谷氨酰胺酶水解小麦蛋白工艺研究

以溶解度、脱酰胺度为考察指标,研究蛋白质谷氨酰胺酶对小麦蛋白进行酶解改性的工艺。通过单因素及正交试验,对蛋白质谷氨酰胺酶酶解谷朊蛋白进行了工艺条件的优化。探讨蛋白质谷氨酰胺酶与谷朊蛋白质量比、酶解温度、酶解时间和酶解p H 4个工艺参数对酶解谷朊蛋白溶解度及脱酰胺度的影响,确定了蛋白质谷氨酰胺酶解改性小麦蛋白的最佳工艺条件:谷氨酰胺酶与谷朊蛋白质量比0.05︰1,酶解温度45℃,酶解时间26 h,酶解p H 7.3。在此酶解工艺优化条件下,谷朊蛋白溶解度为82.36%,脱酰胺度为45.76%。     

蛋白质谷氨酰胺酶对米谷蛋白的分子结构及功能性质的影响

目的:研究蛋白质谷氨酰胺酶(PG酶)对米谷蛋白的分子结构及功能性质的影响。方法:采用zeta电位仪、体积排阻色谱(SEC-HPLC)及傅里叶红外光谱(FT-IR)研究米谷蛋白及其酶法脱酰胺样品的zeta电位、相对分子质量分布和二级结构变化。研究不同pH值条件下酶法脱酰胺样品溶解度的变化。结果:随着酶解时间的延长,米谷蛋白的脱酰胺度逐渐增大,当反应时间48 h时,DD值为52.29%;zeta电位逐渐增加,体系中蛋白质聚合体部分逐渐减少,α-螺旋结构有所降低;米谷蛋白在中性溶液中溶解度显著提高(达96.99%)。结论:酶法脱酰胺使蛋白质分子所带负电荷增加,分子间静电排斥作用增大;在中性pH条件下米谷蛋白的溶解度上升。     

大米谷蛋白碱法脱酰胺条件优化

脱酰胺可以改变蛋白质结构从而可能改变蛋白质溶解性。以脱酰胺度、溶解度为评价指标,对提纯的大米谷蛋白进行碱法脱酰胺,研究了碱液浓度、温度、加热时间等因素对脱酰胺度的影响,并确定谷蛋白溶解度和脱酰胺度之间的相关性,最后通过3因素3水平正交试验优化谷蛋白碱法脱酰胺条件。结果表明,大米谷蛋白在0.6 mol/L的Na OH溶液中70℃反应140 min,脱酰胺度可达68.74%,溶解度达到85.45%,溶解度和脱酰胺度呈现正相关,加热温度是影响脱酰胺的第一要素。脱酰胺大米谷蛋白在中性条件下有理想的水溶性,对拓宽大米谷蛋白的应用范围具有潜在意义。     

蛋白质谷氨酰胺酶对米谷蛋白功能性质的影响

研究蛋白质谷氨酰胺酶对米谷蛋白功能性质的影响,测定米谷蛋白及其脱酰胺样品的溶解度、乳化、起泡、黏度、持水持油力等功能性质。结果表明,谷氨酰胺酶法脱酰胺的米谷蛋白其功能性质均有提高,在中性溶液中溶解度显著增加(达到96.99%);酶解时间1～12h 的范围内,改性蛋白在中性条件下的乳化性能最好,酶解时间1～5h 的范围内,强酸性条件下的乳化稳定性得到显著改善,并呈现出最佳的起泡性能,而起泡稳定性和黏度则随着反应时间的增加均逐渐降低;此外,改性蛋白与未改性蛋白比较,持水性提高1.75～2.03 倍,持油性提高1.58～1.94 倍。     

超声辅助酶解改性对花生分离蛋白功能性的影响

以花生分离蛋白为原料,研究了超声作用对碱性蛋白酶酶解改性花生分离蛋白的影响,并确定了超声辅助酶解改性的最佳反应条件。结果表明,超声作用不改变花生蛋白溶解度与反应温度、pH、底物质量浓度、加酶量之间关系曲线的变化趋势,但使花生分离蛋白的溶解度提高了30.9%。超声辅助酶解改性的最佳工艺条件为:底物质量浓度60 g/L,加酶量4%,反应温度50℃,pH 8.0,超声功率200 W。经超声辅助酶解改性后,花生分离蛋白的水解度、溶解度、乳化性、起泡性分别比无超声酶解改性提高了40.6%、30.9%、58.8%和85.9%,泡沫稳定性和乳化稳定性则降低了21.5%和47.9%。     

