昆虫血淋巴抑制细胞凋亡的研究

对昆虫血淋巴抑制细胞凋亡的研究在理论和实际中都有重要的价值．通过对昆虫血淋巴抑制细胞凋亡研究历史的探讨,发现昆虫血淋巴中包含抑制细胞凋亡的组分,并且在昆虫血淋巴中含有抑制细胞凋亡的不同分子量蛋白,说明昆虫血淋巴介导的抗细胞凋亡效果可能由不同的蛋白执行．它能抑制由病毒诱导的细胞凋亡,对蛋白和病毒生产系统来说,在细胞培养中添加血淋巴,是生物技术中优化的策略．     

昆虫血淋巴抑制细胞凋亡的研究

对昆虫血淋巴抑制细胞凋亡的研究在理论和实际中都有重要的价值.通过对昆虫血淋巴抑制细胞凋亡研究历史的探讨.发现昆虫血淋巴中包含抑制细胞凋亡的组分,并且在昆虫血淋巴中含有抑制细胞凋亡的不同分子量蛋白,说明昆虫血淋巴介导的抗细胞凋亡效果可能由不同的蛋白执行.它能抑制由病毒诱导的细胞凋亡,对蛋白和病毒生产系统来说,在细胞培养中添加血淋巴,是生物技术中优化的策略.     

苯并三唑化合物Bz引发4T-1乳腺癌细胞凋亡

观察苯并三唑化合物(Bz)诱导小鼠乳腺癌(4T-1)细胞系,考察了诱导细胞凋亡的生物学效应。结果表明,Bz显著抑制小鼠乳腺癌4T-1细胞的生长,呈浓度和时间依赖性;4T-1细胞经Bz作用后,细胞增殖周期延长,增殖速度减慢,ATPase活性降低;膜电位检测结果表明,Bz能够引起细胞线粒体膜电位显著下降。Bz具有诱导小鼠乳腺癌4T-1细胞凋亡的作用,其机制可能是通过引发细胞线粒体膜电位下降而诱导细胞凋亡。     

香附挥发油诱导A549细胞凋亡作用

超临界CO2装置提取香附挥发油(ACA),研究ACA体外诱导A549细胞凋亡作用及机制。采用MTT法和LDH活性测定确定ACA杀伤A549量效和时效关系;Annexin V-EGFP/PI双重荧光染色观察ACA致细胞凋亡。测定细胞内Ca2+,MDA和ATP浓度及SOD活性,罗丹明123(Rh 123)检测线粒体膜电位(Δψ)分析其诱导凋亡的机制。结果显示:与阳性对照药顺铂(cisplatin,DDP)相比较,ACA诱导肺癌细胞A549凋亡作用效能强大、起效迅速。ACA诱导细胞钙超载、增加氧化损伤,抑制能量代谢致线粒体结构和功能受损,最终使线粒体凋亡通路激活诱导A549细胞凋亡。ACA在抗肺癌药物开发方面具有良好的前景。     

细胞通讯及主要信息传递途径

生物体内细胞通讯包括细胞间的信息传递和细胞内的信息传递。作者较详细地介绍了主要信息传递途径     

凋亡蛋白对Hep2细胞影响的研究

从鸡贫血病毒(CAV———ch icken anem ia virus)总DNA中克隆凋亡蛋白(Apoptin)基因片段,并与pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO载体构建融合载体,转化E.coli.DH5α,筛选氨苄抗性阳性克隆并鉴定.以该融合载体转染Hep2细胞后,在倒置荧光显微镜下观察到绿色荧光标记,同时观察到细胞核形态学呈凋亡特征变化,表明凋亡蛋白可以诱导Hep2细胞系发生凋亡.     

PHA-767491抑制肝癌细胞生长的研究

利用不同浓度的PHA-767491对多种肝癌细胞株进行杀伤研究,探讨PHA-767491对肝癌细胞的抑杀作用.MTT实验结果表明,PHA-767491能显著抑制多种肝癌细胞株的增殖.Hoechst 33342染色结果也表明PHA-767491可以诱导肝癌细胞进入凋亡.表明PHA-767491对肝癌细胞具有较高的杀伤作用,可能具有广阔的应用前景.     

