到了纯度在30%以上的粗制品。      

高效液相色谱法测定山楂黄酮的研究

对高效液相色谱测定山楂中主要黄酮类物质的方法进行了研究,建立了定性定量测定牡荆素、芦丁和槲皮素的方法。方法学验证结果表明,重复性试验相对标准偏差（RSD）为1.73%,稳定性试验相对标准偏差（RSD）为1.04%,加标回收率为99.63%～104.80%。对5个不同地区的山楂样品进行检测,其样品与对照色谱图谱相似度在0.772～0.993之间,说明不同地区山楂中的黄酮组成存在较大差别。5个不同地区山楂中牡荆素、芦丁、槲皮素3种主要山楂黄酮的总量在420.47～897.80 mg/kg之间,其中芦丁含量为产生差别的主要原因。     

贵州蓝莓蜜的成分分析及其抗氧化活性

以贵州蓝莓蜜为研究对象,对其理化指标、抗氧化活性、多酚成分进行研究。结果显示,贵州蓝莓蜜酸度值44.69 mmol/kg,总糖含量79.30%,葡萄糖含量(40.88%)高于果糖含量(38.41%);总酚酸和总黄酮含量分别为20.27～24.72 mg GAE/100 g和3.88～6.77mg RE/100 g,DPPH和ABTS自由基半抑制率分别为119.04～136.56 mg/mL和140.56～212.34 mg/mL;蓝莓蜜含15种多酚类物质(原儿茶酸、对羟基苯甲酸、香草酸、咖啡酸、对香豆酸、芦丁、阿魏酸、杨梅酮、木犀草素、桑色素、槲皮素、芹菜素、山奈酚、异鼠李素、高良姜素),其中,黄酮类物质含量最高为槲皮素,酚酸含量由高到低为:对羟基苯甲酸对香豆酸阿魏酸咖啡酸香草酸原儿茶酸。研究表明,蓝莓蜜酸度偏高、易结晶,结合槲皮素含量高的特点与酚酸含量高低规律,可作为蓝莓蜜鉴定与检测的参考指标。     

Identification of Flavonoids in Sunflower Honey

The flavonoids of sunflower honey were isolated and analyzed by different methods: RP-TLC, RP-HPLC/UV-Vis (diode array detection) using post-column derivatization, GC/SM. Five main compounds were identified as pinocembrin (5,7-dihydroxyflavanone), pinobank-sin (3,5,7-trihydroxyflavanone), chrysin (5,7-dihydroxyflavone), gal-angin (3,5,7-trihydroxyflavone) and quercetin (3,5,7,3′,4′-pentahydroxy flavone). Two minor flavonoids were also detected: tectochrysin (5-hydroxy-7-methoxyflavone) and kaempferol (3,5,7,4′-tetrahydroxy flavone). All these compounds had been previously reported in propolis, another hive product. Honey is a source of flavonoids in the human diet. Flavonoid structures may provide an index of floral origin with further study.     

不同大孔树脂苦荞黄酮富集品中4种主要黄酮的定量检测

此次试验建立了高效液相色谱同时定量检测不同大孔树脂苦荞麸皮黄酮富集品中芦丁、烟花苷、槲皮素和山柰酚4种黄酮类化合物含量的方法。分别使用ADS-7、AB-8、D101型大孔树脂富集苦荞麸皮黄酮,采用Intersustain C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈和0.2%磷酸水溶液作为梯度洗脱的流动相,流速1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长360 nm。结果显示,芦丁、烟花苷、槲皮素和山柰酚分别在25~400,1.25~20,9.375~150和0.625~10μg/mL的浓度范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.48%,100.86%,100.93%和102.27%。结果表明,ADS-7型大孔树脂纯化的苦荞麸皮总黄酮含量较AB-8和D101更高,该方法操作方便、准确性高、重复性好。     

高效毛细管电泳同时检测荸荠中的4种黄酮类物质

采用毛细管电泳法分析荸荠中的黄酮类化合物,测定了芦丁、槲皮素、山奈酚和绿原酸的含量。研究了缓冲液的种类、离子浓度、pH值、分离电压和运行温度等一系列电泳参数,得出优化的电泳条件为:缓冲液为20mmol/L磷酸二氢钾-20 mmol/L硼砂(pH 7.8),紫外检测波长202 nm,分离电压24 kV,运行温度30℃。在此条件下,上述4种物质在7 min内即可分离,并在3.125～100 mg/L内有良好的线性关系,相关系数R2均在0.999以上,相对标准偏差(RSD):迁移时间为0.78%～0.98%;峰面积为6.5%～8.6%。在5,10,20 mg/kg的添加水平下,4种物质的加标回收率为80%～98%。该方法简便、快速、重现性好,可推广应用于植物中4种黄酮类物质的同时检测。     