酸法脱酰胺结合酶解制备米蛋白肽及其与亚铁螯合工艺研究

采用米蛋白为原料,经酸法脱酰胺、蛋白酶酶解后,以FeCl_2作为铁源制备米蛋白肽亚铁螯合物。结果表明,碱性蛋白酶对米蛋白的水解效果最好,经4 h酶解后蛋白的水解度和蛋白肽得率分别达到23.4%和73.4%。酸法脱酰胺处理能有效提高米蛋白肽的得率。采用0.4 mol/L HCl在95℃处理3 h制备的脱酰胺米蛋白,其水解度和蛋白肽得率分别达到27.1%和92.6%;单因素试验表明反应温度、pH和质量比均对米蛋白肽亚铁螯合物的产品得率和螯合能力有显著影响;米蛋白肽与亚铁盐的最佳螯合工艺条件为:反应温度50℃、蛋白肽与亚铁盐的质量比2:1、pH 6.5;在此条件下其产品得率为65.2%,亚铁螯合能力最大为21.6 mg/g。     

盐酸法脱酰胺结合酶解制备高携钙能力鸭蛋蛋清肽

为了利用食品工业下脚料咸鸭蛋蛋清,以鸭蛋蛋清蛋白为原料,通过盐酸脱酰胺、蛋白酶酶解后,得到具有高携钙能力的蛋清肽。结果显示,温度和盐酸浓度对脱酰胺度影响显著(P 0. 05),优化后的脱酰胺条件为:温度95℃,反应时间4 h,盐酸浓度0. 5 mol/L,在此条件下蛋清蛋白的脱酰胺度达72. 67%。从5种常用的商业用酶中筛选出木瓜蛋白酶为实验用酶,就可溶性钙结合量而言,酶解时间和料液比对酶解效果影响显著(P 0. 05),而酶的质量分数对酶解效果有极显著影响(P 0. 01)。经优化后,得到最佳酶解工艺为:温度50℃、pH 6. 5、料液比5%、酶的质量分数0. 3%、酶解时间3 h。在此条件下,得到的脱酰胺鸭蛋蛋清肽的可溶性钙结合量为14. 42 mg Ca/g肽。经过超滤分级后,发现分子质量较小的级分具有更强的钙结合能力。     

TGase催化玉米谷蛋白与壳寡糖糖基化修饰的研究

在壳寡糖存在的条件下,利用转谷氨酰胺酶(Transglutaminase,TGase)对玉米谷蛋白进行糖基化交联修饰,以玉米谷蛋白糖基化修饰产物中的单糖导入量为指标,采用单因素试验优化糖基化反应条件,并比较了玉米谷蛋白、玉米谷蛋白交联产物和玉米谷蛋白糖基化修饰产物的溶解性。结果表明,最适糖基化反应条件为p H 8.0、酶添加量15 U/g玉米谷蛋白、玉米谷蛋白质量浓度3%、反应温度47℃、时间2 h、玉米谷蛋白中酰基供体与壳寡糖中酰基受体物质的量比1︰3。与玉米谷蛋白相比,玉米谷蛋白糖基化修饰产物的溶解性显著改善。     

响应面法优化酶改性谷朊粉替代口香糖胶基的研究

利用谷氨酰胺转氨酶(MTG)对谷朊粉(WG)进行改性,采用响应面法优化改性工艺条件,并利用改性WG全部替代胶基制作口香糖。结果表明,六种谷朊粉中恒丰产WG最适合生产口香糖。利用响应面法优化MTG改性WG的最佳工艺条件为:酶浓度2.21%,反应温度49.88℃,反应时间1.54h,pH6.63,此时改性WG的粘度为5.42kcP,比改性前提高了67.73%。利用改性WG制成口香糖的感官评分比改性前提高了16.8%,咀嚼时间延长了93.5%。     

转谷氨酰胺酶改性大豆分离蛋白条件研究

利用微生物转谷氨酰胺酶(MTGase)对大豆分离蛋白(SPI)进行改性,探讨pH、反应温度、反应时间、底物浓度、酶/蛋白质比对SPI改性影响,采用正交试验优化改性条件。结果显示,酶/蛋白质比和底物浓度对SPI改性影响较小;pH、温度和时间对该改性作用影响较大,该3种因素对SPI改性影响大小依次为pH、温度和时间;MTGase改性SPI的最佳条件为pH 5.5、温度55℃、时间30 min、底物浓度2.0%、酶/蛋白质比10 U/g。