家蝇幼虫凝集素的分离纯化及其抑制MCF-7细胞活性的研究

家蝇幼虫血淋巴粗提液经过亲和层析,分离出3种与D-半乳糖特异性结合的蛋白,经高效液相色谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳。分离出分子质量为38ku的家蝇幼虫凝集素（MLL-2）,该组分具有明显的凝血活性．圆二色谱结果表明,MLL-2的二级结构主要是以／3折叠（80．3％）和无规卷曲（19．5％）的构象存在．MTT实验结果显示,MLL-2对人乳腺癌（MCF-7）细胞的生长具有明显的抑制作用,其抑制效果具有时间和浓度依赖性．形态学观察表明,MLL-2处理过的MCF-7细胞出现凋亡小体、染色质浓缩凋亡现象．经流式细胞仪分析MCF-7细胞被阻遏在G2／M期,并且凋亡率随作用时间的延长而增加．MLL-2通过诱导MCF-7细胞发生凋亡,从而起到抑制肿瘤细胞生长的作用．     

放线菌素D诱导的SL-1细胞凋亡的初步研究

研究了一定浓度的放线菌素D诱导SL-1细胞凋亡作用.以终浓度为50ng/mL,100ng/mL,200ng/mL,500ng/mL的放线菌素D处理正常SL-1细胞,24h后,终浓度为200ng/mL,500ng/mL的放线菌素D处理的细胞出现较明显的细胞凋亡现象,光学显微镜下可见细胞膜表面突出或形成小泡,细胞碎裂成凋亡小体;DAPI染色荧光显示细胞核逐渐形变,直至碎裂成小块而被凋亡小体包裹;DNA琼脂凝胶电泳呈典型的凋亡细胞DNA梯形条带;流式细胞仪检测结果,对照和以上四种浓度的放线菌素D处理的细胞凋亡率分别为3.43%,10.61%,15.60%,32.67%,72.24%.实验结果证明一定浓度的放线菌素D能诱导SL-1细胞凋亡,且成剂量正相关.     

微波辐射损伤大鼠神经胶质细胞的初步研究

旨在揭示特定频率及强度微波辐射对周围神经胶质细胞的影响。对周围神经系统神经胶质细胞系雪旺细胞进行微波辐射后,通过检测细胞活性、细胞凋亡率,蛋白质水平的超级氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性以及胞内物质活性氧簇(ROS)和谷胱甘肽(GSH)的含量,探讨微波辐射对神经胶质细胞的影响。经频率为2.45GHz,功率密度为1mW/cm2的微波辐射后,雪旺细胞的过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的活力随时间的延长而升高,其细胞活性随时间的延长而降低,同时细胞凋亡率升高。模拟移动电话微波辐射将诱导大鼠神经胶质细胞出现细胞凋亡,同时细胞抗氧化系统的积极响应说明氧化损伤可能是导致细胞凋亡的原因之一。     

植物细胞凋亡的研究现状与发展趋势

细胞凋亡是一种细胞死亡的形态学描述.与动物细胞相同,植物细胞的凋亡也是一种由细胞内部控制的、普遍存在的主动性死亡行为,在植物的系统发育、环境压力以及病原体感染过程中起到了重要的作用.在凋亡过程中有活性氧及Caspase的参与.但是迄今为止,植物细胞凋亡的分子调控机制仍不清楚.     

胡椒碱对人胃癌SGC-7901细胞抗肿瘤活性的体外实验研究

胡椒碱（Piperine）是一种从胡椒属植物中提取的生物碱,具有镇静、抗炎、抗肿瘤等多种药理活性.探讨胡椒碱对人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用.采用MTT比色法测定其对SGC-7901细胞增殖抑制率;通过免疫荧光法、流式细胞术、Western blot法对其进行抗癌机制研究.MTT结果显示Piperine处理细胞72h的IC50值为37.41 μmol·L-1,且呈现时间剂量依赖性; Hoechst33258染色荧光显微镜观察发现Piperine能诱导SGC-7901细胞核形态学改变,部分细胞呈现典型的凋亡形态学特征;Annexin V-FITC/PI荧光双染结果亦证实Piperine可以诱导SGC-7901细胞发生凋亡;DAPI和DCFH-DA染色流式细胞术分析显示Piperine诱导SGC-7901细胞G2/M期阻滞、细胞活性氧产生增加; Western blot分析发现Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达逐渐增加,呈现剂量依赖性,且Bax/Bcl-2比例增加.因此,Piperine具有抑制SGC-7901细胞增殖和诱导凋亡的抗肿瘤活性.     

Nutlins类似物诱导TCA-8113细胞凋亡的研究

目的:研究新型小分子化合物Nutlins类似物在体外对舌癌TCA-8113细胞的凋亡作用.方法:采用MTT法检测新型小分子化合物Nutlins类似物对TCA-8113细胞增殖的影响;用流式细胞仪(FCM)检测Nutlins类似物诱导TCA-8113细胞凋亡情况和周期阻滞情况;用DAPI染色法观察细胞核变化.结果:Nutlins类似物NL-11和NL19以浓度依赖的方式抑制TCA-8113细胞增殖并诱导其凋亡,而且能引起TCA-8113细胞发生G2期周期阻滞.结论:NL-11和NL-19化合物能够有效地在体外抑制TCA-8113细胞增殖,并诱导细胞凋亡.     