油茶黄酮化合物对核桃油氧化稳定性研究

将油茶黄酮化合物添加到核桃油中,通过体外抗氧化实验,探究其对核桃油稳定性的影响。以油茶叶、油茶籽壳为原料,提取黄酮类化合物并通过高效液相色谱法定性定量分析;将黄酮类提取物按照油茶籽壳中杨梅素∶槲皮素∶山奈酚=1.15∶1.00∶1.05,油茶叶中杨梅素∶槲皮素∶山奈酚=2.36∶1.00∶1.60的比例添加到核桃油中,以200 mg/kg的TBHQ、BHA、VE做对照组,测定过氧化值、酸价、总抗氧化能力、还原能力等指标,研究杨梅素、槲皮素、山奈酚不同配比对核桃油氧化稳定性的影响。结果表明：油茶籽壳中杨梅素、槲皮素和山奈酚含量分别为：68.71、59.77、62.71 mg/100 g;油茶叶中杨梅素、槲皮素和山奈酚含量分别为：74.51、31.58、50.58 mg/100 g。对核桃油的抗氧化效果为：TBHQ>杨梅素∶槲皮素∶山奈酚=1.15∶1.00∶1.05>BHA>杨梅素∶槲皮素∶山奈酚=2.36∶1.00∶1.60>VE。油茶中的黄酮化合物作为一种天然抗氧化剂能有效延长核桃油的货架期;油茶籽壳黄酮化合物的抗氧化效果优于BHA、VE;油茶叶黄酮化合物的抗...     

枸杞晒干过程中黄酮类化合物和苯丙氨酸解氨酶活性的变化

本实验在枸杞表面涂抹Na2CO3、Na2SO3溶液作为除蜡剂,以不涂抹除蜡剂为空白对照,研究晒干过程中总黄酮和苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonialyase,PAL）活性的变化,并利用高效液相色谱（highperformance liquid chromatography,HPLC）法检测枸杞中山奈酚、芦丁和槲皮素含量的变化。对总黄酮含量和PAL活性、3 种不同处理方式条件下3 种黄酮类化合物含量之间进行相关性分析。结果表明：Na2CO3、Na2SO3和空白对照处理下的枸杞在晒干过程中PAL活性、总黄酮含量呈现持续上升的趋势,山奈酚、芦丁和槲皮素含量均呈现先增加后下降趋势;同一处理下的PAL活性和总黄酮含量变化呈显著极强正相关,山奈酚、芦丁和槲皮素含量变化呈正相关;除蜡剂影响同一干燥时间下PAL活性、总黄酮、山奈酚、芦丁和槲皮素含量的大小,并且其达到最高值的时间也受除蜡剂的影响。     

离子液体辅助超声萃取-高效液相色谱同时测定半边莲中6 种黄酮类化合物

目的：通过单因素试验和正交试验对离子液体辅助萃取半边莲中黄酮类化合物的条件进行优化,建立高效液相色谱法同时分离测定半边莲中芦丁、槲皮素、柚皮素、橙皮素、山柰酚和芹菜素的方法。方法：采用InertSustain C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）进行分离;流动相为甲醇（B）-乙酸溶液（A,pH 3.0）,梯度洗脱;流速1.0 mL/min;紫外检测波长285 nm;柱温35 ℃。结果：以黄酮类化合物的提取量为指标,最佳提取条件为甲醇体积分数80%、固液比1∶80（g/mL）、萃取时间30 min、离子液体浓度0.6 mol/L。在优化的色谱条件下,芦丁、槲皮素、柚皮素、橙皮素、山柰酚和芹菜素分离效果良好;定性检出限（RSN = 3）依次为0.001 2、0.002 3、0.002 6、0.000 2、0.001 0、0.000 6 μg/mL;样品回收率为91.77%～102.53%。结论：该萃取方法操作简单快速,为半边莲中黄酮类化合物的提取分离及检测提供了有效的方法。     

蜂胶液体中类黄酮化合物的HPLC测定和抗氧化性能研究

研究了蜂胶液体中类黄酮化合物的含量和蜂胶液体的抗氧化性能。高效液相色谱法(HPLC)分析显示,每100mL蜂胶液体中芦丁、槲皮素、桑黄素、山萘黄素和异鼠李素的含量分别是11.20、4.60、16.00、4.00和6.10mg。芦丁比色法测定显示,蜂胶液体中总类黄酮化合物含量达到30mg/mL。抗氧化试验结果表明,在金属抗坏血酸依赖的卵磷脂脂质体过氧化作用中,蜂胶液体具有一定的抗氧化性质。蜂胶液体对Cu2+、Fe2+和Fe3+催化的氧化体系的抑制率分别为9.17%、34.32%和47.02%;在Cu2+催化的体系中,蜂胶液体的氧化抑制效果与1.0mmol/L肌肽相似,在Fe2+和Fe3+催化的氧化体系中则与10mmol/L肌肽的作用相当。     

Determination of red wine flavonoids by HPLC and effect of aging

A new method for simultaneous determination of 10 flavonols and 2 flavones by high performance liquid chromatography was developed in this paper. The identified compounds contained quercetin, kaempferol, myricetin, rhamnetin, isorhamnetin, quercetrin, rutin, morin, galangin, fisetin, apigenin and luteolin. The chromatographic separation of these flavonoids was performed in a single run by using the mobile phase gradient elution of acetonitrile–methanol–water mixture (1% tetrahydrofuran, THF) at 20 °C, with the flow rate at 1.0 ml/min and the detection wavelength at 360 nm. With direct injection of wine samples, seven red wine samples, differing in their origin of producing places and time, were analyzed for flavonoids content by this method. The results showed the presence of myricetin, luteolin, quercetin, kaempferol, isorhamnetin and galanin. Additionally, the changes of flavonoids in red wines stored in the three types of oak barrels with aging time were investigated, which indicated that the component of flavonoids in red wine is related to wine aging greatly. These provide a substantial basis for the further research on control of flavonoids during winemaking.