OtsAB途径对谷氨酸棒杆菌ATCC 13032胞内海藻糖含量及细胞耐受性的影响

OtsAB途径是谷氨酸棒杆菌胞内海藻糖3条合成途径中最主要的一条.从野生型谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)ATCC 13032出发,通过重叠延伸PCR及同源重组技术构建了OtsAB途径缺陷突变株Corynebacterium glutamicum(△otsAB);利用谷氨酸棒杆菌穿梭表达载体pEC-XK99E构建重组工程菌株Corynebacterium glutamicum(pECotsAB)过量表达同源otsA及otsB基因.考察了野生型、缺陷型及过量表达菌株对于不同渗透压和培养温度的耐受性及该条件下各菌株胞内海藻糖的含量.结果表明:不同培养条件下,Corynebacterium glutamicum(△otsAB)胞内海藻糖含量与同条件野生型相比减少了34.40%～44.96%,对于渗透压和温度的耐受性明显降低;在相同的培养温度(30℃)、不同的渗透压条件下,Corynebacterium glutami-cum(pECotsAB)胞内海藻糖含量与野生型相比增加了14.53%～34.5%;细胞对于温度和渗透压的耐受性随胞内海藻糖含量的增加而提高.     

三唑类衍生物对肝癌细胞株BEL-7402增殖的影响

通过体外药敏性实验,对几种三唑类衍生物抗肿瘤活性进行了研究,从Cf、Db、Cc、Cg、Dc 5种三唑类化合物中筛选出Db。实验表明,Db对肝癌细胞株BEL-7402增殖有明显的抑制作用,抑制率呈浓度和时间依赖性。进一步实验证明,Db能够通过引发细胞产生自由基、线粒体膜电位下降等途径诱导细胞凋亡。     

蛋白酶体抑制剂MG132诱导KG-1细胞凋亡的机制研究

研究蛋白酶体抑制剂MG132对人急性髓性白血病细胞株KG-1的致凋亡作用及其对细胞内信号传导因子NF-kB与凋亡蛋白PARP表达的影响.采用（CK-8法检测MG132对KG-1细胞增殖的抑制作用;利用Hoechst33342染色法,从形态学上观察凋亡的KG-1细胞;Western blot检测NF-kB活性及与凋亡相关的蛋白变化情况.CCK-8法检测结果表明,MG132能明显抑制KG-1细胞生长,并呈现时间依赖性和浓度依赖性;Hoechst染色和Western blot检测实验证明,MG132诱导KG-1细胞发生凋亡的同时,NF-kB活性明显降低,细胞凋亡蛋白PARP降解为P89蛋白.以上结果显示,MG132能诱导KG-1细胞凋亡,其机制可能与MG132抑制NF-kB信号转导通路,下调NF-kB表达继而增加凋亡蛋白PARP剪切有关.     

β-磷酸三钙与透明质酸钠复合交联支架材料的生物相容性研究

制备了透明质酸钠与β-磷酸三钙复合材料,对复合材料进行化学交联改性,将交联与未交联的HA/β-TCP复合支架与骨髓间充质干细胞共培养,研究支架材料调控BMSCs增殖或凋亡的过程,评价线粒体应激信号通路在调控过程中的作用。通过对样品细胞毒性的CCK-8试剂盒测试、细胞黏附实验、细胞Hoechst/PI染色实验、细胞凋亡率的流式细胞仪检测、以及线粒体机制Bax与Bcl-2相关蛋白表达的Western Blot检测,发现交联HA/β-TCP复合支架材料与未交联材料相比,生物相容性更好,能从线粒体机制更有效地抑制细胞凋亡。HA/β-TCP支架材料有望在软骨组织工程中得到广泛应用。     

β-桐酸抑制膀胱癌T24细胞生长及其与ROS的关系

研究了β-桐酸(β-ESA)对人膀胱癌T24细胞的生长抑制作用,阐明活性氧簇(ROS)产生与生长抑制作用的关系。利用MTT法检测细胞活力,DCFH-DA荧光探针检测ROS,二硫代二硝基苯甲酸比色法(DNTB)检测谷胱甘肽(GSH)的含量。MTT结果显示,β-桐酸对T24细胞有明显的生长抑制作用,呈时间剂量相关性(P<0.05);活性氧检测表明β-桐酸可以诱导ROS的产生(P<0.05);GSH含量检测表明GSH水平显著降低(P<0.05);加入ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)可以拮抗β-桐酸的作用(P<0.05)。实验结果表明,β-桐酸可抑制T24细胞的生长,其机制可能与诱导ROS的产生有关。